核转录因子-κB(p65)在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中变化的研究

目的 研究NF-κB(p65)在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中的变化.方法 通过蛋白质免疫印迹法及免疫组织化学的方法检测p65在139A感染的脑组织均浆中的含量变化.利用免疫荧光方法检测p65在神经元及胶质细胞中的分布情况.结果 在139A感染终末期小鼠脑组织均浆中,p65含量下降,差异有统计学意义.对感染不同时间点的动态分析结果显示,p65含量呈先升高随后逐渐降低趋势.免疫组织化学显示,139A感染终末期小鼠大脑皮层p65含量明显下降.免疫组织荧光显示在正常和139A感染终末期小鼠脑组织中,p65与神经元细胞存在共定位现象.结论 NF-κB (p65)在小鼠中枢神经系统中主要分布于神经元细胞,在139A感染的小鼠终末期脑组织中,p65总量明显下降,提示在139A感染的小鼠脑组织中,NF-κB(p65)出现了变化,在疾病进程中发挥一定作用.

AKT1、p65和MMP9在乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨AKT1、p65、MMP9在乳腺癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化方法检测AKT1、p65和MMP9在74例经手术切除的乳腺癌组织中的表达.分析癌组织AKT1、p65和MMP9的表达与患者临床病理参数的关系.结果 在74例乳腺癌组织中AKT1的高表达率为73％(54/74),p65的高表达率为51％(38/74),MMP9的高表达率为29％(22/74).三者的表达均彼此相关且三者的表达均与TNM分期和组织学分级明显相关,差异有统计学意义(P<0.05),而与患者年龄、淋巴结转移等均无关;差异无统计学意义(P>0.05).结论 AKT1、p65、MMP9在乳腺癌浸润进展过程中发挥重要作用,以AKT1、p65、MMP9为靶蛋白抑制乳腺癌的恶性进展可能具有相对重要的临床病理意义.

龙血通络胶囊对氧化低密度脂蛋白损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

该文为观察龙血通络胶囊对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致人脐静脉内皮细胞(EAhy.926细胞)损伤的保护作用.采用氧化低密度脂蛋白(100 mg·L-1)损伤建立体外人脐静脉内皮细胞损伤模型方法,MTT法检测龙血通络胶囊对正常细胞生长影响及对损伤细胞的保护作用,酶联免疫吸附法检测龙血通络胶囊对内皮细胞损伤后乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(N0)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响,蛋白质印迹(WB)法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞黏附分子-1 (VCAM-1),p65,p-p65,IKB,p-IKB的表达水平.结果显示,与正常对照组比较,ox-LDL损伤后EAhy.926细胞活力显著降低,细胞LDH漏出量增加(P＜0.01),NO含量、SOD活力均显著降低(P ＜0.01,P＜0.05),细胞中MDA含量升高(P＜0.05),ICAM-1,VCAM-1,p-p65/p65,p-IKB/IKB等蛋白的表达量均显著升高(P＜0.01);与模型对照组比较,龙血通络胶囊(1,2 mg·L-1)对正常细胞生长无显著影响,可促进ox-LDL损伤的血管内皮细胞增殖(P ＜0.05,P＜0.01),降低胞内MDA含量、减少细胞LDH释放量(P＜0.05),提高SOD活力及NO含量(P＜0.01,P＜0.05);可降低ICAM-1,VCAM-1,p-p65/p65,p-IKB/IKB的表达(P＜0.01).结果提示龙血通络胶囊对ox-LDL所致的人脐静脉内皮细胞损伤具有明显的保护作用,说明龙血通络胶囊对动脉粥样硬化具有一定治疗作用.

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝大鼠的治疗作用

目的 探讨甘草酸二铵脂质配位体(DGLL)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的治疗作用及其相关机制.方法 60只SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、DGLL(30、60、120mg/kg)组及阳性对照药联苯双酯(200mg/kg)组,每组10只.采用高脂乳剂灌胃建立大鼠NAFLD模型,并给予DGLL干预,9周后观察大鼠血脂、脂质过氧化水平改变;肝脏免疫组织化学观察NF-κB p65病理变化;Western blotting 技术检测肝脏组织NF-κB p65和I-κBα蛋白的表达水平.结果 与高脂模型组相比,DGLL能明显降低NAFLD大鼠总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、丙二醛水平,使其高密度脂蛋白、超氧化物歧化酶水平升高;能降低NAFLD大鼠肝脏组织NF-κB p65的表达,下调大鼠肝脏组织NF-κB p65蛋白表达,抑制肝脏组织I-κBα蛋白的降解.结论 DGLL能显著降低高脂饮食诱导的NAFLD大鼠NF-κB p65的水平,该作用与抑制NF-κB p65的表达相关.

柔红霉素联合磁性纳米铁对Raji细胞株的作用研究

本研究探讨磁性纳米四氧化三铁颗粒联合柔红霉素(MNP-Fe3O4-DNR)对淋巴瘤Raji细胞株作用.纳米铁颗粒与柔红霉素(DNR)采用机械吸附法聚合后加入Raji细胞株,采用MTT法检测细胞的增殖、台盼蓝染色计数细胞的活性、流式细胞术检测细胞凋亡情况,同时采用Western blot检测细胞P53和P65的表达水平.结果表明:DNR及MNP-Fe3O4-DNR对Raji细胞的生长抑制率与药物浓度、作用时间呈正相关,两者的OD值比较P<0.05;细胞凋亡率与时间相关,总体凋亡率相比有统计学意义(p=0.028);Western blot检测示DNR组与MNP-Fe3O4-DNR组的P65蛋白的灰度值与内参比较分别为2.52±0.32和2.08±0.39;P53蛋白的条带灰度值分别为0.685±0.144和0.870±0.091,两者P值均小于0.05.结论:磁性纳米四氧化三铁颗粒联合柔红霉素能够有效抑制Raji细胞增殖并诱导其凋亡,作用机制可能与增强P53蛋白活化、抑制NF-κB通路的激活有关.

异丙酚对急性肺损伤大鼠肺组织凋亡及NF-κB p65的影响

目的 探讨不同剂量异丙酚对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)凋亡及NF-KB p65的影响.方法 60只SD大鼠随机(随机数字法)分为5组:空白对照(NS)组,模型(All)组和不同剂量丙泊酚干预(P1,P2,P3)组.HE染色和血气分析评估模型制备成功与否,流式细胞术及蛋白免疫印迹法通过单因素方差分析,检测肺组织凋亡和NF-KB活化情况.结果 模型组肺部损伤达到Au标准,模型制备成功;丙泊酚干预组肺损伤较模型组明显减轻,且呈剂量依赖性;与对照组比较,模型组肺组织细胞凋亡率显著增加,NF-κB P65核转位显著增加,核浆比显著高于对照组(P<0.05);与模型组比较,异丙酚干预组肺组织凋亡率显著减少,核转位显著减少,P1,P2,P3组核浆比显著低于模型组,(P<0.05).结论 异丙酚对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤具有保护作用;异丙酚能显著抑制肺组织细胞凋亡和NF-κB核转位;异丙酚对脂多糖诱导大鼠ALI的拮抗作用可能与抑制肺组织凋亡和抑制NF-κB P65核转位有关.

PRMT1对哮喘小鼠的影响以及作用机制分析

目的 探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)对哮喘的影响及作用机制.方法 构建小鼠哮喘模型,然后分别利用氨茶碱(AMI)和磷酸盐缓冲液(PBS)处理两组小鼠,收集并用ELISA试剂盒检测小鼠支气管肺泡灌洗液中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-4和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.运用Bradford方法检测小鼠支气管肺泡灌洗液中蛋白含量.Western blotting检测肺脏组织中PRMT1的含量以及NF-κB信号通路下游分子P65的变化.结果 哮喘模型组IL-4,IL-1β和TNF-α的水平较对照组明显升高(25.48±4.96 pg/ml vs.4.01±0.56 pg/ml,23.48±6.11 pg/ml vs.3.77±0.27 pg/ml,29.45±6.98 pg/ml vs.5±1.84 pg/ml);经AMI处理的哮喘模型组IL-4,IL-1β,TNF-α的水平较PBS处理的哮喘模型组明显降低(12.14±3.87 pg/ml vs.25.48±4.96 pg/ml,11.95±2.55 pg/ml vs.23.48±6.11 pg/ml,16.81±7.49 pg/ml vs.29.45±6.98 pg/ml),差异有统计学意义(P＜0.05).哮喘模型组小鼠支气管肺泡灌洗液中蛋白渗出量较对照组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05),同时对比PBS处理组和AMI处理组发现,AMI处理后小鼠支气管肺泡灌洗液中蛋白渗出含量明显减少(P＜0.05).Western blotting检测了四组小鼠肺脏组织中PRMT1和P65的蛋白含量,结果显示在患有哮喘的小鼠中PRMT1和P65的表达水平较对照组显著升高,无论是对照组还是哮喘模型组,AMI处理后的PRMT1和P65的表达水平较PBS处理组降低.结论 PRMT1通过上调NF-κB信号通路促进肺脏炎性因子IL-1β、IL-1和TNF-α的产生以及蛋白渗出,诱导哮喘的发生.

复方青黛颗粒对溃疡性结肠炎大鼠NF-κB P65、TNF-α表达的影响

目的:探讨复方青黛颗粒治疗溃疡性结肠炎(UC)大鼠的相关机制.方法:用三硝基苯磺酸(TNBS)法制备大鼠UC模型,分为空白对照组、模型对照组、柳氮磺吡啶(SASP)组、复方青黛颗粒低、中、高剂量组.造模后第3天开始灌胃给药,共给药10 d,实验第14天,处死大鼠.取大鼠结肠组织及血清,用免疫组织化学SP法检测NF-κB P65蛋白表达,ELISA测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果:空白对照组与模型对照组比较,结肠组织中NF-KB P65蛋白表达及血清中TNF-α表达明显增高(0.276±0.0081 vs 0.138±0.003;67.657±3.580 vs 18.990±3.964,均P<0.05),复方青黛颗粒高剂量组与模型对照组相比,结肠组织中NF-κB P65蛋白表达及血清中TNF-α表达显著降低(0.217±0.007 vs 0.276±0.008;27.783±2.867 vs 67.657±3.580,均P<0.05).结论:复方青黛颗粒对TNBS诱导的UC大鼠的治疗作用可能与通过NF-KB信号传导通路,调节TNF-α含量有关.

厄贝沙坦对人外周血单核细胞炎性细胞因子的合成及核因子-κB的活化的影响

目的:探讨厄贝沙坦对细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导人外周血单核细胞炎性细胞因子的合成及核因子κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)活化的影响.方法:密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,应用ELISA法检测培养基上清中肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor α,TNF-α)水平,应用免疫细胞化学方法观察NF-κB在单核细胞中的活化过程.结果:厄贝沙坦(10-8mol/L-10-6mol/L)呈剂量依赖性抑制LPS诱导的单核细胞TNF-α合成,10-6mol/L厄贝沙坦能明显抑制NF-κB在单核细胞中活化.结论:厄贝沙坦能抑制LPS诱导的单核细胞的炎性反应,且这种抑制作用至少部分是通过抑制NF-κB的活化来实现的.

MS-275对急性肝衰竭小鼠肝脏的保护作用

目的：观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对急性肝衰竭（ ALF）小鼠肝脏的保护作用及对NF-κB信号通路的影响。方法选取SPF级C57 BL／6雄性小鼠30只，并随机分为健康对照组、ALF模型组和MS-275治疗组，每组10只。 ALF模型组和MS-275治疗组小鼠采用D-氨基半乳糖以及脂多糖（ LPS）联合诱导小鼠ALF模型，其中MS-275治疗组小鼠在制备ALF模型前2 h腹腔注射MS-275。24 h后观察检测各组小组血清丙氨酸转氨酶（ ALT）、天冬氨酸转氨酶（ AST）、总胆红素（TBil）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）γ、白介素（IL）-1β、高迁移率族蛋白1（HMGB1）水平，取肝组织做HE染色观察肝组织结构并检测肝组织HDAC1、HDAC3、P65蛋白表达及乙酰化组蛋白、乙酰化、磷酸化P65蛋白的表达。采用t检验比较组间上述指标的差异。结果 HE染色结果显示，与ALF模型组相比，MS-275治疗组小鼠肝细胞损害程度明显降低，炎症细胞浸润减少。与ALF模型组相比，MS-275治疗组小鼠血清中 ALT、AST 和 TBil 水平明显降低（ t ＝－22．215、－11．914和－12．160，P值均＜0．05），但仍高于健康对照组（t ＝14．852、11．692和8．333，P值均＜0．05）；MS-275治疗组小鼠血清TNF-α、IFNγ、IL-1β、HMGB1表达水平也明显降低（ t＝－7．926、－3．427、－2．475和－5．920，P值均＜0．05），但仍高于健康对照组，其中TNF-α和IFNγ水平与健康对照组比较，差异有统计学意义（t＝5．541和5．514，P值均＜0．05）；MS-275治疗组小鼠肝组织中HDAC1和HDAC3蛋白表达明显下降（t＝－3．676和－10．576，P值均＜0．05），肝组织中乙酰化H3、H4和P65蛋白表达明显增加（t＝3．976、5．559和4．588，P值均＜0．05）。免疫组化结果提示，MS-275治疗组小鼠肝组织中P65表达总数及入核率均低于ALF模型组。结论 MS-275对ALF小鼠肝脏有保护作用，可能与非组蛋白的乙酰化调控有关。

肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的表达情况及与临床特征的关系

目的 探究肺癌组织中P65、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、波形蛋白(vimentin)的表达情况及与肺癌患者临床特征的关系.方法 选取60例肺癌患者的肺癌组织及对应的癌旁组织,采用免疫组织化学法检测肺癌组织和癌旁组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的表达情况,并对其与肺癌患者临床特征的关系进行分析.结果 肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的阳性表达率均明显高于癌旁组织(P﹤0.01);临床分期为Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的阳性表达率均明显高于临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的患者(P﹤0.01).有淋巴结转移的肺癌患者肺癌组织中P65和vimentin蛋白的阳性表达率均高于无淋巴结转移的患者(P﹤0.05);不同淋巴结转移情况肺癌患者肺癌组织中CYFRA21-1蛋白的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05).结论 肺癌患者肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的阳性表达率较癌旁组织增高,P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的表达与肺癌患者的临床分期和淋巴结转移情况有一定关联.

Raf激酶抑制蛋白与肝细胞癌侵袭转移的关系

目的 探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)与肝细胞癌(HCC)侵袭转移的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HCC、癌旁组织及正常肝组织中RKIP mRNA的表达,采用免疫组织化学和Western blot法检测不同肝组织中RKIP、p65和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(pERK)蛋白的表达,分析RKIP表达与HCC临床病理学特征的关系及其与p65和pERK表达的相关性.结果 HCC、癌旁组织和正常肝组织中RKIP mRNA的表达量分别为1.357±0.569、1.512±0.623和1.550±0.426,组问差异无统计学意义(P>0.05).HCC、癌旁组织和正常肝组织中,RKIP蛋白的表达量分别为0.579±0.380、1.178±0.659和1.115±0.442,p65蛋白的表达量分别为0.830±0.376、0.630±0.337和0.466±0.345,pERK蛋白的表达量分别为1.023±0.478、0.605±0.367和0.461±0.293.免疫组织化学结果显示,HCC、癌旁组织和正常肝组织中,RKIP的阳性表达率分别为22.2%、86.0%和93.8%,p65的阳性表达率分别为73.6%、56.0%和37.5%;pERK的阳性表达率为65.3%、38.0%和31.3%.RKIP蛋白在HCC组织中的表达显著低于癌旁组织及正常肝组织,而p65和pERK在HCC组织中的表达均显著高于癌旁组织及正常肝组织(均P<0.05).RKIP蛋白表达水平与HCC分化程度和有尤门静脉或胆管癌柃情况有关(P<0.05),p65蛋白表达水平与HCC分化程度和有无门静脉或胆管癌栓有关,pERK蛋白表达水平与HCC分化程度、有无门静脉或胆管癌栓和肝内或淋巴结转移情况有关(均P<0.05).HCC组织中RKIP的表达与pERK的表达相关(P=0.04),但与p65的表达无关(P=0.143).结论 RKIP表达的减少或缺失、p65和pERK的高表达与HCC的发生发展、侵袭转移密切相关.RKIP可能通过下调pERK的表达抑制HCC的侵袭转移.

Activation of nuclear factor kappa B (NF-κB) is a hallmark of various central nervous system (CNS) pathologies. Neuron-speciifc inhibition of its transcriptional activator subunit RelA, also referred to as p65, promotes neuronal survival under a range of conditions, i.e., for ischemic or excitotoxic insults. In macro-and microglial cells, post-lesional activation of NF-κB triggers a growth-permissive program which contributes to neural tissue inlfammation, scar formation, and the expression of axonal growth inhibitors. Intriguingly, inhibition of such inducible NF-κB in the neuro-glial compartment, i.e., by genetic ablation of RelA or overexpression of a trans-dominant negative mutant of its upstream regulator IκBα, significantly enhances functional recovery and promotes axonal regeneration in the mature CNS. By contrast, depletion of the NF-κB subunit p50, which lacks transcriptional activator function and acts as a transcriptional repressor on its own, causes precocious neuronal loss and exacerbates axonal degeneration in the lesioned brain. Collectively, the data imply that NF-κB orchestrates a multicellular pro-gram in whichκB-dependent gene expression establishes a growth-repulsive terrain within the post-lesioned brain that limits structural regeneration of neuronal circuits. Considering these subunit-speciifc functions, interference with the NF-κB pathway might hold clinical potentials to improve functional restoration following traumatic CNS injury.

银杏叶提取物抑制人冠状动脉内皮细胞中NF-κB表达及VAP-1、IL-6生成的研究

目的：检测银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract，EGb）能否抑制由活化血小板刺激引起的人冠状动脉内皮细胞（human coronary artery ebditgekuak cells，HCAECs）中NF-κB的表达，并降低炎症因子血管黏附蛋白-1（vascalur adhesion protein l，VAP-1），白细胞介素6（interlenkin-6，IL-6）的生成。方法活化血小板刺激HCAECs建立氧化应激模型，使用银杏叶提取物（4、40、400μg/ml）进行干预后，通过Western Blot检测NF-κB（p65、PP65）的表达量，酶联免疫吸附试验检测VAP-1，IL-6的生成量。结果活化血小板刺激HCAECs可引起目的分子表达量的增加，检测结果显示治疗量的EGb能显著抑制p65，PP65的表达及VAP-1、IL-6的生成，并成剂量依赖性。结论银杏叶提取物能显著抑制活化血小板刺激的人冠状动脉内皮细胞中p65，PP65的表达，并降低VAP-1及IL-6的生成。

银杏内酯B对oxLDL刺激大鼠胸主动脉平滑肌细胞和U937细胞功能变化的作用

目的观察银杏内酯B对oxLDL或PAF引起的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖及U937单核细胞趋化因子分泌的抑制作用.方法用3H-Tdr参入实验测定VSMC增殖.用ELISA和RT-PCR方法测定MCP-1和IL-8的蛋白和mRNA水平.Western blotting测定p65和IκB的蛋白量.放射受体配体结合实验观察oxLDL与PAF受体的结合.结果银杏内酯B呈剂量依赖性地抑制oxLDL诱导的VSMC增殖以及U937细胞MCP-1和IL-8分泌,并抑制oxLDL诱导的p65活化和IκB降解.并证实oxLDL可以抑制PAF与其在U937细胞上受体的结合.结论银杏内酯B在体外具有一定的抗oxLDL促进VSMC增殖及刺激单核细胞趋化因子分泌的作用.银杏内酯B抑制oxLDL的毒性作用可能部分通过抑制其与PAF受体的结合实现.

自发性糖尿病小鼠肾小球细胞Nampt和骨形态发生蛋白7的表达及烟酰胺单核苷酸在高糖条件下对大鼠肾小球系膜HBZY-1细胞纤维化的影响

目的 探讨糖尿病肾小球细胞烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)与骨形态发生蛋白7(BMP7)表达的关系及烟酰胺单核苷酸(NMN)缓解糖尿病肾小球细胞炎症纤维化的作用机制.方法 ①动物实验:C57/BL6自发性糖尿病小鼠和C57/BL6野生型小鼠,均采取普通饲料喂养,当自发性糖尿病小鼠血糖＞(34.2±1.9)mmol·L-1并出现明显肾组织损伤时,取肾组织进行病理切片,免疫共聚焦法检测肾小球细胞Nampt、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、沉默调节蛋白1(SlRT1)和BMP7的表达.②细胞实验:葡萄糖200 mmol·L-1培养大鼠肾小球系膜HBZY-1细胞,在不同时间(24,48和72 h)以及不同浓度NMN(50,100和200μmol·L-1)处理24 h时后,免疫印迹法检测Nampt和BMP7的表达;葡萄糖200 mmol·L-1处理HBZY-1细胞96 h,免疫荧光法检测NF-κB p65和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;应用NMN 100 μmol·L-1和Nampt特异抑制剂FK866 10μmol·L-1作用HBZY-1细胞24 h后,免疫印迹法检测HBZY-1细胞Nampt,BMP7和NF-κB p65表达.结果 ①动物实验:自发性糖尿病小鼠肾小球明显萎缩,肾小球细胞Nampt和NF-κB p65的荧光强度比野生型小鼠明显升高(P＜0.05),而BMP7和SIRT1的荧光强度显著降低(P＜0.01).②细胞实验:Western蛋白印迹检测显示,葡萄糖200 mmol·L-1培养48和72 h,HBZY-1细胞Nampt表达增加(P＜0.01),BMP7表达下降(P＜0.01,P＜0.05).葡萄糖200 mmol·L-1条件下加NMN 50,100和200 μmol·L-1作用24 h,各组BMP7表达均增加(P＜0.01);免疫荧光结果显示,与细胞对照组比较,葡萄糖200 mmol·L-1处理HBZY-1细胞,NF-κB p65和α-SMA的荧光强度升高(P＜0.01);NMN干预后,与葡萄糖200 mmol·L-1处理组比,Nampt和NF-κB p65表达降低(P＜0.01),BMP7表达增加(P＜0.01);加FK866后,Nampt表达降低(P＜0.01),NF-κB p65表达下降,BMP7表达虽然有上升趋势,但其表达增高没有NMN组明显.结论 严重糖尿病状态下,通过抑制内源性Nampt过表达能够上调BMP7,从而缓解肾小球细胞炎症纤维化作用,NMN可能通过干预Nampt影响细胞BMP7表达.

β-连环素和P65在喉癌侵袭转移过程中的关系研究

目的 检测喉癌中的β-连环素和P65的表达情况,观察比较其表达特点,分析二者在喉癌侵袭转移过程中的关系.方法 收集不同分化程度的喉癌患者手术标本47例.采用免疫组化SP法对其染色,光镜下分别观察以上不同组织中β-连环素和P65的表达情况.结果 (1)在临床分期Ⅲ、Ⅳ期P65/β-连环素组合同时阳性表达比Ⅰ、Ⅱ期表达率高(P < 0.05);在不同病理分化标本中低中分化喉癌中P65/β-连环素组合同时阳性表达比高分化喉癌表达率高(P < 0.05);在有淋巴结转移组患者喉癌标本中P65/β-连环素组合同时阳性表达比无淋巴结转移组表达率高;(2)P65/β-连环素组合同时阳性表达在超过生存5年患者与低于5年患者中无差别.结论 P65与β-连环素在喉癌的表达结果具有相关性,并随着肿瘤侵袭、进展,相关性增强.

紫草酸通过抑制凋亡及磷酸化P65改善脂多糖对H9c2细胞的损伤

目的 探讨紫草酸对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的H9C2细胞损伤的保护作用.方法 本实验分组为5组:对照组、LPS组、LPS加紫草酸组(低、中、高剂量).LPS浓度为2mg/ml,紫草酸浓度分别为5、10、201μmol/L.药物干预时间为12h.用CCK8检测药物对细胞存活率影响,用TUNEL、RT-PCR及Western blot法检测凋亡蛋白及信号通路蛋白的变化.结果 紫草酸对H9C2细胞具有低毒性,它可以降低胞内凋亡的水平,降低炎性反应,且具有浓度依赖性以及时间依赖性.结论 紫草酸可以改善LPS诱导H9C2细胞损伤.

河湟谷地胃癌患者TNF-α、NF-κB P65的表达及临床意义

目的 探讨河湟谷地胃癌患者TNF-α及NF-κB P65的表达及临床意义.方法 采用ELISA法检测河湟谷地健康人、胃炎患者及胃癌患者(各20例)血清中TNF-α的表达,Western blot法检测上述胃癌患者癌组织及癌旁组织NF-κB P65蛋白的表达,分析TNF-α和NF-κB P65与胃癌发生、发展的相关性.结果 TNF-α在健康入、胃炎患者及胃癌患者血清中的表达具有差异性(P ＜0.001),并与胃癌分期及淋巴结转移具有相关性(P＜0.05).NF-κB P65蛋白在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达差异具有统计学意义(P＜0.001),并与胃癌分期及淋巴结转移有相关性(P＜0.05).胃癌患者TNF-α和NF-κBP65的表达呈正相关(r=0.745,P＜0.01).结论 TNF-α和NF-κB P65具有作为河湟谷地胃癌患者早期诊断的分子标志物的潜力,并且二者在胃癌发生、发展及转移过程中可能起重要协同作用.

结肠癌组织AKIP1、PKA及P65的表达及意义

目的 探讨结肠癌组织AKIP1、PKA及P65的蛋白表达情况及其临床意义.方法 选择手术切除的结肠癌组织标本及同源癌旁组织标本各37例,采用免疫组化SP法对组织进行染色,观察结肠癌组织及癌旁组织中AKIP1、PKA及P65的表达差异及其相关性,同时观察结肠癌组织AKIP1、PKA及P65表达与结肠癌组织恶性程度及病例分期的相关性.结果 结肠癌组织AKIP1、PKA表达强度低于癌旁组织,差异有统计学意义(u=77.42,P＜ 0.05;u=38.09,P＜0.05),结肠癌组织AKIP1、PKA阳性表达率(67.6％、75.7％)低于癌旁组织(94.3％、91.9％),差异有统计学意义(x2=15.51,P＜0.05；x2=10.16,P＜0.05)；结肠癌组织P65表达强度高于癌旁组织(u=22.07,P＜0.05),结肠癌组织P65阳性表达率(91.9％)高于癌旁组织(62.2％)(x2=27.07,P＜0.05),结肠癌组织中AKIP1与PKA表达呈正相关(r=3.106,P＜0.05),与P65表达呈负相关(r=-0.40226,P=0.05).不同TNM分期的结肠癌组织中AKIP1、PKA及P65的表达,两两相比,差异有统计学意义(u=11.92,P＜0.05;u=8.17,P＜0.05;u=18.02,P＜0.05)；不同分化程度的结肠癌组织中KIP1、PKA及P65的表达,两两相比,差异有统计学意义(u=22.09,P＜ 0.05;u=12.09,P＜0.05;u=27.94,P＜0.05).结论 结肠癌组织中存在AKIP1、PKA及P65过度表达现象,并且同结肠癌的生物学行为相关,其可能通过相互调控参与结肠癌的发生发展.