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  • 我国某地首株O139霍乱弧菌某些特征的研究

    作者:朱勇;刘松青;李子怀;刘彩莲;刘延清

    我国某地1996年6月从一名腹泻病人粪便中分离出首例O139霍乱弧菌,并将该菌与国内外菌株形态,生化和遗传学特性进行了比较研究,结果表明此菌株与国内外O139流行菌株具有相似的表型特性(Phenotype),形态,生化特性与O1群相似,但对弧菌抑制剂(O/129)不敏感,不被O1多价血清凝集;用已知的几种霍乱弧菌毒素基因探针与被测O139菌株DNA杂交,结果显示都具有ctx,zot,ace基因;PCR检测ctxA基因与O1群霍乱流行株具有相同的扩增产物;SDS-PAGE分析外膜蛋白所有O139菌株图谱相似;用16SrRNA基因探针与Bgl Ⅰ酶切的染色体DNA杂交,结果表明此菌株与中国及国外菌株分属于不同的核糖体基因型(Ribotype,RT),而且与当年的O1群流行菌株具有相似的RT型,推测该菌株可能是O1群的突变株,对新毒株O139的出现应引起我们高度重视.

  • 16SrRNA对于烧伤脓毒血症患者机体免疫调控的作用研究

    作者:李明华;刘冬梅;刘进辉

    目的 探讨烧伤脓毒血症患者外周血清白细胞中微小RNA(16SrRNA)表达水平在脓毒血症患者中的意义以及与机体免疫调控之间的关系.方法 选取2015年1月—2016年12月该院收治的50例烧伤脓毒血症患者作为观察组,选取同期健康体检人群25名作为对照组,比较两组16SrRNA﹑WBC﹑TNF-α以及IL-10水平,分析烧伤脓毒血症患者的16SrRNA与WBC﹑TNF-α以﹑IL-10以及SOFA评分的关系.测定不同病情严重度患者外周血Treg系列的表达以及16SrRNA表达,比较死亡以及存活患者的Treg﹑16SrRNA﹑IL-10水平.结果 观察组的16SrRNA水平(1.06±0.13)×109/L,对照组(1.86±0.28)×109/L,观察组明显低于对照组(t=5.064,P<0.05);观察组WBC﹑TNF-α以及IL-10水平分别为(11.19±1.24)×109/L,(154.15±6.38)Pg/mL,(128.95±5.27)Pg/mL均明显高于对照组(6.79±1.83)×109/L,(45.29±4.99)Pg/mL,(37.39±4.29)Pg/mL;两组检验组分别为(t=29.164﹑33.135﹑4.882,P<0.05);烧伤脓毒血症患者的16SrRNA与SOFA评分﹑ 血清TNF-α﹑IL-10之间存在负相关(r=-0.624,-0.439,-0.519,P<0.05),与WBC水平呈正相关关系(P>0.05),烧伤脓毒症患者外周血Treg表达率以及16SrRNA表达均明显高于健康对照组,且随着疾病严重度的加重,不同实验组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05).该研究中死亡患者的Treg﹑16SrRNA﹑IL-10水平均明显高于健康存活组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 16SrRNA的表达水平测定不仅能够反映出机体的炎症水平,同时在一定程度上也有助于评价疾病的预后及其严重度.

  • 母亲妊娠期糖尿病对新生儿口腔菌群的影响

    作者:陈旭日;黎红平;朱元方;肖斌;邓琦;曾春映;李会琴

    目的 探讨母亲孕期妊娠期糖尿病对新生儿生后即刻口腔菌群的影响,为减少妊娠期糖尿病对子代的影响提供可能的方案.方法 选择2016年8月-10月自然分娩的足月新生儿20例,其中孕妇产检诊断妊娠期糖尿病为观察组9例,另配对选取同期母亲产检无异常的新生儿作为对照组11例.胎头娩出后采用无菌吸痰装置清理新生儿口腔,收集口腔分泌物,提取细菌基因组DNA,采用Illumina MiSeq平台对样本细菌进行DNA测序及生物信息分析,比较不同菌属在新生儿口腔定植的情况.结果 两组新生儿主要菌门是放线菌门、拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门和软壁菌门,两组差异无统计学意义(P>0.05),两组对比有差异的菌门为浮霉菌门(P<0.05);拟杆菌属、双歧杆菌属、棒状杆菌属、普拉梭菌属,乳杆菌属,普雷沃菌属,丙酸菌属,金黄色葡萄球菌,脲原体属和维斯氏菌属,这些主要的菌属两组对比无差异,有显著差异的菌有柯林斯菌属,Tyzzerella,Dermacoccus,Limnobacter,马赛菌属和生根瘤菌属(P<0.05).结论 新生儿生后即刻口腔菌群分布着丰富的益生菌,母亲妊娠期糖尿病可影响新生儿婴儿口腔菌群,这可能是引起子代远期代谢紊乱的原因.

  • 浦东机场口岸蝇类携带病原菌种类及16SrRNA鉴定

    作者:陈拓;曹晓梅;邓耀华;房健慧;李飞

    目的 确定口岸蝇类携带病原菌种类及分布.方法 将蝇类体表、体内细菌分离培养,单克隆菌株经Vitek 2Compact微生物自动分析及16SrRNA基因序列比对.结果 在7种蝇体表检出18种菌,其中致病菌2种,条件致病菌14种,包括1株国内未报道的条件致病菌株Wohlfahrtiimonas chitiniclastica;蝇体内检出14种菌,其中致病菌1种,条件致病菌12种;携带菌种类多的是酱麻蝇,其次为亮绿蝇.结论 口岸蝇体携带病原菌的调查,有利于对新型病原微生物入侵的鉴别及应对突发公共卫生事件.

  • 16SrRNA序列分析法对城市居民区德国小蠊携带致病菌检测研究

    作者:唐振强;赵奇;刘吉起;郭祥树

    目的 基于16S rRNA序列分析法检测河南省城市居民区中德国小蠊携带致病菌情况.方法 设计通用的16SrRNA基因引物,对从试虫体表或体内分离出的单菌落进行PCR扩增并测序,再利用BLAST序列比对检索系统寻找同源性高的序列作为鉴定结果.结果 分离出福氏志贺菌和伤寒沙门菌2种病原菌,阴沟肠杆菌、柯氏柠檬酸杆菌、大肠埃希菌、沙雷菌和肺炎克雷伯菌5种条件致病菌,以及嗜碱芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌2种工程菌.结论 河南省城市居民区中德国小蠊携带致病菌的情况不容忽视;16S rRNA序列分析法可以作为微生物快速鉴定方法为今后的病媒生物防制工作提供帮助.

  • 土生克雷伯菌中发现16S rRNA甲基化酶基因rmtB

    作者:单浩;吴林松;糜祖煌;邹玉秀;熊春林;秦玲;黄支密

    近年来,有关临床分离的革兰阴性杆菌产生16S rRNA甲基化酶导致对临床上常用的几乎所有氨基糖苷类抗生素耐药情况备受国内外学者关注[1-3]引.我们曾先后报道了临床分离的阴沟肠杆菌[1]、鲍曼不动杆菌[4]、肺炎克雷伯菌[5]中16SrRNA甲基化酶基因存在与分布状况.

  • 质粒介导16S rRNA甲基化酶在奇异变形杆菌临床分离株的流行情况研究

    作者:杜卫良;余方友;陈坚;张雪青;姚丹;朱涛;瞿涤;王良兴

    到目前为止,在革兰阴性杆菌中已发现AnnA、RmtA、RmtB、RmtC、RmtD和NpmA 6种16S rRNA甲基化酶,且编码这些酶的基因通常和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因共处一个质粒上,通过质粒在不同的菌株之间播散~[1-4].RmtC型16S rRNA甲基化酶首次在奇异变形杆菌中被发现~[4],但16S rRNA甲基化酶在奇异变形杆菌中的流行情况还不清楚.本研究的目的是对从我院2004年5月至2007年9月临床标本中分离的198株奇异变形杆菌进行16SrRNA甲基化酶筛查,并对其转移机制进行研究,现将结果报道如下.

  • 一株临床分离的欧洲放线菌的鉴定及生物学特性研究

    作者:孙铭艳;吴倩倩;王保强;王楠;刘言霞;陶元勇

    目的 探讨欧洲放线菌的鉴定方法、生物学特性,为放线菌病的诊断提供依据.方法取患者的脓液标本,进行细菌培养及革兰染色检查,用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪进行鉴定,E-test法作药敏试验.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行分离株的鉴定.提取菌株的DNA,选用16S rRNA的通用引物进行扩增,回收、纯化后对PCR的产物进行测序,与GenBank数据库中的序列进行同源性比较.结果药敏试验结果为对青霉素、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松敏感,对环丙沙星耐药.MALDI-TOF MS鉴定为欧洲放线菌.16S rRNA基因检测鉴定为欧洲放线菌.结论MALDI-TOF MS和16S rRNA可对欧洲放线菌进行鉴定,对放线菌病的诊断具有重要的意义.

  • 16SrRNA基因检测在老年糖尿病烧伤脓毒症诊治中的价值

    作者:李满元;赵劲松;王学哲;崔建娇;王佳美

    目的 探讨16SrRNA基因检测在老年糖尿病患者烧伤后脓毒症诊断治疗中的作用.方法 采用回顾性分析的方法,选取2016年7月至2017年12月锦州市妇婴医院收治的80例老年糖尿病烧伤患者,均为疑似脓毒症,对患者血清标本的细菌培养检测结果与16SrRNA的PCR检测结果进行分析,同时观察PCR检测阳性与阴性、血培养阳性与阴性标本的白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖值(FPG)、餐后2小时血糖值(2 h PG).结果 16SrRNA的PCR检测阳性率为41.25%(33/80),明显高于血培养检测的23.75%(19/80)(P<0.05).PCR检测时间平均为(4.08±1.14)h,明显少于血培养检测的(26.72±11.58)h(P<0.05).PCR与血培养阳性患者的白细胞计数(WBC)分别为(14.85±2.51)×109/L与(13.84±2.06)×109/L,明显低于阴性患者的(16.17±2.36)×109/L与(15.81±2.62)×109/L(P<0.05),PCR与血培养阳性患者的IL-6、TNF-α、CRP、FPG、2h PG分别为(23.48±5.87)ng/L和(22.94±5.63)ng/L、(50.67±6.39)ng/L和(51.47±6.29)ng/L、(5.02±1.33)mg/L和(5.14±1.47)mg/L、(9.14±1.26)mmol/L和(9.21±1.02)mmol/L、(19.77±2.21)mmol/L和(19.37±2.46)mmol/L,明显高于阴性患者的(6.84±2.24)ng/L和(6.27±2.37)ng/L、(9.11±3.54)ng/L和(9.37±2.84)ng/L、(0.92±0.34)mg/L和(0.85±0.35)mg/L、(8.44±1.52)mmol/L和(8.57±1.13)mmol/L、(13.15±2.62)mmol/L和(12.74±2.16)mmol/L(P<0.05),PCR与血培养阳性患者的HbA1c分别为(8.54±2.16)%和(8.53±2.36)%,与阴性患者的(7.59±2.28)%和(7.16±2.72)%相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 老年糖尿病患者烧伤后检测血常规以及血清炎性因子指标能够为细菌感染提供预警信息,同时监测血糖水平变化也有一定的作用,对存在脓毒症危险性的患者,可以及时进行16SrRNA基因检测,能够在较短时间内确定是否发生感染,采取有效的治疗措施.

  • 高脂饮食对大鼠肝脏功能及肠道细菌群落的影响

    作者:赵仕勇;林先耀;宋闻;陈海哨;祁正红

    目的 通过高脂喂养大鼠构造动物模型,探究高脂饮食对肝脏功能及肠道细菌群落的影响.方法 将20只21日龄大鼠随机均分成两组: 正常组和高脂组.正常组饮食普通饲料,高脂组饮食高脂饲料. 6周之后,提取两组大鼠粪便对肠道细菌群落进行16S rRNA高通量测序分析.结果 6周之后,与普通饮食大鼠比较,高脂饮食大鼠血液中总蛋白 (TP 55. 79±3. 75) (P=0. 002)、球蛋白 (GLB 34. 9±2. 53) (P<0. 001)、白蛋白 (ALB/GLB 0. 60±0. 02) (P<0. 001)、碱性磷酸酶 (ALP 373. 80±63. 05) (P<0. 001)、总胆固醇 (TC 1. 94±0. 23) (P<0. 001)、低密度脂蛋白 (LDL 0. 76± 0. 93) (P<0. 001)、 LDL/高密度脂蛋白 (HDL 1. 43±0. 22) (P<0. 001) 和三酰甘油 (TG 1. 48±0. 50) (P=0. 015) 均显著升高.高脂饮食后,大鼠肠道细菌群落多样性和均匀性降低.大鼠肠道细菌中的优势门为拟杆菌门 (平均相对丰度为56. 36%)、厚壁菌门 (35. 31%) 和变形菌门 (6. 61%).其中,拟杆菌门在高脂组中的相对丰度明显降低 ( P=0. 007),厚壁菌门的相对丰度在高脂组中明显升高(P=0. 020),而变形菌门的相对丰度在两组中没有变化 (P=0. 928).此外, 16S rRNA高通量测序分析发现正常组和高脂组大鼠肠道细菌群落结构存在着显著差异.结论 高脂饮食能导致肠道细菌群落结构的改变,并进一步导致肝功能受损,并引发肥胖的形成.

  • 单纯性肥胖及肥胖伴黑棘皮病患者肠道微生态的结构差异

    作者:朱翠玲;高仁元;李豪;秦环龙;曲伸

    目的 探索单纯性肥胖及肥胖伴黑棘皮病患者肠道菌群的分布特点.方法 选取131例肥胖患者及25名健康志愿者并分为肥胖伴黑棘皮病组(AN组)、 单纯性肥胖组(OB组)及对照组(CON组).收集所有人群的新鲜粪便、 临床及生化指标,并采用焦磷酸测序技术对粪便标本的16s rRNA进行鉴定,分析各组的菌群分布特点.结果 AN组患者的体质量指数[(37.45±5.12)kg/m2比(33.34±2.54)kg/m2比(20.35±1.68)kg/m2,P=0.045,P<0.001]、 胰岛素[32.77(25.18)mU/L比20.73(9.30)mU/L比8.70(6.18)mU/L,P<0.001,P<0.001]、 胰岛素抵抗指数[7.78(6.87)比4.71(2.88)比1.81(1.40),P<0.001,P<0.001]及白细胞介素-6[(3.64±2.23)ng/L比(2.71±0.78)ng/L比(2.17±0.86)ng/L,P=0.040,P=0.009]水平均高于OB组和CON组.与OB组和CON组相比,AN组的菌群多样性显著下降,差异有统计学意义(P=0.015,P=0.001),但3组之间的菌群丰度差异无统计学意义.在门水平,3组菌群均包括厚壁菌门、 拟杆菌门、 变形菌门、 放线菌门和梭杆菌门,差异无统计学意义.在属水平,AN组和OB组均以拟杆菌属、 巨单胞菌属、 柔嫩梭菌属和埃希-志贺菌属为主.此外,与OB组和CON组相比,AN组的瘤胃球菌属显著下降(P=0.023,P=0.043),而韦氏菌属显著增加(P=0.048,P=0.043),OB和AN组的魏斯菌属均较CON组显著下降(P=0.045,P=0.025).结论 肥胖伴黑棘皮病患者较单纯性肥胖患者有更严重的胰岛素抵抗及炎症状态,且两组的肠道菌群分布差异有统计学意义.

  • 大肠埃希菌临床分离株质粒介导16S rRNA甲基化酶基因的检测及转移机制研究

    作者:余方友;陈坚;陈冲;李俏俏;杨乐和;姚丹;叶青青;吴聪;张雪青;潘景业;王良兴;瞿涤

    近年来,发现一类质粒介导的16S rRNA甲基化酶,该酶能够保护细菌的30S核糖体的16s rRNA不与氨基糖苷类药物结合,造成其对包括阿贝卡星在内的所有的氨基糖苷类药物耐药,并且为高水平耐药~[1-4].目前,在革兰阴性杆菌中已发现ArmA、RmtA、RmtB、RmtC、RmtD和NpmA 6种16SrRNA甲基化酶,且该酶通常和ESBL基因共处一个质粒上,通过质粒在不同的菌株之间播散~[2-3,5-6].我们在前期的研究中发现肺炎克雷伯菌临床分离株中存在rmtB和armA两种16S rRNA甲基化酶基因~[7],16S rRNA甲基化酶基因也可能存在于大肠埃希菌临床分离株中.在本研究中,我们对从温州医学院附属第一医院2006年1月至2008年7月临床标本中分离的680株大肠埃希菌进行了16S rRNA甲基化酶基因筛查,并对其转移机制进行了研究.

  • 革兰阴性杆菌中16S rRNA甲基化酶和aac(6')-Ib-cr基因的检测

    作者:杨银梅;陈晓文;张伟红;陈灿华;叶惠芬;陈惠玲

    细菌对氨基糖苷类抗生素耐药机制研究以往主要集中在细菌产生的氨基糖苷类修饰酶~([1]).氨基糖苷类抗生素通过与细菌30S核糖体的16SrRNA亚单位结合,干扰蛋白质合成从而抑制细菌生长.

  • 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术及其在临床微生物鉴定中的应用

    作者:何英;陆学东

    为满足临床日益增长的微生物鉴定需要,在不断提高微生物鉴定仪器的机械化与自动化的同时,微生物学家也试图寻找新的分离鉴定方法以满足临床需求.虽然这种探求从未停止,但目前在世界各地临床微生物实验室,传统的鉴定方法仍占绝对主导地位.基于表型特征进行微生物鉴定的传统鉴定方法受外部条件影响较大,且需要较长的时间才能获得鉴定结果,不能满足临床诊断和治疗的需求.虽然基于特定基因序列(如16SrRNA)的分子生物学检测为临床微生物鉴定提供了一种灵敏、快速的鉴定手段,但技术复杂、费用高,不能满足临床微生物实验室常规鉴定需求.

  • 慢性功能性便秘患者的肠道菌群分析

    作者:黄林生;高仁元;严雪冰;祝琦;潘成;尹明明;李豪;孔程;张鹏;沈通一;秦环龙

    目的 探讨慢性功能性便秘患者与健康对照组之间肠道菌群的差异.方法 选取便秘组和健康对照组共计20人,留取新鲜粪便样本,冰块运送至实验室并存放于-80度冰箱.采用16S rRNA测序技术检测V4区鉴定菌群.结果 发现两组人群的菌群丰富度差异有统计学意义(P<0.05),菌群多样性差异无统计学意义.便秘患者与健康对照组之间的肠道细菌组成在门和属水平差异均存在显著统计学意义(P<0.05).在门水平,便秘患者肠道中放线菌门(Actinobacteria)丰度显著增加(Z=-3.10,P<0.05),而变形菌门(Proteobacteria)丰度显著降低(Z=-2.42,P<0.05),在属水平发现20个菌属差异存在统计学意义(P<0.05).其中,Coprobacillus(Z=-2.10,P<0.05)、Hungatella(Z=-2.31,P<0.05)、Holdemanella(Z=-2.32,P<0.05)、Anaerostipes(Z=-3.78,P<0.01)、Bacteroidales_S24-7_group_norank(Z=-2.15,P<0.05)、Bacteroides(Z=-3.78,P<0.01)、Blautia(Z=-3.78,P<0.05)、Collinsella(Z=-3.02,P<0.05)、Dorea(Z=-2.95,P<0.05)、[Eubacterium]_ruminantium_group(Z=-2.70,P<0.05)、Erysipelotrichaceae_UCG-003(Z=-3.10,P<0.05)、Ruminococcaceae_uncultured(Z=-2.50,P<0.05)、Parabacteroides(Z=-2.87,P<0.05)菌属在便秘患者的肠道中丰度明显增多,而Megasphaera(Z=-2.31,P<0.05)、Paraprevotella(Z=-2.94,P<0.05)、Prevotella_2(Z=-3.10,P<0.05)、Prevotella_9(Z=-3.68,P<0.01)、Enterococcus(Z=-2.27,P<0.05)、Catenibacterium(Z=-2.48,P<0.05)、Clostridium_sensu_stricto_1(Z=-2.50,P<0.05)菌属在健康对照组的肠道中丰度明显增多.结论 慢性功能性便秘患者的肠道菌群与健康人群的菌群存在较大差异,通过改变肠道菌群可能成为治疗慢性功能性便秘的新策略.

  • 神经型布鲁菌病临床特点和实验室诊断分析

    作者:曹敬荣;王岩;王育英;谢威;陈典典;段园园;闵嵘;王培昌

    目的 总结神经型布鲁菌病(NB)的临床及实验室诊断过程,为提高临床和实验室对该病的认识和早期诊疗提供经验.方法 回顾性分析2015年1月至2017年1月于首都医科大学宣武医院确诊的12例神经型布鲁菌病患者的临床表现、流行病学资料及脑脊液(CSF)培养等病原学检查、影像学表现和其他实验室检查结果,并与非神经型布鲁菌病患者比较平均发病年龄,CSF白细胞数、蛋白含量、氯化物、葡萄糖水平等.结果 12例神经型布鲁菌病患者中男性9例,女性3例,平均年龄为(43±14)岁;10例患者来自流行地区,9例有明确的流行病学接触史,其中3例既往诊断布鲁菌病;12例患者均出现不同程度发热,6例有头痛伴脑膜刺激征表现;3例患者表现为复视、视力下降;伴有听力减退伴步态不稳,肢体麻木无力,精神状态改变者各4例.血清布鲁杆菌凝集试验阳性(100%)较CSF凝集阳性率(58.3%)和CSF培养阳性率(46.1%)对临床诊断神经型布鲁菌病价值较大,差异具有统计学意义(χ2=52.68、P=0.005,χ2=73.79、P=0.005);12例NB患者CSF白细胞数(单核为主)和蛋白均不同程度升高,葡萄糖、氯化物正常或减低,与非NB感染者相比,CSF葡萄糖检测具有重要价值(P均<0.05).给予多西环素或米诺环素+利福平+头孢曲松治疗后12例患者均预后良好.结论 神经型布鲁菌病临床表现多样,易误诊或漏诊,非疫区医务人员应重视CSF血瓶培养及布鲁杆菌凝集,加强多学科协作交流以及早确诊及早治疗.

  • V3通用引物联合多重PCR检测感染性心内膜炎病原菌

    作者:曹清;周云芳;潘淑华;王希华;李璧如

    目的 了解2007年至2010年21例在上海儿童医学中心接受手术治疗的急性感染性心内膜炎(infective endocarditis,IE)患儿的病原菌分布.方法 21例IE患儿均行血培养、赘生物培养及赘生物PCR检测(以16SrRNA基因的保守区序列V3为靶基因);对葡萄球菌进行多重PCR扩增检测耐甲氧西林葡萄球菌.结果 21例IE患儿赘生物PCR阳性检出率95.2%,血培养阳性检出率57.1%,赘生物阳性检出率9.5%,3种方法阳性检出率的差别有统计学意义(P <0.0001).其中1例心内膜赘生物的PCR结果与血培养结果不一致,赘生物PCR结果为放射菌,血培养结果为溶血巴斯德菌,利用血培养得到的菌落进行PCR检测,与赘生物PCR的结果一致,均为伴放线放线杆菌;其余11例心内膜标本的PCR结果与血培养结果一致.多重PCR技术检测mecA基因能快速、敏感、准确地检测耐甲氧西林葡萄球菌,与femA基因联合检测能有效检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,及时提示临床使用糖肽类抗生素.21例患儿均痊愈出院,术后随访无感染复发.结论 V3通用引物联合多重PCR法可提高IE患儿赘生物病原菌检出率,且受抗菌药物的影响小,适用于符合手术指征且血培养阴性或鉴别困难的病原学诊断,有利于手术后抗菌药物的选用及提高IE的终治愈率.

  • 多形类杆菌的分子生物学鉴定

    作者:赵德华;王国戗;罗予

    目的 用聚合酶连反应技术(PCR)鉴定多形类杆菌.方法 采用16S rRNA基因序列为靶基因设计引物,建立PCR反应体系对该种细菌进行鉴定,并测定PCR产物序列,验证PCR反应的特异性.结果 3株多形类杆菌能被扩增,其他菌株和基因组不能被扩增;所测得的PCR产物序列和标准的多形类杆菌16S rRNA基因序列99%同源.结论 建立PCR反应体系能特异地鉴定多形类杆菌.

  • 活血止痛胶囊中土鳖虫的分子鉴定研究

    作者:王云灵;濮存海;马毅敏;李红琴

    目的 建立活血止痛胶囊中土鳖虫的一种分子鉴定方法.方法 采用蛋白酶K法结合吸附柱法提取活血止痛胶囊中土鳌虫基因组DNA,使用蜚镰目昆虫通用引物扩增其线粒体16S rRNA片段并测序.结果 土鳌虫能扩增出475饰左右的片段,本实验成功从自制活血止痛胶囊中扩增出该片段.结论 该方法灵敏度高,可靠性强,可以做为活血止痛胶囊中土鳖虫的一种鉴定方法.

  • 套式PCR与血清学方法用于检测肺炎支原体感染的对比研究

    作者:刘雪梅;唐正宇;谢良依

    目的 比较基于16SrRNA的套式PCR与血清学方法 对肺炎支原体(Mp)的检出情况.方法 获取医院呼吸内科96例呼吸道标本,设计针16SrRNA特异性引物,用套式PCR法扩增.同时获取双份血清标本检测Mp抗体,比较两种方法 的阳性率.结果 套式PCR对Mp的检出率为22.9%,双份血清检出率为18.75%,差异无统计学意义.单份血清检出率为10.4%,套式PCR法对Mp的检出率明显高于单份血清试验.84例发病早期患儿,套式PCR检测出阳性69例,阳性率为82.14%,血清抗体阳性10例,阳性率为12.04%.经统计学分析,P<0.05.结论 套式PCR和血清学方法 均能敏感快速检测Mp感染,但对早期感染而言,套式PCR更有优势.

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