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中药复方益气消征方对体外小鼠脾细胞增殖作用的影响
目的 观察中药复方益气消征方(YQXZF)对体外小鼠脾细胞增殖作用的影响.方法 取不同浓度益气消征方体外作用于小鼠脾细胞,采用MTT比色法测定小鼠脾细胞的光密度值.结果 益气消征方对小鼠脾细胞有促进增殖的作用,在益气消征方浓度为3 μg/ml时促进增殖作用明显.结论 中药复方益气消征方具有体外促进小鼠脾细胞增殖的作用.
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人工模拟外湿环境对正常及脾阳虚大鼠脾细胞增殖能力的影响
目的：探讨外湿环境因素对正常及脾阳虚大鼠脾细胞增殖能力的影响，研究复合病因内外合邪发病机制。方法选取 SD 大鼠40只随机分为对照组、外湿组、脾阳虚组、脾阳虚加湿组，每组10只。造模成功后无菌摘除脾脏，采用 ConA 诱导脾淋巴细胞增殖，以此表示淋巴细胞的功能水平。结果脾阳虚组、外湿组、脾阳虚加湿组脾淋巴细胞增殖能力均显著低于对照组，差异有统计学意义（P ﹤0.01）。脾阳虚加湿组脾淋巴细胞增殖能力较脾阳虚组显著下降，差异有统计学意义（ P ﹤0.01）。结论外湿环境因素相对于脾阳虚因素对机体免疫抑制作用更强。说明外湿环境因素对正常大鼠、脾阳虚模型大鼠免疫学的影响较单纯脾阳虚模型大鼠明显，并且外湿环境因素与脾阳虚模型具有协同致免疫机能下降的作用。
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左归饮对老年小鼠脾细胞体外增殖和血清白细胞介素-2的影响
目的:探讨左归饮对老年小鼠免疫功能的影响.方法:通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞增殖反应、酶联免疫(ELISA)法测定血清中白细胞介素-2(IL-2)水平.结果:老年小鼠脾细胞对刀豆蛋白A(ConA)应答增殖能力和血清中IL-2水平明显低于青年小鼠(P＜0.01和P＜0.05),左归饮可显著提高老年小鼠IL-2的含量,同时促进体外脾细胞增殖(P＜0.05和P＜0.01).结论:左归饮明显增强老年小鼠的免疫功能,使其恢复或接近青年小鼠状态,具有延缓衰老的作用.
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关黄柏总多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响
目的:分离纯化关黄柏总多糖,研究纯化组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.方法:采用DEAE Cellulose 52,DEAE-Sepharose F.F,Sephacryl S-400等载体对关黄柏总多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成;采用MTT法测定各多糖组分对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的作用.结果:关黄柏总多糖占药材的4.3％,从关黄柏总多糖中分离纯化得到3种多糖组分G1,G2,G3,分别占总多糖的6％,9％,10％,经HPLC鉴定证明为均一多糖,均主要含阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸,其摩尔比分别是G1(1∶ 1.06∶ 1.04∶ 1.14),G2(1∶ 1.27∶ 1.10∶ 1.09),G3(1∶ 1.23∶0.99∶ 1.55),3种均一多糖对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有显著的抑制作用.结论:3种均一关黄柏总多糖主要由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成,具有一定显著的抑制细胞免疫的作用,为进一步研究提供了实验基础.
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骨髓间充质干细胞异体移植对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)异体移植对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用.方法 全骨髓贴壁培养法获得大鼠BMSCs,流式细胞术检测细胞免疫表型,并诱导成骨方向分化.取雌性C57BL/6小鼠,随机分为3组:正常对照组、PBS组和大鼠BMSCs组,用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35～55联合完全弗氏佐剂诱导建立EAE模型.小鼠免疫后38d和48d腹腔注射PBS或大鼠BMSCs进行治疗,神经功能评分观察各组小鼠神经功能变化.二次治疗12d后取各组小鼠脊髓、脾脏和外周血.HE染色及Luxol fast blue染色观察脊髓炎性细胞浸润及髓鞘脱失情况;脾脏制成单细胞悬液,细胞CFSE标记后10mg/L刀豆球蛋白(ConA)和MOG3s ～55刺激培养3d,观察脾细胞增殖情况.ELISA检测大鼠BMSCs移植后外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素17(IL-17)含量.结果 流式细胞术显示,大鼠BMSCs第3代(P3)细胞表达抗原CD29、CD90、CD106,不表达CD45.体外诱导其能向成骨分化.小鼠发病后,大鼠BMSCs组小鼠神经功能缺损症状较PBS组减轻,评分降低.HE染色和Luxol fast blue染色结果显示,大鼠BMSCs组脊髓炎细胞浸润和脱髓鞘比同时间点PBS组减轻(P＜0.05).ConA和MOG35-55刺激培养后,PBS组和大鼠BMSCs组脾细胞增殖增加,而大鼠BMSCs组又较PBS组降低.与PBS组相比,大鼠BMSCs组血浆细胞因子IFN-γ、IL-17含量降低(P＜0.05).结论 全骨髓贴壁培养法能有效分离纯化BMSCs,大鼠BMSCs异体移植对小鼠EAE模型有治疗作用.
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磁性纳米四氧化三铁对小鼠淋巴细胞及巨噬细胞功能影响的初步研究
为了探讨磁性纳米四氧化三铁颗粒(Fe3O4-MNP)对小鼠免疫系统的影响,将ICR小鼠随机分为4组,分别给予生理盐水、低剂量、中剂量和高剂量Fe3O4-MNP,在小鼠经胃灌药后2周处死,测量脾脏重量及小鼠体重并计算脾脏指数;用刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验测定脾淋巴细胞增殖活性,中性红比色法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能.结果表明,与对照组相比,实验组的脾脏指数并没有明显差异(p＞0.05).实验组脾淋巴细胞增殖率均高于对照组,尤其在中剂量组(p＜0.05),且中剂量组腹腔巨噬细胞吞噬率较对照组及其他2个实验组均有明显升高(p＜0.05).结论:合适剂量的Fe3O4-MNPs可以增强小鼠淋巴细胞免疫和巨噬细胞吞噬功能.
关键词： Fe3O4-MNPs 免疫功能 吞噬指数 脾细胞增殖 -
半枝莲多糖的抗肝癌作用及其机制的研究
目的 探讨半枝莲多糖(SPS)的抗肝癌作用及其机制.方法 建立小鼠移植瘤模型,采用荷瘤小鼠抑瘤率检测SPS对H22肝癌小鼠的抗肿瘤作用;制备荷瘤小鼠脾细胞悬液,检测SPS对脾淋巴细胞增殖和脾细胞分泌IL-2和TNF-α的影响.结果 SPS在50～200 mg/(kg·d)范围内可抑制小鼠H22肝癌的生长,促进荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖,提高脾细胞分泌IL-2和TNF-α的水平.结论 SPS可能是通过增强机体免疫功能达到治疗肿瘤的功效.
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枸杞子活性多糖的研究
目的对4个均一枸杞多糖：LBP 1a-1,LBP 1a-2,LBP 3a-1和LBP 3a-2进行结构研究和药理评价。方法采用凝胶柱色谱、酸水解、过碘酸氧化和波谱学等方法测定多糖样品的分子量、单糖组成及连接方式，并以小鼠脾淋巴细胞增殖反应为免疫活性指标对多糖样品进行活性评价。结果 4个多糖样品的分子量分别为11.5×104,9.4×104,10.3×104，8.2×104，LBP 1a-1,LBP 1a-2为1，6连接的葡聚糖；LBP 3a-1,LBP 3a-2具有1，4连接的多聚半乳糖醛酸主链，及微量的半乳糖和阿拉伯糖分支。4个多糖均具有免疫促进作用。结论 4种多糖首次从枸杞子中分离得到，具有1，4连接多聚半乳糖醛酸主链结构的多糖活性较强。
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软骨多糖对荷瘤小鼠免疫功能影响的初步研究
目的 研究软骨多糖对荷瘤小鼠的作用,并探讨其对免疫功能的影响.方法 采用小鼠肉瘤S180细胞建立动物腹水瘤模型,然后随机将小鼠分为生理盐水对照组和软骨多糖给药组,连续腹腔注射生理盐水或软骨多糖,分别测量ConA和LPS刺激下小鼠脾细胞淋巴增殖情况、外周血NK细胞的活性,及外周血单个核细胞E花环形成率.结果 软骨多糖能刺激淋巴细胞增殖,明显提高NK细胞的活性,提高E花环形成率.结论 软骨多糖能通过增强S180荷瘤小鼠的免疫功能而抑制肿瘤的生长.
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芪术调修方对免疫系统的影响
目的研究芪术调修方对实验动物免疫系统的影响.方法直接称重法测定小鼠胸腺及脾的脏器系数;定量注射微细碳颗粒,测定血中碳颗粒的含量变化;α-醋酸萘酯法测定小鼠的T淋巴细胞酯酶染色率;比色法测定小鼠IgG和IgM的含量;耳片称重法测定小鼠迟发型超敏反应的变化;四甲基偶氮唑盐比色法测定小鼠脾细胞的增殖.结果该方明显增加幼鼠的免疫器官质量;小剂量明显增加注射用环磷酰胺致免疫低下成年鼠的胸腺指数;10 g·kg-1 及 20 g·kg-1 可明显增加T淋巴细胞百分率;22.8 g·L-1 能促进 2.5 mg·L-1 刀豆毒素A诱导的脾细胞增殖.结论芪术调修方可调节T淋巴细胞参与的免疫反应,而对巨噬细胞的吞噬功能无明显影响.
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猪软骨多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响
皮下注射S180细胞建立动物实体瘤模型,将小鼠随机分为生理盐水对照组和猪软骨多糖治疗组,连续腹腔注射生理盐水或猪软骨多糖21 d,MTT法测定脾细胞增殖能力、免疫荧光法检测CD40和CD40L的表达以及TUNEL法检测瘤细胞的凋亡;免疫组化SP法检测Fas、PCNA、Cyclin D1和p21的表达.结果显示,猪软骨多糖能够促进脾淋巴细胞的转化并提高CD40和CD40L蛋白的表达,治疗组的Fas和p21的抗体表达较对照组显著升高,而PCNA和Cyclin D1的表达则显著降低.提示猪软骨多糖能够活化免疫细胞,提高小鼠的免疫力,通过提高Fas和p21的表达水平和降低PCNA和Cyclin D1的表达水平而诱导瘤细胞的凋亡.
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大鼠杏仁核5-HT3受体参与免疫调制
实验通过大鼠侧脑室和杏仁核给予5-HT3受体激动剂1-phenylbiguanide (PBG), 用～3H-TdR掺入法测定脾细胞丝裂原(concanavalin A, Con A和lipopolysaccharide, LPS)刺激增殖效应, 用活化脾细胞增殖法测定IL-2生成, MTT法测定自然杀伤(natural killer, NK)细胞活性和用放射免疫测定血浆皮质酮水平, 以探讨大鼠杏仁核5-HT3受体在免疫调控中的作用.结果表明: 5-HT3受体拮抗剂granisetron (GNT, 0.1～0.4 mg/kg ip)剂量依赖地增强Con A和LPS刺激的脾细胞增殖, 作用在连续给药5 d明显; 双侧脑室给予PBG (5 μg/side)可增强Con A和LPS刺激的脾细胞增殖效应, 作用在连续给药3 d明显; 双侧和单侧中央杏仁核给予PBG 0.5 μg均增强Con A刺激的脾细胞增殖和IL-2生成; 底内侧杏仁核给予同剂量PBG仅增强LPS刺激的脾细胞增殖效应, 不影响Con A刺激的脾细胞增殖和IL-2生成; 中央杏仁核给予PBG升高血浆皮质酮的作用较底内侧杏仁核给予等量PBG引起的升高血浆皮质酮作用明显(P<0.01).侧脑室、中央杏仁核和底内杏仁核给予PBG对丝裂原刺激的脾细胞增殖效应影响不同, 但均被同时同部位给予GNT所拮抗, 提示杏仁核中央核和底内侧核的5-HT3受体可能以不同方式参与Con A或LPS刺激的脾细胞增殖效应的调制.
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日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj26GST）疫苗免疫BALB／c小鼠脾细胞动态观察
目的：观察日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj26GST ）疫苗免疫BALB/c小鼠后脾细胞增殖、亚群和凋亡的动态变化。方法将疫苗分别经皮下注射（SC组）和鼻腔粘膜接种（IN组）免疫BALB/c鼠，在免疫后0～22周每2周每组随机剖杀4只小鼠，无菌取脾，制成单个悬浮脾细胞，用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测脾细胞增殖水平、用流式细胞仪（FACsort）检测T细胞亚群和脾细胞凋亡状况。结果未刺激及SjAWA刺激时SC组小鼠脾细胞增值水平于免疫后4～20周明显升高， ConA刺激时于4～18周显著升高，均于免疫后8周达高水平；IN组脾细胞增殖水平原液组、SjAWA组和ConA组分别于2～18周、2～10周及14～18周、2～8周和12～18周显著升高，均于免疫后4周达大值（ P＜0．01或 P＜0．05）。SC组和IN组CD＋4 T细胞分别于免疫后2～14周、2周及6～16周升高，并于8周达峰值（ P＜0．01或 P＜0．05）；两组CD＋8 T 细胞均于2～20周轻微升高，分别于8周和6周达较高值（P＞0．05）。未刺激和ConA刺激时SC组脾细胞凋亡水平分别于免疫后2～4周、2～6周升高显著，均于免疫后2周达大值（ P＜0．01或 P＜0．05）；IN组均于4周显著升高并达峰值（ P＜0．01）。结论日本血吸虫重组 Bb（pGEX-Sj26GST ）疫苗可诱导脾细胞的增殖，增加CD＋4 T细胞的数目，抑制脾细胞的凋亡而发挥保护性免疫应答。
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牛大力多糖对小鼠脾细胞增殖及分泌细胞因子的影响
目的 观察牛大力多糖对小鼠脾细胞增殖及分泌细胞因子的影响,探讨其免疫调节的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测牛大力多糖对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠T淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E 2(PGE 2)的含量.结果 牛大力多糖浓度在50~200 μg·mL-1范围内能增强Con A诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖作用;并对TNF-α和IL-6的产生有促进作用,对PGE 2有抑制作用.结论 牛大力多糖能促进小鼠脾细胞的增殖,通过调节细胞因子发挥免疫增强作用.
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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞增殖变化的研究
目的 探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞增殖的变化.方法 将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小鼠,免疫后8周每鼠用50个Eg原头节攻击感染,感染后25周剖杀小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重抑制率;取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原(EgAg)或刀豆素A(ConA)刺激培养,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测免疫小鼠脾细胞增殖反应,同时设有空载体、Bb和MRS对照.结果 以上4种疫苗接种组小鼠的囊重抑制率分别为45.33%、41.33%、70.67%和62.67%;疫苗接种组的脾细胞明显增殖:鼻腔内接种和口服免疫组的脾细胞增殖显著高于皮下和肌肉注射组.结论 细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生特异性的细胞免疫反应.
关键词： 细粒棘球绦虫 重组Bb-Eg95-EgA31疫苗 脾细胞增殖 -
梅花鹿茸生物碱类成分及其对小鼠脾细胞增殖的影响
目的:研究梅花鹿茸生物碱类成分及其对小鼠脾细胞体外增殖的影响.方法:综合利用Sephadex LH-20和MCI(CHP20P)等柱色谱方法分离梅花鹿茸中的化学成分,运用多种波谱技术(UV、1H-NMR、13C-NMR和MS)鉴定化合物结构,应用MTT法考察梅花鹿茸总碱和8个生物碱成分对小鼠脾细胞体外增殖的影响.结果:从梅花鹿茸中分离得到11个化合物,分别鉴定为:尿嘧啶(1)、次黄嘌呤(2)、尿苷(3)、肌苷(4)、鸟苷(5)、2'-脱氧鸟苷(6)、鸟嘌呤(7)、胸苷(8)、胸腺嘧啶(9)、胞苷(10)和腺苷(1 1).小鼠脾细胞体外增殖活性研究发现梅花鹿茸总碱、尿嘧啶、腺苷具有明显的促进小鼠脾细胞增殖的活性.结论:其中,化合物4～11为首次从梅花鹿茸中分离得到,梅花鹿茸总碱是鹿茸免疫调节作用的物质基础之一,其中以尿嘧啶和腺苷活性强.
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β-内啡肽及其受体对创伤失血性休克大鼠细胞免疫功能的调节作用
本文通过研究β-内啡肽对创伤失血性休克大鼠细胞免疫功能的调节作用,并进一步分析β-EP通过何种阿片受体亚型介导在创伤失血性休克后细胞免疫抑制中作用,以期从神经- 内分泌-免疫网络角度探讨创伤后免疫紊乱的机制.实验以正常大鼠脾细胞为靶细胞,以代表T细胞免疫功能的conA诱导的脾细胞增殖、IL-2的分泌及IL-2R的表达为观察指标,采用离体实验的方法,分别用β-EP抗血清、δ、κ高选择性受体拮抗剂naltrindole(NTI)、Nor -BNI、及μ相对选择性受体拮抗小剂量naloxone(NAL)为工具药进行研究.实验首先通过测定创伤失血性休克不同时相血浆β-EP对脾细胞增殖功能、IL-2分泌及IL-2R表达的影响, 进一步观察休克血浆经β-EP抗血清预处理后对脾细胞功能的作用,以证明β-内啡肽是否直接参与大鼠创伤失血性休克后细胞免疫受抑中的作用.实验第二部分用1-1000 nmol/L的NTI 、 Nor-BNI及1-100 nmol/L NAL体外作用于含休克血浆的脾细胞培养体系,观察脾细胞功能的变化,以探讨β-EP通过何种受体介导在创伤失血性休克后细胞免疫抑制中作用.结果表明:创伤失血性休克后即刻(0h)至休克后6 h血浆β-EP水平显著升高,休克血浆非常显著地抑制正常大鼠脾细胞功能,休克血浆β-EP含量与脾细胞增殖功能、IL-2分泌及IL-2R表达呈显著负相关,β-EP抗血清显著降低休克血浆对脾细胞功能的抑制,结果直接证实了β-EP在创伤失血性休克后免疫抑制中有重要的作用.δ、κ受体拮抗剂NTI、Nor-BNI剂量依赖性地显著逆转休克血浆对脾细胞功能的抑制,小剂量NAL无作用,提示创伤性休克后β-EP可能主要通过与δ、κ受体结合发挥免疫抑制作用,未观察到与μ受体有关.
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β-内啡肽在大鼠创伤失血性休克脾细胞增殖功能的作用研究
目的 探讨创伤失血性休克后,血浆β-内啡肽（β-EP）对脾细胞增殖功能的调节作用。方法 ①以Wistar大鼠制造创伤失血性休克模型，于模型完成后0、1、3、6、12、24 h分别处死大鼠、收集血浆标本并检测β-内啡肽水平，并设假手术对照组；②分离正常大鼠脾细胞，分别与休克血浆（Ⅰ组）、灭活休克血浆（Ⅱ组）及休克血浆+β-内啡肽抗血清（Ⅲ组）体外培养，观察conA诱导的脾细胞增殖功能。结果 ①休克后即刻血浆β-内啡肽水平显著升高（P<0.01），1 h达高峰，之后呈下降趋势，24 h趋于休克前水平。②与对照组相比，创伤休克血浆可显著降低conA诱导的脾细胞增殖功能（P<0.01）；休克血浆经灭活后，脾细胞增殖功能非常显著回升（P<0.01）;休克血浆经β-EP抗血清处理较未经抗血清处理相比，脾细胞增殖功能明显升高（P<0.05），但仍低于对照组。结论 创伤失血性休克后血浆中显著升高的β-内啡肽对抑制脾细胞增殖功能有重要的作用。
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胡颓子熊果酸对小鼠免疫功能的影响
目的:探讨胡颓子熊果酸对小鼠免疫功能的影响.方法:乙醇回流法提取胡颓子熊果酸(ursolu acid,UA),用四噻唑盐(MTT)比色法检测胡颓子熊果酸对脾细胞的增殖作用,用ELISA检测白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量.结果:胡颓子熊果酸促进脾细胞增殖反应,对脾细胞IL-2、IFN-γ的产生有显著促进作用.结论:胡颓子熊果酸可增强小鼠免疫功能.
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大枣多糖对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1α及脾细胞体外增殖的影响
目的:探讨大枣多糖对免疫功能的影响.方法:用环磷酰胺引致小鼠免疫低下.结果:大枣多糖可显著促进免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞IL-1α的产生及活性,促进体外脾细胞增殖.结论:大枣多糖有明显免疫兴奋作用.
