白桦脂醇的体内抗肿瘤作用及机制

目的：研究白桦酯醇的体内抗肿瘤作用及机制。方法：采用小鼠肝癌细胞（H22）建立荷瘤小鼠动物模型，白桦脂醇灌胃10 d后，计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数；MTT法测定小鼠T淋巴细胞转化功能及NK细胞杀伤活性。结果：白桦脂醇三个剂量组、阳性对照组瘤重均减轻，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），中剂量组抑瘤率高；三个剂量组脾指数与阳性对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），中、高剂量组与阴性对照组比较差异亦有统计学意义（P＜0.05）；中剂量组胸腺指数与阴性、阳性对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；中剂量组T淋巴细胞转化率与阴性对照组和阳性对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；低剂量组在效靶比为25∶1时，NK细胞杀伤活性高于阳性对照组（P＜0.05），在效靶比为100∶1，杀伤活性高于阴性对照组（P＜0.05）；中剂量组在效靶比为25∶1、50∶1、100∶1时，NK细胞杀伤活性均同时高于阴性对照组和阳性对照组（P＜0.05）；高剂量组在效靶比为25∶1时，NK细胞杀伤活性高于阴性对照组和阳性对照组（P＜0.05）。结论：白桦脂醇通过刺激激活免疫器官，提高T淋巴细胞转化功能、提高NK细胞杀伤活性来抑制肿瘤细胞增殖。

更正

本刊2015年第35卷第3期发表的论文《鼻咽癌特异性减毒重组疫苗Lmdd-LMP2 A的构建及其抑瘤效应的研究》，第二作者陈小琴的工作单位应为：南京医科大学附属南京儿童医院检验科。

缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对肺癌细胞生长的抑制作用

恶性肿瘤在生长过程中,由于组织增生过快必然会造成局部组织缺氧和供能与耗能之间的不平衡[1].缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1, HIF-1)能通过诱导血管内皮生长因子(VEGF)和糖酵解相关酶的表达,增加供血、供氧、供能,改善这一失衡,与肿瘤的发生、发展密切相关[2].本研究拟设计HIF-1α的反义寡核苷酸,并研究它对体内、外肺癌细胞株A549的抑瘤效应,为肺癌的基因治疗寻找一条可行的途径.

人胎肝细胞和胎牛肝细胞低分子抑瘤物对小鼠腹腔积液型S-180细胞抑制作用的比较

目的:对比观察人胎肝细胞和胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物(LMW-NTS)对小鼠腹腔积液型S-180细胞生长的抑制效应.方法:分别从胎儿肝细胞和胎牛肝细胞中分离提取出LMW-NTS.采用体外双层软琼脂培养法检测它们对S-180细胞集落生成的抑制作用;给两组荷瘤小鼠每日分别腹腔注射人胎肝细胞和胎牛肝细胞LMW-NTS 0.5 mg/只,每日1次连续注射21天,观察小鼠的寿命.结果:人胎肝细胞和胎牛肝细胞LMW-NTS对S-180细胞的生长均有明显的抑制作用,且抑制作用随LMW-NTS浓度增高而增强;腹腔注射治疗荷瘤小鼠均能显著延长小鼠寿命.结论:人胎肝细胞和胎牛肝细胞中均存在着一种作用相似的LMW-NTS,在体内外均具有明显的抗肿瘤活性.

C-Myc/Fas基因舌鳞癌移植瘤内转染的抑瘤效应研究

近来发现,营养不足时,C-myc过表达也可介导细胞凋亡.而且C-myc介导凋亡主要通过上调Fas表达发挥作用.鉴于C-myc凋亡机制与Fas蛋白的特殊关系,C-myc在口腔鳞癌中过表达的普遍性,以及晚期肿瘤中部的缺血环境,我们采用基因转染技术,探讨C-myc/Fas瘤内转染的抑瘤效应.

肿瘤相关抗原肽与低剂量全身照射的协同抑瘤作用

目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据.方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小鼠75 mGy X射线全身照射,12 h后以TAP提取物皮下免疫小鼠,检测脾细胞CD3、CD69和TCRαβ表面标记、脾T细胞亚组百分数的变化、脾细胞Con A反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应.结果小鼠经TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞CD3分子和CD69分子的表达显著升高,脾细胞Con A反应性、IFN-γ分泌活性和CTL杀伤活性显著增强,IL-2分泌增多.而同时给予LDR的小鼠不仅上述功能不同程度增强,脾CD8+细胞百分数显著增高.结论LDR与细胞膜TAP具有协同抑瘤作用,细胞免疫力的明显增强可能为其机制之一.

热休克蛋白-抗原肽复合物对移植黑色素瘤B16细胞小鼠的抑瘤效应

制备黑色素瘤B16细胞热休克蛋白-抗原肽复合物(HACs)及其粗提物(HAC-CEs),并进行其抑瘤效应的研究.结果表明应用凝胶过滤制备的HAC-CE3、HAC-CE4和HAC-CE5及应用亲和层析纯化的HAC60、HAC75和HAC97均不同程度地降低肿瘤发生率、延迟肿瘤发生时间和减少C57BL/6J小鼠死亡率.提示,60～97kD HACs具有抑瘤效应,而且为制备肿瘤疫苗提供了重要的实验依据.

C215抗原基因转染的瘤苗联合单抗与超抗原的融合蛋白C215Fab-SEA的抗肿 瘤作用初步研究

目的：研究抗C215单抗与超抗原——金黄色葡萄球菌肠 毒素A(SEA)的融合蛋白C215Fab-SEA与C215抗原基因转染的瘤苗共同激发的抗 肿瘤效应。方法：以脂质体法将人大肠癌相关C215抗原的基因转染B16小鼠 黑色素瘤细胞系制备成瘤苗，建立C57BL/6小鼠黑色素瘤荷瘤模型，观察其与融合蛋白C 215Fab-SEA对肿瘤生长的抑制作用。结果：融合蛋白与瘤苗联合治疗组小鼠的抑瘤率明显高于单用融合蛋白 组和单用瘤苗组(P＜0.01)。结论：融合蛋白C215Fab-SEA与C215抗原基因转染的瘤苗 ，两者的抗肿瘤效应能相互增强，其共同激发的免疫应答能控制荷瘤动物肿瘤的生长。

恶性肿瘤放射治疗的新思考

恶性肿瘤是当前人类健康面临的主要威胁之一.近百年来电离辐射一直是治疗恶性肿瘤的重要手段.肿瘤放疗的原则是给瘤体局部足够的辐射剂量,而尽可能减轻正常组织的损伤.但控制肿瘤的有效剂量往往造成严重的正常组织损伤,包括局部损伤(如纤维化、溃疡等)和全身损伤(如免疫和造血功能抑制等),且有些肿瘤对辐射不敏感或对辐射产生抗性而得不到根治.这些因素己成为放疗成功的主要障碍.因此,寻求减少局部辐射剂量、增强抑瘤效应的治疗措施,已成为放射肿瘤学研究面临的重要课题.

WWOX基因转染抑瘤效应的实验研究

目的 建立肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体,观察其瞬时转染对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 采用RT-PCR方法,从正常人胚肾细胞HEK-293中钓取WWOX基因,将其克隆至pMD18-T载体上,测序正确后克隆到真核表达载体peDNA4/myc-His中;采用脂质体介导法体外瞬时转染人肺腺癌A549细胞;RT-PCR法和Western印迹法分别检测WWOX基因mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成试验观察肿瘤细胞克隆形成能力的变化.结果 成功构建了WWOX的真核表达载体.体外转染的A549细胞凋亡率明显高于未转染和空载体转染细胞,且细胞克隆形成能力下降.形成率为35.43%,明显低于未转染细胞和空载体转染细胞.结论 所构建的poDNA4/myc-WWOX真核表达载体转染肿瘤细胞能够抑制肿瘤生长并诱导细胞凋亡.

甘氨酸-钼锗酸盐体内抑瘤效应及机理研究

目的:观察甘氨酸-钼锗酸盐体内抑瘤效应及其抑瘤机理.方法:建立荷MGC-803小鼠模型,灌药物10 d,MTT法测定抑瘤率;MTT法测定MGc-803小鼠淋巴细胞转化功能及NK细胞活性;通过荧光染色观察BGC-823细胞凋亡形态及慧星细胞形成.结果:甘氨酸-钼锗酸盐显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长(P＜0.05);显著提高荷瘤小鼠淋巴细胞的转化功能及NK细胞活性(P＜0.05);诱导肿瘤细胞发生凋亡及破坏肿瘤细胞DNA.结论:甘氨酸-钼锗酸盐可通过提高机体免疫细胞活性、诱导肿瘤细胞凋亡及破坏肿瘤细胞DNA来抑制肿瘤细胞生长.

目的:建立黑色素瘤B16细胞热休克蛋白-抗原肽复合物(HACs)的制备方法并测其抑瘤效应.方法:应用Sephacryl S-200凝胶过滤制备HAC粗提物,应用SDS-PAGE纯化HACs,并测其抑瘤效应.结果:应用SDS-PAGE纯化的HAC60、HAC75和HAC97不同程度地降低肿瘤发生率,延迟肿瘤发生时间和减慢肿瘤生长速度.结论:60 000～97 000 HACs具有抑制瘤作用.

低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽提取物抑瘤作用的影响

目的:观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物抑瘤作用的影响,为低剂量辐射与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据.方法:采用微酸洗脱法制备分子量≤3 000的细胞膜TAP提取物,皮下免疫小鼠,免疫前12 h给予75 mGy X射线全身照射,检测胸腺细胞周期时相、脾细胞Con A反应性及脾T细胞CD4、CD8亚组的变化,同时观察体内抑瘤效应.结果:TAP提取物免疫小鼠后,移植肿瘤的发生率降低,平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞Con A反应性增强,胸腺细胞周期百分数无显著变化.小鼠免疫前12 h给予75 mGy全身照射可增强TAP提取物的抑瘤效应,与单纯TAP组相比,胸腺细胞S期百分数明显增加,脾细胞CD8+ T细胞百分数增高.结论:低剂量辐射能进一步激发免疫系统功能,增强小鼠肝癌H-22细胞膜TAP提取物的抑制肿瘤作用.

九钨三钛硅酸盐抗肿瘤作用及其机理研究

目的:观察九钨三肽硅酸盐(α-Ti3)对小鼠肝癌细胞、Lewis肺癌细胞及S180腹水瘤细胞的体外抑瘤作用及荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:建立3种小鼠荷瘤模型,测定瘤重和体外抑瘤3H-TdR掺入量以及相关免疫指标.结果:α-Ti3 LD50为1849.36 mg/kg.α-Ti 在6.25 mg/ml以上浓度时对3种瘤细胞的DNA合成均有抑制作用.α-Ti3能延长小鼠寿命,对荷瘤小鼠的瘤重有抑制作用,可增强荷瘤小鼠胸腺细胞自发掺入能力,脾细胞对ConA的反应性及脾细胞S期DNA的合成.结论:α-Ti 增强小鼠胸腺和脾细胞免疫功能可能作为抑瘤作用机理之一.

CD95抑制大肠癌细胞生长的实验研究

诱导肿瘤细胞凋亡治疗肿瘤,是肿瘤治疗上的一个突破.将凋亡基因CD95 cDNA导入大肠癌细胞,观察CD95基因在转导株的表达及在CD95抗体作用下的体外抑瘤效应,可望为大肠癌的CD95核酸免疫治疗提供理论依据.

链球菌制剂SM对不同肿瘤细胞生长的抑制作用

目的探讨链球菌制剂SM对不同肿瘤细胞生长的抑制作用.方法将不同浓度的链球菌制剂SM分别与7种肿瘤细胞和正常人外周血淋巴细胞共同孵育不同时间后,以MTT法检测其对7种肿瘤细胞的直接抑瘤作用及经诱导后的外周血淋巴细胞对K562和Raji细胞的细胞毒效应.结果链球菌制剂SM浓度在1～2KE·mL-1时,对7种肿瘤细胞均有直接的增殖抑制作用,与对照组相比有明显差异(P<0.01),对SHG-44细胞和S180细胞的GI50为1～2KE·mL-1, Hela,Raji和H22细胞大于2KE·mL-1,其余细胞介于两者之间.经诱导后的外周血淋巴细胞对K562和Raji细胞均有明显的细胞毒效应.尤其浓度为0.125～0.031 KE·mL-1时,与对照组相比有明显差异(P<0.05).结论链球菌制剂SM具有直接和间接的抑瘤效应,其作用与药物浓度有关,且对不同肿瘤细胞的敏感性存在一定的差异.

SSTR亚型调变与188Re-SSA抑瘤效应相关性研究

研究小细胞肺癌的治疗学基础,探索其生长抑素受体(简称SSTR)介导的放射性核素标记的特异配体靶向治疗方案具有重要意义,下面叙述有关研究现状.1.肿瘤生长抑素受体亚型表达的研究现状.20世纪80年代前后各国学者对促生长素抑制素(简称生长抑素,SST)的多种生理、药理作用进行了深入研究,并着重研究了SST及其类似物(简称SSA)的抑瘤效应,而SST或SSA作用的实现均是通过靶细胞膜上高特异性的SSTR介导的.1992～1995年间SSTR的5种亚型(简称SSTR1～5)先后克隆成功,组成结构和功能各异的SSTR家族(SSTRs)[1].近年研究表明胺前体摄取与脱羧瘤(简称APUD瘤)及其转移灶均有SSTRs的表达,其表达密度显著超过肿瘤周围的SST靶组织,故采用SSTR1～5亚型作探针的原位杂交法可检测各类肿瘤SSTR1～5的表达模式.初步研究表明人体各类各型肿瘤表达SSTR亚型的模式各不相同[2],多数APUD瘤以表达SSTR2和(或)SSTR1为主,具有APUD瘤某些特征的小细胞肺癌(简称SCLC)也以SSTR2的表达占优势[3].文献报道SSA的抑瘤效应主要由SSTR2介导[3].近年发现人胰腺癌失去表达SSTR2的能力,若通过基因转移将SSTR2再导入该癌细胞内,即可在实验模型上获得

链球菌制剂SM对S180荷肉瘤小鼠的抑瘤作用

目的观察评价链球菌制剂对S180荷肉瘤小鼠抑瘤效应及免疫器官的影响.方法以S180荷肉瘤小鼠为模型,随机分为3组,分别给予SM制剂、环磷酰胺或PBS治疗,观察对小鼠的抑瘤率、生命延长率及对脾脏和胸腺重量变化的影响.结果 SM制剂组对小鼠的抑瘤率为33.9%,生命延长率为37.82%;环磷酰胺组的抑瘤率为44.49%,生命延长率为46.19%,两者相比无显著差异(P>0.05).SM制剂组脾脏重量与正常对照组相比,无显著差异(P>0.05),胸腺重量明显高于对照组(P<0.05);而环磷酰胺组小鼠脾脏和胸腺重量均明显小于正常对照组.结论链球菌制剂SM具有明显的抑瘤效应,其作用与环磷酰胺相比无显著性差异,并有促进S180荷肉瘤小鼠免疫器官增生作用.

宫颈癌U14细胞正丁醇提取物脂质体瘤苗的体内抑瘤效应

目的 观察小鼠宫颈癌U14细胞抗原脂质体瘤苗的体内抑瘤效应.方法 正丁醇法提取U14细胞表面抗原(CBE),包裹入阴离子脂质体制成CBE-脂质体瘤苗,腹腔接种免疫Km小鼠,然后每只腹腔接种104 U14细胞或105 U14细胞,观察瘤苗对后续U14细胞负荷攻击的免疫保护作用.同时用104 U14细胞预先攻击Km小鼠,再用CBE脂质体瘤苗免疫观察瘤苗的抑瘤能力.结果 低剂量(104 U14细胞)CBE脂质体瘤苗免疫组荷瘤小鼠平均生存时间为(25.50±2.08)天,明显长于空白对照组[(18.00±0.00)天]、单纯脂质体组[(18.33± 0.52)天]和单纯CBE组[(19.33±1.75)天],有统计学差异(P＜0.01).高剂量(105 U14细胞)荷瘤小鼠组与对照组生存时间比较无差异.腹腔给予104 U14细胞,再给予瘤苗免疫后各组小鼠生存时间无差异.结论 CBE脂质体瘤苗对小鼠后续腹腔攻击的相关肿瘤细胞,可产生抑制作用,但效果与肿瘤细胞负荷量有关.

脉冲电场对人卵巢癌SKOV3离体细胞与在体移植瘤的杀伤效应研究

目的 观察不同频率脉冲电场对离体人卵巢癌SKOV3的急性细胞毒性及对BALB/c裸鼠SKOV3皮下移植瘤的迟发性抑制效应,以探讨电场脉冲频率与急、慢性抑制效应间的量效关系.方法 首先梯度改变脉冲频率(1,60,1 000,5 000 Hz)和电压峰值(50,100,150,200,250,300,350,400 V),对SKOV3离体细胞悬液进行电击刺激.采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测脉冲电场的急性细胞毒性效应;然后仅梯度改变电场脉冲频率(1,60,1 000,5 000 Hz),依次对28只BALB/c裸小鼠SKOV3皮下移植瘤进行电脉冲刺激,对照组(7只)皮下移植瘤仅插入电极,但未给予电脉冲刺激.采用体积抑瘤率来观察脉冲电场的迟发性抑瘤效应;采用光、电镜观察SKOV3组织学超微结构变化.结果 频率为1 Hz及5 kHz的脉冲电场对离体SKOV3有着相似的急性细胞毒性效应;各频率脉冲电场对小鼠皮下移植瘤的迟发性抑制效应亦无明显差异(P＞0.05);组织学分析发现各频率脉冲电场均对靶组织造成急性损伤效应,而且5 kHz脉冲电场还能诱导SKOV3离体细胞或在体瘤细胞凋亡.结论 5 kHz脉冲电场相对低频(1 Hz)脉冲电场并未减弱其对肿瘤组织的急、慢性抑制效应,并且还具有诱导细胞凋亡的二线杀伤效应.