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淋病奈瑟菌青霉素、四环素耐药的分子检测
淋病奈瑟菌(Neisseria Gonorrhoeae,NG)的青霉素、四环素耐药表型研究(即药敏分析)国内已有较多文献报导.但不同的药敏检测方法其检出率的差异颇大.NG对青霉素、四环素耐药多数分别为获得TEM基因和Tet M基因的质粒所致.为精确了解常州地区NG对青霉素、四环素的耐药状况,我们应用以TEM基因为靶基因的套式聚合酶链反应(nested Polymerase Chain Reaction,nPCR)和以Tet M基因为靶基因的PCR技术对分离自常州地区的50株NG进行了分析检测,现将结果报告如下.
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淋病奈瑟菌青霉素、四环素耐药的分子检测
淋病奈瑟菌(Neisseria Gonorrhoeae,NG)的青霉素、四环素耐药表型研究(即药敏分析)国内已有较多文献报导.
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临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药表型及耐消毒剂基因检测
目的:研究医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA)的耐药表型和消毒剂抗性基因携带情况,为加强MRSA感染防控提供理论依据。方法采用细菌分离培养方法和PCR技术,对徐州地区医院住院患者送检病原学标本分离的MRSA耐药表型和抗消毒剂基因携带情况进行检测。结果从临床标本分离的280株金黄色葡萄球菌中共鉴定出MRSA 157株,占检出金黄色葡萄球菌的56.1%。临床分离MRSA仅对万古霉素、奎奴普丁/达福普汀和利奈唑胺敏感,对其他所试验的抗菌药物普遍耐药。 MRSA菌株中有28.0%携带抗消毒剂基因qacA/B,MSSA菌株中携带qacA/B基因仅占7.3%。结论该地区医院患者感染的金黄色葡萄球菌中MRSA检出率较高,其MRSA菌株携带抗消毒剂基因比例明显高于敏感株,且普遍耐药,应加强MRSA监测和控制。
关键词: 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药表型 耐消毒剂基因 -
敏感细胞KB与其耐药细胞KBv200脂质过氧化物含量分析及超微结构观察
肿瘤细胞耐药是化疗失败的重要原因.联系影响抗癌药跨膜转运和胞内分布异常的多药耐药现象,本研究对一对耐药细胞KBv200(其耐药表型为MDR)及其敏感细胞KB的超微结构和脂质过氧化物含量进行了分析.超微结构观察到KBv200细胞多聚核糖体数目较KB细胞增多,这可能与耐药相关的酶蛋白类有关,尤其是P-GP.
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全自动荧光标记DNA测序法检测利福平耐药结核杆菌rpoB基因突变
为研究我国分离的结核杆菌临床分离株利福平(Rifampin,RFP)耐药表型与rpoB基因突变的关系,应用全自动荧光标记DNA测序方法对7株RFP耐药株及1株RFP敏感株的rpoB基因突变集中区域进行了序列分析,并与欧美日文献报道结果做了对比.
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白念珠菌AP-PCR基因分型与耐药性关系研究
目前白念珠菌的耐药表型与基因型的关系仍不清楚,寻找一种恰当的基因分型方法,探讨其与耐药表型的关系,对监测耐药株的分子流行病学以及深化耐药分子机制的研究有重要的临床意义.
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评估纸片扩散法与Vitek2-compact GN13测定的肺炎克雷伯菌体外亚胺培南药敏及AES系统修正可靠性的研究
Vitek2是目前在临床微生物实验室相对普及的商品化鉴定及药敏系统,其中GN13卡在测定临床常用抗菌药物的体外药敏及常见耐药表型方面具有很好的可靠性。但由于近年来亚胺培南在美国临床和实验室标准协会( CLSI)中判断折点的变迁,造成 AES ( advanced expert system)专家系统对其修改率也逐渐攀升,针对此情况我们开展评估纸片扩散法与Vitek2-compact GN13测定肺炎克雷伯菌体外亚胺培南药敏及 AES 系统修正的可靠性。
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结核分枝杆菌临床分离株利福平耐药表型及rpoB基因型分析
目的 分析结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株利福平(rifampin,RFP)耐药表型及rpoB基因突变关系,阐明MTB RFP耐药株rpoB基因突变特征.方法 采用改良罗氏培养基比例法检测387株MTB临床分离株对RFP敏感性,并进行rpoB基因测序.对经测序rpoB基因511位和533位密码子突变株进行RFP小抑菌浓度(MIC)检测.结果 比例法检测387株 MTB 临床分离株中,198株RFP耐药株,189株RFP敏感株.rpoB基因测序结果表明,198株比例法RFP耐药株中,192株(96.97%)发生rpoB基因突变,涉及16种单位点和24种双位点密码子联合突变类型,单位点和双位点密码子联合突变率分别为84.34%(167/198)和12.63%(25/198),其中发现1种单位点和21种双位点密码子联合突变新类型.常见的突变位点为531位(51.01%)、526位(21.21%)和516位(7.07%)密码子.6株(3.03%)耐药株在rpoB测序范围内未见突变.189株比例法RFP敏感株中,174株(92.06%)在rpoB基因测序范围内未见突变,15株(7.94%)发生突变,其中7株CTG511CCG(Leu→Pro)突变和6株CTG533CCG(Leu→Pro)突变.511位和533位密码子突变株MIC检测结果提示其突变与低度耐RFP相关.结论 所得数据及一些新的发现为进一步研究MTB RFP耐药机制、研制快速新型分子药敏试验方法提供理论和实际应用依据.
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2008年度新乡市中心医院铜绿假单胞菌耐药性分析
目的:了解铜绿假单胞菌临床分离株的耐药现状.方法:收集2008年度临床分离的铜绿假单胞菌株584株,用Kirby-Bauer法做药敏试验,并根据耐药表型分析可能存在的耐药机制.结果:临床分离的铜绿假单胞菌耐药率依次为头孢哌酮舒巴坦28.4%,亚胺培南34.0%,环丙沙星36.5%,左氧氟沙星43.2%,头孢他啶48.0%,阿米卡星49.2%,哌拉西林-他唑巴坦55.1%,哌拉西林62.5%,氨曲南62.6%,替卡西林-克拉维酸63.9%.结论:临床分离的铜绿假单胞菌耐药率相对较高,耐药机制非常复杂,需引起实验室和临床密切关注.
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鲍曼不动杆菌6种氨基糖苷类药物修饰酶基因的研究
为研究鲍曼不动杆菌氨基糖苷类药物修饰酶基因及其与耐药表型关系,我们用琼脂稀释法检测了庆大霉素、阿米卡星等6种抗菌药物对20株多重耐药性鲍曼不动杆菌的低抑菌浓度(MIC),并用聚合酶链反应(PCR)检测了6种氨基糖苷类药物修饰酶基因.
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阴沟肠杆菌高活性β内酰胺酶检测与相关耐药表型分析
阴沟肠杆菌是医院感染的重要病原菌.我们对我院临床分离的部分阴沟肠杆菌进行 AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检测,并结合临床药敏试验,进行耐药表型及耐药机制分析,为合理使用药物提供参考依据.
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一株少见耐药表型产酸克雷伯菌致感染一例
患者女,62岁,自2003年9月25日以来因尿路感染和肺部感染,曾用氨苄西林、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物治疗.患者因肺部感染于2003年10月31日~11月8日期间共送6 份下呼吸道痰标本做细菌培养和药敏试验.
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嗜麦芽窄食单胞菌两株临床菌株外排泵SmeDEF诱导表达的研究
近10年来嗜麦芽窄食单胞菌所致的感染不断上升,已成为医院感染的重要致病菌,其多重耐药可能与外排泵有关.SmeDEF泵外排包括氟喹诺酮类等多种抗生素.大肠埃希菌多药外排泵AcrAB表达,与耐药表型的诱导有关,是否嗜麦芽窄食单胞菌也有同样机制,待研究.
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葡萄球菌对大环内酯类的耐药研究
葡萄球菌是引起医院和社区获得性感染的主要病原菌之一,近年来葡萄球菌对大环内酯类抗生素的耐药性在不断上升.其耐药机制为msrA基因编码的泵出机制、核糖体结构变异、核糖体可诱导变异(MLSb)[1],而诱导型的耐药率随地区有差异[2].现对我院分离的133株葡萄球菌测定其对红霉素、克林霉素耐药性,并分析其耐药表型.
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头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)不仅对甲氧西林耐药,且具有多重耐药性.目前由于某些菌株在甲氧西林耐药表型上出现不均一性,影响了临床常用的表型检测方法如苯唑西林纸片扩散法、MIC法的准确性,且这类菌株正逐渐增加,并由医院感染向社区感染发展[1].mecA基因和青霉素结合蛋白PBP2a的检测是目前公认的MRSA检测鉴定的金标准,但这两项技术要求高、试剂昂贵,不适合普通临床实验室大量开展[2].有报道使用30μg头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,可克服使用苯唑西林鉴定方法的局限性,具有较好的敏感性和特异性[3-5].本研究对该方法用于临床实验室快速筛选MRSA进行研究.
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同种不同株型阴沟肠杆菌引起的肺部感染
阴沟肠杆菌是临床感染的常见菌,属于耐药性较强的菌。我们从一例肺部感染住院患者痰中分离到2株同种不同株型的阴沟肠杆菌,其生化表型及耐药表型均显示差异,报道如下。 一、材料和方法 1.标本分离:患者清晨痰标本,分别接种血琼脂和嗜血杆菌巧克力琼脂,置CO2孵箱35℃培养24 h,长出灰白色扁平菌落,为革兰阴性杆菌。 2.方法:生物梅里埃VITEK 32微生物自动分析仪进行细菌鉴定和药敏试验,并用纸片扩散法补充部分药敏试验。
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天津市耐异烟肼或利福平的结核分枝杆菌相关基因突变特征
目前已知多个基因突变与MTB对异烟肼和利福平的耐药有关,但是不同的基因密码子突变率存在地区差异.为此,我们检测了天津市结核病患者异烟肼耐药株katG和inhA启动子以及利福平耐药株rpoB的突变情况,探讨其耐药相关基因的突变特征及基因突变与耐药表型的相关性.
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自动细菌鉴定药敏系统对肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶菌株的检测评价
目的:本研究旨在探讨自动细菌鉴定药敏仪器对碳青霉烯非敏感肺炎克雷伯菌株的检测效果,并对其实用性、可靠性做出初步评价。方法采用改良Hodge试验对菌株进行产碳青霉烯酶筛选,同时与常规药敏实验筛选的可能产碳青霉烯酶实验菌株对照,对可疑菌株进行相关耐药基因PCR扩增、测序,以此结果作为标准来判断上述试验的敏感性和特异性。结果研究期间临床共检出87株可疑产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌菌株,经Hodge试验初筛、PCR扩增证实产KPC酶的菌株40株,待测序确认6株;无VIM和IMP基因型;VITEK2专家系统提示碳青霉烯酶表型的敏感性87.0%,特异性92.7%。结论 VITEK2自动药敏鉴定仪因其对低水平耐药的产碳青霉烯酶菌株检测效果欠佳,敏感性和特异性不高,在筛选产碳青霉烯酶菌株时需谨慎使用。
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肺炎克雷伯菌喹诺酮类药物耐药表型与 PM QR 基因携带相关性研究
目的:探讨肺炎克雷伯菌喹诺酮类药物耐药表型与质粒介导喹诺酮类耐药基因(PMQR)携带之间的关系,为控制多药耐药肺炎克雷伯菌流行提供理论依据。方法收集医院临床2014年1月-2015年12月分离的90株肺炎克雷伯菌,其中30株对环丙沙星敏感,20株中介,40株耐药;PCR检测 PMQR基因及插入序列ISCR1,对ISCR1阳性菌株采用PCR‐mapping检测插入序列下游 PMQR基因携带情况,通过DNA测序确定。结果30株敏感的肺炎克雷伯菌株中qnrA基因阳性8株(26.67%),未检出可移动元件;20株中介的肺炎克雷伯菌中 qnrA 17株(85.00%),qnrB 7株(35.00%),qnrS 5株(25.00%),acc(6′)‐Ib‐cr基因11株(55.00%);ISCR1基因阳性15株(75.00%),PCR‐mapping结果显示,ISCR1‐qnrA 阳性14株(70.00%);ISCR1‐qnrB和ISCR1‐qnrS分别检出6株(30.0%)和5株(25.00%);ISCR1‐acc(6′)‐Ib‐cr检出4株(20.00%);40株耐药的多药耐药肺炎克雷伯菌中,qnrA共33株(82.50%),qnrB共12株(30.00%),qnrS共16株(40.00%),acc(6′)‐Ib‐cr28株(70.00%);ISCR1基因阳性菌株30株(75.00%),ISCR1‐qnrA1阳性菌株30株,阳性率为75.00%;ISCR1‐qnrB4和 ISCR1‐qnrS1阳性率分别为37.50%和30.00%。结论喹诺酮类中介的肺炎克雷伯菌 PMQR基因携带率不低于耐药肺炎克雷伯菌,且其具备通过可移动元件进行传播的能力,因此在对这部分菌株进行多药耐药预防控制时不宜忽视。
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2006-2015年医院流感嗜血菌分布及耐药性分析
目的:了解流感嗜血杆菌的临床分布及对抗菌药物的耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法回顾分析医院2006年1月-2015年12月患者临床分离的流感嗜血菌分布,菌株鉴定及药敏结果,药敏试验结果及耐药表型分析均采用WHONET 5.6软件进行分析。结果患者临床分离出流感嗜血菌1671株,标本主要来源于痰液1442株占86.3%;药敏结果显示,儿童组和成人组患者流感嗜血菌对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的敏感率均为低,分别为33.8%和47.1%,其次为氨苄西林分别为46.7%和65.4%,对其他抗菌药物的敏感率均较高(>70.0%)。结论医院分离的流感嗜血菌主要来自呼吸道标本,磺胺甲噁唑/甲氧苄啶和氨苄西林已经不适合用于流感嗜血菌感染的经验治疗,医师应根据药敏结果合理选用抗菌药物。