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  • 重楼皂苷Ⅰ诱导G2/M期阻滞及干扰微管结构抗结肠癌HCT116细胞作用机制

    作者:于思;曹治兴;杨雨婷;白姣姣;彭成;李玉芝

    目的:探讨重楼皂苷Ⅰ (PPI)对人结肠癌HCT116细胞周期的影响,并研究其作用机制.方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测PPI对HCT116细胞的体外抑制活性;采用Hoechst33258染色法观察PPI对HCT116细胞核数量的影响;采用流式细胞仪检测PPI对HCT116细胞周期的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶(CDC2)和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)蛋白的表达和活性,利用细胞免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜检测PPI对HCT116细胞微管的影响.结果:PPI以剂量~时间依赖的方式抑制HCT116的体外增殖,Hoechst 33258染色发现PPI处理组双核细胞数量明显增加(P <0.05,P<0.01);将其细胞周期阻滞于G2/M期;PPI未能抑制G2/M期相关蛋白CDC2,CDC25C的表达和活性,却有促进作用;PPI可导致细胞微管结构紊乱.结论:PPI会导致HCT116细胞阻滞在G2/M期,其作用机制与干扰细胞内微管结构有关.

  • HPLC比较醇提重楼及其颗粒中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量

    作者:陈清;夏亚飞;阎姝

    目的:建立一种测定重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量测定方法,用于比较重楼乙醇提物与重楼配方颗粒中皂苷的含量.方法:采用C18色谱柱,以乙腈-水(42:58)为流动相,检测波长210 nm,流速1 mL· min -1,柱温室温.结果:在0.043 5~0.870 0g·L-1,重楼皂苷Ⅰ的峰面积与浓度有良好的线性,r =0.999 1;在0.038 ~0.760 0 g·L-1,重楼皂苷Ⅱ的峰面积与浓度有良好的线性,r=0.999 7,重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的平均回收率为99.90%,100.2%,RSD分别为1.7%,1.7%.醇提物与配方颗粒中皂苷Ⅰ,Ⅱ的总含量分别为34.7%,3.1%.结论:该法操作简单,出峰时间短,两峰分离度好,测得的醇提物中皂苷Ⅰ,Ⅱ含量明显高于重楼配方颗粒.

  • HPLC-ELSD法测定清咽胶囊中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的含量

    作者:毕晓黎;胥爱丽;罗文汇

    目的:采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定清咽胶囊中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的含量.方法:以乙腈-水(48:52)为流动相,Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)为固定相,流速1.0 mL·min-1,漂移管温度45℃,载气流量1.5L·min-1.结果:重楼皂苷Ⅰ的回收率97.27%,RSD为1.22%(n=6);重楼皂苷Ⅱ的回收率97,09%,RSD 1.40%(n=6).结论:该方法简便、快速、重复性好,可用于清咽胶囊的质量控制.

  • 重楼皂苷Ⅰ对结肠癌HCT116细胞凋亡及Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白表达的影响

    作者:罗吉;罗燕;李勇敏;谭小宁;吕元;马荣丽;蒋益兰

    目的:观察重楼皂苷Ⅰ (polyphyllin Ⅰ,PPⅠ)对结肠癌HCT116细胞凋亡及凋亡相关因子Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax),B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2),半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响,探讨重楼皂苷Ⅰ抑制结直肠癌转移的可能作用机制.方法:Cell counting kit-8(CCK-8)法检测12,24,48 h的细胞生长抑制作用,流式细胞术检测不同浓度的重楼皂苷Ⅰ对HCT116细胞凋亡的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关因子Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白的表达.结果:重楼皂苷Ⅰ可抑制对HCT116细胞生长,呈一定的浓度、时间依赖性;可促进HCT116细胞凋亡,呈一定的浓度依赖性.与空白组、重楼皂苷Ⅰ低浓度组比较,重楼皂苷Ⅰ高浓度组Bax,剪切的半胱天冬酶-3蛋白(cleaved Caspase-3)蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),未剪切的半胱天冬酶-3(pro-Caspase-3)蛋白表达无明显变化.结论:重楼皂苷Ⅰ可抑制HCT116细胞生长,诱导HCT116细胞凋亡,且其诱导HCT116细胞凋亡的机制可能与其降低线粒体途径相关的细胞凋亡因子Bcl-2表达,升高Bax表达,并上调线粒体通路下游的Caspase-3蛋白相关.

  • 重楼皂苷Ⅰ通过线粒体碎裂诱导人肺癌NCI-H661细胞凋亡

    作者:陈舒怡;沈自尹;黄建华;舒琦瑾

    目的:研究重楼皂苷Ⅰ对人肺癌NCI-H661细胞凋亡的影响及机制.方法:WST-1法测定重楼皂苷Ⅰ对NCI-H661活性的影响,流式细胞术测定该药对NCI-H661凋亡的影响,Western Blot检测该药对Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2蛋白表达的影响,荧光显微镜观察该药对NCI-H661、大鼠皮质海马神经元线粒体形态的影响.结果:重楼皂苷Ⅰ抑制NCI-H661细胞增殖,呈剂量依赖与时间依赖性;该药诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性;该药干预后,Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2表达有逐渐减少的趋势,以Bcl-2作用为显著(P<0.05);该药物能快速导致线粒体碎裂.结论:重楼皂苷Ⅰ通过线粒体碎裂诱导NCI-H661凋亡.

  • 椒枝软胶囊的质量控制研究

    作者:蒋剑平;陈华;许家鸾;盛振华;宋康

    目的:建立椒枝软胶囊的质量控制标准.方法:采用薄层色谱法(TLC)法对椒枝软胶囊中的亚麻酸、重楼皂苷进行鉴别;采用高效液相色谱法( HPLC)法对椒枝软胶囊中的重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ进行定量测定.结果:在TLC谱图中能检出亚麻酸、重楼皂苷的特征斑点;HPLC法测得重楼皂苷Ⅰ在0.4908-4.908μg线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.42%,RSD为1.36%;重楼皂苷Ⅱ在0.4276-4.276μg线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为101.00%,RSD为1.52%.结论:该方法准确、灵敏,重现性好,能有效地控制椒枝软胶囊的质量.

  • HPLC法测定重楼克感滴丸中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的含量

    作者:杨培民;倪健;曹广尚

    目的:建立高效液相色谱法测定重楼克感滴丸中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的含量.方法:采用Kromasil C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(42:58),检测波长为203nm,流速1.0mL/min,柱温40℃.结果:重楼皂苷Ⅰ在0.465-4.185μg范围内线性关系良好(r=0.9999),重楼皂苷Ⅱ在0.236-2.124μg范围内线性关系良好(r=0.9999).重楼皂苷Ⅰ的平均加样回收率为99.56%( RSD=1.93%),重楼皂苷Ⅱ的平均加样回收率为99.64%(RSD=1.90%).结论:该方法简便、快速、准确,可用于重楼克感滴丸的质量控制.

  • 康咳灵合剂中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ含量测定

    作者:彭敏;石美琴;童晓东;杨水英;许彦

    目的 测定康咳灵合剂中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ的含量.方法 采用HPLC,色谱柱为Poroshell 120 Ec-C18柱(4.6 mm×150 mm,4 μm),以乙腈(A)-水(B)作为流动相进行梯度洗脱,检测波长为210 nm,流速为1 mL/min,柱温为30 ℃. 结果 重楼皂苷Ⅰ在1.009~10.09 μg(r=0.9996)范围内线性关系良好,平均回收率为97.31%(RSD=2.05%,n=6);重楼皂苷Ⅱ在0.6405~6.405 μg(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均回收率为96.41%(RSD=1.67%,n=6).结论 本方法简便、重复性好,结果准确,可用于测定康咳灵合剂中重楼皂苷的含量.

  • HPLC测定彝肤软膏中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量

    作者:蒲友明;张艺;古锐;赖先荣;杜娟;李仁超

    目的:建立同时测定彝肤软膏中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ高效液相色谱分析方法.方法:采用高效液相色谱法对彝肤软膏中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ同时进行含量测定:Hypersil ODS2(4.6 mm×150 mm,5 μm);预柱:IBBM-612111,C-18柱芯;乙腈-0.02%磷酸(43∶57)为流动相,流速1 mL·min-1,检测波长203 am,柱温40℃.结果:重楼皂苷Ⅰ在0.102 4~3.2 μg线形关系良好,r=0.999 8,平均回收率97.4%,RSD 1.8%(n=6);重楼皂苷Ⅱ在0.064~2.0 μg线形关系良好,r=0.999 9,平均回收率101.4%,RSD 1.0%(n=6).结论:本方法准确可靠、重复性好,能有效控制该制剂的质量.

  • HPLC测定复方岩连片重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ的含量

    作者:宋晓宁;许乾丽;茅向军

    复方岩连片由石吊兰、重楼、板蓝根、百部、和杠板归5味药材组成,功效为清热解毒,化痰止咳.用于上呼吸道感染引起的感冒咳嗽,急慢性支气管炎,咽喉炎,扁桃体炎等.

  • 一种简易的用于检测细胞凋亡的微流控芯片分析技术

    作者:李远;肖文海;廖娟;刘严;米永华

    目的 针对微流控芯片的加工、细胞培养及细胞响应分析发展一套易于被普通生物学实验室实施的微流控芯片细胞分析技术,以天然抗癌药物重楼皂苷Ⅰ促人肺癌细胞A549凋亡作用分析对该技术进行验证.方法 微流控芯片加工采用了基于感光干膜的软光刻工艺;微流控芯片结构设计为储液池加直微通道,通过ANSYS软件对芯片的流体动力学行为进行分析;细胞培养采用间歇式细胞动态培养技术;重楼皂苷Ⅰ对A549细胞的促凋亡作用通过细胞形态学改变、活/死细胞荧光染色及乳酸脱氢酶(LDH)释放进行定性和定量分析.结果 感光干膜软刻工艺加工微流控芯片简单易行;储液池加微通道结构的微流控芯片适合各类贴壁细胞培养;形态学和荧光染色实验提示重楼皂苷Ⅰ具有促A549细胞凋亡作用,且促凋亡效率与浓度呈正比关系;微流控芯片上LDH释放定量分析结果与传统96孔板实验结果吻合.结论 该文展示的技术操作简单、低试剂消耗,能实现定性和定量分析相结合,可在无相关微流控技术经验的生物医学实验室中推广使用.

  • 大孔树脂技术纯化重楼中皂苷单体的工艺研究

    作者:曲丽萍;王飞飞;马骁;袁永雷;李振彪

    目的 研究用12种不同型号大孔树脂富集纯化重楼中重楼皂苷Ⅱ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷I的佳工艺.方法 采用HPLC法测定重楼皂苷Ⅱ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ的含量, 比较在12种不同型号大孔树脂下3种单体的静态吸附量和解吸率, 并根据动态吸附和解析实验, 确定佳的吸附洗脱工艺.结果 ADS-17树脂对3种重楼皂苷单体的吸附能力和解吸率较强, 40%乙醇用于除杂, 洗脱8个柱体积, 90%乙醇用于富集皂苷单体, 洗脱15个柱体积, 浸膏得率为14.6%, 浸膏中重楼皂苷Ⅱ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ的含量分别为64.14、9.50、108.37 mg·g-1, 转移率分别为87.67%、91.63%、93.98%.结论 该工艺能有效富集纯化重楼中重楼皂苷Ⅱ、纤细薯蓣皂苷和重楼皂苷Ⅰ.

  • 黑籽重楼化学成分及其抗肿瘤活性研究

    作者:景松松;王颖;李雪娇;李霞;黄璐琦;肖培根;高文远

    目的 研究黑籽重楼Paris thibetica根状茎的化学成分及其抗肿瘤活性.方法 综合运用正相硅胶、Sephadex LH-20、ODS-C18等柱色谱以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱学方法进行结构鉴定.采用MTT法研究化合物的体外抗肿瘤活性.结果 从黑籽重楼根状茎的乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为重楼皂苷Ⅴ(1)、重楼皂苷Ⅰ(2)、重楼皂昔Ⅱ(3)、重楼皂苷Ⅵ(4)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、重楼皂苷H(6)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、重楼皂苷Ⅶ (8)、parisyunnanoside G(9)、trikamsteroside E(10)、豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(11)、β-谷甾醇棕榈酸酯(12)、β-香树脂醇(13)、4-羟基-5-甲基呋喃-3-羧酸(14).结论 所有化合物均为首次从黑籽重楼中分离得到,化合物10、12~14为首次从重楼属植物中分离得到.化合物1~8对人肝癌细胞BEL-7402有细胞毒活性,其中化合物3活性好,IC50为0.48μmol/L.

  • UPLC-ELSD法同时测定重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ

    作者:韩燕全;洪燕;夏伦祝;左冬;姜蕾;罗欢

    目的 建立同时测定重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的超高效液相色谱-蒸发光散射(UPLC-ELSD)分析方法.方法 采用Waters Acquity UPLC H-Class色谱系统,ELSD检测器,BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-水,以体积流量0.45 mL/min进行梯度洗脱,柱温30℃.结果 被测成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r>0.999 5);平均回收率在98.36%~100.11%,RSD≤1.56%.结论 UPLC法分离效果及重现性好,且快速、简便,可作为重楼的质量控制方法.

  • pH依赖型重芪结肠靶向微丸的制备及体外释放性能的评价

    作者:刘天易;王信;杨田义;曹广尚

    目的 制备pH值依赖型重芪结肠靶向微丸,并对其进行体外释放性能评价.方法 采用正交试验法优选微丸的挤出-滚圆法制备工艺参数;采用流化床进行微丸包衣;采用单因素法考察包衣液处方;以重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ为指标,进行体外释放性能评价.结果 挤出-滚圆法制备pH值依赖型重芪结肠靶向微丸的佳工艺参数为挤出速率为60 r/min,滚圆速度为1 200 r/min,滚圆时间为5min;微丸包衣处方为Eudrugit S100增重15%,单硬脂酸甘油酯用量1.5%,柠檬酸三乙酯用量为5%;体外释放度实验表明,pH值依赖型重芪结肠靶向微丸在人工胃液中2h几乎不释放,在人工小肠液中4h累积释放度<10%,在人工结肠液中2h累积释放度>90%.结论 pH值依赖型重芪结肠靶向微丸制备工艺合理可行,具有良好的体外结肠释药特征.

  • HPLC-DAD变波长法同时测定博尔宁胶囊中12种指标成分

    作者:孙立伟;陈博年;姜镕;周慧;李金铎;王斌;马春华;吕远;穆宁

    目的 建立HPLC-DAD波长切换联合梯度洗脱法同时测定博尔宁胶囊中12种指标成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷、澳洲茄碱、澳洲茄边碱、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅰ、特女贞苷、迷迭香酸、大黄酸、大黄酚和大黄素的量.方法 采用HPLC-DAD法,Atlantis T3 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,体积流量0.8 mL/min,梯度洗脱;变波长扫描;进样量为20 μL.结果 12种指标成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷、澳洲茄碱、澳洲茄边碱、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅰ、特女贞苷、迷迭香酸、大黄酸、大黄酚和大黄素分别在1.97~19.70 μg/mL(r=0.999 2)、1.022~10.220 μg/mL(r=0.999 3)、0.982~9.820 μg/mL(r=0.999 1)、1.1~11.0 μg/mL(r=0.999 6)、1.154~11.540 μg/mL (r=0.999 8)、1.114~11.140μg/mL (r=0.999 5)、1.102~11.020 μg/mL (r=0.999 3)、2.768~27.680μg/mL (r=0.999 3)、3.04~30.40 μg/mL (r=0.999 6)、3.379~33.790 μg/mL (r=0.999 5)、3.286~32.860 μg/mL(r=0.999 4)、3.507~35.070 μg/mL (r=0.999 7)质量浓度与峰面积具有较好的线性关系;精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%;平均加样回收率和相应的RSD分别为100.08%、1.27%;98.11%、1.15%;99.68%、1.13%;101.38%、0.87%;101.87%、0.95%;100.53%、0.74%;98.52%、0.83%;99.52%、0.88%;97.84%、1.33%;98.31%、0.71%;99.66%、0.57%;101.73%、1.41%.12批次供试品中12种指标成分质量分数分别为0.085~0.118 mg/g、0.065~0.085 mg/g、0.051~0.075 mg/g、1.822~1.888 mg/g、1.532~1.599 mg/g、1.027~1.148 mg/g、2.420~2.621 mg/g、6.428~6.937 mg/g、0.258~0.289 mg/g、0.122~0.143mg/g、0.159~0.184 mg/g、0.222~0.273 mg/g.结论 建立的HPLC-DAD波长切换联合梯度洗脱法同时测定博尔宁胶囊中的12种成分,方法操作简便、快速、准确,可作为博尔宁胶囊全面可靠的质量控制方法.

  • HPLC法测定青贯解毒颗粒中去甲氧基荚果蕨素、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ

    作者:晏明英;魏谭军;肖成;熊永爱

    目的:建立 HPLC 法同时测定青贯解毒颗粒中去甲氧基荚果蕨素、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ。方法采用 Agilent Zorbax SB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相 A:甲醇–乙腈(2∶1),流动相 B:水,采用梯度洗脱;0~32 min 时在298 nm 波长下检测去甲氧基荚果蕨素,32~75 min 在203 nm 波长下检测重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ;体积流量:0.9 mL/min;进样量:20μL。结果去甲氧基荚果蕨素、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ分别在4.14~82.80μg/mL(r=0.9999)、3.80~76.00μg/mL(r=0.9995)、4.94~98.80μg/mL(r=0.9998)、7.57~151.40μg/mL (r=0.9997)与峰面积具有较好的线性关系。平均回收率分别为99.26%、97.62%、98.27%、98.90%,RSD 值分别为0.87%、1.39%、1.14%、1.15%。结论建立的 HPLC 法同时测定青贯解毒颗粒中去甲氧基荚果蕨素、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ,方法操作准确、简便,可作为青贯解毒颗粒的质量控制方法。

  • 重楼皂苷Ⅰ抑制肺腺癌A549细胞侵袭转移作用机制研究

    作者:牟海军;赵丹;石寒冰;毕红霞;姜云飞;刘国华

    目的:通过研究重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞侵袭转移能力及MMP2、E-cad表达的影响,探讨重楼皂苷Ⅰ抑制肺腺癌A549细胞侵袭转移的作用机制.方法:①应用CCK8法检测重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞增殖的影响.②应用Transwell及细胞划痕实验检测重楼皂苷Ⅰ对人肺腺癌A549细胞侵袭转移能力的影响.③应用Western blot、Qrt-PCR检测重楼皂苷Ⅰ对肺腺癌A549细胞MMP2、E-cad表达的影响.结果:①细胞增殖实验结果表明浓度为0.25、0.5、1、2、4、8、16 mg/L重楼皂苷Ⅰ对肺腺癌A549细胞增殖的抑制率分别为(2.10±1.2)%、(11.98±2.4)%、(24.32±3.5)%、(38.76±4.3)%、(49.25±4.9)%、(62.55±5.3)%、(83.85±6.4)%,各抑制率比较差异有统计学意义(P<0.05);并且随着剂量的增加抑制率升高,抑制率与剂量呈正相关,具有量效关系.②Transwell及细胞划痕实验结果表明不同浓度的重楼皂苷Ⅰ与空白对照组比较,划痕愈合距离缩短,穿过的细胞数量减少,具有抑制细胞侵袭转移的能力,随着剂量的增加,抑制作用增强,各组比较差异有统计学意义(P<0.05).③Western blot、Qrt-PCR实验结果表明不同浓度的重楼皂苷Ⅰ与空白对照组比较,MMP2表达降低,E-cad表达升高,随着剂量的增加,变化幅度增大,各组比较差异有统计学意义(P<0.05),说明重楼皂苷Ⅰ可以下调MMP2表达,上调E-cad表达,并且有量效依赖关系.结论:重楼皂苷Ⅰ具有抑制肺腺癌A549细胞侵袭转移的能力,作用机制可能为通过下调MMP2的表达、上调E-cad的表达实现.

  • 基于DLEC1基因表观遗传学调控探讨重楼皂苷Ⅰ的抗卵巢癌作用

    作者:贾萍;龙方懿;王华飞;卿轶;何梦婕;王婷

    目的 通过基于DLEC1基因表观遗传学调控探讨重楼皂苷Ⅰ抗卵巢癌作用及其分子机制.方法 MTT法检测不同浓度重楼皂苷Ⅰ(5、10、15与20 μmol/L)对卵巢癌SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR及Western blot法检测重楼皂苷Ⅰ对SK-OV-3与OVCAR-3细胞DLEC1表达的影响;RNAi技术及MTT法检测DLEC1基因对重楼皂苷Ⅰ抑制SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖作用的影响;甲基化特异性PCR及甲基化DNA免疫沉淀-qPCR技术检测重楼皂苷Ⅰ对SK-OV-3及OVCAR-3细胞中DLEC1基因启动子甲基化的影响.结果 重楼皂苷Ⅰ可显著抑制SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖(P<0.05),且具有一定的浓度依赖性;可显著上调SK-OV-3及OVCAR-3细胞中DLEC1基因mRNA转录及蛋白的表达水平(P<0.05);可显著增强SK-OV-3及OVCAR-3细胞中DLEC1基因启动子的去甲基化作用(P<0.05).同时,下调DLEC1表达可明显减弱重楼皂苷1对SK-OV-3及OVCAR-3细胞增殖抑制作用(P<0.05).结论 重楼皂苷Ⅰ可通过表观遗传学调控对DLEC1基因启动子发挥去甲基化作用,进而诱导DLEC1的表达而发挥抗卵巢癌作用.

  • 重楼皂苷Ⅰ作用于人卵巢癌细胞株体外生物学效应研究

    作者:罗敏;顾琳慧;冯建国;林能明;苏丹;徐海燕;许雅思

    目的 探讨重楼皂苷Ⅰ(Polyphyllin I,P-I)对人卵巢癌细胞株SKOV3的体外生物学效应.方法 以不同浓度的P-I对SKOV3细胞作用不同时间后,分别应用CCK-8比色法和流式细胞术检测细胞体外增殖和周期改变,并用Hoechst 33258荧光染色法和AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡变化.结果 在一定浓度范围,P-I抑制SKOV3细胞体外生长增殖呈明显的量-效关系,与对照组比较差异具有明显统计学意义(P<0.01);P-I在SKOV3细胞分裂周期的G0/G1期具有高度作用敏感性;P-I明显诱导SKOV3细胞发生凋亡.结论 P-I可能是通过干扰人卵巢癌细胞株DNA合成,抑制其生长增殖,并诱导凋亡,从而起到抗卵巢癌的作用.

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