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酶联免疫法筛查HIV抗体在艾滋病诊断中的应用价值
目的 对比在艾滋病检验中HIV抗体ELISA法筛查结果与免疫印迹试验结果,探讨HIV抗体筛查在艾滋病诊断中的临床价值.方法 选取2000年1月-2014年1月于海军总医院门诊或住院部术前或输血前患者79 231例,对所有患者抽血,采用EHSA方法对HIV抗体进行初筛检测,将阳性标本进行ELISA复核检测及免疫印迹试验确证,记录各标本复核结果及确证结果,并利用SPSS软件进行对比分析.结果 初筛结果阳性189例,复核结果双阳性186例,初筛与确证结果符合率为96.77％,其中2例经确证为阴性,4例确证结果为不确定.确证为阳性、阴性及不确定的HIV抗体初筛样本结果S/CO值分别为9.9 ～38(17.02 ±3.19)、1～5.8(5.18 ±0.48)、6～9.9(7.94±2.34).1＜S/CO值＜5.9、6＜S/CO值＜9.9及S/CO值＞9.9的样本确证试验阳性符合率分别为33.33％、85.71％,、98.22％.189例初筛阳性样本确诊结果阳性符合率为95.24％,确证试验共出现11条反应带,出现频率由高到低依次为gp160、gp24、gp120、gp41、p66、p51、p31、p17、p55、p39和p36,前4者出现率为95％以上.结论 通过ELISA方法进行HIV抗体筛查阳性率高,但存在一定的假阳性率,其阳性符合率与S/CO值呈正相关性,虽然高S/CO值不能证明其HIV感染,但它是艾滋病诊断中有效的方法.
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去唾液酸糖蛋白受体在乙型肝炎病毒感染者精子中表达的初步研究
目的 检测乙型肝炎病毒(HBV)感染者精子中去唾液酸糖蛋白受体(ASGP-R)的表达,并与HBV阴性男性精子比较,探讨ASGP-R是否参与介导HBV侵入人精子.方法 用ASGP-R单抗,通过免疫印迹(Western blot)和流式细胞术检测ASGP-R在乙肝表面抗原(+)/乙肝e抗原(+)[HBsAg(+)/HBeAg(+)]者(双阳性组,n=16)、HBsAg(+)/HBeAg(一)者(单阳性组,n=28)和HBsAg(-)者(阴性组,n=35)精子中表达差异.结果 ASGP-R于人精子的胞质中高表达,于胞膜低表达；胞质中ASGP-R水平在阴性组、单阳性组及双阳性组中逐渐升高,双阳性组和单阳性组的胞膜上ASGP-R的阳性率均高于阴性组(P均＜0.05).结论 人精子胞膜和胞质中均存在ASGP-R; HBV可能通过人精子表面的ASGP-R进入精子,且HBV可能通过某种机制使ASGP-R的表达量增加.
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丙型肝炎病毒抗体酶联免疫吸附试剂检测结果可信度的分析
[目的]分析丙型肝炎病毒(HCV)抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂的可信度.[方法]本研究对应用2种国产ELISA试剂从大连口岸出入境人员中检出的HCV阳性标本采用免疫印迹试验(RIBA)进行确证,并对检测结果进行综合分析.[结果]138份标本中万泰(WT)、丽珠(LZ)2种ELISA试剂检测均为阳性的120份,进行RIBA确证阳性115份,阳性率95.8%;仅WT阳性的10份标本,RIBA确证阳性4份,阳性率40.0%;仅LZ阳性的8份标本,RIBA确证阳性3份,阳性率37.5%.对ELISA检测真阳性和假阳性标本的S/CO值进行统计学处理,发现差异有显著性(P＜0.05).对16份假阳性标本进行RIBA条带分析,其中Core条带有10条,占62.5%;NS3-1条带有3条,占18.8%;NS3-2条带有2条,占12.5%;NS4条带有1条,占6.3%;没有出现NS5条带.[结论]本研究的结果与美国疾病预防与控制中心(CDC)在对美国公司所生产的抗HCV试剂可信度评价的基础上规定:当S/CO值在3.8以下时,样品需进行确证方可确定其阴、阳性的要求相一致.当HCV的ELISA检测结果S/CO值较低或1种ELISA试剂检测结果为阴性时应进行RIBA确证试验.
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潍坊艾滋病确证实验室HIV确证结果分析
目的 了解潍坊市艾滋病感染状况,为HIV防控提供依据.方法 对筛查实验室送检的抗体初筛阳性标本复检后进行免疫印迹法确证.结果 629例初筛阳性标本中,415份复检阳性,其中确证阳性309例.结论 HIV感染地区分布广,感染者男女比例为5.18:1,年龄以20~49岁为主,样本来源分布广泛,已由高危人群向一般人群漫延.
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一种血液艾滋病病毒抗体免疫印迹试剂的现场评估
目的对Cambridge血液艾滋病病毒(HIV)-1抗体免疫印迹(WB)试剂进行现场评估并考核其在不同的HIV感染状态的人群中确认试验检测的敏感性和特异性.方法选取不同的现场,分别采集不同的HIV感染状态人群的血液样品,共计645份.经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测后,分别使用Cambridge血液HIV-1抗体WB试剂盒和HIV blot 2.2 HIV-1/2型WB确认试剂盒进行平行对比试验.结果在已知既往HIV感染者中,Cambridge血液WB与Genelabs WB检测结果均为阳性,在此人群中上述2种确认试剂的敏感性均为100%.在398例HIV抗体ELISA检测为阴性的人群中,Cambridge血液WB试验23例为不确定;Genelabs血液WB试验86例为不确定,在此类人群中上述2种确认试剂的特异性分别为94.22%(375/398)和78.39%(312/398).结论Cambridge血液HIV-1抗体WB试剂盒与Genelabs诊断公司的HIV blot 2.2 HIV-1/2型WB试剂盒的试验结果对比,在特异性方面前者优于后者.
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补肾舒脊颗粒对人骨髓间充质干细胞BMP-4、Smad-4mRNA及蛋白表达的影响
目的 研究补肾舒脊颗粒对人骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白(BMP)通路BMP-4、Smad-4mRNA及蛋白表达的影响.方法 体外培养人骨髓间充质干细胞,并将其分为空白组、西药组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,向成骨细胞诱导,干预28天后提取mRNA及蛋白,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测BMP-4、Smad-4 mRNA及其蛋白的表达.结果 (1) RT-PCR结果发现,与模型组比较,中药低剂量组BMP-4 mRNA表达水平降低(P＜0.05),中药中、高剂量组BMP-4、Smad-4 mRNA表达水平降低(P＜0.05).与西药组比较,中药低、中、高各剂量组BMP-4、Smad-4 mRNA水平均降低(P＜0.05).与中药低剂量组比较,中药中剂量组BMP-4 mRNA表达水平降低(P＜0.05),中药高剂量组BMP-4、Smad-4 mRNA表达水平降低(P＜0.05).(2) West-ern blot结果发现,与空白组比较,模型组BMP-4蛋白表达降低(P＜0.05);与模型组比较,西药组、中药低、中剂量组BMP-4、Smad-4蛋白表达均降低(P＜0.05);与西药组比较,中药中剂量组BMP-4、Smad-4蛋白表达水平降低(P＜0.05).结论 补肾舒脊颗粒可能通过BMP通路抑制BMP-4及Smad-4的表达,从而起到延缓强直性脊柱炎异位骨化的作用.其中中药低剂量组可以降低BMP-4表达水平,而中、高剂量组可以降低BMP-4、Smad-4表达水平.
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免疫印迹试验检测血清胰岛自身抗体的应用价值
目的:探讨免疫印迹试验(IB)检测血清胰岛素自身抗体的临床价值.方法:选取初诊糖尿病(DM)患者146例和同期健康体检者60例(对照组);DM患者分为1型DM组(T1DM组,85例)和2型DM组(T2DM,61例).用IB检测各组研究对象的谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛素自身抗体(IAA)及岛细胞抗体(ICA)表达,比较分析各组研究对象各抗体的阳性率.结果:T1DM组患者的IAA、ICA及GA-DA阳性率均显著高于T2DM组和对照组;T2DM组的GADA阳性率显著高于对照组(P<0.05);T1DM组患者的GADA与ICA或IAA或ICA+IAA联合检测的阳性率均较单项检测显著提高(P<0.05).结论:IB检测血清胰IAA对糖尿病患者的早期诊断与分型有重要指导价值.
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献血前健康咨询辅助筛查HIV携带者1例
HIV感染后存在3～6个月的窗口期,此期间难以确定感染情况.我们通过献血前健康咨询辅助筛查出1例HIV携带者,报告如下.1 临床资料 我中心对自愿献血者均进行献血前健康咨询,筛选出有野游史、多个性伴侣、同性恋、吸毒、血友病、接受输血及其他血液制品的高危献血者,劝阻其献血并征得本人同意后留取血标本检测HIV抗体.跟踪随访半年,期间采血检测6次,前4次间隔1周,第5次间隔2个月,第6次间隔3个月.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验(WB)两种方法检测HIV抗体.
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HIV1/2抗体与P24抗原联合检测的意义研究
目的 研究HIV1/2抗体与P24抗原联合检测对临床诊断的影响.方法 自2006年1月-2011年3月分别收集ELISA法检测HIV1/2抗体吸光度(OD值)为临界值及大于等于阳性对照的患者血清33、29份,采用电化学发光法联合检测HIV1/2抗体与P24抗原(HIVCOM).追踪患者免疫印迹HIV确证试验结果,研究HIV1/2抗体与P24抗原联合检测对临床诊断的影响.结果 33例临界值吸光度患者中27例HIV1/2抗体与P24抗原阳性,6例阴性,29例大于等于阳性对照值吸光度的患者中28例阳性,1例阴性,免疫印迹HIV确证试验的检测结果与联合检测HIV1/2抗体及P24抗原结果一致.结论 HIV1/2抗体与P24抗原联合检测较ELISA法能够更早更准确的发现HIV感染,对临床的与早期诊断和治疗具有重要的意义及应用价值.
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三种实验室检测方法对梅毒诊断的临床意义分析
目的 检验三种梅毒实验室检测方法的梅毒阳性检出率,分析各检测指标间的相互关系,探讨其临床意义.方法 抽取性病门诊就诊者的静脉血,用梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒抗体,同时用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测同一份血清,二种方法均为阳性者用荧光梅毒螺旋体抗体吸收法(FTA-ABS)检测及免疫印迹法(WB)确认,对试验数据进行统计分析和检查.结果 在所有784名性病门诊就诊者中,ELISA检测梅毒抗体阳性者306人,阳性率39.03%;TPPA法检测梅毒抗体阳性为297人,阳性率为37.88%;经FTA-ABS检测确证阳性299人,阳性率为38.14%;终WB结果与FTA-ABS检测一致.结论 为了提高梅毒的检出率及正确性,对高度疑似梅毒的患者,应同时进行两种抗体的检查.
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抗-HIV1+2筛查试验阳性与免疫印迹试验对比结果的分析
目的对比分析艾滋病病毒(HIV 1+2)抗体筛查试验阳性结果与免疫印迹试验结果.方法对150份筛查复检为阳性标本的酶联免疫吸附试验(ELISA)与明胶颗粒凝集试验(PA)的结果,分别与同时检测的免疫印迹试验(WB)的结果进行比较,计算出ELISA、PA的符合率、敏感性和特异性,并依据ELISA的OD值变化探求与PA及WB结果的关系.结果ELISA、PA与WB的阳性符合率分别为89.93%和86.81%;ELISA的敏感性为100%,特异性为90.34%;PA的敏感性为100%,特异性为87.33%.凡经ELISA检测其S/CO值(平均18.63)远高于阳性对照S/CO值(平均6.677)的强阳性标本,与PA、WB的阳性符合率同为100%;经ELISA检测其S/CO值(平均0.8596)≤1或略大于1的标本,与PA、WB的阳性符合率分别为21.05%和0;经ELISA检测其S/CO值(平均2.648)＞1、小于阳性对照S/CO值的标本,与PA、WB的阳性符合率分别为66.67%和0.结论筛查试验存在一定的假阳性结果,HIV抗体结果的报告必须以WB结果为准;ELISA、PA与WB确认结果不符的情况仅出现于确认为HIV-1抗体阴性及不确定的标本中.
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136份初筛抗-HIV1+2阳性而复检阴性标本的分析
目的 了解山东省历年来艾滋病病毒(HIV)抗体检测中筛查试验假阳性结果的真实情况,更加合理地开展HIV抗体日常检测.方法 检测及结果判断按<全国艾滋病检测技术规范>进行,对比分析HIV抗体筛查试验为阳性而免疫印迹试验(WB)为阴性的标本的结果以及相关资料.结果 136份筛查试验为阳性反应、WB确认为HIV抗体阴性的标本,占所有送检标本的6.70%,占筛查试验阳性标本的13.39%.136份标本中,明胶颗粒凝集试验(PA)阳性的119份,占87.50%;酶联免疫吸附试验(ELISA)阳性33份,占24.26%,S/CO值平均为0.8005(0.2319～5.544).结论 日常检测必须遵从先筛查再确认的检测程序,筛查试验阳性的不能直接出HIV抗体阳性报告,应确认后再出.
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HIV抗体WB确证实验的替代策略研究
目的 利用艾滋病病毒(HIV)抗体筛查实验的酶联免疫吸附试验(ELISA)和快诊检测结果与蛋白免疫印迹试验(WB)的组合,对HIV感染与否进行确证,避免单一WB确证实验的“不确定”结果,区别WB实验中“已感染-不确定”和“未感染-不确定”结果,及时精确判定阳性与阴性结果.方法 以2007-2013年筛查为“阳性”结果的1190例需进一步进行确证实验的所有血清样本为研究对象,包括确证结果为“阳性”、“不确定”及“阴性”者.三种确证结果及实验条带结果均与两种ELISA(高敏感性和高特异性)和两种快诊(胶体硒和胶体金)的联合检测进行比对分析.结果 1190例HIV抗体待复查标本中,确证试验为阳性的930例样本,两种ELISA和两种快诊试验均为阳性;144例确证试验为阴性的血清样本,两种ELISA和两种快诊试验至少有一种为阴性,其中快诊无一例为强阳性;116例确证试验为“不确定”者,其中“不确定-阳性”样本两种ELISA和两种快诊试验均为阳性(包括强阳性、阳性与弱阳性),“不确定-阴性”样本两种ELISA和两种快诊试验至少有一种为阴性,其中快诊无一例为强阳性.结论 两种ELISA与两种快诊的联合运用敏感性、特异性均达到100％(除窗口期),可以有效区分WB结果的“感染-不确定”与“未感染-不确定”,建议国家调整艾滋病确证策略,利用HIV抗体筛查试验的联合运用来替代WB的确证试验,既排除了“不确定”结果,又节约了大量资源及减少不必要的伤害还可以满足及时精确判定结果.
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HIV抗体检测免疫印迹法的替代策略及其应用进展
目前,中国艾滋病(AIDS)的流行仍然处于全国低流行和局部地区及特定人群高流行并存的态势.2003年底估计现存感染者人数为84万,全人群感染率为0.07%.截至2004年9月底,全国累计报告的艾滋病病毒(HIV)感染者为89 067例.其中对有偿献血员的大量筛查工作发现,很多既往感染者,现行的HIV抗体筛查和确认实验[酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验(WB)]策略使检测的可及性受到一定的影响,成为艾滋病自愿咨询检测的不利因素,使艾滋病的预防和控制工作受到影响,因此,很多国家都在研究HIV抗体检测经典确认方法的替代策略,即应用现有的用于HIV抗体检测初筛实验的ELISA试剂和/或快速试剂的联合检测,代替经典的ELISA和WB的确认组合,以期在检测结果的可靠性和准确性不降低的情况下,使检测时间、检测成本降低,从而提高检测的可及性.
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治疗儿童艾滋病抗病毒1例报告
患儿,女,8岁.因四肢、面部皮肤反复发生脓疱疮皮损1年余,于2005年1月27日入院,3年前艾滋病病毒(HIV)检查酶联免疫吸附试验(ELISA)及HIV-1抗体免疫印迹试验(WB)均阳性.
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HIV抗体筛查阳性与免疫印迹试验结果对比分析
目的 对比分析HIV抗体筛查试验阳性结果与免疫印迹试验(WB)结果,探求HIV抗体筛查阳性样本ELISA的S/CO值与确认实验结果的关系.方法 对952份筛查阳性样本的ELISA结果与WB确认结果进行比较,计算ELISA的敏感性、特异性,并依据ELISA检测S/CO值变化探求与WB结果的关系.结果 ELISA与WB的阳性符合率为93.39%,ELISA检测HIV抗体的敏感性为99.53%,特异性为96.49%;确认为阳性标本的S/CO平均值为18.38,gp160、gp120、gp41、p66、p51、p31、p24条带出现的百分率都在93%以上,其中gp160出现的百分率为100%;确认阴性与不确定标本S/CO平均值分别为3.03与2.22,经统计学分析,两组之间无显著性差异.结论 筛查试验存在假阳性结果,HIV抗体结果的报告必须以确认结果为准.高S/CO值(≥6.0)预示HIV抗体阳性的可能性较大,而S/CO值较低时HIV抗体阴性及不确定的可能性较大.WB确认方法在区分阴性与不确定标本中存在不足.
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PMN对链球菌组蛋白样蛋白释放的影响
为观察人多形核白细胞(PMN)对链球菌组蛋白样蛋白(HlpA)释放的影响,将PMN与链球菌以一定比例共同作用后取上清液做免疫印迹试验.发现与抗HlpA抗体特异性结合的蛋白条带.提示PMN作用于链球菌后,HlpA能自菌体内释放出来.
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139例HIV抗体筛查标本的免疫印迹试验结果分析
目的 使用酶联免麦吸附法(ELJSA).硒标免疫层析法(Detemine)及免疫印迹法(WB)对139例J.L清标本进行筛查及确认.方法 操作及结果判断按照<全国艾滋病检测技术规范>实施.结果 139例筛查阳性标本经已疲印迹试验确认138例HIV-1阳性.gP160、gp120,gp41,p66、p51条带出现为95%以上,结论初筛结果有假阳性须经确认试验才得出准确姑果.
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仙台病毒抗原的制备及初步应用
目的 纯化和制备仙台病毒(Sendai Virus,SeV)抗原,初步应用于间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹(Western-blot)试验对SeV抗体进行检测.方法 通过鸡胚尿囊腔及BHK-21细胞增殖法培养增殖SeV,低温冻融去除细胞碎片后,用差速离心及超声破碎法纯化并制备SeV抗原,以SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定；优化确定间接SeV-ELISA抗原的佳包被浓度,对比检测间接免疫荧光试验(IFA)初筛小鼠SeV阳性血清,同时用Western-blot检测法进行特异性验证.结果 用BHK-21细胞培养增殖的SeV,病毒滴度HA为1∶128,SeV抗原的电泳纯度达80％；确定SeV-ELISA抗原佳包被浓度为2.5 μg/mL时,测得小鼠SeV抗体ELISA与IFA的阳性符合率为100％,并由Western-blot检测法得到了证实.结论 通过BHK-21细胞增殖和差速离心及超声破碎法制备的SeV抗原,可用于ELISA及Western-blot法对小鼠SeV抗体的检测,进而验证了SeV具有较强的抗原特异性及蛋白活性.
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青岛地区无偿献血者HIV初筛与确证结果对比
目的 了解第4代HIV抗原抗体诊断试剂与罗氏HIV DNA检测试剂在青岛地区无偿献血者血液筛检中的应用情况.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和核酸检测(NAT)对108 491份血液标本进行HIV初筛,初筛阳性的标本由市疾病预防控制中心采用免疫印迹试验(WB)进行确证.结果 初筛阳性64份(0.59‰),ELISA检测阳性63份(0.58‰),NAT检测阳性19份(0.18‰);两种筛查结果均为阳性18份(0.17‰),均确证阳性.HIV初筛阳性标本中,单项HIV阳性51份,WB试验结果阳性16份;HIV+梅毒(TP)阳性模式10份,HIV+乙型肝炎病毒阳性模式1份,WB试验均阴性;HIV+TP+丙型肝炎病毒阳性模式2份,WB试验阳性.结论 青岛地区HIV单纯感染为主要感染模式,合并感染模式较少;NAT能准确地检测到HIV阳性标本、发现窗口期感染;ELISA检测的假阳性率较高,有必要对本地区HIV假阳性献血者进行归队,减少献血者流失.
