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脱细胞软骨基质对于大鼠腰椎终板软骨干细胞分化的影响
[目的]制备家猪脱细胞软骨基质,探索其对大鼠腰椎终板软骨干细胞分化的影响.[方法]通过胰酶、核酶及TritonX-100制备脱细胞软骨基质,将软骨基质溶于双蒸水制得脱细胞软骨基质膜.将大鼠腰椎终板软骨干细胞种植于基质膜上,CCK-8检测1、3、5d的增殖情况,并与空白板对照.取P3代终板软骨干细胞种植于铺有软骨基质的孔板(DEPM组)和两组空白板(正常诱导组和无诱导组),然后进行成骨、成脂肪及成软骨分化诱导,2周后,茜素红、油红O及番红染色,分别鉴定其成骨、成脂肪及成软骨能力;每组取4孔按500 ul/孔加入DMSO,置于酶标仪上,在450 nm波长下检测各组的吸光度.同时Real-Time PCR分别检测成骨、成脂肪及成软骨特征性基因Runx2、Col-2a1和PPARγ在各组中的相对表达量,分析干细胞在软骨基质上的分化倾向性.[结果]大鼠腰椎终板软骨干细胞能够在脱细胞软骨基质上生长,并与其有很好的组织相容性.将终板软骨干细胞进行诱导后染色发现,DEPM组的干细胞具有更强的成骨分化能力,较低的成脂肪及成软骨分化能力.Real-Time PCR检测成骨基因Runx2在DEPM组较其他两组呈较高表达,而Col-2a1和PPARγ基因表达较低.在450 nm波长下,DEPM组中的成骨吸光度大,大于其他两组,成脂肪及成软骨的吸光度小于正常诱导组.[结论]脱细胞软骨基质能够较好的保持干细胞成脂肪及成软骨的分化特性,但是促进干细胞向成骨方向分化.
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人原发性骨关节炎与正常人关节软骨间充质祖细胞多向分化能力的对比研究
[目的]观察原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞的生长和增殖特性及其成软骨、成骨和成脂分化能力,探讨关节软骨间充质祖细胞在原发性骨关节炎发病中的重要作用.[方法]观察原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞成软骨(微团培养)诱导分化后的细胞形态变化,TB、Ⅱ型胶原、Aggrecan染色,GAG含量及Ⅱ型胶原mRNA表达;成骨(单层传代培养)诱导分化后细胞形态变化,钙结节染色,ALP活性及BGPmRNA表达;成脂(单层传代培养)诱导分化后细胞形态变化,油红染色,油红染色阳性细胞比率及TG含量.[结果]原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞成软骨诱导分化后细胞TB、Ⅱ型胶原、Aggrecan染色均呈阳性,原发性骨关节炎者GAG含量减少及Ⅱ型胶原mRNA表达减弱(P＜0.05);成骨诱导分化后细胞钙结节染色均呈阳性,原发性骨关节炎者ALP含量减少及BGPmRNA表达减弱(P＜0.05);成脂诱导分化后细胞油红染色均呈阳性,原发性骨关节炎者TG含量增加(P＜0.05).[结论]关节软骨间充质祖细胞经成软骨、成骨及成脂诱导后均能分化为具有相应功能细胞特性的分化细胞.原发性骨关节炎关节软骨间充质祖细胞成软骨和成骨分化能力降低,而成月旨分化能力增加,提示原发性骨关节炎关节软骨间充质祖细胞分化功能出现异常,骨关节炎关节软骨细胞对软骨损伤修复能力降低.
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中药制剂诱导骨髓间充质干细胞多向分化的研究进展
骨髓间充质干细胞具有自我更新能力和多向分化潜能,随着中药提纯技术的发展,以中药制剂作为诱导剂来防治疾病的研究在逐步展开.国内许多抗氧化、抗衰老等中药的研究,已成功诱导出心肌细胞、神经细胞、成骨细胞、软骨细胞等,并取得初步成果.对其研究进行概述,引用文献26篇.
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乳牙牙髓干细胞新研究进展
乳牙牙髓干细胞（stem cell from human exfolia-ted deciduous teeth，SHED）是由施松涛教授于2003年首次在脱落的乳牙中发现，后经 Miura 等人［1］证实，SHED 具有较强增殖和多向分化潜能。迄今为止在口腔中已分离出五种牙源性干细胞：脱落乳牙牙髓干细胞（SHED），恒牙牙髓干细胞（dental pulp stem cell，DPSC），牙囊干细胞（ dental follicle stem cell，DFSC），牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cell，PDLSC）。而 SHED 易于操作，不存在免疫和排斥反应，在组织工程学中作为种子细胞越来越受关注。本文就乳牙牙髓干细胞的新研究进展、临床前应用、未来前景等做一综述。
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成人脂肪干细胞的体外多向分化能力观察
目的 观察成人脂肪干细胞(ADSCs)的体外多向分化能力.方法 从正常成人脂肪组织分离得到ADSCs并体外培养.在ADSCs中分别加入成人脂肪、骨、软骨、肝细胞的体外诱导培养基诱导,观察诱导过程中细胞形态的变化,诱导前、诱导1周、诱导2周时采用RT-PCR法观察细胞相应标志物mRNA表达的变化.结果 ADSCs向脂肪细胞诱导2周,细胞内的脂质空泡聚集,小脂滴融合在一起并变大;后细胞变为单房,并且充满脂质,红油O染色阳性;诱导1周细胞PPARγ、脂蛋白酶和αP2 mRNA表达较诱导前增加;诱导2周细胞PPARγ、脂蛋白酶mRNA表达降低,但αP2 mRNA变化不明显.ADSCs向骨细胞诱导5天,细胞由成纤维形转化为多边形或不规则状.诱导2周单层细胞聚集成块,形成细胞岛状结构,ALP染色阳性,von Kossa染色可见黑色矿化结节;矿化结节形成后细胞向结节移行聚集,促使更多的细胞形成更大的矿化结节;诱导后细胞ALP、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原mRNA表达逐渐增加.ADSCs向软骨细胞诱导1周,细胞呈多边形或类圆形,细胞团向内呈放射状聚集,FITC染色后免疫荧光可见Ⅱ型胶原;诱导1、2周时细胞Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖和SOX9 mRNA表达明显高于诱导前.ADSCs向肝细胞诱导2周时可见部分细胞变成圆形或椭圆形,并随时间顺延呈肝细胞样圆形细胞增多趋势,细胞核居中,圆形且边缘清楚,PAS染色阳性;诱导1、2周时细胞CK18、HNF1α及白蛋白mRNA表达明显高于诱导前.结论 成人脂肪组织中分离得到的成人ADSCs可在体外定向分化为脂肪细胞、骨细胞、成骨细胞和肝细胞.
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胎儿真皮间充质干细胞的生物学特征和多向分化的研究
近年来,间充质干细胞(MSCs)的研究已成为生物学领域的热点课题.目前已经在骨髓、肝、脾、肺、肌肉、脑组织中证实有MSCs的存在[1,2].皮肤作为人体大的组织,可以提供大量的种子细胞,并且取材方便,但关于皮肤来源MSCs的研究报道很少.
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脑胶质瘤干细胞对肿瘤血管生成拟态形成的作用及其机制
脑胶质瘤占脑肿瘤的大部分，其中胶质母细胞瘤是成人胶质瘤常见的类型。各年龄段均可发病，确诊后1年生存率为35．2％，3年生存率仅7．54％，是恶性程度高的脑肿瘤之一。胶质瘤组织无论分化程度高低，均呈浸润性生长且无包膜，瘤组织中微血管常处于异常增生、高度血管化畸形的状态［1］。目前在胶质瘤中公认的血管生成方式包括出芽式血管生成、成血管细胞募集和血管共选定。近年来又发现了一种与传统肿瘤血管生长途径完全不同的、不依赖内皮细胞的全新血液供应方式，即血管生成拟态（VM）［2］。 VM存在于一些恶性实体瘤中，其发生与临床预后不良密切相关。构成VM的肿瘤细胞具有高度可塑性，像干细胞一样具备产生各种新型细胞的潜能，即肿瘤干细胞（ CSCs ）。胶质瘤干细胞（ GSCs ）除自我更新和生成异质肿瘤细胞亚群的潜能外，还能分化为内皮细胞和血管平滑肌样细胞，以形成VM ［3～5］。现将GSCs在肿瘤VM中的作用综述如下。
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肝干细胞移植治疗肝功能衰竭
干细胞是机体组织器官的起源细胞,具有自我复制和多向分化的功能.近年来干细胞的研究始终是生命科学领域引人瞩目的热点之一,1999年和2000年干细胞研究进展两度被science评选为年度世界十大科学进展之首,细胞重编程(Reprogramming Cells,即分化的细胞在特定的条件下被逆转后恢复到全能性状态,或者形成胚胎干细胞系,或者进一步发育成一个新的个体的过程)被science评为2007年度世界十大科学进展的第二位、2008年度第一位.
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中药对骨髓间充质干细胞多向分化影响的研究进展
骨髓间充质干细胞具有较强的自我复制和多向分化潜能,近年来,国内一些研究发现部分中药能诱导其分化为神经细胞、成骨细胞、心肌细胞等,且已取得一定进展.本文就中药对骨髓间充质干细胞多向分化的影响方面作一综述,探讨中药应用的新前景.
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牙髓干细胞免疫特性及其应用研究进展
牙髓干细胞是存在于牙髓组织中的具有保持高度增殖、自我更新和多向分化潜能的干细胞.近年来,随再生医学研究的逐渐深入,利用牙髓干细胞具有多向分化能力,将其作为种子细胞已用于修复组织缺损,且牙髓干细胞的免疫学特性也成为研究热点.本文就牙髓干细胞的免疫特性及其应用的研究进展作一综述.
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肾脏原始神经外胚叶肿瘤1例报道并文献复习
原始神经外胚叶肿瘤(primitive neumectodermai tumor, PNET)是一组起源于神经嵴胚胎残留组织的恶性肿瘤,具有多向分化的潜能,临床上少见,大多数发生于胸腔、四肢和中轴软组织,原发于肾脏的 PENT 罕见。我院于2014年4月收治1例肾脏 PNET 患者,现报告如下。
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微小RNA-203抑制胶质母细胞瘤干细胞的干细胞特性
目的 培养胶质母细胞瘤干细胞,观察微小RNA (miR)-203对其干细胞的影响,探讨其在胶质母细胞瘤基因治疗中的应用.方法 体外原代培养胶质母细胞瘤组织,免疫磁珠法分选CD133+细胞;免疫荧光染色检测分选后细胞CD133、巢蛋白(Nestin)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白2(MAP2)的表达.将人miR-203模拟体和无意义寡核苷酸链(NC)分别转染胶质母细胞瘤干细胞作为miR-203组、NC组,用成球试验检测miR-203对胶质母细胞瘤干细胞自我更新能力的影响.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色分别检测两组细胞CD133、Nestin、GFAP、MAP2的mRNA和蛋白的表达.结果 培养的胶质母细胞瘤干细胞表达干细胞标记物CD133、Nestin,分化后细胞表达星形胶质细胞的标志物GFAP、神经元的标志物MAP2;转染后7d,当NC组细胞球数目为100％时,miR-203组一、二次球数目分别为(67.84±13.79)％和(30.53±8.91)％,差异均有统计学意义(P＜0.05);RT-PCR结果显示与NC组比较,miR-203组细胞CD133mRNA的相对表达水平为0.29±0.15,nestin mRNA为0.27±0.18;GFAP、MAP2mRNA表达升高,分别为7.89±3.99和2.59±1.16,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-203可以抑制胶质母细胞瘤干细胞的自我更新能力并促进其多向分化,可能成为新的针对胶质母细胞瘤的治疗策略.
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脐带间充质干细胞分离培养及其定向分化研究
间充质干细胞( MSC)能够自我增殖,多向分化[1-2],且具有免疫调节等功能,在人类白细胞抗原( HLA)并不匹配的情况下输注同种异体MSC,一般不会引起宿主的免疫反应[3-4],使MSC作为临床治疗的一种手段成为可能.
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大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养及其生长特性和表型
间充质干细胞(MSC)是一种具有多向分化、体外扩增、自我更新能力的细胞.本研究旨在分离rMSCs,并观察其类型特征及生长特性.一.材料和方法1.材料:SD大鼠(中山大学实验动物中心),DMEM-LG培养基(Gibico公司);胎牛血清(Hyclone公司);兔抗鼠CD-FITC(Pharmingen)
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乳腺癌干细胞的靶向治疗进展
早在100多年前,就有学者提出肿瘤干细胞(CSCs)假说,随着现代分子生物学及肿瘤免疫学的发展,科学家先在急性髓性白血病中成功分离并鉴定出CSCs,此后,利用特定的细胞表面标志物及流式细胞分选技术,分别在脑肿瘤、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、肝癌、结直肠癌等实体肿瘤中分选出CSCs.研究结果显示,CSCs与胚胎干细胞具有相似的生物学特点,都具有自我更新及多向分化的潜能,除此之外,CSCs还与肿瘤的发生、发展、转移、复发密切相关[1].乳腺癌干细胞(BCSCs)的研究一直是近年的热点,从乳腺癌的发生发展、侵袭转移,到抵抗放化疗的机制,BCSCs始终起着关键的作用,成为乳癌复发的根源.
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脂肪干细胞的培养鉴定及多向诱导分化
目的:进行脂肪干细胞的分离、培养和鉴定,阐明脂肪干细胞的生物学特性.方法:无菌条件下取新西兰大耳白兔腹股沟处脂肪组织,从中获得纯化的脂肪来源干细胞.HE染色观察细胞形态;流式细胞术检测细胞表面标志物;多向诱导后检测其成脂、成骨及成软骨分化能力.结果:提取的兔脂肪干细胞形态为成纤维细胞样,生长旺盛,可以稳定增殖20代以上.流式细胞术分析显示CD44呈阳性表达,CD34、CD14呈阴性表达;经体外诱导培养后,向成脂细胞、成骨细胞及成软骨细胞分化.结论:本实验成功分离、培养和鉴定了脂肪干细胞,脂肪干细胞体外增殖稳定,并且具有成脂、成骨及成软骨多向分化潜能.
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低温冻存对牙髓干细胞生物学特性的影响
目的:研究低温冻存(cryopreservation)对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)生物学特性的影响.方法:取牙髓组织进行干细胞分离培养,用流式细胞仪、细胞增殖检测以及多向诱导分化对比研究未低温冻存与冻存1年后复苏的DPSCs自我更新和多向分化潜能之间的差异.结果:低温冻存对DPSCs的干细胞表面标记分子、增殖以及成骨和成脂分化均无显著影响.结论:低温冻存对DPSCs生物学特性无显著影响,是长期进行干细胞储存的可行方法.
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TGF-β对牙周膜干细胞性能的调节作用
目的：研究TGF?β对牙周膜干细胞（ periodontal ligament stem cells，PDLSCs）自我更新与分化能力的调节。方法：取牙周膜组织进行干细胞分离培养并给予TGF?β刺激，检测其对PDLSCs自我更新与多向分化潜能的影响，并分析分子相互作用模式。结果：TGF?β促进PDLSCs的增殖与自我更新，抑制PDLSCs成骨分化与成脂分化潜能。 TGF?β对PDLSCs性能的调节与Notch信号通路有关。结论：TGF?β在调节PDLSCs具有重要作用。
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脂肪基质干细胞的研究进展
脂肪基质干细胞是存在于脂肪组织中的一群能多向分化的细胞.它们具有与骨髓问充质干细胞相似的特性,在不同的诱导条件下能向同组织细胞分化.脂肪基质干细胞也具有一定的免疫负调节作用.能用于造血干细胞移植后的造血支持.
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小儿骨髓间充质干细胞的培养及多向分化潜能的研究
目的 研究小儿骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物学特性及多向分化能力,为小儿MSCs的临床应用提供实验依据.方法 经Percoll梯度分离接种获得小儿MSCs,观察其形态、排列分布情况,用MTT法检测细胞增殖情况,并绘制生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期,诱导剂干预细胞,观察细胞的成骨、成脂肪、成神经等多向分化能力.结果 小儿MSCs贴壁容易,呈细长梭形,增殖能力强,融合后旋涡状分布.MSCs分别经各诱导剂诱导后,细胞形态均发生相应的变化,用化学染色、PGR、免疫细胞染色等方法检测成骨标志物(碱性磷酸酶、骨钙素mRNA、钙结节)、脂肪标志物(脂滴、PPARγ-2mRNA)、以及类神经标志物(尼克氏体、NSE、NF-200)有明显的阳性.结论 小儿MSCs能稳定增殖、传代,具有成骨、成脂肪、成神经等多方向的定向分化潜能,可以作为多方面组织工程的种子细胞.
