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荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体结果探讨
分子生物学技术以其高度敏感性和特异性得到大家的公认,但不是所有的检验项目非分子生物学莫属.如临床上淋病奈瑟菌泌尿系感染,则以细菌常规涂片及培养可解决85%以上问题,只有在疑难患者或考虑有衣原体混合感染时,PCR检测才有必要性[1].为了探讨本地区淋菌和非淋菌感染情况,本文选择了在临床上疑有淋球菌(NG)和沙眼衣原体(Ct)混合感染病例668例,用荧光定量PCR技术检测,其结果如下.
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常见性病病原体检测结果分析
为了了解本地区近期淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)、沙眼衣原体(Chlamydiat rachomatis,Ct)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)的感染情况,对2003年1月~2005年6月本院皮肤科、妇科门诊拟诊为非淋菌尿道炎(nongonococcal urethritis,NGU)和粘液脓性宫颈炎(mucopurulent cervicitis,MPC)的患者846例进行NG、Uu培养及Ct检测.
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2004~2005年南昌地区淋病奈瑟菌质粒谱型研究
目的:研究南昌地区淋病奈瑟菌质粒谱型的分布情况.方法:(1)采用碱裂解法提取淋病奈瑟菌质粒;(2)采用琼脂糖电泳法测定质粒分子量大小,并对菌株的青霉素耐药现象与4.5 Md质粒的关系进行分析.结果:218株淋病奈瑟菌中有206株菌携带质粒,质粒总检出率为94.50%;质粒谱共分7型,以4.5 Md+2.6 Md和24.5 Md+4.5 Md+2.6 Md为主,分别占30.73%及24.77%,未检出3.2 Md的R质粒.结论:南昌地区淋病奈瑟菌质粒谱型的分析对该地区淋病的防治有重要意义;4.5 Md质粒与青霉素耐药密切相关.
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泌尿生殖道感染者淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲支原体检测结果分析
目的:了解本地区淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲支原体临床感染现状,为临床诊断治疗提供可靠依据.方法:2000年1月~2002年12月在我院门诊就诊病人获取泌尿生殖道标本5 008份,其中男性标本2 759份,女性标本2 249份.培养法检测淋病奈瑟菌和解脲支原体,单克隆抗体免疫荧光法检测沙眼衣原体,或男性急性尿道炎患者用直接涂片革兰氏染色检测淋病奈瑟菌.结果:5008份标本中,男性2 759份,3种病原体阳性者633例,阳性检出率为22.9%;女性2 249份,3种病原体阳性者433例,阳性检出率为19.3%.3种病原体在2000年感染的阳性检出率为26.5%,2001年感染的阳性检出率为18.1%,2002年感染的阳性检出率为18%.在3年中,淋病奈瑟菌总的阳性率为4.4%,沙眼衣原体阳性检出率为3.9%,解脲支原体阳性检出率为13%.1 066份阳性标本中,患者年龄分布<20岁97例,占9.1%;20~30岁581例,占54.5%;31~40岁284例,占26.6%;>40岁104例,占9.8%.结论:对疑为泌尿生殖道感染病人,应同时进行3种病原体的检测,防止性传播疾病的慢延.
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淋病奈瑟菌4种抗生素耐药基因研究
目的检测淋病奈瑟菌(淋菌)临床分离株青霉素、四环素、环丙沙星、大观霉素耐药基因.方法对分离自常州地区的42株淋菌进行耐药相关基因TEM-1、penA、tetM、gyrA、16SrRNA基因检测分析.结果42株淋菌中31株TEM基因阳性,22株tetM基因阳性;并均存在penA、gyrA基因的突变.16SrRNA基因无突变.多种基因检测证实这些淋菌已对青霉素、四环素、环丙沙星2种或3种同时耐药.结论临床常用于治疗淋病的青霉素、四环素、环丙沙星已有较高的耐药率,大观霉素是淋病治疗的有效药物.
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淋球菌对氟喹诺酮类抗生素耐药性的研究
目的了解南昌地区淋球菌对氟喹诺酮类抗生素的耐药状况.方法采用纸片扩散法测定120株淋球菌对5种氟喹诺酮类抗生素的药物敏感性.结果淋球菌对诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星及头洛美沙星的耐药百分率分别为85.00%, 95.00%, 38.33%, 59.17%, 83.33%.结论南昌地区淋球菌对氟喹诺酮类抗生素耐药率较高,临床医生进行淋病治疗时要引起高度重视.
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南昌地区淋球菌对抗生素耐药性研究
目的了解南昌地区淋球菌对抗生素的耐药性及产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)和高水平耐四环素淋球菌(TRNG)的流行状况.方法采用琼脂稀释法测定5种抗菌药物对120株淋球菌的低抑菌浓度(MIC);用改良碘定量法检测PPNG菌株.结果淋球菌对青霉素、四环素、环丙沙星、大观霉素及头孢三嗪的耐药率分别为74.17%,76.67%,38.33%,1.67%,3.33%.检出16株(13.33%)PPNG菌株,15株(12.5%)TRNG菌株;同时对青霉素、四环素、环丙沙星耐药的菌株占31.67%.结论头孢三嗪、大观霉素仍可作为南昌地区治疗淋病的首选用药,但淋球菌对青霉素、四环素及环丙沙星耐药率较高.
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南昌地区耐头孢三嗪淋病奈瑟菌的首次分离
目的:探讨南昌地区淋病奈瑟菌对头孢三嗪的敏感性.方法:采用琼脂稀释法测定头孢三嗪对淋病奈瑟菌的小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC).结果:首次在南昌地区分离到4株对头孢三嗪耐药的菌株;80%的淋病奈瑟菌对头孢三嗪敏感,3.33%耐药.结论:头孢三嗪在作为治疗淋病的首选药时,应高度重视耐头孢三嗪淋病奈瑟菌菌株的出现.
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135株淋病奈瑟菌药敏试验结果分析
近年来,由于病人的不正规就诊以及抗生素的乱用,致使很多细菌对部分抗生素产生了相当的耐药性,从而影响临床治疗效果,导致延误病情,增加病人的负担,严重影响国民的身体健康,其中淋病奈瑟菌尤为明显.
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淋病奈瑟菌的抗药性、抗药质粒及其转移机制
淋病奈瑟菌(以下称淋菌)引起的淋病是目前我国发病率高的性病.近年来,由于抗生素的滥用,淋菌抗药菌株明显增加,除可由染色体介导外,更主要是由质粒介导,这已成为淋病防治中的一大难题.淋菌除产生β-内酰胺酶外,尚可通过膜蛋白机制及膜通透性改变产生抗药性[1].为了控制抗药菌株的传播,国内外许多地区采取了相应的措施,追踪这些菌株的来源和传播途径,为建立有效的检测方法,制订有效治疗手段提供依据.本文对淋菌抗药质粒及其在菌株间的传播机制、膜蛋白机制及膜通透性改变产生抗药性,以及克服抗药性采取的措施等有关问题进行了综述.
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避免配置头孢匹罗时产生过多气体的方法
头孢匹罗属半合成第四代头孢,具有广谱抗菌活性,对萄葡球菌、耐青霉素的肺炎球菌及肠球菌均有效,尤其对流感嗜血杆菌和淋病奈瑟菌高度敏感,被广泛用于临床.我们在使用中发现,用传统方法配置头孢皮罗易产生大量气体,使瓶内压力骤然上升,气体来不及放掉,药液会随气体通过瓶塞针眼冒出,既造成了药物的浪费,又造成了药物污染,极不符合无菌配药原则.
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1231例泌尿生殖道患者常见病原体检测结果分析
目的:分析解脲支原体(Uu),沙眼衣原体(CT)和淋病奈瑟菌(NG)感染及药物敏感情况,为性病防治提供可靠依据.方法:对2011年1月-2014年6月来我院就诊的1231例临床疑似生殖泌尿道感染的患者分泌物进行解脲支原体和人型支原体(MH)的培养及药敏、沙眼衣原体抗原检测、淋病奈瑟菌的培养与鉴定.结果:1231例生殖泌尿道感染的患者中支原体培养阳性523例,其中解脲支原体(uu)感染388例,解脲支原体和人型支原体(MH)混合感染98例,人型支原体感染27例;支原体体外药敏实验提示有效的抗生素为强力霉素、克拉霉素、美满霉素、交沙霉素.淋病奈瑟菌培养阳性51例;衣原体抗原检测阳性37例.结论:门诊泌尿生殖道病原体感染中,支原体感染占主导地位,其次为淋球菌感染.治疗本地区支原体感染有效的抗生素是强力霉素、美满霉素和交沙霉素.
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金黄色葡萄球菌的耐药性分析
近年来,随着抗菌药物的不断发展,在临床治疗上有了更多的选择.但也面临着如何选择佳抗菌药物的问题.我们通过体外抗菌活性试验,发现万古霉素对金黄色葡萄球菌所致的淋病奈瑟菌性尿道炎、前列腺炎等一系列泌尿生殖系统性疾病有较好的抑菌作用,现将结果报告如下.
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阴道炎患者霉菌、淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和支原体感染情况分析
为了解近期上海地区女性阴道炎患者中霉菌、淋病奈瑟菌、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)、人型支原体(MH)的流行情况,我们对120例阴道炎患者进行病原体检测,同时进行支原体培养及药敏试验,为指导临床合理使用抗菌药物提供依据,现将结果报道如下.
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济南市社区门诊261例女性就诊者CT和NG检测结果分析
沙眼衣原体(CT)和淋病奈瑟菌(NG)感染,聚合酶链反应(PCR)检测具有特异、敏感、快速的特点.本文以Roche沙眼衣原体/淋球菌(CT/NG)PCR试剂盒检测了济南市社区门诊261例女性就诊者宫颈标本,并镜检了阴道滴虫和霉菌,对检测结果进行了分析.
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Th17细胞在小鼠生殖道淋病奈瑟菌感染中的作用
目的:评价Th17细胞在鼠生殖道淋病奈瑟菌感染中的作用.方法:建立淋病奈瑟菌生殖道感染鼠模型,取髂淋巴结细胞培养,检测上清液IL-17;抗IL-17抗体阻断生殖道淋病感染模型鼠IL-17,阴道分泌物细菌培养观察感染期变化、阴道涂片观察生殖道中性粒细胞的比例变化.淋病奈瑟菌刺激鼠脾单个核细胞、骨髓衍生的树突状细胞(BDMC),ELISA检测上清液IL-17、IL-12、IL-6、IL-22、IL-23、IFN-γ的含量.结果:淋病奈瑟菌感染的髂淋巴结细胞产生高浓度IL-17,抗IL-17抗体延长了生殖道淋病奈瑟菌的感染期、延缓了生殖道中性粒细胞的聚集.经淋病奈瑟菌刺激后,脾单个核细胞上清液中含高浓度IL-17、IL-6,BDMC上清液中有高浓度IL-23、IL-6,而IL-12浓度较低.结论:在淋病奈瑟菌生殖道感染过程中,Th17细胞分化增加,并通过趋化中性粒细胞发挥重要的抗感染作用.
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武汉地区淋球菌对6种抗菌药物敏感性的监测
目的:了解武汉地区淋球菌对6种抗菌药物耐药的发生率及耐药特征,为临床用药提供依据.方法:临床分离70株淋球菌,采用琼脂稀释法对淋球菌进行青霉素、四环素、阿奇霉素、环丙沙星、头孢曲松、大观霉素的敏感性的测定.结果:耐青霉素、四环素、阿奇霉素、环丙沙星的菌株分别占60.00%(42)、71.42%(50)、37.14%(26)、54.28%(38),同时耐2种及以上抗菌药物的多重耐药率为80%(56).未发现耐大观霉素、头孢曲松的菌株.结论:武汉地区淋球菌环丙沙星耐药率及多重耐药率均增长迅速,头孢曲松、大观霉素可以作为武汉地区治疗淋病的首选药物,其余4种不作为首选.
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威海地区淋球菌流行株质粒谱研究
目的:研究威海地区淋病奈瑟菌(简称淋球菌)耐药质粒的传播情况.方法:收集威海地区2000~2003年共82株淋球菌,采用碱裂解法提取质粒,以λDNA/HindⅢ作为分子质量参照,以标准分子质量的电泳结果为标准系统,以其相对迁移率为自变量,其分子质量对数值为因变量建立回归方程,计算样品所带核酸的分子量.结果:82株淋球菌中检出11株PPNG菌株,阳性率为13.41%.所有PPNG菌株均携带4.5Kb的"亚洲型"质粒.对由质粒介导的四环素高度耐药株(TRNG)(MIC≥16μg/mL)为2株,加上中度耐药株53株(MIC≥8μg/mL).82株淋球菌中有74株携带质粒,质粒总检出率为90.2%.共检出4种分子质量的质粒,分别为2.6、4.5、24.5和25.2Kb,其中2.6Kb质粒携带为49株,携带率为66.22%,携带4.5Kb者59株,其中53株(89.83%)对青霉素耐药.携带25.2Kb质粒的12株对四环素高度耐药.质粒谱共有7种,分别为4.5、2.6、(4.5+2.6)、(24.5+4.5)、(24.5+4.5+2.6)、(25.2+2.6)Kb及非质粒型,其中以(4.5+2.6)Kb和(24.5+4.5+2.6)Kb质粒谱型为主,分别占24.32%和14.86%.结论:质粒介导性耐药(包括PPNG和TRNG)是威海地区淋球菌产生耐药的主要原因.
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淋球菌mtrR调控区突变片段的体外重组和鉴定
目的:体外重组一段突变DNA片段,用其转染临床淋球菌株,产生特异位点-mtrR调控区突变的转染株.方法:采用基因剪接的技术,通过两步PCR反应完成DNA片段的体外定点突变,突变的EF片段用于后续淋球菌转染实验.结果:经重组的EF分子与淋球菌基因组DNA的相应片段并不完全匹配,测序结果显示,对应mtrR起始密码子上游第45位到第54位碱基之间有9 bp大小的片段缺失.结论:证实EF分子即为预期设计的突变DNA片段.
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STD就诊者阴道加特纳菌及其它病原体感染研究
目的:探讨女性STD就诊者阴道加特纳菌(GV)及其它病原菌的感染情况.方法:检测疑为STD患者标本890份(患者组)和健康人标本120份(对照组),用实时荧光PCR检测患者解脲脲原体(Uu)、淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(Ct)和阴道加特纳菌(GV),同时用超高倍显微诊断系统在相差视野下镜检念珠菌(CD)和阴道毛滴虫(TV).结果:STD患者组GV的阳性率为32.14%在CD(40.11%)之后占第2位、对照组GV的阳性率为7.5%.结论:STD患者GV阳性率较高,对STD患者应注意GV的检测和治疗.