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超抗原金葡萄球菌肠毒素A对大鼠骨肉瘤的免疫治疗
本实验旨在观察超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对骨肉瘤荷瘤鼠免疫功能的影响及抑瘤效应,并分析其作用机制,以期为成骨肉瘤的免疫治疗寻求一种新方法.
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新城疫病毒对肿瘤细胞的杀伤及其作用机制研究
目的探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)对肿瘤细胞的抑制机制及其体内抑瘤作用.方法采用基因组电泳法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞基因组的影响.运用SDS-PAGE、Western blot等方法检测NDV感染对Hep-2肿瘤细胞内p53及Bcl-2蛋白表达量的影响.通过间接免疫荧光法检测NDV感染后其新城疫病毒HN基因在Hep-2肿瘤细胞表面的表达情况.另外,构建C57/BL小鼠荷H22模型,瘤内注射NDV,观察其对实体肿瘤的抑制作用,探讨NDV在动物模型体内所介导的抑瘤作用.结果 NDV可致Hep-2肿瘤细胞的基因组断裂,电泳呈梯状条带.NDV感染能够上调p53的表达,且不影响Bcl-2蛋白的含量.间接免疫荧光实验显示,NDV感染Hep-2肿瘤细胞后可在其表面表达大量新城疫病毒HN蛋白.动物实验结果说明,NDV可抑制实体肿瘤生长.结论 NDV可诱导Hep-2肿瘤细胞凋亡,且不受Bcl-2的影响;能够有效抑制体内实体肿瘤的生长.
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山核桃树皮水提物对荷瘤小鼠抑瘤效应及对血象的影响研究
目的:探讨山核桃树皮水提物对荷瘤小鼠的抑瘤效应及对血象的影响.方法:采用细胞培养、小鼠移植瘤实验、药物瘤体治疗、血象分析等方法研究山核桃树皮水提物对荷瘤小鼠抑瘤效应及其血象的影响. 结果:皮下移植瘤动物模型构建成功.在移植瘤小鼠的第1、2、3周的血象检测结果中,山核桃树皮水提物药物高剂量组的白细胞、红细胞、血红蛋白、淋巴细胞分类数量均显著性高于PBS组及中、低剂量组.结论:在肿瘤进展过程中,药物高剂量能显著改善荷瘤小鼠的贫血和免疫状态,中、低剂量的改善作用不明显,达一定剂量的山核桃树皮水提物具有对荷瘤小鼠的抑瘤效应.
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康赛宁联合IL-2对C57BL/6小鼠Lewis肺癌原发瘤生长的影响
目的:选择具有协同免疫调节作用的生物制剂进行联合治疗是提高肿瘤生物治疗,减少抗癌药物的副作用.方法:40只C57BL/6小鼠右侧腋下皮下接种Lewis肺癌瘤株(LLC)1.5×106实验分4组,每组10只小鼠,Ⅰ组为对照组,注射生理盐水;Ⅱ组注射康赛宁;Ⅲ组为注射IL-2;Ⅳ组为康赛宁+白细胞介素Ⅱ剂量减半.接种肿瘤第2 d开始用药,间日注射,5次为一疗程,进行二个疗程,中间间隔4 d.结果:1. Ⅱ、Ⅲ组较对照组Ⅰ肿瘤潜伏期延长,肿瘤体积与重量都明显减少(P＜0.05).第二个疗程结束时,抑瘤率分别为40%、30%,且至接种肿瘤第48 d,二组分别有20%、30%小鼠不发瘤.2. Ⅳ组肿瘤潜伏期同Ⅱ、Ⅲ组肿瘤体积与重量较对照组减少更加显著(P＜0.001,P＜0.01),抑瘤率为60%,40%小鼠不发瘤.结论:联合应用康赛宁与白细胞介素Ⅱ免疫治疗,可明显加强二者的抑瘤效应,减少剂量.为临床联合应用二者瘤内注射治疗癌症患者提供实验依据.
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载5-氟尿嘧啶两亲多糖纳米粒的制备及其对肝癌细胞HepG2的杀伤作用
背景与目的:生物可降解载药纳米微粒作为新型药物靶向传输和缓释/控释载体,可延长药物的生物半衰期,减轻药物的毒副作用,而且具有良好的生物相容性.本实验制备可生物降解的载5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)葡聚糖接枝聚乳酸共聚物(5-FU/DEX-g-PLA),探讨其对人肝癌细胞HepG2的体内外杀伤作用.方法:利用分子自组装技术制备5-FU/DEX-g-PLA载药纳米微粒,透射电镜观察纳米粒形态,分光光度法计算载药率,MTT法观察对HepG2细胞的体外杀伤作用,动物实验观察其体内抑瘤效应.结果:5-FU/DEX-g-PLA纳米微粒呈球形,粒径约50 nm,药物包封率约9.3%.体内药物代谢动力学数据显示,5-FU纳米制剂在血液中维持时间长于5-FU裸药:MTT结果显示,5-FU纳米组细胞生长抑制率(58.8%)与5-FU裸药组(58.0%)差异无显著性(P＞0.05);体内抑瘤实验显示,5-FU纳米组肿瘤抑制率(73.1%)显著高于5-FU裸药组(57.5%).结论:5-FU/DEX-g-PLA纳米微粒可有效抑制肝癌细胞的生长.
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MAGE-3多肽纳米疫苗对小鼠胃癌种植瘤抑瘤效应研究
背景与目的:纳米颗粒作为疫苗载体可保护抗原免受酶解,增强免疫原性,是一类极具开发潜力的新型疫苗载体.本实验制备负载CD4+CD8+T细胞表位MAGE-3多肽抗原的纳米疫苗,探讨其相关特性及抗肿瘤免疫.方法:利用自组装技术制备多肽/Chit-DC(壳聚糖-脱氧胆酸)载药纳米胶束,透射电镜观察纳米微观形态,荧光分光光度法计算负载率、载药量,并测定药物释放规律.流式细胞仪检测DC(树突状细胞)对药物的吞噬率,酶联免疫斑点实验(ELISPOT)和细胞毒性实验检测MAGE-3多肽纳米疫苗激活机体细胞免疫反应的状况.动物实验观察其体内抑瘤效应.结果:成功制备多肽/Chit-DC纳米胶束,药物包封率约为37%,载药量为17%.载药纳米颗粒中的多肽在pH7.4的PBS中释放缓慢,于48 h达释放平台;在2 mg/mL溶菌酶溶液中,药物有一定的突释现象,于24 h达释放平台.ELISPOT和细胞毒性实验显示MAGE-3多肽纳米疫苗可以激活体内免疫反应而产生针对MAGE-3的CTL,特异性杀伤表达MAGE-3的肿瘤细胞.体内抑瘤实验显示,多肽纳米疫苗组相对肿瘤抑制率为37.81%.结论:MAGE-3多肽/Chit-DC纳米疫苗能有效激活体内的抗肿瘤免疫效应,抑制MFC小鼠前胃癌细胞的生长.
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心脏激素的抑瘤效应及作用机制
心钠素简称ANP(atrial natriuretic peptide)或ANF(atrial natriuretic factor),是由心房分泌的一种活性多肽激素,主要参与维持机体水盐平衡及血压调节等功能.然而ANP只是该组4种多肽中的一种,其来源于ANP基因编码的心钠素前体(proANP).proANP在体内酶解为含第99～126个氨基酸的ANP、含第1～30个氨基酸的长效钠肽(LA-NP)、含第31～67个氨基酸的血管扩张素(VD)及含第79～98个氨基酸的利钾肽(KP)4种多肽.近年发现4种心脏激素对多种肿瘤有抑瘤效应,且不良反应极轻,作为内源性激素开发为抗癌药物很有价值.
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IL-2协同肿瘤坏死因子对移植性鼻咽癌的抗瘤作用
目的:研究重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)与重组白介素-2(rhIL-2)协同体内抗鼻咽癌效应及抗瘤机理.方法:利用我室建立的鼻咽癌细胞株(CNE3)制成裸鼠鼻咽癌模型,用rhTNF-α或与rhIL-2联合瘤内注射以观察抑瘤效应及荷瘤组织细胞的病理学、超微结构的改变,探讨其作用机理.结果:鼻咽癌裸鼠移植瘤经rhTNF-α治疗后肿瘤出现坏死、体积缩小、甚至消失.rhIL-2能增强rhTNF-α的抗瘤作用.组织病理学及超微结构观察发现,大多数癌细胞出现粗面内质网扩张;核碎裂、核溶解而消失.结论:rhIL-2增强rhTNF-α的抗瘤机理可能与IL-2诱导癌细胞表达TNF受体作用有关,本研究为临床在鼻咽镜下进行肿瘤局部注射TNF进行治疗提供实验依据.
关键词： 重组人肿瘤坏死因子-α 白介素-2 鼻咽癌细胞株 裸鼠 抑瘤效应 -
超声定位辐照载药微泡抑制卵巢癌裸鼠皮下移植瘤增殖的实验研究
目的:探讨超声定位辐照载紫杉醇脂质微泡(Paclitaxel-carrying liposome microbubbles,PLM)的方法对裸鼠人卵巢癌移植瘤的抑瘤效应及可能的机制.方法:建立20只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成PLM辐照组、紫杉醇药物组、PLM组及生理盐水对照组,每组5只,分别给予不同处理,末次处理24 h后处死裸鼠,测量重量体积,计算抑瘤率;用免疫组织化学sP法检测肿瘤组织中细胞核相关抗原Ki-67并进行半定量分析;在透射电镜下对肿瘤细胞进行形态学观察.结果:与对照组比较,PLM辐照组及紫杉醇药物组对移植瘤的生长有明显的抑制作用,以PLM辐照组的抑瘤率高(P<0.01);PLM辐照组及紫杉醇药物组肿瘤组织中Ki-67的阳性表达量均下降,前者下降更为明显(P<0.01).透射电镜下观察到PLM辐照组肿瘤凋亡细胞出现较多.结论:与紫杉醇药物组相比,超声破坏PLM的方法对裸鼠SKOV3卵巢癌皮下移植瘤具有较强的体内抑瘤效应,可能是通过诱导细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖活性而延缓肿瘤生长的.
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Genistein对人乳腺癌移植瘤抑瘤效果的几种主要影响因素分析
大量体外实验证实, Genistein具有抑制肿瘤细胞增殖与浸润、抑制新生血管形成等多重抑瘤效应,极具临床应用价值.但其体内疗效的报道结果却出入极大[1,2].本实验拟通过建立裸鼠荷瘤模型,采用正交设计,研究几种常见因素对该药抑瘤效果的影响.为进一步促进Genistein应用于临床提供实验依据.
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肿节风注射液抗肿瘤作用的实验研究
目的:研究肿节风注射液的抗肿瘤作用及对免疫调节的影响,以初步探讨其抗肿瘤作用及机制.方法:利用小鼠荷瘤模型(荷MFC、HeP)观察肿节风注射液体内抑瘤效应,并观察肿节风注射液对荷瘤小鼠(荷MFC)的免疫调节作用.结果:肿节风注射液对小鼠HeP、小鼠MFC移植性肿瘤的生长有抑制作用,抑瘤率分别为64. 38%、11.65%(P<0.05,P<0.01);肿节风注射液可延长腹水型荷瘤小鼠(MFC、HeP)的生存期 ,ILS分别为16.34%(P<0.02)11.65%(P<0.01);肿节风注射液在体内体外皆可促进淋巴细胞转化(P<0.01);肿节风注射液在体内还可增强NK细胞活性(P<0.01),还可增强荷瘤小鼠脾细胞产生TNF的水平(P<0.01);肿节风注射液可增强荷瘤鼠免疫吞噬功能,使吞噬指数K增加(P<0.05),还可增加肝、脾重量(P<0.01,P<0.05).结论:肿节风注射液对小鼠Hep、MFC肿瘤具抗肿瘤作用,此作用可能与肿节风注射液增强小鼠机体免疫吞噬功能、脾细胞对ConA的反应性和NK细胞的活性,促进脾细胞TNF的产生等免疫调节机制有关.
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低压电脉冲对黑素瘤荷瘤小鼠的抑瘤效应
目的 研究低压电脉冲刺激对荷黑素瘤小鼠的抑瘤效应.方法 建立BALB/c小鼠皮下B16F10黑素瘤小鼠模型,随机分为对照组与10、20、30 Hz电刺激组,电刺激组接受30 min/d、连续20 d电刺激.每日测量肿瘤体积,HE染色观察肿瘤组织学变化,分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测肿瘤组织caspase-3和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的mRNA水平,免疫组织化学法检测肿瘤组织caspase-3和MMP-9的蛋白表达.结果 与对照组相比,7d时电刺激30 Hz组肿瘤体积减小,20 d时,各电刺激组肿瘤体积减小,随时间延长抑瘤率增加;电刺激组肿瘤细胞核固缩、坏死较多;各电刺激组caspase-3 mRNA及蛋白质表达增加;MMP-9 mRNA及蛋白表达降低,caspase-3、MMP-9表达强度变化随着频率增大而增强.结论 低压电刺激可上调caspase-3表达,抑制MMP-9表达,抑制肿瘤生长.
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三取代型钛钨硅酸盐体内抑瘤效应的免疫机制探讨
目的: 探讨三取代型钛钨硅酸盐(WT)体内抑瘤效应的免疫机制.方法: 建立荷H22肝癌小鼠模型,WT连续灌胃10 d,取出肿瘤称重测定抑瘤率.用MTT比色法测定荷H22肝癌小鼠淋巴细胞转化的活性及NK细胞的杀伤活性.通过形态学观察和流式细胞仪检测WT诱导BEL-7402细胞的凋亡.结果:WT可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长(P<0.05),提高荷瘤小鼠淋巴细胞转化的活性及NK细胞的杀伤活性(P<0.05),并诱导肿瘤细胞发生凋亡.结论: WT的抑瘤作用与机体免疫功能的增强有关.
