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LCR技术检测男性首段尿中的淋病奈瑟菌和沙眼衣原体
目的:应用连接酶链反应(LCR)技术检测男性尿标本中的淋病奈瑟菌和沙眼衣原体,初步评价其敏感性和特异性.方法:采集受检者晨起或较长时间(2小时以上)不排尿后的首段尿(FVU)标本1 131份,利用LCR技术对此尿液标本进行淋病奈瑟菌和沙眼衣原体检测,对Cut-off值在灰区以上的标本进行PCR检测.对LCR和PCR结果相异的标本,用另一LCR试剂进行复检,参照"扩大的金标准"来确定检测结果.结果:LCR技术检测淋病奈瑟菌的敏感性和特异性分别为100%和99.9%,沙眼衣原体分别为97.5%和98.4%.结论:应用LCR技术筛检男性尿液中淋病奈瑟菌和沙眼衣原体,是一种既敏感又特异的非侵入诊断方法,可避免取尿道标本给患者带来的痛苦.
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淋病奈瑟菌耐药性的分子基础初探
目的:研究染色体介导淋病奈瑟菌耐药的机制.方法:应用抑制性消减杂交技术构建和筛选耐药淋病奈瑟菌差异DNA消减文库.结果:从削减文库中随机挑取的96个克隆,发现其中有47个克隆仪能与tester DNA探针杂交,而不能与driver DNA探针杂交.结论:这些克隆中载有特异基因片段,它们为RSM292C4基因组DNA所特有,可能代表某些淋病奈瑟菌新基因.
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对一种快速淋病奈瑟菌鉴定方法的探讨
为探讨泌尿生殖道淋病奈瑟菌(N.g)快速的鉴定方法.将泌尿生殖道分泌物接种N.g平板和营养琼脂(NA)平板,放35℃、5%～10% CO2环境中孵育24～48 h,根据生长物的革兰染色和氧化酶试验以及在NA平板上是否生长来鉴定N.g,并且用"金标准"的API NH比对.以革兰阴性双球菌、氧化酶试验阳性且在NA平板上不生长为特征鉴定的308株N.g菌,同API NH鉴定结果一致.且48 h生长物不影响N.g的快速鉴定.泌尿生殖道分泌物接种N.g平板,生长物经革兰染色和氧化酶试验,结合NA平板上不生长可以快速、准确鉴定出N.g.
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淋病奈瑟菌耐药外排泵研究进展
淋病奈瑟菌多重耐药是淋病防治的一项难题,主动外排系统是引起该菌多重耐药的主要机制.至今发现淋病奈瑟菌4个外排泵系统,分别为:MtrCDE、MacAB、NorM和FarAB,在一些菌株还发现MtrF泵蛋白.本文就外排泵系统的组成、功能、基因调控等方面的研究现状进行综述.
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性传播性宫颈炎
性传播性宫颈炎可分为两型--宫颈内膜炎,也称为粘液脓性宫颈炎(MPC)和宫颈外膜炎.宫颈内膜炎的原因包括沙眼衣原体(CT)、淋病奈瑟菌(GC)和单纯疱疹病毒(HSV)引起的感染.HSV感染也可引起宫颈外膜炎.存在宫颈感染与宫颈炎并不是同义词,因为不是所有感染都与有临床表现的宫颈炎有关,反过来也是如此.例如,一份子宫颈内膜标本沙眼衣原体试验阳性,可诊断为宫颈衣原体感染,未必诊断为衣原体性"宫颈炎"[1].
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淋病及其耐药性的流行现状
淋病是淋病奈瑟菌(简称淋球菌)感染泌尿生殖系统所致的一种常见的性传播疾病,发病率高.目前淋球菌对很多药物产生耐药性,使淋病的治疗复杂化.淋病及其耐药淋球菌的流行病学调查分析,对制定我国性病防治政策,判定淋病临床治疗效果都有非常重要的意义.
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眼部分泌物检出淋病奈瑟菌1例
患者,女,出生后二十余天,因哭闹不止,眼分泌物过多,不能睁眼,来我院就诊.检查发现眼睑肿胀,结膜充血,球囊内可见大量脓性分泌物.分泌物中检出淋病奈瑟菌,给予敏感药物毒霉素滴眼治疗,症状消失痊愈.
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淋病奈瑟菌与支原体感染引起流产的临床观察
目的探讨淋病奈瑟菌与支原体感染对妊娠及胎儿影响所致的流产.方法应用PCR技术检测法.对198例妊娠妇女分为两组,即流产组99例,正常妊娠组99例,进行淋病奈瑟菌与支原体检测.结果流产组淋病奈瑟菌阳性率为54.5%,支原体阳性率为30.3%,NG与UU总阳性率84.8%,非病原体感染者为15.2%;正常妊娠组淋病奈瑟菌阳性率为18.2%,支原体阳性率为12.1%,NG与UU总阳性率为30.3%,非病原体感染者为69.7%.两组总阳性率比较,差异有极显著性(P<0.01),两组非病原体感染比较,差异有极显著性(P<0.01).结论淋病奈瑟菌和支原体的生殖道感染是造成流产的原因之一.
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TaqMan实时荧光定量PCR快速检测淋病奈瑟菌ParC基因Ser87/Arg点突变
目的 建立TaqMan实时荧光定量PCR快速检测淋病奈瑟菌ParC基因Ser87/Arg点突变的方法.方法 设计引物与探针,优化PCR反应体系及条件,配制阳性标准品,建立TaqMan实时荧光定量PCR方法.结果 建立的TaqMan实时荧光定量PCR标准曲线相关系数r为-0.9996(r2=0.9993),特异度和敏感度分别为100%,94.6%.结论 本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法,简便快捷,定量准确,可用于临床标本中淋病奈瑟菌ParC基因点突变检测,从而快速筛出氟喹诺酮高水平耐药株.
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山东地区淋病奈瑟菌临床菌株常用抗生素的耐药性分析
目的：对2014年6月—2016年6月从山东济南、青岛、泰安地区分离的189株淋病奈瑟菌（neisseria gonor-rhoeae，NG）临床菌株，对环丙沙星、青霉素、四环素、头孢曲松、阿奇霉素，以及大观霉素等6种常用抗生素的耐药性进行分析，为临床淋病的治疗提供依据。方法采用琼脂稀释法测定189株临床分离菌株对6种抗生素的小抑菌浓度（MIC）值。采用产色头孢硝噻吩纸片法检测产β-内酰胺酶 NG 菌株（PPNG）。结果 NG 对头孢曲松、阿奇霉素、和大观霉素的敏感率分别为98.41％、97.88％、98.94％；对环丙沙星、青霉素、四环素等几种传统抗生素的耐药率分别为95.77％、96.3％、96.83％。检出 PPNG 75株（39.7％），TRNG77株（40.7％）。结论青霉素、环丙沙星及四环素等药物已不适用于本地区淋病的治疗，头孢曲松可作为治疗的首选药物，可同时用阿奇霉素进行联合治疗，三代头孢类药物过敏时可用大观霉素。
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8704例孕妇产前阴道分泌物细菌培养及药敏试验结果分析
目的 分析孕妇产前阴道分泌物细菌培养及药敏结果,了解病原菌的分布及其药敏情况.方法 对8 704例孕妇产前进行阴道分泌物细菌培养及药敏试验.结果 8 704例孕妇阴道分泌物共培养出2 115株病菌,阳性率为24.30％,其中革兰阴性杆菌121株,革兰阳性球菌856株,真菌1 121株；革兰阴性杆菌中优势菌主要是大肠埃希菌(94株)和肺炎克雷伯菌(16株)；革兰阳性球菌中优势菌是B群无乳链球菌(548株)、金黄色葡萄球菌(167株)、粪肠球菌(34株).大肠埃希菌对亚胺培南(100％)、美罗培南(100％)、厄他培南(98.94％)、阿米卡星(96.81％)、哌拉西林/他唑巴坦(96.81％)的敏感性较高；肺炎克雷伯菌对环丙沙星(100％)、亚胺培南(100％)、左氧氟沙星(100％)、美罗培南(100％)、替卡西林/克拉维酸(93.75％)、阿米卡星(93.75％)、头孢西丁(93.75％)、厄他培南(93.75％)的敏感性较高.B群无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌对万古霉素和达托霉素敏感率均为100％.结论 孕妇阴道细菌以革兰阳性球菌居多,真菌的生长比例较高.革兰阴性杆菌敏感率高的药物为亚胺培南、美罗培南、厄他培南和阿米卡星,革兰阳性球菌为万古霉素和达托霉素.
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注射用门冬氨酸洛美沙星与痰热清注射液存在配伍禁忌
注射用门冬氨酸洛美沙星(0.2 g/支)为喹诺酮类抗菌药,对肠杆菌科细菌、淋病奈瑟菌、葡萄球菌属和肺炎球菌、溶血性链球菌等亦有一定的抗菌作用.主要用于呼吸道感染、泌尿生殖系统感染、胃肠道细菌感染、腹腔、胆道、伤寒等感染.注射用痰热清(10 ml/支)为棕红色澄明液体,主要成分为熊胆粉、黄芩、山羊角、金银花等,对肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌有一定的抑制作用,临床常用于风温肺热病属痰热阻肺病(如急性支气管炎、急性肺炎早期).
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淋病奈瑟菌耐药机制研究进展
淋病在我国的感染率仍居性传播疾病之首,淋病奈瑟菌目前仍采用抗生素治疗.近年来随着抗生素的广泛使用,淋病奈瑟菌耐药菌株对各种抗生素产生不同程度的耐药.只有严密监测淋病奈瑟菌的耐药情况,才能更好地指导临床用药,并采取有效的措施预防、治疗及控制淋病.本文针对淋病奈瑟菌对几种常用抗生素的耐药机制的研究进展做简要概述.
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男性淋病奈瑟球菌3种不同检测方法的对比研究
目的 对比研究3种检测方法在淋病奈瑟球菌诊断中的临床应用价值.方法 收集370例疑似淋病奈瑟菌感染男性患者的尿道分泌物和尿液标本,分别进行以下3种方法检测:普通培养法、DNA实时荧光定量法(RT-PCR)及RNA实时荧光恒温扩增检测(SAT)法.以普通培养法作为对照组,对比3组检测方法对淋病奈瑟菌的阳性率以及检测淋球菌的符合度情况.结果 普通培养法、RT-PCR、SAT法阳性检出率分别为24.1％、11.8％、24.8％;普通培养法与SAT法淋病奈瑟菌阳性率均高于RT-PCR法,差异有统计学意义(P＜0.05);普通培养法与SAT法淋病奈瑟球菌阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在临床工作中对男性淋病奈瑟球菌进行诊断时,建议选择2种以上的检测方法以提高阳性检出率;SAT法阳性反映活细菌数,可以更好地指导临床抗生素合理使用.
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淋病奈瑟菌pIB基因的克隆、原核表达及其表达产物免疫学鉴定
目的:分析本地区淋病奈瑟菌临床菌株外膜蛋白pIB基因核苷酸及氨基酸序列,构建pIB基因的原核表达系统并鉴定表达产物的免疫反应性,检测标本中pIB基因的表达情况.方法:采用PCR扩增淋病奈瑟菌ATCCA9226株的全长pIB基因,T-A克隆测序后与GenBank中相应序列进行相似性比较并构建pIB基因的原核表达系统.采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检查目的重组蛋白rPIB表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rPIB.rPIB免疫家兔以了解其抗原性并采用免疫双扩散试验检测抗血清的效价.采用Western Blot检测rPIB的免疫反应性.建立PIB-ELISA检测标本中pIB基因的表达情况.结果:与GenBank中相应序列比较,克隆的pIB基因核苷酸和氨基酸序列完全相同.rPIB表达量为细菌总蛋白的21.5%,提纯的rPIB经SDS-PAGE后显示为单一的蛋白条带.rPIB能诱导家兔产生特异性抗体,其免疫双扩散效价为1:4.pIB+淋病奈瑟菌感染的病人血清能与rPIB产生阳性Western杂交条带.PIB-ELISA检测淋病病人的脓性分泌物标本的阳性率为82.3%.结论:结果表明本研究成功地克隆并构建淋病奈瑟菌pIB基因及其原核表达系统,该表达系统能有效地表达rPIB.rPIB有良好的抗原性和免疫反应性,rPIB免疫家兔制备的抗血清特异性高.可作为研制淋病基因工程疫苗及实验室诊断方法的侯选抗原.
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PIB基因点突变与淋病奈瑟菌对青霉素和四环素耐药相关性的研究
目的:了解浙江地区分离的淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素的耐药率及该菌PIB基因G120和A121点突变与青霉素和四环素耐药性的关系.方法:采用高保真PCR扩增25株淋病奈瑟菌PIB基因序列,T-A克隆后测序.分析测序菌株PIB基因中与耐药性密切相关的G120和A121变异情况,采用二倍琼脂稀释法确定PIB菌株的耐药性.结果:25株淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素均耐药,耐药率为100%.经测序的25株PIB淋病奈瑟菌中,1株(4.0%)G120或A121均未突变,其对青霉素和四环素的MIC分别为8 μg/ml和4 μg/ml.5株(20.0%)G120D/N突变而A121不变,1株(4.0%)G120不变而A121G突变,2株(8.0%)G120N突变但A121缺失,16株(64.0%)G120K和A121D双位点突变.24株G120和/或A121突变的PIB菌株均对青霉素和四环素的MIC为4～128 μg/ml不等.结论:浙江地区分离的PIB型淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药率为100%.上述淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药与PIB基因氨基酸序列G120和/或A121突变密切相关.
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98株淋病奈瑟菌药敏实验结果分析
[目的]监测河南地区淋病奈瑟菌药物敏感情况.[方法]以98株淋病奈瑟菌临床分离株为对象,分别以纸片酸度法进行β-内酰胺酶测定,以琼脂稀释法进行四环素、环丙沙星、壮观霉素和头孢曲松四种抗生素耐药性测定.[结果]检出产质粒介导的β-内酰胺酶菌(PPNG)9株,四环素耐药株39株,环丙沙星耐药株98株,壮观霉素耐药株3株,39株耐四环素和环丙沙星,3株耐四环素和壮观霉素,3株耐环丙沙星和壮观霉素.[结论]河南地区流行的淋病奈瑟菌株对青霉素、四环素和环丙沙星已产生广泛的耐药性,对壮观霉素的耐药性应该高度重视,目前尚未发现对头孢曲松耐药的菌株.
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泌尿生殖道支原体感染率调查及耐药性分析
解脲支原体(UU)、人型支原体(MH)是人类泌尿生殖道常见的有致病作用的支原体,近年来文献报道UU、MH感染率呈上升趋势.为了解本地区目前泌尿生殖道支原体感染率及耐药情况,我们对本院2000年1月至12月期间,患有泌尿生殖道炎者进行解脲支原体(UU)、人型支原体(MH)、沙眼衣原体(CT)、淋病奈瑟菌(NG)检测,并统计分析如下.
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2013年-2016年温州地区淋病奈瑟菌的检测及耐药性分析
目的 了解2013年-2016年温州地区尿液、尿道拭子和女性阴道/官腔分泌物临床标本分离出的淋病奈瑟菌的分布情况,通过对6种临床常用抗生素的耐药性分析指导临床合理用药.方法 采用K-B纸片琼脂扩散法检测淋病奈瑟菌对6种常用抗生素的敏感性,用头孢硝噻吩纸片法检测β-内酰胺酶.结果 27 601份标本中共检出402株淋病奈瑟菌菌株,阳性率为1.46％.尿液和尿道拭子标本的淋病奈瑟菌检出率呈逐年上升趋势;青霉素、环丙沙星和四环素的耐药率、β-内酰胺酶的阳性率也呈逐年上升趋势;头孢曲松、头孢噻肟和壮观霉素总体敏感性较高,偶见耐药菌株.结论 温州地区近4年分离的淋病奈瑟菌对头孢曲松、头孢噻肟和壮观霉素基本上敏感,对青霉素、四环素和环丙沙星耐药率较高,临床治疗应根据药敏结果合理选用抗菌药物.
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抗原快速检测法用于疑似淋病患者泌尿生殖道样本的评价
目的:评价2种淋病奈瑟菌抗原快速检测试剂检测泌尿生殖道样本的性能.方法:收集352例疑似淋病患者泌尿生殖道分泌物样本,分别用分离培养法和2种淋病奈瑟菌快速抗原检测试剂平行检测,以培养为对照,统计抗原检测方法的特异度和灵敏度.结果:352例样本中培养阳性218例.以培养结果为标准,2种抗原检测试剂检测25例女性宫颈分泌物样本灵敏度分别为95.65％和100％,特异度均为100％.检测327例男性尿道分泌物样本的灵敏度分别为95.38％和96.92％,特异性为99.24％和98.48％.总体检测灵敏度为95.41％和97.25％,特异度为99.25％和98.51％.结论:淋病奈瑟菌抗原检测操作简便,快捷,具有较好的敏感性和特异性,可用于基层医疗机构快速诊断淋病奈瑟菌感染.
