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头孢西丁琼脂筛选法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌
耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)是导致医院感染和社区感染的重要病原菌之一.近年来,随着广谱抗菌药物的广泛应用, 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的分离率逐渐增高、耐药性逐渐增强.Diekema等[1]对分离自全球多个地区的凝固酶阴性葡萄球菌研究表明,该菌对苯唑西林的耐药率达70%以上.MRCNS对万古霉素耐药菌株的出现更使临床上对其感染的治疗成为十分棘手的问题[2].因此,快速、简便、准确检测MRCNS以指导临床合理用药对控制其感染显得尤为重要.2004年,美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)首次将头孢西丁纸片扩散法用于MRCNS的检测[3].本研究用不同培养周期和不同浓度的头孢西丁琼脂筛选平板检测了104株凝固酶阴性葡萄球菌并对该方法作了评价.
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头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)不仅对甲氧西林耐药,且具有多重耐药性.目前由于某些菌株在甲氧西林耐药表型上出现不均一性,影响了临床常用的表型检测方法如苯唑西林纸片扩散法、MIC法的准确性,且这类菌株正逐渐增加,并由医院感染向社区感染发展[1].mecA基因和青霉素结合蛋白PBP2a的检测是目前公认的MRSA检测鉴定的金标准,但这两项技术要求高、试剂昂贵,不适合普通临床实验室大量开展[2].有报道使用30μg头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,可克服使用苯唑西林鉴定方法的局限性,具有较好的敏感性和特异性[3-5].本研究对该方法用于临床实验室快速筛选MRSA进行研究.
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基因扩增和3种表型筛查法检测耐甲氧西林葡萄球菌的应用评价
目的 比较4种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率、灵敏度和特异度,以便临床检测MRS时选择.方法 用Vitek-32全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和mecA基因检测法分别检测175株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),经行×列表资料的x2检验比较阳性检出率,并以mecA基因检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异度.结果 4种方法检出MRSA的阳性率无差别(x2=1.640,P＞0.05),但检测MRCNS的阳性率有差别(x2=9.478,P＜0.05),其中Vitek-32全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出MRCNS的阳性率高于mecA基因检测法;3种表型检测法检测MRSA的灵敏度和特异度分别为100%、96.3%、96.3%和88.2%、100%、100%,检测MRCNS的灵敏度均为100%,特异度分别为50%、46.1%和65.4%.结论 终判定MRS时,要考虑到mecA基因和苯唑西林低抑菌浓度两个因素,并区别对待mecA基因介导的MRS和非mecA基因介导的MRS.
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Phoenix-100检测耐甲氧西林葡萄球菌
目的 比较分析耐甲氧西林葡萄球菌全自动微生物鉴定/药敏仪检测与头孢西丁扩散法检测的检出率,对全自动微生物鉴定/药敏仪检测耐甲氧西林葡萄球菌初步评估.方法 将临床分离到的257株葡萄球菌用Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测的同时按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行头孢西丁纸片扩散法检测,比较两种方法的检出率.结果 Phoenix-100法与头孢西丁纸片扩散法耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检出率分别为:79.4% 和 78.2%,两种方法差异无显著性.结论 Phoenix-100法操作简便,结果可靠,可以直接根据全自动微生物鉴定/药敏仪结果报告临床,对指导临床合理使用抗生素,有效控制感染具有积极意义.
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头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其耐药状况分析
我们对我院2004年1月-2005年12月间分离到的254株金黄色葡萄球菌采用头孢西丁纸片散法检测到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)87株,并对其耐药状况进行回顾性分析,结果报告如下.
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头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的评价
目前在临床实验室常规开展的检测MRS的方法如苯唑西林K-B法、E-test微量稀释法、琼脂筛查法等表型试验,因不同的MRS具有不同的耐药水平(MIC不同),而无法检测处于临界范围的MRS,特别是低表达的MRS.在2002年,美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)指出,一旦葡萄球菌检出mecA基因或PBP2a蛋白即可定为MRS,因此PCR扩增法检测MRS的mecA基因是判断MRS的金标准,但是该方法对于实验室设备要求、操作人员的要求十分高,而且费用昂贵,不易在临床实验室中常规开展.而头孢西丁纸片扩散法操作简单、准确率高、同PCR扩增法的结果具有很好的相关性,可以在临床实验室常规开展,是目前临床实验室筛选MRS好的表型试验之一.
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4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评估
目的:评价4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法的临床应用价值.方法:用mecA基因检测MRSA乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法对临床分离的160株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较.结果:160株中有127株为MRSA,4种检测方法结果一致.结论:头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRSA的简便又准确的实验方法,并值得推广应用.
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头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌
目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性.方法PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准K-B(Kirby-Bauer)法进行.结果在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138株,表皮葡萄球菌30株,溶血葡萄球菌22株,经PCR法检测mecA基因,金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2%(112/138)、96.1%(50/52).头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2%(81.2/138)、94.2%(49/52),与mecA基因法结果相比较,头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99.4%(161/162)、100.0%(28/28),两者符合率为99.5%(189/190),2种方法所获得的结果经统计学处理,两者差异无显著性.结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度,适合在临床微生物实验室中进行推广.
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头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的探讨
根据美国临床实验室标准化委员会(National Committee for Clinical Laboratory Standards,NCCLS)2004年用头孢西丁检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的新标准,我们对临床分离的124株金黄色葡萄球菌进行检测,并与以往检测的MRSA方法进行比较,以找出便于常规检测的方法.
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ATB Expression微生物分析系统筛查耐甲氧西林葡萄球菌的评价
目的 通过对头孢西丁(FOX)纸片扩散法与ATB Expression微生物分析系统(苯唑西林MIC法)检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的比较,对ATB Expression分析系统筛查MRS的准确性和临床适用性进行评估. 方法用FOX纸片扩散法、ATB Expression分析系统检测医院临床送检标本中分离的204株金黄色葡萄球菌和216株凝固酶阴性葡萄球菌. 结果两种方法检测204株金黄色葡萄球菌中MRS阳性率均为84.3%,且两种方法的符合率100%.检测216株凝固酶阴性葡萄球菌的MRS时,FOX纸片法阳性率为83.6%,而仪器检测的阳性率为91.7%,仪器检测的特异性为51.4%. 结论两种方法检测金黄色葡萄球菌的MRS结果相符合;而仪器检测凝固酶阴性葡萄球菌特异性较低,建议辩证灵活运用自动化仪器,在ATB Expression系统检测的同时用FOX纸片法补充和确认MRS检测结果.
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头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的评价
目的:评价头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的可靠性和临床实用性.方法:将临床分离得到的葡萄球菌310株,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法实验,并以PCR检测葡萄球菌mecA基因为判断标准,比较4种方法的敏感性及特异性.结果:经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为57.1%(113/198),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为62.5%(70/112).头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,检测MRCNS敏感性为98.6%,特异性为100%.结论:头孢西丁纸片扩散法操作简便,结果可靠,可作为临床实验室检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法.
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几种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评价
目的 对三种检测耐甲氧西林葡萄球菌方法的可靠性和临床实用性进行评价.方法 以PCR检测金黄色葡萄球菌甲氧西林决定因子A(mecA)为金标准,按临床实验室标准化委员会(CLSI)操作规程用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法对临床分离的155株金黄色葡萄球菌进行检测.结果 155株金黄色葡萄球菌经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为61.9%(96/155);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%;苯唑西林纸片扩散法的敏感性为95.8%,特异性为91.5%;苯唑西林琼脂稀释法的敏感性为100%,特异性为98.3%;头孢西丁纸片扩散法优于苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林琼脂稀释法.结论 头孢西丁纸片扩散法操作简便、敏感性高、特异性好、结果可靠,可作为医院微生物实验室日常工作中检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法.
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耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的比较
目的 以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为金标准,比较头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的优缺点.方法 对临床分离的70株葡萄球菌(其中金黄色葡萄球菌40株,凝固酶阴性的葡萄球菌30株)分别用PCR法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准KB(Kirby Bauer)法进行.结果 经PCR法检测mecA基因,耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为75.0%(30/40)和80.0%(24/30);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为93.3%、95.9%;90.0%和100%;苯唑西林纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为90.0%、87.5%;90.0%和83.3%;乳胶凝集法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为100.0%、100.0%;100.0%和100.0%.与PCR结果比较,3种方法所获得的结果经统计学分析,差异无显著性.结论 头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法是成批检测的理想方法;乳胶凝集法检测快速,结果可靠,但检测成本高;实验室应选择合适的方法,以提高MRS的检出率.
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头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林葡萄球菌
目的:评价头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的方法.方法:采用2004年NCCLS推荐的30μg/片头孢西丁纸片法检测MRS,以PCR方法检测mecA基因为"金标准".结果:在60株临床分离的葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌36株,凝固酶阴性葡萄球菌24株.用PCR方法检测mecA基因阳性43株(金黄色葡萄球菌25株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),阴性17株(金黄色葡萄球菌11株,凝固酶阴性葡萄球菌6株);用头孢西丁纸片法筛查MRS耐药(+)41株(金黄色葡萄球菌23株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),敏感(-)19株(金黄色葡萄球菌13株,凝固酶阴性葡萄球菌6株).以PCR检测mecA基因法为"金标准",头孢西丁纸片法的敏感度和特异度分别为95.3%(41/43)、100%(17/17).准确度为96.7%(58/60).结论:头孢西丁纸片法筛查MRS与mecA基因检测法具有很好的一致性,该方法适合在临床微生物实验室中推广使用.
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耐甲氧西林葡萄球菌常规检测方法的比较
目的：比较三种方法对耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的阳性检出率和特异性，寻找适合实验室常规检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）简易，准确的方法。方法通过头孢西丁（30μg/片）纸片扩散法、苯唑西林（1μg/片）纸片扩散法和苯唑西林琼脂筛选法对临床分离的67株葡萄球菌进行MRS检测，比较其MRS检出率，为分析NaCl对头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测结果的影响，同时用含4%NaCl的M-H培养基和普通M-H培养基进行检测，比较其差异。结果67株葡萄球菌中琼脂筛选法检出率为79.1%；头孢西丁纸片扩散法在含4%NaCl和普通M-H培养基检出率相同，均为71.6%，苯唑西林（1μg/片）纸片扩散法在含4%NaCl的M-H培养基检出率为76.1%，普通M-H培养基检出率为73.1%，苯唑西林纸片法在含4%NaClM-H培养基上的检出率高于普通 M-H培养基，分别各有1株金葡和凝固酶阴性葡萄球菌未被检出。结论头孢西丁（30μg/片）纸片扩散法与苯唑西林琼脂筛选法具有很好的相关性，且不受NaCl影响，该法操作简便易行，各医院临床实验室均能开展，是检测MRS值得推荐的方法。
