首页 > 文献资料
-
疏肝益阳胶囊对动脉性勃起功能障碍大鼠TGF-β、NADPH表达的影响
目的:通过检测动脉性勃起功能障碍(AED)大鼠转化生长因子β(TGF-β)及还原型辅酶Ⅱ(NADPH)的表达,观察中药疏肝益阳胶囊改善AED血管平滑肌功能的分子机制.方法:选取3月龄成年雄性SD大鼠,采用双侧髂内动脉结扎法制造勃起障碍模型.设假手术对照组、模型组、西药西地那非组(10.5mg· kg-1·d-1)、疏肝益阳小剂量治疗组(0.5g· kg-1·d-1)、大剂量治疗组(1g·kg-1·d-1),灌胃给药30d.荧光定量PCR法检测海绵体组织TGF-3、NADPH mRNA表达,ELISA法检测血浆TGF-β含量.结果:模型组与假手术组比较,TGF-β和NADPH表达显著升高(P＜0.01);疏肝益阳治疗组与模型组比较,TGF-β和NADPH表达均显著降低(P＜0.05).结论:疏肝益阳胶囊对动脉性勃起障碍大鼠的血管平滑肌功能具有改善作用,而这种作用可能是通过调节氧化应激机制实现的.
-
L－02细胞中3－羟基－3－甲基戊二酰辅酶 A还原酶活性检测方法的建立及应用
目的：建立L－02细胞中3－羟基－3－甲基戊二酰辅酶A（ HMG－CoA）还原酶活性的检测方法。方法色谱柱：C18色谱柱，流动相：甲醇－水（20μmol? L－1磷酸二氢钾，pH 7．2）＝6∶94，检测波长：340 nm，柱温：25℃，流速：1 mL? min－1。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、稳定性。结果还原型辅酶Ⅱ线性范围为2．5～1000μmol? L－1，定量下限为0．5μmol? L－1，日内、日间 RSD 分别在（5～6）％和（4～8）％内，相对回收率在（96．97～99．57）％内。结论建立的L－02细胞中HMG－CoA还原酶活性检测方法符合实验要求，且可用于测定氟伐他汀对L－02细胞HMG－CoA还原酶活性的抑制作用。
-
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征及其相关高血压患者血浆还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽和血清还原型辅酶Ⅱ与氧化型辅酶Ⅱ水平的变化
目的 观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)及阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征相关高血压(OSAHAHT)患者血浆还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)及血清还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、氧化型辅酶Ⅱ(NADP~+)水平.探讨OSAHS患者氧化还原态的变化.方法 选择OSAHS患者39例,其中无并发症的OSAHS患者20例,OSAHAHT患者19例,;健康对照组19例,应用比色法和酶联免疫吸附法测定血浆GSH、GSSG,血清NADPH、NADP~+水平.结果 3组受检者血浆GSH、GSSG及血清NADPH、NADP~+水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),其中OSAHS患者与对照组比较,OSAHAHT与OSAHS患者组比较,血浆GSH/GSSG、血清NADPH/NADP~+比值均降低(P＜0.05),并且与反映睡眠呼吸暂停严重程度的指标均呈负相关(P＜0.05).结论 OSAHS患者存在GSH/GSSG、NADPH/NADP~+比值的变化,且与OSAHS的病情严重程度相关;氧化还原态的变化在OSAHAHT患者中更明显.
-
NADH对Aβ蛋白损伤PC12细胞转谷酰胺酶Ⅱ、Cyclin和G蛋白表达的调控
目的探讨NADH对PC12细胞Aβ25-35损伤后的修复作用.方法采用细胞实验检测NADH对Aβ25-35对鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞系细胞毒性作用的影响,并运用流式细胞仪对细胞周期蛋白、G蛋白和转谷酰胺酶Ⅱ含量进行分析.结果NADH能够明显抑制Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,上调细胞损伤后周期蛋白A和B1的表达及下调周期蛋白D1表达;上调G蛋白和转谷酰胺酶Ⅱ表达.结论NADH抑制和修复Aβ25-35对PC12的损伤与细胞周期蛋白、G蛋白和转谷酰胺酶Ⅱ调节有关.
-
高原红细胞增多症患者中性粒细胞[Ca2+]i及NADPH氧化酶活性变化
目的 观察高原红细胞增多症(HAPC)患者外周血中性粒细胞[Ca2+]i及NADPH氧化酶活性变化.方法 HAPC患者30例(HAPC组),世代居住的健康者29例(健康组),分离两组外周血中性粒细胞,两组细胞各添加fM-LP(终浓度为0、0.001、0.01、0.1、1、10 μmol/L)及PMA(终浓度为0、10、20、30、40、50 μmol/L)后,采用钙离子荧光探针(Fura-2/AM)法检测两组中性粒细胞内[Ca2+]i；ELISA法检测中性粒细胞NADPH氧化酶活性.结果 fMLP终浓度为0.1、1、10 μmol/L时,健康组中性粒细胞[Ca2+]i分别为(223.6 ±34.6)、(260.7 ±30.0)、(316.6 ±53.8) nmol/L;HAPC组分别为(203.2±25.6)、(235.5 ±35.9)、(278.1 ±47.1) nmol/L,两组比较,P＜0.05或＜0.01.fMLP终浓度为0.1、1、10 μmol/L时,健康组中性粒细胞NADPH氧化酶活性分别为(81.3±16.9)、(97.6±23.7)、(119.5 ±33.8)pmol/(10-6个细胞·30 min)；HAPC组分别为(72.0±16.9)、(83.6±15.3)、(102.9±26.3) pmol/(10-6个细胞·30min),两组比较,P＜0.05或＜0.01.PMA终浓度为30、40、50 μmol/L时,健康组中性粒细胞[Ca2+]i分别为(224.9±33.1)、(326.7 ±45.3)、(646.9 ±78.1) nmol/L;HAPC组分别为(205.5±26.3)、(293.9 ±52.6)、(567.9±103.1)nmol/L,两组比较,P ＜0.05或＜0.01.PMA终浓度为30、40、50 μmol/L时,健康组中性粒细胞NADPH氧化酶活性分别为(258.2±25.1)、(327.3 ±38.5)、(383.1±36.7)pmol/(10-6个细胞·30 min)；HAPC组分别为(213.8 ±36.3)、(291.3 ±50.5)、(337.2±36.0) pmol/(10-6个细胞·30 min),两组比较,P＜0.01.结论 高原缺氧降低人外周血中性粒细胞NADPH活性及[Ca2+]i浓度升高幅度.
-
和胃消痞胶囊对大鼠胃肠肌间神经丛一氧化氮合酶的影响
目的:研究和胃消痞胶囊对大鼠胃肠肌间神经丛一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨其作用机制.方法:采用隔日禁食的方法制作大鼠胃肠运动功能紊乱模型,以辅酶Ⅱ黄递酶组化染色法及消化道铺片技术显示大鼠胃及上段小肠纵肌层NOS阳性神经.结果:胃窦NOS阳性神经元灰度值模型组(模型组)低于正常对照组;和胃消痞胶囊大、小剂量组低于对照组,但高于模型组;中剂量组高于模型组及对照组;吗丁啉组低于模型组及对照组.胃底模型组及和胃消痞胶囊大、中剂量组均低于对照组;小剂量组及吗丁啉组高于对照组.上段模型组及和胃消痞胶囊小剂量组与对照组接近,大、中剂量组及吗丁啉组显著高于对照组.结论:和胃消痞胶囊可预防模型鼠胃窦动力紊乱;大剂量增加胃底NO合成,小剂量使胃底NO合成减少,对胃底容受性舒张功能有双向调节作用;大、中剂量可减少上段小肠NO合成,增强小肠蠕动功能.
-
紫外分光光度法体外筛选5α-还原酶抑制药
目的:从天然产物中筛选5α-还原酶抑制药用于前列腺增生(BPH)的治疗.方法:从SD雄性大鼠前列腺组织中提取5α-还原酶,以睾酮为底物,加入还原型辅酶Ⅱ(NADPH),加入天然产物提取物建立酶反应体系,在37℃连续孵育,采用分光光度法在340 nm波长处检测辅酶NADPH 10 min内吸光度值变化,以前列康醇提物和生理盐水分别为阳性对照和阴性对照,筛选5α-还原酶抑制药,并对其活性成分进行初步确定.结果:8种天然产物中,槟榔、地榆提取物对5α-还原酶有一定抑制作用,且地榆醇提液,槟榔水提液和醇提液酶抑制活性较强.结论:紫外分光光度法操作简单、经济可行,适用于5α-还原酶抑制药的初步筛选.
关键词： 5α-还原酶抑制药 紫外-可见分光光度法 还原型辅酶Ⅱ 天然产物 -
亚砷酸钠对雄性大鼠肺氧化损伤作用研究
目的：探讨亚砷酸钠（ NaAsO2）经饮水染毒对大鼠肺氧化损伤作用。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠，随机分为对照组和低、中、高剂量组，每组8只。3个剂量组大鼠自由饮用质量浓度分别为10.00、100.00和1000.00μg／L的NaAsO2溶液，对照组大鼠自由饮用超纯水。染毒28 d后处死大鼠，测定支气管肺泡灌洗液（ BALF）中白细胞总数和细胞死亡率，以酶联免疫吸附实验测定BALF中活性氧（ ROS）、还原型辅酶Ⅱ（ NADPH）、总抗氧化能力和一氧化氮（ NO）水平。结果中剂量组大鼠BALF中白细胞总数分别高于对照组和高剂量组（ P＜0.05）；高剂量组大鼠BALF中细胞死亡率分别高于对照组、低剂量组和中剂量组（ P＜0.01）。低、中和高剂量组大鼠BALF中ROS水平分别高于对照组（P＜0.01）；中、高剂量组大鼠BALF中NADPH水平分别高于对照组和低剂量组（P＜0.05）；中和高剂量组大鼠BALF中总抗氧化能力分别低于对照组（P＜0.01），但NO水平均高于对照组（ P＜0.05）。结论砷进入大鼠体内后可能是通过激活氧化酶NADPH使ROS高表达，进而使NO增多，造成组织氧化应激损伤。
-
糖尿病患者外周血白细胞磷酸戊糖途径代谢与呼吸爆发的关系
目的 观察2型糖尿病患者外周血白细胞磷酸戊糖途径(PPP)关键酶--葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)产量及呼吸爆发功能的变化,探讨糖尿病患者易感染的可能机制.方法 检测2型糖尿病患者外周血白细胞G6PD活性、NADPH含量,并通过检测白细胞活性氧(ROS)产量观察其呼吸爆发功能,研究白细胞外不同浓度糖环境对细胞呼吸爆发功能的影响.结果 与正常人比较,糖尿病患者外周血白细胞G6PD活性、NADPH产量及ROS含量均明显降低.结论 血糖控制不良引起糖尿病患者白细胞内PPP途径代谢紊乱,G6PD活性下降从而导致其白细胞呼吸爆发功能障碍,这可能是糖尿病患者易于感染的主要原因之一.
-
Fenofibrate 与 Apocinin 在脑缺血中神经保护作用的机制
目的：探讨Fenofibrate（ Feno）和Apocinin（ Apo）联合应用在脑缺血中的神经保护作用。方法在脑缺血动物模型中给予Feno（ Feno组）、Apo（ Apo组）及Feno＋Apo（ Feno＋Apo组）干预，以羧甲基纤维素钠（ CMC）为对照（ CMC组）。应用实时荧光定量PCR分析SOD1、2、3和NADPH的亚基NOX2 mRNA表达，检测SODs和NADPH oxisase酶活性改变以及ROS含量分析。结果与CMC组比较，Feno组、Apo组及Feno＋Apo组脑坏死面积均明显减小（P＝0.000），Feno组和Feno＋Apo组SOD1、2、3的mRNA及其SODs酶活性升高（P＝0.000）；Feno组、Apo组及Feno＋Apo组NOX2 mRNA表达以及NADPH oxisase 酶活性降低， ROS的含量减少（ P＝0.000）。结论 Feno通过促进SODs mRNA的表达和活性以及抑制NADPH oxidase mRNA的表达和酶的活性，而Apo仅通过抑制NADPH oxidase mRNA的表达和酶的活性以保护脑组织的缺血损伤，而两者联合应用不能够起到加强作用。
关键词： 脑缺血 Fenofibrate Apocinin 还原型辅酶Ⅱ 超氧化物歧化酶
