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青岛市对病原微生物实验室生物安全管理工作进行督导检查
青岛市卫生计生行政部门于7月28日至30日对全市病原微生物实验室生物安全管理工作进行了专项检查。
本次监督检查采取抽查形式,由青岛市卫生计生委牵头,青岛市卫生局卫生监督局执法人员及青岛市医学检验质量控制中心相关专家联合,对市内12家中东呼吸综合征病原体检测单位、定点中东呼吸综合征救治医疗单位、相关涉外机关所属的医疗单位进行监督检查。 -
九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测对诊断急性呼吸道感染的临床价值
急性呼吸道感染常见疾病有急性上呼吸道感染、急性支气管炎、支气管肺炎、肺炎,症状轻重不一[1-2],主要临床表现为发热、咽痛、咳嗽咳痰、气喘气急等呼吸道症状,特征不明显[3-4],很难进行针对性治疗,乃至病情加重,滥用抗生素[3-6].九项呼吸道病原体检测血中的IgM抗体,能为临床早期诊断提供重要参考[11],同时可以用于流行病学和病原学研究,减少抗生素的应用,缩短治疗时间[12].
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多重聚合酶链反应在性病病原体鉴别中的应用
淋球菌(Ng)、沙眼衣原体(Ct)和解脲脲原体(Uu)所致疾病的主要临床表现非常相似,而治疗方案不尽相同.采用多重聚合酶链式反应进行病原体检测,978份标本均取自来本院就诊的性病怀疑者,其中男570例,年龄18~58岁,均取尿道拭子;女408例,年龄18~55岁,均取宫颈拭子.
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DNA芯片(DNA chip)
一种通过光刻技术或其他技术将DNA片段或基因集成在固体基底(玻璃或尼龙、硅片)表面而形成的阵列.通常1cm2的阵列可包含几百、几千甚至几万个DNA片段,故也叫微阵列(microarray).它是分子生物学和微加工技术进步的产物.DNA芯片在生命科学研究中发挥着重要的作用.其应用范围涉及:基因表达谱分析、基因突变检测、DNA(基因)序列测定、疾病机理分析、疾病诊断、药物筛选、环境因素对机体的作用机理、毒物基因组学、食品卫生、病原体检测和生物样品的制备等.此外,它还将生命科学中许多不连续的过程如样品制备、化学反应和检测等步骤在芯片上实现其连续和微型化,建立缩微芯片实验室(Lab-on-A-chip).DNA芯片与PCR芯片、毛细管电泳芯片及介电电泳芯片等一起通称生物芯片(biochip).(本文编辑:邵隽一)
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PCT及炎症因子联合病原体抗体检测在成人呼吸道感染的诊断价值
目的 研究细菌性及非细菌性下呼吸道感染患者血清降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)变化及病原体组成,探讨联合检测在成人呼吸道感染的诊断价值.方法 选取70例下呼吸道感染患者,并依据其临床及病理表现分为细菌感染组及非细菌感染组.同期,选择30例健康人群作为对照组.收集患者治疗前及抗感染治疗2周后血清.分别采用全自动电化学发光免疫法、酶联免疫吸附法及间接免疫荧光法对血清PCT水平、IL-6水平及9种病原体进行检测.统计学方法对各组间及治疗前后指标的变化进行分析.结果 治疗前,三组患者血清PCT及IL-6均存在显著性差异,两指标阳性检出率在细菌感染组高(P<0.05).治疗后,细菌感染组及非细菌感染组两指标水平均降低,但PCT在非细菌感染组下降不明显(P>0.05).从疾病预测诊断角度,PCT灵敏度及阴性预期值均高于IL-6,但特异性及阳性预期值略低于IL-6.两指标并联检测,灵敏度及阴性预期值均可提高到90%以上.本研究中细菌感染组及非细菌感染组9种病原体检出率分别为7.89%(3例)和46.88%(15例).结论 PCT、IL-6联合病原体检测,可以检测分辨患者感染的病原体类型,并提高细菌检测的灵敏度及特异性.
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基于rDNA靶向测序和鸟枪法测序相结合的致病菌筛查
目的 基于高通量测序技术,建立靶向测序和鸟枪法测序相结合的致病菌筛查方法,以期用于临床感染标本中可疑致病菌的快速检测.为临床治疗提供参考. 方法 通过计算机模拟建立分析策略并研究其可行性,然后通过已知细菌进行验证;应用该方法对临床样品进行检测,分析样品中可疑的致病菌. 结果 在计算机模拟分析的四组标本中,相对应的细菌种属的reads检出比例在总细菌reads数中均为高.在用已知细菌进行验证的结果中,四种细菌相对应的属reads比例均达到标本总reads数的88%以上,种reads比例均达到标本总reads数的51%以上;三个真菌标本中相对应的真菌属reads比例均达到标本总reads数的91 %以上,种reads比例均达到标本总reads数的40%以上.四个细菌样本和三个真菌样本相对应的细菌和真菌属reads和种reads检出比例分别是对应样本中含量高的属和种,与实际操作的细菌投入量基本相符.计算机模拟分析和用已知细菌测试结果表明,利用16S/ITS全长序列扩增产物进行打断建库可用于细菌和真菌的检测.将rDNA靶向测序和鸟枪法测序相结合,在临床脑脊液中检出红球菌和假单胞菌,在血液和唾液中检出金黄色葡萄球菌. 结论 靶向测序提高了检测的灵敏性,rDNA靶向测序和鸟枪法测序结果相互印证,提高了病原体检测的准确性.两种测序方法相结合用于病原体检测更加合理有效.
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儿童梅毒血清学检测方法学评价
梅毒属于苍白螺旋体引起的一种严重危害人类健康的性传播疾病,临床表现较为复杂,儿科更不易发现。梅毒检测方法主要分为病原体检测、血清学筛选试验及血清学确证试验,临床实验室多采用血清学筛选试验。
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儿童急性呼吸道感染患者病原体的临床检验分析
目的 针对儿童急性呼吸道感染患者进行病原体的临床检测,并统计对比不同年龄段发生呼吸道感染的情况.方法 选取2012年5月-2013年5月期间在我院治疗的急性呼吸道感染患者850例作为研究对象.采集患者的血清,在荧光显微镜下利用呼吸道病原体谱抗体IgM检测试剂进行病原体检测.结果 850例患者病原体阳性率为32.71%,MP的感染率高,ADV和INFA的感染率次之,LPI的感染率低.年龄段在6~12岁的病原体感染率明显高于年龄在1岁以内及1~3岁的患者,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 儿童急性呼吸道感染患者主要是MP、ADV以及INFA等感染,不同年龄段的感染情况不同,6~12岁的儿童患者的病原体感染率较高.
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早孕期产前超声诊断人体鱼序列征一例
孕妇,24岁,孕13+3周.婚后两年未孕,曾行输卵管碘水造影示左侧输卵管不通,右侧输卵管正常.受孕前半年服用中草药治疗(用于促排卵治疗)夫妻双方平素身体健康,无不良嗜好,无糖尿病和家族性遗传病史;早孕期无放射线接触史,孕妇血清检测除外宫内感染(弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒及其他可引起围产儿畸形的病原体检测正常).使用Siemens S2000型超声诊断仪,腹部探头频率2~6 MHz,阴道探头频率5~8 MHz,高频探头频率4~9 MHz,三维及四维容积探头,应用胎儿条件及胎儿心脏条件,经腹高频超声联合经阴道超声对胎儿进行检查.胎儿头臀长7.30 cm,相当孕13+3周大小,颈项透明层0.18 cm,鼻骨长0.24cm,左肺大小1.1cm×0.7 cm,右肺大小1.4 cm×0.8 cm,胃泡、四腔心及心内结构未见明显异常,心胸比例正常.未见双肾及膀胱回声;仅见一下肢,上宽下窄,呈“鱼状”,腿周径0.9 cm,内可见1根较粗大股骨,长度为1.1 cm,小腿短而细小,周径0.3 cm,内可见1根长约0.3 cm长骨,另可见细长约0.5 cm软组织与小腿相连(图1).胎儿颈、胸、腰段脊柱排列尚规整,骶尾部显示不清.脐带直径0.4 cm,可见2根脐血管,横切面呈“吕”字型排列.
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小儿急性下呼吸道感染病原体检测与临床分析
急性下呼吸道感染(acute lower respiratory infection,ALRI)的病原主要有病毒、细菌和肺炎支原体等.呼吸道感染的病毒病原学因不同国家,不同省市和地区,不同医院,不同年份、季节和年龄等而异.急性下呼吸道感染是儿童的常见病、多发病,在发展中国家其致死率占儿童死亡率的30%,近年来随着各种抗生素的广泛应用,呼吸道细菌感染有所降低,而呼吸道病毒感染呈上升趋势,病毒感染可能占80%以上,已成为全球性疾病,严重威胁小儿健康.本组应用ELISA方法对186例患儿进行下呼吸道常见病原体检测,为临床提供较为可靠的诊断及治疗信息.
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角膜炎常见致病真菌DNA快速提取方法的探索
近年来我国真菌性角膜炎的发病逐年上升,聚合酶链反应(PCR)技术为真菌病原体检测提供了一条快速、敏感的诊断方法. 真菌细胞壁较厚不易裂解,传统的DNA提取因其繁琐而成为该技术应用于临床的障碍.本实验使用几种不同的裂解液提取常见角膜致病真菌DNA,并将结果进行比较分析.
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严重急性呼吸综合征临床检测实验室管理的初步实践
严重急性呼吸综合征(SARS)是一种在世界33个国家和地区流行的急性呼吸道传染病[1].世界卫生组织(WHO)对SARS临床检测实验生物安全操作做出了相应的规定.要求有关SARS病原体检测必须在P3级实验室中进行.我国在疫情期间短期内建立大量符合P3级标准的SARS临床检测实验室显得不切实际.作为由三级甲等医院转型而来的SARS定点医院的专业临床检测实验室,我们结合SARS临床检测的特殊性和现有实际条件,对实验室进行了改造.
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小儿呼吸道肺炎支原体感染病原体检测的研究
目的:探讨小儿肺炎支原体(MP)感染不同检测方法,为MP感染提供新的快速的诊断方法.方法:对疑诊MP感染的110例患儿进行咽拭子咽部分泌物显微镜下直接观察形态学检查,同时进行抽取静脉血检测血清MP特异性抗体.结果:咽部分泌物显微镜下直接观察形态学检查对MP检出率为85.4%,血清MP特异性抗体对MP检出率为64.5%,且前者与病程无关(p>0.05).结论:咽部分泌物显微镜下直接观察形态学检查,为MP感染提供新的,陕速的诊断方法.
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不液化精液的需氧病原体检测和治疗
精液不液化导致的男性不育约占9.8%[1].我们1995年1月至2000年7月对125例不液化精液行需氧病原体检测,同时采用联合药物治疗,效果良好,报告如下.
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多重聚合酶链式反应在脓毒血症病原体检测中的应用
目的:探讨多重聚合酶链式反应(PCR)在脓毒血症病原体检测中的灵敏度、特异性及检测时间,为多重PCR在脓毒血症病原体检测中的应用提供理论依据。方法采用多重PCR和血培养检测医院40例脓毒血症患者血液中的病原体,并比较两种检测方法的灵敏度、特异性、检测速度、检测菌种的差异,并以同期40名健康体检者血标本作为对照;采用SPSS 15.0软件进行数据处理,检测阳性结果以率的形式表示,并进行χ2检验。结果对照组中两种方法的阳性率差异无统计学意义,脓毒血症组多重PCR检测的阳性率为55.0%,血培养为82.5%,两者比较差异有统计学意义( P<0.05),且血培养检测出18例脓血症患者中共有11例 PCR检测为阳性,占61.1%;多重PCR特异性为80.7%,灵敏度为95.7%;脓毒血症组多重PCR的平均检测时间为(6±0.56)h ,血培养法为(30.78±1.45)h ,差异有统计学意义( P<0.05);从22份阳性血培养中共分离出4种病原菌,分别为金黄色葡萄球菌10株、铜绿假单胞菌7株、鲍氏不动杆菌3株、表皮葡萄球菌2株,多重PCR均能检测上述病原菌的DNA。结论在脓毒血症病原学的检测中,多重PCR较血培养具有更高的敏感性和特异性,检测时间也较血培养明显缩短,有利于脓毒血症病原体的快速检测,指导临床用药。
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复发性念珠菌外阴阴道炎622例分析
近年复发性念珠菌外阴阴道炎(recurrent vulvovaginal candidiasis,RVVC)的发病率明显增加,为探讨RVVC发病的相关因素,我院妇科门诊对2001年3月~2003年2月确诊为RVVC的622例患者,通过询问病史、常规妇科检查及常见生殖道感染病原体检测等了解RVVC发病相关因素.现将结果报告如下.
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荧光定量PCR快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立
目的 利用SmartCycler系统建立一种简便、快速的荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称SAU)的方法.方法 根据SAU特异nuc基因设计引物和探针,建立检测体系,并在体系中加入内质控IAC,通过另一个标记不同荧光基团的TaqMan探针来监测IAC.用SAU 6538株污染饮用水和牛奶模拟实际样本,以评价体系的性能.结果 以含nuc片段的线性质粒为模板,反应体系的灵敏度为5 拷贝/μl;以6538株基因组DNA为模板,低检测限为10 fg/μl;用涂平板法计数并10倍梯度稀释的菌液提取DNA为模板,低检测限为50 cfu/ml.建立的定量标准曲线的循环域值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r~2≥0.998),PCR效率E≥96.7%.用SAU 6538污染饮用水和牛奶模拟实际样本,灵敏度可达5×10~2 cfu/25 ml样本.结论 所建立的nuc-IAC荧光定量PCR具有内质控IAC,既能定量检测食物是否被污染,又能监测PCR体系,防止假阴性发生或低估病原菌污染量.
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3380例宫颈感染病原体检测分析
目的探讨子宫颈解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)、淋菌(NG)、人乳头瘤病毒(HPV)感染情况,提出防治疾病的有效措施.方法取宫颈分泌物,以PCR技术,随机对3380例来自我院妇科门诊的患者,要求排查性传播疾病及有不洁性生活史者进行CT、UU、NG、HPV(11型)检测.结果总检出率为25.38%(858/3380),UU、CT、NG、HPV(11型)检出率分别为18.67%(631/3380)、5.77%(195/3380)、0.77%(26/3380)、1.83%(62/3380).结论本组患者宫颈感染UU、CT、NG、HPV(11型)检出排序为UU>CT>HPV>NG,病毒感染不可忽视.
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降钙素原结合病原体检测对儿童下呼吸道感染的诊断价值探析
目的 讨论降钙素原结合病原体检测对儿童下呼吸道感染的诊断价值.方法 选取本院发生下呼吸道感染的患儿100例,根据临床诊断的情况分为出现细菌感染的实验组以及非细菌感染的对照组.结果 实验组的患者的降钙素原水平的检测结果高于对照组,实验组的呼吸道的IgM九联检血清抗体检验的阳性率小于对照组,实验组的痰培养的阳性率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论使用降钙素原检测可以在下呼吸道感染的早期将其检测出来,使用痰培养检测的准确率很高但是检测使用的时间较长,而使用呼吸道的IgM九联检血清抗体的检测速度较快,使用三种方式联合,可以全面有效的检测下呼吸道感染的病原菌实行检测,具有重要的临床价值.
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应用TRUST与TPPA诊断梅毒的几点体会
梅毒是由苍白螺旋体引起的慢性传染病,诊断梅毒的实验室方法主要有病原体检测和抗体检测,我们应用TRUST筛查试验和TPPA确诊实验对5000名出入境健康体检人员进行了梅毒感染情况检测,现将应用以上两种方法的对比观察总结如下: