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MCP-1诱导人胃癌细胞NF-κB-p65的表达和核移位
目的 研究MCP-1对人胃癌细胞NF-κB-p65的表达和核移位的影响.方法 人胃癌细胞系SGC7901中加入MCP-1及其受体(CCR2)拮抗剂RS102895,应用Western blotting方法分别检测NF-κB-p65和p65-NLS(活性p65)蛋白的表达,同时应用免疫组化方法分别检测42例人胃癌石蜡包埋组织中MCP-1、NF-κB-p65和p65-NLS蛋白的表达.结果 MCP-1能显著上调人胃癌SGC7901细胞NF-κB-p65和p65-NLS蛋白的表达(P＜0.01),而RS102895预先处理能显著抑制MCP-1的上调效应(P＜0.01);人胃癌组织中MCP-1蛋白与NF-κB-p65和p65-NLS蛋白的表达显著相关(P均＜0.05).结论 MCP-1能显著诱导人胃癌细胞NF-κB-p65的表达和核移位,从而在NF-κB通路的活化过程中发挥作用.
关键词： 胃癌 单核细胞趋化蛋白-1 核因子-κB p65 -
麦考酚酸对翼状胬肉成纤维细胞作用的实验研究
目的 研究麦考酚酸(mycophenolic acid,MPA)对翼状胬肉成纤维细胞(pterygium fibroblasts,PFB)活性的影响,并对其相关机制进行探讨.方法 体外培养PFB,MTT比色法、Brdu掺入法观察MPA对PFB增殖的抑制作用,Western blot检测PFB内核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)P65及IκB-α蛋白的表达.结果 MTT比色法发现不同浓度的MPA和丝裂霉素C对PFB增殖均有抑制作用,差异均有统计学意义(均为P＜0.05),且呈时间、剂量依赖性,半数抑制浓度下48 h抑制率分别为(31.918 5±1.277 6)％、(31.123 5±1.582 6)％,72 h抑制率分别为(50.292 9±2.457 4)％、(47.972 9±0.614 2)％.Brdu掺入法发现不同浓度MPA组积分光密度值与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均为P＜0.05),进一步证实MPA可抑制PFB的增殖；Western blot显示,MPA可抑制PFB胞核内P65表达(与空白对照组表达量1.542 9±0.142 7相比,MPA组表达量仅为0.886 4±0.072 8),并能增加胞浆IκB-α的表达(空白对照组为1.559 2±0.267 6,MPA组为2.142 5±0.305 2).结论 MPA对PFB增殖有显著的抑制作用,其作用机制可能与其抑制PFB的NF-κB通路有关.
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麦考酚酸抑制翼状胬肉成纤维细胞的作用机制
背景 研究表明麦考酚酸(MPA)可下调或抑制与组织增生和炎症相关细胞因子的表达和分泌,进而抑制组织的增生和炎症反应.翼状胬肉是球结膜组织炎性和增生性病变,MPA对翼状胬肉组织的增生是否有抑制作用尚未见报道.目的 研究MPA对翼状胬肉组织成纤维细胞(PFBs)活性的影响,并对其相关机制进行探讨.方法 翼状胬肉切除术中获取的组织经组织块培养法体外培养PFBs,并采用波形蛋白抗体免疫组织化学法进行鉴定.将0、0.125、0.250、0.500、1.000 μmol/LMPA液加入培养孔中,未加入MPA液者作为对照.采用MTT比色法和5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法观察各组PFBs的生长情况；用Western blot法检测各组PFBs中核因子-κB(NF-κB)、p65及NF-KBα抑制剂(IκB-α)蛋白的表达.结果 培养的细胞为长梭形,呈漩涡状、放射状排列,波形蛋白表达阳性.MTT比色法检测表明,随着MPA浓度的增加,PFBs的增生值(A560)均逐渐下降,5个浓度组间PFBs增生值的总体比较差异有统计学意义(F=42.874,P＜0.01).随着MPA作用时间的延长,PFBs的增生值(A560)逐渐下降,差异有统计学意义(F=26.038,P＜0.01).BrdU 免疫荧光染色发现,随着MPA浓度的增加,PFBs DNA合成量(A560)逐渐下降,5个组间总体比较差异有统计学意义(F=175.279,P＜0.05),各浓度MPA组PFBs DNA合成量与对照组比较均明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).DAPI免疫荧光染色结果表明,各浓度的MPA作用后均未见PFBs的形态学异常.Western blot法检测显示,作用72 h后,MPA组p65表达量为0.886±0.072,明显低于对照组的1.542±0.124,MPA组PFBs细胞质IκB-α的表达量为2.141±0.305,明显高于对照组的1.559±0.267,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 MPA可抑制PFBs的生长,其作用机制可能与其抑制PFBs的NF-κB通路有关.
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NF-κB信号通路蛋白在木脂素对胃癌SGC-7901细胞抗增殖作用中的机制研究
目的 探讨NF-κB信号通路蛋白在木脂素对胃癌SGC-7901细胞抗增殖作用中的机制.方法 利用MTT、流式细胞术和Hochest染色、western blot方法检测木脂素对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、细胞周期和NF-κB信号通路相关蛋白p50和p65蛋白及bax和bcl-2蛋白表达的影响.结果 MTT结果表明,木脂可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,并具有浓度和时间依赖性(P ＜0.05或P＜0.01);流式细胞结果表明,木脂素促进细胞凋亡,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),具有浓度依赖性,并阻止胃癌SGC-7901细胞从G0/G1期进入S期;western blot结果,木脂素下调p65、p50和bcl-2蛋白的表达而上调bax蛋白的表达.结论 木脂素抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖和凋亡与NF-κB信号通路密切相关.
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复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变大鼠模型P65与IkB-a蛋白表达的实验研究
目的 研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变(PLGC)大鼠转录因子p65及其抑制因子IkB-a的影响,揭示其治疗PLGC的机制及效果.方法 将120只雄性大鼠随机分为A、B、C、D、E、F(空白对照组、模型对照组、复方蜥蜴散80目治疗组、100目治疗组、80目100目等量混合治疗组、维酶素治疗组)6组,采用MNNG以及情绪刺激等综合因素造模,造模成功后,各组大鼠均作相应处理后,应用免疫组化法检测p65、IkB-a在胃粘膜组织的表达及影响,并对实验结果进行统计分析.结果 各组与A组比较,B、C、D、F组p65、IkB-a阳性表达AOD值均降低,差异有显著意义(P＜0.01),E组AOD值则显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);各治疗组与B组比较,AOD值明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);复方蜥蜴散各治疗组(C、D、E组)与F组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),尤以E组AOD值低(P＜0.01),而复方蜥蜴散各治疗组比较,E组与C组、E组与D组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),C组与D组比较,则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 复方蜥蜴散不同微粒组合剂能抑制凋亡相关蛋白p65、IkB-a的表达,阻断并逆转了PLGC的病理改变.
关键词： 复方蜥蜴散不同微粒组合剂 PLGC MNNG p65 IKB-a -
川芎嗪对内毒素血症大鼠胸主动脉收缩性的影响
目的 观察川芎嗪对内毒素血症大鼠胸主动脉血管环对去甲肾上腺素收缩反应性的影响,并探讨血管平滑肌中iNOS、p65蛋白在其中的作用.方法 24只雄性SD大鼠分为四组:对照组、lps注射组、川芎嗪干预组、注射lps后川芎嗪治疗组.lps注射后6h,应用体外血管条张力测定技术检测各组大鼠胸主动脉环对不同浓度去甲肾上腺素的收缩反应;应用免疫荧光法检测大鼠胸主动脉血管平滑肌中p65及iNOS蛋白的表达.结果 与对照组相比,注射lps后大鼠胸主动脉血管环对去甲肾上腺素的收缩反应产生的张力显著降低;川芎嗪治疗后内毒素血症大鼠胸主动脉对去甲肾上腺素的反应性显著升高.内毒素血症大鼠胸主动脉血管平滑肌表达iNOS及p65蛋白较对照组显著升高,川芎嗪治疗后可抑制内毒素血症大鼠血管平滑肌中iNOS及p65蛋白的表达.结论 川芎嗪可增强内毒素血症大鼠血管对去甲肾上腺素的收缩反应性,这与川芎嗪降低血管平滑肌中iNOS及p65蛋白表达有关.
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NBD多肽预处理对局灶脑缺血再灌注大鼠脑内核因子-κB核转位活化的影响
目的 探讨NBD多肽预处理对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑缺血皮质细胞内核因子-κB活化的影响.方法 将SD健康雄性大鼠(280~300 g)共36只随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=15)、药物组(n=15).缺血模型制备前2 h经右侧侧脑室注射NBD多肽25 μl进行预处理.运用改良线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞再灌注大鼠模型.运用免疫组化检测再灌注后72 h NF-κB p65在胞浆/胞核的蛋白表达变化;运用免疫荧光定位及Western印迹(半定量)检测NF-κB p65及IκBα的蛋白表达情况.结果 免疫组化结果显示与假手术组比较,再灌注72 h模型组胞浆/胞核内NF-κB p65大量表达(P<0.05);NBD多肽预处理后NF-κB p65主要在胞浆表达,胞核内表达明显减少(P<0.05);免疫荧光双标定位及Western印迹半定量检测显示模型组胞浆/胞核内NF-κB p65蛋白均大量表达(P<0.05),IκBα蛋白呈现低表达(P<0.05);NBD多肽预处理后胞核内NF-κB p65蛋白表达明显减少,主要以胞浆表达为主(P<0.05),IκBα胞浆/胞核内表达显著增加(P<0.05).结论 局灶脑缺血再灌注72 h NF-κB p65蛋白胞核表达明显增加,NF-κB核转位/活化过程被激活;NBD多肽预处理后通过增加胞核/胞浆内IκBα表达有效阻止NF-κB的核转位/活化过程,从而有效地减轻再灌注后72 h局灶脑缺血再灌注对脑组织的损害.
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巨细胞病毒感染后雄鼠生殖细胞凋亡与睾丸NF-κB p65的表达研究
目的 研究鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对雄鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响,探讨睾丸组织核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)表达与生殖细胞凋亡的相关性.方法 建立小鼠睾丸MCMV感染模型,设立实验组与对照组,分别于感染不同时段(小鼠一个生精周期内),采用Hoechst33258染色法对小鼠睾丸组织生精小管及间质细胞进行凋亡检测,采用免疫组织化学SP法检测小鼠睾丸组织内NF-κB p65的表达.结果 睾丸间质细胞的凋亡率在MCMV感染的第1 天开始增多(P<0.05),第4~6 天达到高峰,第21 天、第38 天恢复正常.生精小管管周肌样上皮细胞的凋亡数在感染的第1 天开始增多(P<0.05),第6~9天达到高峰(P<0.001),第21 天、第38 天也恢复正常.生精细胞的凋亡数在感染的第2 天显著增加(P<0.05),第6 天达到高峰(P<0.001);第14 天起逐渐恢复正常.睾丸组织中NF-κB p65表达在MCMV感染第2 天起开始增加(P<0.05),感染的第6~9天增至高峰(P<0.001),随感染时间延长逐渐下降,第21~28天恢复正常.结论 MCMV急性感染可诱导睾丸生殖细胞凋亡,其凋亡程度与睾丸组织NF-κB p65表达呈正相关.提示NF-κB p65参与并调控了MCMV感染所致的生殖细胞凋亡,这可能是MCMV感染的致病机制及机体抵御MCMV感染机制之一.
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丹参酮ⅡA对压力负荷增加大鼠心肌纤维化的改善作用
目的:观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对压力负荷增加大鼠心肌纤维化的改善作用.方法:60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=8)和手术组(n=52),手术组均行腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加心肌纤维化模型,术后4周,存活的32只成模大鼠中8只留作模型组(Model组),余24只分为TanⅡA低剂量组(L-TanⅡA 组,10mg/Kg/天)、TanⅡA高剂量组(H-TanⅡA组,20mg/Kg/天)及阳性对照药物卡托普利组(Captopril组,100mg/Kg/天),每组8例.给药4周后,检测5组大鼠心肌肥厚指数和心肌组织形态、心肌羟脯氨酸(HYP)含量、心肌组织Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白含量.结果:与Sham组比较,Model组大鼠的心肌肥厚指数、心肌HYP含量及心肌组织中ROCK1、TGF-β1和NF-κB p65蛋白含量均显著升高(P均<0.01),组织病理学改变明显;与Model组比较,L-TanⅡA和H-TanⅡA组心肌肥厚指数、心肌HYP含量及心肌组织中ROCK1、TGF-β1和NF-κB p65蛋白含量均降低(P<0.05或P<0.01),组织病理学改变明显.结论:TanⅡA能改善压力负荷增加大鼠心肌纤维化,此作用可能与其抑制ROCK1表达,下调TGF-β1和NF-κB p65水平有关.
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Rnd3通过对p65的泛素化调节诱导胶质瘤细胞凋亡
目的 探讨Rnd3在胶质瘤细胞凋亡中的作用及机制.方法 通过Myc-Rnd3真核表达质粒转染,以Myc真核表达质粒转染作为对照,调控胶质瘤细胞株U251中Rnd3的表达;采用流式细胞术检测转染后U251细胞凋亡率;用Western blot技术检测细胞内Rnd3、p65、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)以及裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)的表达;以Flag真核表达质粒转染作为对照,通过Flag-p65真核表达质粒转染恢复p65表达后,用Western blot技术检测其下游bcl-2以及cleaved-Caspase-3蛋白的表达;Myc-Rnd3转染后,用MG-132抑制蛋白泛素化,检测细胞内p65蛋白表达.结果 经真核表达质粒转染后,Myc-Rnd3组细胞Rnd3蛋白表达量较Myc组显著提高(P＜0.05);Myc-Rnd3组细胞凋亡由U251-Myc组7.28％(5.36±0.1、1.92±0.12)增加至U251-Myc-Rnd3组的19.93％(13.51 ±0.32、6.42 ±0.21),细胞凋亡率明显高于Myc组,差异有统计学意义(P＜0.05);与U251-Myc组比较,U25 1-Myc-Rnd3组p65蛋白表达量降低,高表达的Rnd3使p65表达下调,进而引起bcl-2下调和cleaved-Caspase-3上调,差异有统计学意义(P＜0.05);逆转p65蛋白功能后(p65+,Rnd3-)组较(p65-,Rnd3-)组p65表达量升高(P＜0.05),bcl-2表达量升高(P＜0.05),cleaved-Caspase-3表达量降低(P＜0.05);(p65+,Rnd3+)组较(p65+,Rnd3-)组p65表达量差异无统计学意义;(p65-,Rnd3+)组较(p65-,Rnd3-)Rnd3表达量升高(P＜0.05),p65表达量降低(P＜0.05),bcl-2表达量降低(P＜0.05),cleaved-Caspase-3表达量升高(P ＜0.05);MG-132抑制细胞内蛋白泛素化途径结果显示,随着Rnd3蛋白表达量升高,p65蛋白表达量依次降低;而在MG-132处理组,随着Rnd3蛋白表达量升高,p65蛋白表达量差异无统计学意义.结论 Rnd3可能通过促进p65泛素化诱导U251胶质瘤细胞凋亡.
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阿司匹林对人骨肉瘤细胞MG63、 U2OS的生物学作用
目的 探讨阿司匹林对骨肉瘤细胞生长作用的影响及其机制.方法 培养人MG63和U2OS骨肉瘤细胞株,取不同浓度的阿司匹林处理骨肉瘤细胞后采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,取100 mmol/L阿司匹林处理后采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,取10、50、100 mmol/L阿司匹林处理24h后采用Western blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和p65表达水平变化.结果 0.1、1.0 mmol/L阿司匹林处理24h后对MG63和U2OS细胞增殖能力无显著作用(P＞0.05);与对照组比较,10 mmol/L(P＜0.05)、50 mmol/L(P＜0.05)、100 mmol/L(P＜0.01)、200 mmol/L(P＜0.01)的阿司匹林处理24 h后细胞增殖受到抑制,100 mmol/L阿司匹林抑制骨肉瘤细胞增殖能力具有时间依赖性;MG63和U2OS骨肉瘤细胞G2/M期细胞比例均高于对照组[(77.56±6.38)％、(79.12±10.66)％比(40.68±5.98)％、(41.54±6.17)％,P＜0.05];细胞早期凋亡(29.64％比2.49％,24.95％比2.62％,P＜ 0.01)和晚期凋亡(27.94％比7.05％,28.76％比8.49％,P＜0.01)细胞比例与对照组比较显著增加;10、50和l00mmoL/L阿司匹林处理组的Caspase-3蛋白表达明显强于对照组,而p65蛋白表达均弱于对照组,且随着阿司匹林浓度增加,Caspase-3和p65蛋白表达强度差异明显.结论 阿司匹林可能通过调控Caspase-3和p65促进骨肉瘤细胞凋亡.
关键词： 阿司匹林 骨肉瘤 脱噬作用 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 p65 -
p65小分子干扰RNA对THP-1细胞种植瘤生长及凋亡的影响
目的 探讨p65小分子干扰RNA (siRNA)对BALB/c-nude裸鼠体内THP-1细胞种植瘤生长及凋亡的影响及其机制.方法 将处于指数期生长的THP-1细胞(1×107个细胞/只)接种到BALB/c-nude裸鼠右腋皮下,建立THP-1细胞皮下种植瘤模型.随机分为3组:对照组、p65siRNA治疗组(每只每次2μg)、核因子-κB信号通路抑制剂Pathenolide(PN,每次10 μg/kg)治疗组,隔日1次,共2周.隔日测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测瘤组织中p65、核因子-κB抑制蛋白α(IκBα)的mRNA表达,免疫组织化学检测瘤组织中p65、IκBα的蛋白表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测瘤组织细胞凋亡.结果 (1)全部裸鼠于接种后7～10d成瘤,对照组肿瘤体积持续增大;p65 siRNA组、PN组中肿瘤于治疗的前5d内生长速度和对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),第6天后肿瘤生长速度明显减慢,以p65 siRNA组作用为明显;(2)对照组、p65 siRNA组、PN组瘤重量分别为(1.34 ±0.30)、(0.61±0.24)、(0.89±0.35)g,p65 siRNA组、PN组抑瘤率分别为54.56％、38.03％;(3)RT-PCR和免疫组织化学结果显示:p65 siRNA组、PN组中p65 mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.05),IκBα mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.05),以p65 siRNA组作用为显著(P＜0.05).(4) TUNEL检测结果提示:p65 siRNA组及PN组中瘤组织凋亡细胞的阳性率[(17.95±3.97)％、(10.29±2.74)％]显著增高(P＜0.05),以p65 siRNA组作用为明显(P＜0.05).结论 成功建立THP-1细胞种植瘤模型;p65siRNA可有效抑制THP-1细胞种植瘤的生长,并促进肿瘤细胞凋亡.
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β-连环蛋白在脂多糖诱导巨噬细胞炎性因子表达中的作用
目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)缺陷对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞炎性因子表达的影响及其机制.方法 分离培养野生型及β-catenin缺陷小鼠腹腔巨噬细胞,分为4组(n=5),β-catenin=/+、β-catenin--、β-catenin=/++LPS、β-catenin-/-+LPS组.Western blot检测巨噬细胞β-catenin表达及p65磷酸化水平的变化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6等炎性因子的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度.结果 β-catenin=/++ LPS组β-catenin蛋白表达(0.717±0.101)与β-catenin=/+组(0.524±0.091)比较增加,两组差异有统计学意义(P＜0.05);β-catenin-/-+LPS组与β-catenin+/++ LPS组比较TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA及细胞上清中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度都较β-catenin+/++ LPS组明显增高,两组差异有统计学意义(P＜0.05);β-catenin-/-+LPS组p65的磷酸化水平(0.9646±0.1510)比β-catenin+/++ LPS组(0.728 8±0.093 0)增加,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 β-catenin缺陷使LPS诱导巨噬细胞活化增加,促进炎性因子的分泌,其机制可能与β-catenin促进p65磷酸化,增加核因子-κB (NF-κB)的转录活性有关.
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重离子辐照对人舌鳞癌CAL27细胞的生物学效应及其分子机制
目的 研究重离子12C6+离子辐照对人舌鳞癌CAL27细胞的生物学效应以及分子机制.方法 应用不同剂量重离子束(12C6+)对体外培养的人舌癌CAL27细胞进行辐照,采用MTT、Transwell、流式细胞术、划痕实验、克隆实验观察重离子束(12C6+)对CAL27细胞迁移和侵袭、凋亡和周期的影响,Western blot法观察重离子束(12C6+)对CAL27细胞增殖的影响.结果 (1)重离子辐照对CAL27细胞的增殖抑制作用与剂量-时间成正相关;(2)和空白对照组比较,在相同时间点,不同剂量的重离子束(12C6+)对细胞中P53、P65和VEGF的表达影响明显,随着重离子束(12C6+)辐照剂量增大,细胞中P53、P65和VEGF的表达明显降低(P＜0.05).结论 重离子辐照能抑制CAL27细胞的增殖,且具有剂量和时间效应.
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沉默p65基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期的影响
目的 研究miRNA(microRNA)沉默p65基因后对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞周期分布的影响.方法 用pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体构建p65 miRNA表达质粒,转染MDA-MB-231细胞,用RT-PCR检测转染前后各组细胞中p65 mRNA表达变化；凝胶电泳迁移率改变分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)实验研究转染前后细胞中NF-κB结合活性的变化；流式细胞术(Flow cytometry,FCM)观察转染前后细胞周期分布的变化；Western blot法检测转染前后细胞周期相关因子cyclinD1、CDK4、p21蛋白表达的变化.结果 p65 miRNA质粒明显下调MDA-MB-231细胞中p65 mRNA的表达水平,并显著抑制细胞中NF-kB的结合活性(P＜0.05).FCM结果显示,转染组细胞G0/G1期细胞比例显著增加,S、G2/M期细胞比例明显下降(P＜0.05)；Western blot分析结果显示,沉默p65基因后细胞中cyclinD1蛋白表达下调,p21蛋白表达增加.结论 p65 miRNA可以显著降低p65 mRNA的表达,诱导乳腺癌细胞发生G0/G1期阻滞,可能是通过降低cyclinD1蛋白,上调p21蛋白表达而实现的.
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非小细胞肺癌中p65和C-myc的表达及意义
目的探讨p65和C-myc蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义.方法在肺支气管粘膜上皮不典型增生11例、NSCLC 40例中,用免疫组化二步法检测p65和C-myc蛋白的表达,并将结果进行相关分析. 结果 p65和C-myc蛋白在肺癌组织中的表达与在肺支气管粘膜上皮不典型增生的表达比较差异均有显著性(P＜0.01); p65和C-myc蛋白在肺癌的表达与肺癌组织类型、分化及转移无关(P＞0.05); 肺癌中p65与C-myc的表达具有相关性(Pearson列联系数=0.4143,P＜0.01). 结论 p65和C-myc蛋白在NSCLC组织中表达上调,提示可能通过抑制肺癌细胞凋亡,对肺癌的发生发展起重要促进作用.
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牙龈鳞癌中p65和VEGF的表达及意义
目的 研究p65和VEGF在牙龈癌组织中的表达及意义.方法 应用免疫组化SP法检测46例牙龈鳞癌组织中p65和VEGF的表达,并与临床病理指标结合进行分析.结果 牙龈鳞癌组织中p65与VEGF阳性率分别为63.04%与56.52%.p65的表达与牙龈鳞癌的病理分级、淋巴结转移无相关性,与临床分期明显相关(P＜0.05).VEGF的表达与牙龈鳞癌的病理分级、淋巴结转移密切相关(P＜0.05).p65与VEGF在牙龈鳞癌的表达呈正相关.结论 p65和VEGF参与牙龈鳞癌的发生发展过程,可作为评估牙龈鳞癌生物学行为的一项指标,用于识别高危转移和不良预后者.
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放射线对口腔鳞状细胞癌细胞中核因子-κB p65表达的影响
目的:探讨不同剂量放射线对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65信号转导蛋白表达的影响.方法:采用人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,分为6个剂量组,分别为0y、2、4、6、8、10 Gy,在照射后的不同时间点(1,3,6,10,24,48 h)应用免疫细胞化学检测NF-κB p65的表达情况,应用Leica Qwin Plus图像分析系统对图像进行分析,测其灰度值,并应用SPSS 10.0软件对数据进行X2检验.结果:免疫细胞化学方法显示不同剂量组的平均灰度值与0 Gy组相比均为P ＜0.05,差异均具有统计学意义,而不同时间点组的平均灰度值相互比较,3 h组的平均灰度值与其他时间点组相比均为P ＜0.05,差异有显著性.结论:放射线可以激活NF-κB p65信号转导通路,此信号转导通路在肿瘤的放射治疗中可能具有重要意义.
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青蒿琥酯对人白血病 K562，K562/ADM细胞凋亡的作用及对NF-κB p65表达的影响
目的：观察青蒿琥酯对人白血病K562、K562/ADM细胞凋亡以及对p65表达的影响。方法：采用流式细胞仪检测青蒿琥酯在不同浓度和不同时间段对K562、K562/ADM细胞凋亡的影响,采用Western blot法检测15μmol·L-1青蒿琥酯在不同时间对K562细胞NF-κB p65表达的影响。结果：青蒿琥酯对K562细胞凋亡影响不明显,但对阿霉素耐药K562/ADM细胞影响较大,青蒿琥浓度为7.5μmol·L-1和15μmol·L-1时,K562/ADM细胞的调亡率明显高于K562细胞(P<0.01),15μmol·L-1青蒿琥酯作用后4 h后,K562/ADM细胞的调亡率明显增加(P<0.01)；经15μmol·L-1青蒿琥酯作用后, p65表达随时间的增加而明显降低(P<0.01)。结论：青蒿琥酯通过下调P65的表达而诱导白血病细胞凋亡。
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RelA翻译后修饰对核因子κB活性的调控作用
转录因子NF-κB是由5种蛋白质分子组成的同源或异源二聚体,在多种生物过程中发挥重要的调节作用,如免疫应答、细胞发育、细胞凋亡、肿瘤发生等.作为NF-κB的一种蛋白质亚基,RelA具有多种翻译后修饰作用,包括磷酸化、乙酰化、甲基化和泛素化等,这些翻译后修饰在不同细胞中应答不同的胞外刺激,进而调节NF-κB的活性和功能,其作用形式不同,且同一修饰因环境差异能产生不同的影响;此外,不同修饰间还存在复杂的交互关系,有时相互拮抗,有时相互协同.NF-κB对人类健康具有重要作用,理解这些翻译后修饰不仅可加深对整个NF-κB通路调控的认识,还能帮助临床找到相关疾病的合适治疗靶点及诊断标志.
