首页 > 文献资料
-
玉郎伞多糖对快速老化小鼠额叶、海马神经元丢失和Tau蛋白磷酸化的影响
目的:研究玉郎伞多糖(YLSP)对快速老化模型小鼠(SAMP8)额叶、海马神经元丢失和Tau(Ser202)异常磷酸化的影响.方法:选择6月龄SAMP8,随机分为模型组,石杉碱甲组(0.02 mg· kg-1),YLSP低、高剂量组(45,180 mg·kg-1),选择6月龄正常老化小鼠(SAMR1)作为对照组,以上各组每日上午灌胃给药1次,连续40 d,于末次给药的次日采用尼氏染色方法检测额叶和海马神经元缺失率；应用免疫组织化学方法检测额叶和海马Tau(Ser202)磷酸化水平.结果:模型组额叶、海马神经元缺失率分别为(46.4±8.4)％,(45.5±7.2)％.与模型组相比,石杉碱甲组(35.8±6.7)％,(34.2±5.6)％、YLSP低、高剂量组(35.1±6.4)％,(36.0±4.5)％,(25.6±6.6)％,(26.7±6.1)％额叶、海马神经元缺失率明显降低(P＜0.05或P＜0.01)；模型组额叶、海马pSer202阳性细胞数(92.2±10.7),(98.6±11.4)个较对照组明显升高(12.3±2.1),(15.5±2.6)个(P＜0.01),与模型组相比,石杉碱甲组(48.5±6.4),(56.1±3.3)个、YLSP低、高剂量组(60.7±7.5),(65.9±8.0)；(50.9±5.1),(53.6±6.7)个的额叶、海马Tau(pSer202)阳性细胞数明显降低(P＜0.01).结论:YLSP降低Tau蛋白异常磷酸化,减少脑部神经元缺失.
-
覆盆子有效部位改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆作用机制研究
目的:考察覆盆子有效部位对D-半乳糖联合氢化可的松造成肾阳虚型痴呆大鼠的影响,初步阐明覆盆子有效部位改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆的作用机制.方法:大鼠ip D-半乳糖125 mg·kg-1,连续6周,后2周im氢化可的松混悬液25 mg· kg-1,造成肾阳虚痴呆模型,空白组和模型组灌胃生理盐水,其余各组每天均预防性灌胃覆盆子氯仿部位或乙酸乙酯部位高、低剂量(均按生药量计为24,12 g·kg-1),连续4周.进行历时5d的Morris水迷宫实验后,取大鼠皮层进行乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)和胆碱乙酰化转移酶(choline acyltransferase,ChAT)活性检测、取海马CA1区进行HE染色和tau蛋白免疫组织化学检测.结果:与空白组相比,模型组学习记忆能力下降,皮层AchE活性显著升高,ChAT活性显著降低,海马CA1区Pser404-tau阳性细胞明显增加;与模型组比较,覆盆子氯仿部位高、低剂量组、覆盆子乙酸乙酯部位高、低剂量组均能不同程度改善痴呆大鼠学习记忆能力,降低皮层AchE活性,升高ChAT活性;增加海马CA1区细胞总数,减少坏死细胞数,降低细胞坏死率;减少海马CA1区Pser404-tau阳性细胞数.结论:覆盆子有效部位可能通过降低AchE活性,升高ChAT活性,保护海马CA1区神经元,减少tau蛋白表达而起到改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆.
-
补肾化痰益智方对APPV717I小鼠学习记忆能力和海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响
目的:观察补肾化痰益智方(BSHT)对APPV717I转基因小鼠干预效果,揭示其可能作用机制.方法:将3月龄APPV717I转基因小鼠120只分为2批,每批60只,每批又随机分为5组,分别为多奈哌齐(0.00092 g·kg-1·d-1)组,补肾化痰益智方低、中、高剂量组(5.2,10.4,20.8 g·kg-1·d-1),模型组(APP),每组12只(雌雄各半);同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠24只作为正常组,灌胃给药,模型组及正常组予等容积双蒸水灌胃,每日1次.第1批小鼠给药8个月,第2批给药4个月,后同时以Morris水迷宫进行行为学检测,分别以酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫印迹法测定(Western blot)海马神经元Tau蛋白磷酸化(p-Ser 199/202,Tau-1)的表达水平.结果:行为学实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠的潜伏期有所延长(P＜0.05,P＜0.01);各治疗组与模型组比潜伏期明显缩短(P＜0.05).ELISA和Western blot实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠海马神经元的Ser199/202磷酸化位点磷酸化程度显著升高(P＜0.01);各治疗组Ser199/202磷酸化位点磷酸化水平较模型组比明显缩短(P＜0.05,P＜0.01).结论:补肾化痰益智方可以改善Ser199/202磷酸化位点磷酸化程度,防止神经原纤维缠结(NFT)的形成,从而改善APPV717I转基因小鼠早期的学习记忆能力.
-
黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠学习记忆能力及脑内Alzheimer病样tau蛋白磷酸化途径的影响
目的:探讨黄连解毒汤对2型糖尿病(T2DM)大鼠认知功能及脑内Alzheimer病样tau蛋白磷酸化途径的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠72只,随机分为6组,分别为空白组、模型组、罗格列酮组、黄连解毒汤低、中、高剂量组(1.5、3、6g/kg).通过高糖高脂饮食及小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM模型.除空白组、模型组给予等容积的蒸馏水,其他治疗组以相应药物治疗.8周后,采用Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力,Western blotting法检测大鼠大脑皮层tau蛋白在不同位点的磷酸化水平.结果:黄连解毒汤可缩短T2DM模型大鼠平均逃避潜伏期(P＜0.01),增加逃逸平台次数(P＜0.05)、延长有效区停留时间及有效区游泳路程(P＜0.05,P＜0.01),有效抑制模型大鼠脑组织tau蛋白在Ser199、Ser202、Thr231、Ser396等多位点的磷酸化程度(P＜0.05,P＜0.01).结论:黄连解毒汤能够有效改善T2DM模型大鼠学习和记忆能力,可在tau蛋白多位点上抑制其过度磷酸化水平.
-
远志皂苷通过UPP通路清除AD大鼠脑神经细胞代谢废物积聚的作用机制研究
目的 探讨远志皂苷(tenuigenin,TEN)对AD大鼠脑内β淀粉样蛋白(amyloid β protein,Aβ)沉积、异常磷酸化Tau浓度积聚的清除作用及其作用机制.方法 大鼠右侧海马CA1区注射Aβ1-40建立AD模型,透模成功的大鼠分为模型组、TEN低、中、高剂量组,并用远志皂苷(18.5、37.0、74.0 mg/kg)对大鼠进行灌胃治疗,另设假手术组;免疫组织化学法观察大鼠脑海马神经元中Aβ1-40 、Tau p-Ser262蛋白的表达;Western blot检测大脑神经元中泛素蛋白(ubiquitin,Ub)和泛素连接酶E3(ubiquitin-protein ligase E3)的表达水平.ELISA法检测大脑神经元中26S蛋白酶体的含量.结果 免疫组化显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元中Aβ、Tau p-Ser262蛋白阳性反应的神经元数量显著增多(P＜0.01);Western blot检测显示,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中Ub表达水平上调,而E3表达下调(P＜0.01).ELISA检测显示,AD大鼠脑内的26S蛋白酶体含量显著减少(P＜0.01).与模型组比较,TEN各组大鼠海马神经元中Aβ1-40、Tau p-Ser262和Ub表达水平下降明显,泛素连接酶E3表达水平和26S蛋白酶体含量也明显升高,以37.0 mg/kg和74.0 mg/kg剂量组效果佳(P ＜0.05,P＜0.01).结论 UPP通路参与了AD的发生过程,远志皂苷能明显降低AD大鼠脑内Aβ1-40沉积和tau异常磷酸化水平.
-
糖尿病脑病机理的再探讨及APP17肽的作用
目的 检测糖尿病小鼠脑内Tau蛋白不同位点的磷酸化状态及β淀粉样肽表达的改变，进一步探讨糖尿病脑病的机理并观察APP17肽的作用。 方法 用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型，并皮下注射APP17肽进行保护。4周后，取小鼠脑组织做BT-2、Rllle免疫组织化学染色。另一部分小鼠断头取脑，分离海马，做Tau-1、AT-8、Aβ1-16和管蛋白(tubulin)抗体蛋白免疫印迹。 结果 糖尿病小鼠脑海马神经元内正常Tau蛋白含量减少，Tau蛋白192/202位点及194/198位点过度磷酸化，而Thr231和Thr181位点未被磷酸化；管蛋白的表达明显减少，而APP的表达则增多。用APP17肽对糖尿病小鼠进行保护后，Tau蛋白的磷酸化程度降低，APP和Tubulin的表达恢复到接近正常水平。 结论 糖尿病小鼠脑内Tau蛋白过度磷酸化、tubulin表达减少，微管结构受损，同时APP表达增加造成Aβ含量增多，引起神经元损害。对糖尿病小鼠应用APP17肽使Tau保持磷酸化程度、APP及tubulin表达接近正常，因此，APP17肽在防止神经元变性方面有重要意义。
-
Cdk5/p35抑制剂高通量筛选方法的建立及应用
目的:建立适于高通量筛选的Cdk5/p35抑制剂筛选模型.方法:Cdk5/p35与其底物Histone H1反应时需消耗ATP,通过测定体系中ATP的剩余量,考察ATP浓度、酶浓度、底物浓度、反应温度、反应时间及体系pH等因素对酶促反应的影响,进而确定酶与底物反应的佳条件,并采用Z'因子评价该模型的可靠性和可行性.应用已建立的Cdk5/p35抑制剂高通量筛选模型筛选和发现活性化合物.结果:反应体系的佳反应条件为:ATP终浓度3μmol·L-1,Cdk5/p35终浓度30 nmol· L-1,Histone H1终浓度70 μmol·L-1,孵育温度37℃,孵育时间60 min,体系pH 7,Z'-因子为0.66.应用该模型对222个虚拟筛选挑选出的化合物进行筛选,发现了13个对Cdk5/p35抑制活性较好的化合物.结论:实验结果表明,该模型具有稳定、灵敏、高效等特点,可用于Cdk5/p35抑制剂的高通量筛选.该模型的建立,为Cdk5/p35抑制剂的发现以及Cdk5/p35调控AD的机制研究奠定基础.
关键词： 阿尔茨海默病 Cdk5/p35抑制剂 Tau蛋白磷酸化 高通量筛选 -
葡萄糖转运蛋白1在阿尔茨海默病中的作用研究进展
阿尔茨海默病(AD)是老年人常见的痴呆类型,其发病率呈逐年增长趋势,目前发病机制尚未完全阐明,亦无有效的预防及治疗措施.葡萄糖转运蛋白1 (GLUT1)是主要在血脑屏障内皮细胞表达的葡萄糖转运体,介导血液葡萄糖顺浓度梯度跨血脑屏障转运至脑组织,为脑组织细胞提供代谢所需能量.研究表明,GLUT1在AD患者血脑屏障内皮细胞表达减少,可能与AD发病机制及病理损害有关,笔者通过查阅近年来相关研究文献,系统总结了GLUT1在血脑屏障完整性破坏、Aβ清除障碍、Tau蛋白过度磷酸化等多个AD病理过程中的作用研究进展,以期为进一步探索GLUT1在AD中的确切作用机制实验研究提供参考.
-
Tau蛋白高度磷酸化致阿尔茨海默病动物模型研究进展
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年人中常见的神经退行性疾病,以过度磷酸化tau蛋白为核心形成的神经原纤维缠结为AD的主要病理特征之一.近年来对tau蛋白磷酸化的研究备受关注.在AD的实验研究中,探索理想的AD动物模型对于明确AD的病因、发病机制及药物的研发等方面起关键作用.本文对Tau蛋白磷酸化致AD主要动物模型的研究进展进行了综述,包括Tau转基因动物模型、激酶和磷酸化酶系统失衡致Tau蛋白过度磷酸化损伤模型、降低Tau蛋白糖基化致Tau过度磷酸化模型等.
-
二精丸有效部位对肾阴虚模型大鼠学习记忆障碍的影响及其分子机制
目的 探讨二精丸有效部位对肾阴虚模型大鼠学习记忆障碍的影响及其分子机制.方法 采用大鼠ig甲状腺素加im利血平方法制备肾阴虚模型,二精丸总黄酮和总多糖ig给药结束后Morris水迷宫法测定各组的学习记忆能力;采用酶联免疫法测定血清激素水平;采用免疫组织化学法测定海马部位Bcl-2和Bax表达及Tau蛋白异常磷酸化水平.结果 二精丸总黄酮和总多糖能显著提高模型大鼠的学习记忆能力;能显著恢复激素水平及海马区Bcl-2和Bax表达;能显著抑制海马区Tau蛋白Ser199/202、Ser396、Thr231三个磷酸化位点异常磷酸化.结论 二精丸总黄酮和总多糖能提高肾阴虚模型大鼠的学习记忆能力.
-
葛根素对老年大鼠学习记忆功能及海马内Tau蛋白磷酸化水平的影响
目的：探讨葛根素对老年大鼠学习记忆能力及大脑海马组织内tau蛋白磷酸化水平的影响及其防治老年性痴呆（ AD）的可能机制。方法采用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力，观察葛根素对老年大鼠学习记忆功能的影响，并采用免疫印迹和免疫组织化学法检测大鼠海马组织内tau－1、PS396、和tau－5的表达水平。结果与老年对照组相比，短期内葛根素组大鼠学习寻找隐蔽平台的成绩提高更为明显（ P＜0．01），其大脑海马内tau－1的表达也明显高于对照组，提示葛根素可降低老年大鼠海马内 Tau 蛋白在 Ser199／202位点的磷酸化水平（ P＜0．01）。结论葛根素可明显改善老年大鼠大鼠的学习和近期记忆能力，其机制可能与其降低tau蛋白磷酸化水平有关。
-
血糖波动对糖尿病大鼠海马Tau蛋白磷酸化的影响
目的 观察血糖波动对糖尿病大鼠海马Tau蛋白磷酸化(p-Tau)(ser202位点)的影响,探讨血糖波动对糖尿病大鼠海马Tau蛋白的影响及其分子机制的研究.方法 雄性SD大鼠随机数字表法分为正常对照组(NC组)、糖尿病组,糖尿病组大鼠腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg诱导成糖尿病模型后,随机数字表法分为2组:糖尿病血糖波动组(DF组),人为诱导血糖波动;糖尿病血糖持续组(DC组).NC组生理盐水腹腔注射.8周末,测各组大鼠体重、血糖、HbA1C、胰岛素,免疫组化法观察海马p-Tau(ser202)的表达,Western印迹和图像分析法检测海马p-Tau的表达,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测海马糖原合成激酶3β(GSK-3β)mRNA相对表达.结果 (1)血糖情况:DC组和DF组大鼠血糖波动大于NC组,2组每日血糖平均水平、每日平均血糖的标准差(SDBG)、大血糖波动幅度(LAGE)均较NC组明显升高,差异具有统计学意义(均P<0.05);与DC组相比,DF组SDBG、LAGE升高,差异具有统计学意义(均P<0.05),HbA1C含量、胰岛素水平差异无统计学意义(均P>0.05).(2)与NC组比,DC组与DF组大鼠海马p-Tau含量升高(均P<0.05),大鼠海马GSK-3βmRNA水平升高(均P<0.05);与DC组比,DF组大鼠海马p-Tau含量升高(P<0.05),大鼠海马GSK-3βmRNA水平升高(P<0.05).结论 糖尿病大鼠1天2次定时给予葡萄糖腹腔注射并错时给予胰岛素皮下注射能成功构建糖尿病血糖波动模型;血糖波动使糖尿病大鼠海马p-Tau水平显著增加,机制可能是上调GSK-3β 的表达.
-
早老蛋白-1过度表达对神经母细胞瘤NG-108的tau蛋白磷酸化的影响
目的 观察早老蛋白-1(Presenilin-1,PS1)的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响.方法 在NG-108细胞上转染不同的PS1质粒, 利用免疫双标,免疫印记, 免疫细胞化学,MTT,Western blot 等方法, 观察早老蛋白-1的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响.结果 免疫双标显示,在散发性AD(sporadic Alzheimer disease)患者脑内, PS1主要分布于神经元,并与磷酸化tau蛋白部分共存.免疫印迹显示, 与空质粒组相比,转染野生型PS1组和转染一种家族性AD(familial Alzheimer disease,FAD)突变型早老蛋白-1(mPS1)质粒组的NG-108细胞中磷酸化的tau蛋白均增加.MTT方法未检测到这两组的转染细胞与对照组有显著差异.用Confocal显微镜观察PS1-EGFP质粒转染组, 发现在转染后早期12 h,PS1-EGFP主要分布在细胞膜表面或细胞器上,随后PS1-EGFP主要在细胞浆中弥散分布.同时,免疫细胞化学检测显示,部分PS1-EGFP 转染细胞中有明显的tau蛋白磷酸化,并且这些磷酸化tau蛋白能与PS1-EGFP蛋白一起形成聚集体.在给予磷酸酯酶抑制剂岗田酸后, PS1-EGFP 转染细胞比未转染细胞含有更多的磷酸化的tau蛋白.结论 野生型PS1可能参与了散发性阿茨海默氏病中的tau蛋白的病理改变.
-
丝素肽对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制研究
探讨丝素肽对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其相关机制.建立Aβ25-35损伤SH-SY5Y细胞模型,并以丝素肽干预.MTT法检测丝素肽对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤的干预作用;Western blot检测丝素肽对Aβ25-35致神经元Tau蛋白多位点过度磷酸化的影响及其作用机制;DCFH-DA探针法检测丝素肽对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞胞内活性氧(ROS)异常升高的影响.结果表明,丝素肽可改善Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤.丝素肽可通过抑制GSK-3β活性、增强PP2A活性,改善Aβ25-35引起的神经元Tau蛋白异常磷酸化水平,提示丝素肽可通过调节Tau蛋白的磷酸化发挥神经保护作用.同时,丝素肽可降低Aβ25-35引起的SH-SY5Y细胞胞内升高的ROS水平,提示丝素肽还可通过调节氧化应激反应途径保护神经元.
-
氯化锂对冈田酸所致SK-N-SH神经元突触萎缩的保护作用
目的：考察氯化锂( LiCl)对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸( OA)诱导的SK-N-SH细胞分化神经元损伤的保护作用和tau蛋白Ser-262位点磷酸化水平的影响。方法利用全反式维甲酸( ATRA)诱导SK-N-SH细胞分化为成熟的神经元细胞；采用OA诱导成熟神经元细胞建立AD模型；采用磺酰罗丹明B( SRB)比色法考察LiCl对成熟的神经元细胞增殖的抑制作用；Giemsa染色观察SK-N-SH细胞形态学变化；并采用Image-Proplus软件测定神经元细胞的突触长度；采用Western blot检测synaptophysin蛋白和tau蛋白Ser-262位点磷酸化水平。结果10μmol · L-1 ATRA连续处理7 d,可诱导SK-N-SH细胞突触生长和synaptophysin蛋白表达等典型分化神经元的特征。20~100 nmol · L-1 OA作用于分化神经元,可浓度和时间依赖性抑制细胞增殖,同时致分化神经元突触萎缩, tau蛋白 Ser-262位点磷酸化水平也明显升高。10 mmol·L-1 LiCl预处理可维持synaptophysin蛋白高表达,抑制tau蛋白Ser-262位点磷酸化水平( P<0．01)。结论 LiCl能够改善 OA 所致分化神经元的突触损伤,并伴随着synaptophysin表达的升高、tau蛋白Ser-262位点异常磷酸化水平的降低。
-
人参皂苷对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸拟阿尔采末病细胞模型的影响
目的 探讨人参皂苷(ginsenoside,GS)对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA) 诱导拟Alzheimer病(AD)细胞模型神经细胞tau蛋白的磷酸化、微管、细胞凋亡和凋亡调节因子的影响.方法 GS与人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞预孵育24 h,弃去培养基, 然后用OA 10 nmol·L-1 与SK-N-SH细胞共孵育6 h;用倒置显微镜观察细胞形态的变化,激光共聚焦显微镜观察微管变化,Western blot方法观察磷酸化tau蛋白、凋亡因子Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达,用TUNEL法观察凋亡细胞的变化.结果 正常SK-N-SH神经细胞铺展良好,OA模型组细胞突起断裂,GS显示了细胞保护作用.通过激光共聚焦显微镜观察,正常SK-N-SH细胞微管粗壮、连续,而OA模型组微管断裂、消失;GS能够减少OA引起的微管破坏作用.OA模型组tau蛋白Ser-199/202和Ser-404位点磷酸化水平较正常对照组明显增高,非磷酸化水平较正常对照组明显下降;GS 50 mg·L-1和100 mg·L-1组使神经细胞tau蛋白Ser-199/202和Ser-404位点磷酸化水平较OA模型组明显下降,GS 50 mg·L-1和100 mg·L-1组的tau蛋白Ser202非磷酸化水平较模型组则明显升高;正常对照组未见凋亡细胞;OA模型组凋亡细胞明显增多,Bax和Caspase-3表达水平较正常对照组明显增高,Bcl-2水平明显下降;GS能够明显抑制OA诱导的细胞凋亡,减少Bax和Caspase-3表达.结论 人参皂苷对蛋白磷酸酶抑制剂OA所致的神经细胞病理变化有明显的保护作用,可能是通过抑制tau蛋白过度磷酸化,防止细胞凋亡来发挥作用的,提示该药在防治AD方面可能具有良好的应用前景.
-
沉默信息调节因子2同源蛋白1（SIRT1）与阿尔茨海默病研究进展
沉默信息调节因子2同源蛋白1（ SIRT1）激动可通过抑制β淀粉样蛋白沉积、tau蛋白磷酸化、炎症反应，调节突触可塑性，以及与Akt／蛋白激酶B通路共同作用，改善阿尔茨海默病（ AD）的认知功能障碍。该文就SIRT1与AD研究进展进行综述。
-
自噬在阿尔茨海默病发病中作用机制的研究进展
自噬是溶酶体介导的细胞自我处理系统，是细胞降解长寿蛋白质和功能受损的细胞器进行循环利用或维持细胞稳态的过程。阿尔茨海默病( AD)作为老年性痴呆的主要原因，其神经元内β淀粉样蛋白( Aβ)的积累导致变性和神经元凋亡，随之出现老年斑、Tau蛋白过度磷酸化及代谢障碍。自噬作为清除细胞内异常蛋白、细胞器及维持细胞稳态的细胞卫士，在AD的发生发展中有重要作用。自噬参与Aβ清除，促进Aβ降解，抑制Aβ异常聚集。同时自噬能促进Tau和磷酸化Tau的降解，自噬抑制能增加Tau的细胞毒性。轴突运输障碍影响自噬功能，轴突运输缺陷导致自噬小泡堆积和神经突起的炎性改变，影响自噬体的成熟和正常功能的发挥。
-
罗非昔布对阿尔茨海默病模型小鼠脑内tau蛋白表达的影响
目的 研究罗非昔布对tau转基因小鼠脑内磷酸化tau蛋白表达的影响.方法 实验小鼠分为对照组、AD模型组和罗非昔布治疗组,治疗组小鼠给予罗非昔布(2 mg·kg-1·d-1)饮水喂养处理6个月,对照组和模型组均给予正常饮用水.应用水迷宫实验方法检测三组小鼠的学习记忆能力;并应用免疫荧光和Western blot等实验方法检测磷酸化tau蛋白在三组小鼠脑内的表达情况.结果 Westem blot和免疫荧光结果显示AD模型小鼠脑内的tau蛋白磷酸化水平在Ser202和Ser404两个位点明显高于野生型小鼠,经罗非昔布干预6个月后,tau蛋白磷酸化水平较模型组降低;行为学实验结果提示罗非昔布治疗组小鼠在第3和第4天的平均潜伏期分别为(44.45±2.40)s和(36.7±3.09)s,搜索的平均路程分别为(1.55±0.17)m和(1.45±0.15)m,显著低于模型组小鼠的潜伏期和搜索的平均路程.结论 罗非昔布能够降低AD小鼠脑内的tau蛋白磷酸化水平,进而改善其学习记忆能力,提示罗非昔布在AD的临床治疗方面具有重要的理论意义.
-
多柔比星联合蛋氨酸脑啡肽对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的生长抑制及Tau蛋白磷酸化的调节作用
目的 探讨多柔比星联合蛋氨酸脑啡肽(Met-ENK)对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的生长抑制及Tau蛋白磷酸化的调节作用.方法 阳性对照组SH-SY5Y细胞以1.25 mg·L-1的多柔比星处理,低、中、高剂量实验组SH-SY5Y细胞分别以1.25 mg·L-1的多柔比星+10-7、10-5、10-3 mol·mL-1 Met-ENK处理,阴性对照组细胞以等量生理盐水处理.MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率,流式细胞术和Hoeschest 33258细胞核染色检测各组SH-SY5Y细胞凋亡情况,Western Blot法检测各组SH-SY5Y细胞p-Tau蛋白表达情况.结果 与阴性对照组比较,干预24、48、72 h后,阳性对照组和各实验组细胞存活率降低,且实验组低于阳性对照组,实验组细胞存活率随着Met-ENK浓度的增大逐渐降低(P<0.05).与阴性对照组比较,阳性对照组和各实验组细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例显著升高,中、高剂量实验组高于阳性对照组(P<0.05);阳性对照组和各实验组S期细胞比例显著降低,中、高剂量实验组低于阳性对照组(P<0.05).与阴性对照组比较,阳性对照组和各实验组细胞p-Tau蛋白相对表达量明显升高,中、高剂量实验组高于阳性对照组(P<0.05).结论 多柔比星联合Met-ENK可抑制神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞生长,并促进其凋亡,这可能与上调Tau蛋白磷酸化水平有关.
