首页 > 文献资料
-
小鼠肺纤维化模型中基质金属蛋白酶-9及其抑制剂表达水平的变化
目的: 研究小鼠博来霉素在肺纤维化模型中肺泡巨噬细胞(AM)分泌的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达随着时间的变化, 观察肺纤维化中MMP-9和TIMP-1的表达是否存在失衡. 方法: 以博来霉素诱导建立小鼠肺纤维化模型, 采用HE染色观察肺部胶原沉积状况.选用抗CD68 mAb, 采用微小免疫磁珠法分离纯化肺泡灌洗液中的AM, 用Hoechst 33258染色AM, 在下光镜高倍视野计数法评估AM的纯度和活性, 用EIA法检测AM上清液中MMP-9和TIMP-1的表达.结果: 肺组织切片HE染色显示小鼠肺部胶原沉积在1、 3、 7、 14、 28 d呈逐渐加重趋势.粗分离的AM纯度为(82.5±2.5)%. 采用微小免疫磁珠法分离肺泡灌洗液中的AM纯度可达到(99.3±0.7)%(P<0.05). 纯化后的细胞存活率为(92.5±1.8)%, 与纯化前的(92.7±2.0)%, 相差不大(P>0.05).随着小鼠肺间质纤维化的进展, MMP-9的分泌量逐渐减少, 而TIMP-1的表达量逐渐增加.结论: 在小鼠肺纤维化中AM分泌的MMP-9和TIMP-1之间存在失衡, 表明基质降解系统受到抑制.
-
环孢菌素对大鼠牙龈结缔组织胶原及TIMP-1蛋白表达影响的实验研究
观察环孢菌素(Cyclosporine,CsA)对大鼠牙龈结缔组织胶原和胶原酶TIMP-1表达的影响,探讨CsA对牙龈结缔组织胶原代谢的影响机制.方法:SPF级7周龄雄性Wistar大鼠80只,随机分为实验组和对照组,每组又分为10、20、30、40天亚组,实验组胃饲含CsA鲜牛奶,对照组胃饲等量鲜牛奶.经心灌注4％多聚甲醛内固定取材,制作下颌第一磨牙颊舌向石蜡切片,Masson三色改良法染色胶原,免疫组化PV两步法检测TIMP-1蛋白的表达.结果:实验组大鼠牙龈结缔组织内胶原纤维数量增多、直径增粗；牙龈结缔组织内TIMP-1蛋白表达上调.结论:环孢菌素导致牙龈结缔组织增生可能与TIMP-1蛋白表达上调、胶原堆积有关.
-
强脉冲光对培养的人成纤维细胞表达MMP-1和TIMP-1的影响
目的:观察强脉冲光照射对体外培养的成纤维细胞表达基质金属蛋白酶(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的影响,探讨IPL嫩肤作用的分子生物学机制.方法:采用能量密度分别为20、25、30J/cm2的强脉冲光对培养的人成纤维细胞进行照射,于照射后24h及48h应用ELISA法测定上清液中MMP-1和TIMP-1的表达并与对照组比较.结果:照射24h后25及30J/cm2组上清液中检测到的MMP-1、TIMP-1含量轻度升高;48h时各能量组MMP-1均升高,但各组间并无显著性差异.TIMP-1随能量的升高而含量增高.结论:强脉冲光照射成纤维细胞后可引起MMP-1,TIMP-1表达的增加,但是TIMP-1的增加远远大于MMP-1的增加,提示IPL嫩肤作用的生物学机制可能与成纤维细胞产生的TIMP-1增加有关.
-
强脉冲光对大鼠皮肤TIMP-1表达的影响
目的:观察强脉冲光(IPL)对大鼠皮肤基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,探讨光子嫩肤的分子生物学机制.方法:选择15只SD大鼠,每只选三个部位用强脉冲光照射,采用同一照射参数,能量密度34J/cm2,分为三个脉冲,脉宽各为4ms、5ms、6ms,脉冲延时为20ms及25ms.照射后第1、3、5、7、15、30天分别于治疗及非治疗部位切取皮肤样本,免疫组化染色(SABC法)观察.结果:照射后第1天TIMP-1无表达,第3天时出现表达并逐渐增强,第15天时达到高峰,至第30天时表达仍处于较高水平,非治疗部位染色阴性.结论:强脉冲光照射皮肤后可引起TIMP-1表达的增加,提示TIMP-1在光子嫩肤过程中对皮肤的重塑起重要作用.
-
ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗机制的初步研究
目的:研究ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕中MMP-2和TIMP-1的变化,探讨ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗机制.方法:分为正常组、阴性对照组、高浓度ALA-PDT治疗组、低浓度ALA-PDT治疗组、PDT治疗组进行治疗,1次/周,共3次.治疗后1月,2月和3月采集样本,进行RT-PCR和Western blot实验.结果:ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕是有效的.结论:ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗机制可能是通过逆转MMP-2和TIMP-1之间的失衡状态实现的.
-
金属基质蛋白酶及抑制剂与乳腺癌研究进展
金属基质蛋白酶(MMP)及抑制剂(TIMP)与细胞外基质(ECM)的降解密切相关,而ECM的降解和乳腺癌的浸润,转移相关.查阅国外相关文献发现乳腺癌患者中TIMP-1低水平表达,但有时也较高水平表达,MMP-2,MMP-9水平明显高于正常人,并且可能与术后的愈合相关.所以对于MMPs,TIMPs的进一步研究有望为乳腺癌治疗提供新的方向.
-
ALA-PDT治疗对瘢痕癌体外培养细胞中MMP-9、MMP-13及TIMP-1水平的影响
目的:研究ALA-PDT治疗对瘢痕癌体外培养细胞中MMP-9、MMP-13和TIMP-1的影响.方法:将瘢痕癌体外培养细胞分为正常组、阴性对照组、高浓度ALA-PDT治疗组、低浓度ALA-PDT治疗组、光动力治疗组.对高浓度ALA-PDT治疗组、低浓度ALA-PDT治疗组、光动力治疗组分别进行干预治疗.于治疗后24h和48h采集样本,进行RT-PCR实验和ELISA实验.结果:治疗组中MMP-9、MMP-13的表达水平在ALA-PDT治疗后24h和48h的瘢痕癌体外培养细胞中的表达水平要明显高于阴性对照组,差异具有显著性(P＜0.01),而治疗组中TIMP-1的表达水平要明显低于阴性对照组,差异具有显著性(P＜0.01).高浓度治疗组与低浓度治疗组之间比较有差异(P＜0.05).结论:ALA-PDT治疗可改变瘢痕癌体外培养细胞中MMP-9、MMP-13和TIMP-1的表达,使MMP-9/TIMP-1及MMP-13/TIMP-1之间的比例上调.
-
肝纤维化对结肠癌肝转移的影响及TIMP-1、CTGF在其过程中的机制研究
目的:通过建立小鼠肝纤维化模型及肝纤维化基础上的结肠癌肝转移模型,阐明肝纤维化对肝转移癌发生的影响,探讨TIMP-1、CTGF在肝纤维化抑制结肠癌肝转移中的作用.方法:BALB/c小鼠76只,随机分为A、B两组,A组为正常对照组,B组采用CCl4灌胃法构建肝纤维化模型.病理切片证实肝纤维化模型制作成功后,将B组随机分为B1和B2两组,A组同时随机分为A1和A2两组,每组均为19只.取A2和B2组,将培养好的小鼠结肠癌CT26细胞应用脾脏种植切除脾脏法构建结肠癌肝转移模型.2周后处死各组动物,比较A2和B2组小鼠肝转移率,并采用免疫组化方法对TIMP-1、CTGF在各组肝脏中的表达进行分析.结果:动物模型构建成功,病理切片证实肝纤维化及肝转移癌的发生.A2组肝转移发生率为82.4％(14/17),B2组肝转移发生率为25％ (4/16),差异有统计学意义(P＜0.05).TIMP-1、CTGF在B1、B2组肝脏的表达与A1、A2组相比均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:肝纤维化对肝转移癌的发生有抑制作用.TIMP-1、CTGF可能在肝纤维化抑制结肠癌肝转移中发挥作用.
-
神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞表达MMP-1,MMP-3和TIMP-1的影响
目的 研究神经鞘氨醇磷酸胆碱(shingosylphosphorylcholine,SPC)对体外培养人真皮成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶内源性组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探索在促进皮肤创伤愈合方面SPC的作用机制.方法 通过MTT的方法检测SPC在成纤维细胞增殖效率方面的作用.利用RT-PCR和Western blotting的方法检测体外培养人真皮成纤维细胞经5μmol/L SPC诱导后,表达损伤修复相关蛋白MMP-1,MMP-3,TIMP-1的情况.结果 一定浓度的SPC具有促进成纤维细胞增殖的作用.5μmol/L SPC具有上调成纤维细胞表达MMP-1,MMP-3,TIMP-1 mRNA和蛋白的作用(P＜0.05).结论 实验证实体外培养人真皮成纤维细胞在经SPC干预后,其表达细胞外基质调节蛋白MMP-1,MMP-3,TIMP-1的作用得到增强,提示SPC具有促进皮肤创伤愈合的作用.
-
MMP-9,TIMP-1及ETS-1在扁平苔藓中的表达
目的 观察基质金属蛋白酶-9(matrix metallpproteinase-9,MMP-9)及其相应的组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibifor of metalloproteinase-1,TIMP-1)和Ets-1(E26 transformation-specific)在扁平苔藓(Lichen Planus,LP)中的表达情况并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化方法检测MMP-9,TIMP-1及Ets-1在40例扁平苔鲜皮损和20例正常皮肤组织中的表达情况.结果 MMP-9,TIMP-1及Ets-1在扁平苔藓组中的表达均高于健康对照组(P＜0.05),且三者之间的表达呈正相关(P＜0.05).结论 MMP-9,TIMP-1及Ets-1在扁平苔藓皮损中均过表达,这可能与扁平苔藓的发病有关.
-
地塞米松对人眼小梁细胞MMP-3及TIMP-1 mRNA表达的影响
目的:研究地塞米松对人眼小梁细胞MMP-3及TIMP-1mRNA表达的影响,探讨激素性青光眼的发病机制.方法:采用原代培养的人眼小梁细胞,用10-7mol/L的地塞米松培养24h,通过RT-PCR方法检测小梁细胞MMP-3及TIMP-1 mRNA的表达.结果:地塞米松处理后MMP-3 mRNA的表达明显减少,与正常对照组相比相差显著(0.74±0.10 vs 0.46±0.11,P＜0.05),TIMP-1 mRNA的表达与正常对照组相比无明显改变(2.01±0.13 vs 1.95±0.11,P＞0.05).结论:地塞米松抑制小梁细胞MMP-3 mRNA的表达,提示激素性青光眼的发病与MMP-3的降低有关.
-
青光安对抗青光眼术后滤过道瘢痕组织中弹性纤维、MMP-7、TlMP-1的实验研究
目的：通过观察4种青光安有效组份和青光安颗粒剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕瘢痕组织中弹性纤维、MMP-7、TIMP-1的影响,来探讨青光安的有效组份和青光安颗粒剂对抗滤过道瘢痕化的作用机制,并对比青光安有效组份与青光安颗粒剂对抗瘢痕化作用的优劣。方法：将青光安4种有效组份与青光安颗粒剂中药混悬液作用于滤过手术后D、E、F、G、H组,通过与A组空白对照组、B组模型组和C组丝裂霉素C组进行比较,观察青光安4种有效组份与青光安中药混悬液对青光眼术后滤过道瘢痕组织中弹性纤维、MMP-7、TIMP-1的影响。结果：C组、E组和H组术前基础眼压与术后第2d；1,2,4 wk的眼压比较,现眼压较其他组回升缓慢,第28 d时仍然是小值,与其余A、B、D、F、G组比较差异具有统计学意义。弹性纤维面积密度比较：手术组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),C组与H组、C组与E组比较,差异无明显统计学意义(P>0.05),H组与E组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。其他各组间比较,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论：青光眼术后滤过道瘢痕化,是导致滤过性手术失败的重要原因；青光安有效组份2、青光安混悬液和丝裂霉素C可通过增加MMP-7的表达和抑制弹性纤维、TIMP-1的表达而减少瘢痕组织增生,具有明显的抗青光眼术后滤过道瘢痕化的作用；通过实验观察可初步说明青光安有效组份2与青光安混悬液都具有明显的抑制滤过道瘢痕化的作用,且二者效果持平,青光安中药组略优于青光安有效组份2组。
-
氦氖激光对退变颞下颌关节髁突软骨基质与基质调节因子表达的影响
目的: 研究氦氖激光对退变颞下颌关节髁突软骨细胞外基质和基质调节因子表达的影响.方法: 将40只健康成年雄性新西兰大白兔随机分为正常组、假模型组、模型组和治疗组(n = 10),对治疗组兔采用氦氖激光治疗,组内又分为造模后第1、11天2个取材时间点(n = 5).于不同时间点取出颞下颌关节组织,HE染色观察组织学形态,Western Blot方法检测细胞外基质Col-2、PRG-4和基质调节因子MMP-13、TIMP-1、BMP-2的表达.结果: 经过氦氖激光治疗后的髁突软骨纤维层轻度松解和部分胶原纤维合成增强.造模后第1天模型组与治疗组MMP-13表达均明显升高,Col-2、PRG-4、TIMP-1、BMP-2表达均明显降低(P ＜ 0. 05);治疗组第11天与第1天比较,MMP-13表达降低(P ＜ 0. 05),Col-2、PRG-4、TIMP-1、BMP-2表达升高(P ＜ 0. 05).结论: 氦氖激光治疗可上调退变颞下颌关节软骨细胞外基质Col-2、PRG-4和基质调节因子TIMP-1、BMP-2蛋白表达,下调MMP-13蛋白表达.
-
全反式维甲酸对TGF-β1刺激的肝星状细胞COL1α2、MMP-2、TIMP-1以及信号通路的影响
目的 观察全反式维甲酸对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖,以及经转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激后Ⅰ型胶原α1链蛋白基因(COL1α2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)及Smad 2/3的表达变化,探讨其对肝纤维化的作用及其分子机制.方法 不同浓度的全反式维甲酸(0.1、1、10μmol/L)分别作用HSC-T612、24、48 h,采用噻唑蓝(MTT)比色实验检测HSC-T6增殖活性;另外,经TGF-β1(5 ng/mL)刺激后的HSC-T6用不同浓度全反式维甲酸干预24 h后,利用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定COL1α2、MMP-2及TIMP-1 mRNA的表达,细胞免疫化学染色法检测smad2/3蛋白的表达.结果 全反式维甲酸能够抑制HSC-T6的增殖,而且具有浓度依赖性(P<0.05);受外源TGF-β15 ng/mL刺激后,HSC-T6中COL1α2、MMP-2、TIMP-1 mRNA及Smad2/3蛋白表达较对照组明显增强(P<0.05),而全反式维甲酸干预能够有效降低HSC-T6受TGF-β1刺激后COL1α2、MMP-2、TIMP-1 mRNA及Smad2/3蛋白的表达(P<0.05).结论 全反式维甲酸能够抑制HSC-T6的增殖,下调HSC-T6受TGF-β1刺激后COL1α2、MMP-2、TIMP-1 mRNA的表达,并且可能通过抑制HSC-T6中TGF-β1的下游信号蛋白Smad 2/3的表达,影响TGF-β1/Smad信号通路,发挥其抗肝纤维化作用.
-
川芎嗪对体外培养兔关节软骨细胞MMP-1、MMP-13和TIMP-1表达的影响
目的 研究川芎嗪对IL-1β诱导的兔关节软骨细胞损伤的影响.方法 体外分离培养兔关节软骨细胞,并以其为实验模型；将实验分为正常对照组、白介素组、川芎嗪+白介素组；MTT法检测细胞增殖情况；Real-time PCR检测MMP-1、MMP-13和TIMP-1的mRNA表达量.结果 MTT检测结果显示,川芎嗪+白介素组细胞增殖情况显著高于正常对照组和白介素组( P＜0.05)；Real-time PCR结果显示,川芎嗪+白介素组MMP-1和MMP-13的mRNA表达量显著低于白介素组(P＜0.05),而TIMP-1的mRNA表达量则显著高于白介素组(P＜0.05).结论 川芎嗪可抑制IL-1β对软骨细胞的炎症损伤,具有保护软骨细胞,延缓软骨基质降解的作用,临床上可作为OA的治疗用药.
-
糖尿病心肌病患者血清中MMP-2、TIMP-1的测定及临床意义
目的：探究MMP-2和TIMP-1在评价糖尿病心肌病患者中的应用及其临床价值。方法选取糖尿病心肌病患者44例作为观察组,选取同一时期在本院进行治疗的糖尿病,但无心肌病的患者44例作为对照组,然后在选取同期在我院进行健康体检的正常者40例作为健康对照组,分析三组的一般状况、生化指标、MMP-2、TIMP-1并作出比较。结果对照组和观察组MMP-2的水平均低于健康对照组,而TIMP-1水平高于健康对照组,差异具有统计学意义(﹤0.05)。TIMP-1高水平和MMP-2/TIMP-1比值降低为糖尿病心肌病的危险因素。结论对于糖尿病心肌病,MMP-2/TIMP-1作为其独立的危险因素,可以应用于早期诊断,具有较高的临床应用价值。
-
脑梗死急性期血清MMP-9和TIMP-1与认知功能障碍关系的研究
目的 探讨脑梗死急性期血清金属基质蛋白酶9,及其抑制剂基质金属蛋白酶组织抑制因子1与脑梗死后认知功能障碍的关系.方法 收集首发急性脑梗死患者84例(脑梗死组)及健康受试者40例(健康对照组),脑梗死组根据入组14 d时MoCA评分结果分为CI组(MoCA评分<26分)、非认知障碍(non-cognitive impairment,NCI)组(MoCA评分≥26分).采用ELISA法测定各组血清MMP-9和TIMP-1水平.结果 与健康对照组比,CI组与NCI组血清MMP-9和TIMP-1水平均显著升高(P均<0.05),与NCI组相比,CI组MMP-9水平显著升高(P<0.05),而TIMP-1水平显著降低(P<0.05).Logistic回归分析显示,高MMP-9水平和高龄是脑梗死后CI的独立危险因素,而高TIMP-1水平与吸烟是脑梗死后CI的保护性因素.相关分析显示CI组MoCA评分与MMP-9水平成负相关,与TIMP-1水平呈正相关.结论 脑梗死急性期,血清高MMP-9水平是脑梗死后CI的危险因素,而高TIMP-1水平是脑梗死后CI的保护性因素.测定脑梗死急性期血清MMP-9、TIMP-1水平,当与其他预测脑梗死后CI的因子联合进行系统筛查时,可能有助于识别脑梗死后发生认知功能障碍高风险患者.
-
复方红景天抗大鼠肝纤维化机制的研究现状
肝纤维化是指由多种不同致病因子所致的肝内胶原纤维病理性增生，导致细胞外基质在肝内弥漫性能堆积的病理性过程。它不是一个独立的疾病，是由化学、生物、物理等因素引起的肝硬化的共同病理阶段。因此能否在早期阶段对肝纤维化进行有效的干预是肝硬化治疗能否成功的关键。一直以来，国内外很多学者都致力于肝纤维化抑制药物的研究，如今已经有了不少喜人的成果。其中，国内学者经研究发现我国传统医学在肝纤维化的抑制方面有着难以忽视的作用。本文就复方红景天对实验性肝纤维化抑制作用机制做一综述。
-
基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1测定在慢性肾衰竭患者中的变化
目的：测定基质金属蛋白酶（ MMPs）和基质金属蛋白酶组织抑制剂（ TIMPs）在慢性肾衰竭患者中的结果，以期了解这两种物质在慢性肾衰竭病变中的作用．方法：选择不同期的慢性肾衰竭患者作为研究对象，采用ELISA法测定血清中的MMP?9和TIMP?1的浓度．结果：血清中MMP?9虽然在CRF病例中较高但方差分析提示，差异无统计学意义（ P＞0．05）；血清TIMP?1的结果按肾功能衰竭的程度呈上升趋势，以CRFⅣ组的结果为高，CRFⅠ组低，组间比较差异有统计学意义（ P＜0．001）；尿液中TIMP?1的结果以CRFⅣ组的结果为高，CRFⅠ组低，组间比较差异有统计学意义（ P＜0．001）．慢性肾衰竭患者除CRFⅠ组α1?MG、β2?MG指标外，其余指标均显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）．结论：通过检测血清MMP?9、TIMP?1以及尿液TIMP?1的浓度可以更好地了解慢性肾衰竭的程度和肾间质纤维化的形成原因．
-
姜黄素对哮喘大鼠肺泡灌洗液及血清MMP-9、TIMP-1水平的影响
目的:探讨哮喘大鼠血清和肺泡灌洗液中MMP-9,TIMP-1的水平与气道重塑的关系及姜黄素对其的影响.方法:将30只幼年Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和姜黄素干预组,每组10只.采用卵蛋白(OVA)等致敏大鼠哮喘模型,14天后,哮喘模型组用1%卵蛋白溶液雾化吸入,20分钟激发,动物出现打喷嚏,呼吸频率加快,幅度加大,腹式呼吸明显等症状.以后每天激发1次,共6周;对照组用生理盐水雾化吸入;干预组大鼠于每次激发前20分钟胃饲姜黄素200 mg/kg药液.观察各组动物哮喘发作症状、基底膜周长、胶原面积、总管壁厚度和平滑肌厚度;采用ELISA方法检测血清中的MMP-9、TIMP-1水平.结果:实验各组间气道壁基底膜周长比较,其差异无统计学意义(P>0.05);而各组间气道胶原面积、总管壁厚度和平滑肌厚度比较,哮喘模型组明显高于生理盐水对照组和姜黄素干预组;哮喘模型组的血清和肺泡灌洗液中MMP-9,TIMP-1水平均明显高于生理盐水对照组(P<0.01);姜黄素干预组的血清和肺泡灌洗液中MMP-9、TIMP-1水平均低于哮喘模型组(P<0.01).结论:姜黄素可以降低血清和肺泡灌洗液中MMP-9、TIMP-1含量,其可能是降低哮喘大鼠气道重塑的重要原因之一.
