首页 > 文献资料
-
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素基因的检测
目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素基因的检出情况.方法 收集2007年1月至2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA 45株,采用聚合酶链式反应进行杀白细胞毒素基因的检测.结果 45株MRSA中有12株检出杀白细胞毒素基因,检出率为26.7%.结论 杀白细胞毒素基因PVL检出率较高,是MRSA的重要致病因子.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MRSA 杀白细胞毒素基因 PVL基因 -
金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因的检测
由于金黄色葡萄球菌可产生多种毒素,致病性较强,常引起化脓性感染、食物中毒、疖病、肺炎、化脓性关节炎、骨髓炎、心内膜炎及脓毒血症等~([1]).1961年出现第1株MRSA以来,在全球范围内都有由MRSA引起感染的报道,MRSA是医院感染的主要病原菌,且多呈多重耐药性.近不断有报道MRSA在社区中流行,尽管社区获得性MRSA的耐药性比医院获得性MRSA的耐药性轻,但其致病性不容忽视,特别是产PVL的金黄色葡萄球菌的毒力非常强.因此,对含PVL基因的金黄色葡萄球菌进行检测并防止其播散是非常有必要的.
-
金黄色葡萄球菌耐药性及mecA、qacA/B和pvl基因检测
金黄色葡萄球菌是临床上常见的致病菌之一,可产生多种毒素和酶,包括凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素和表皮溶解毒素等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)具有多药耐药特征,是导致医院感染的主要革兰阳性菌[1],已成为临床抗感染治疗的难题.监测金黄色葡萄球菌的耐药现状,了解金黄色葡萄球菌的耐药和致病机制,以及分析感染的危险因素与治疗对策具有重要的临床意义.
-
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究
目的 研究某院临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特点,为临床预防、MRSA流行监测,制定防治方案等提供科学依据.方法 采用药敏纸片法和PCR技术对从住院患者、医务人员及环境分离的MRSA进行表型、基因型鉴定,检测其杀白细胞毒素(pvl)基因,并进一步对mecA基因阳性标本进行SCCmec基因分型.结果 从1352份标本中分离出108株金黄色葡萄球菌,MRSA为54株,主要分离于烧伤科占77.78%;根据SCCmec基因分型结果,54株MRSA以Ⅲ型为主,占68.52%,pvl基因均为阴性.结论某院MRSA临床检出率与2008年监测的数据相仿,流行情况以Ⅲ型SCCmec基因型为主,提示医院MRSA临床株与环境株之间MRSA可能具有同源性,临床必须采取严格措施加以控制.
-
烧伤科耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因检测及SCCmec分子流行病学调查
目的 研究临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特点,为临床预防MRSA流行、制定防治方案等提供科学依据.方法 采用聚合酶链反应(PCR技术)对烧伤科2010年4月14日-6月1日临床标本中分离的24株MRSA进行SCCmec分型及pvl基因检测；纸片扩散法检测MRSA对21种抗菌药物的耐药性.结果 24株MRSA中,SCCmecⅢ型20株占83.3％,4株未分型占16.7％,pvl基因均为阴性；SCCmecⅢ 型的菌株除对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀敏感以外,对其他抗菌药物均耐药.结论 医院烧伤科临床分离MRSA的SCCmec型别主要以SCCmecⅢ型为主,携带SCCmecⅢ型的MRSA对抗菌药物呈现多药耐药现象.
-
杀白细胞毒素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的红霉素耐药基因的检测
目的 了解杀白细胞毒素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的红霉素耐药基因(ermA/B/C)检出情况.方法 收集2007年1月-2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA 45株,采用聚合酶链反应对45株MRSA的ermA/B/C和PVL基因进行检测,分析PVL基因阳性MRSA的ermA/B/C检出率.结果 45株MRSA中有33株检出ermA/B/C,检出率为73%(33/45);有12株检出PVL基因,检出率为27%(12/45);12株PVL基因阳性MRSA中有9株检出ermA/B/C,检出率为75%(9/12);33株PVL基因阴性MRSA中仅24株检出ermA/B/C,检出率为73%(24/33).结论 PVL基因阳性与PVL基因阴性MRSA的ermA/B/C检出率基本一致,MRSA的重要致病基因--PVL的产生可能与红霉素耐药基因ermA/B/C无关.
-
社区获得性和医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PVL基因检测
目的 调查本地区患者各种标本中分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的杀白细胞素(PVL)基因携带情况,为临床MRSA的治疗及流行病学调查提供合理的依据.方法 对所分离的MRSA菌株进行药敏试验分析,同时采用PCR法检测mecA基因和PVL基因,比较社区获得性MRSA (CA-MRSA)和医院获得性MRSA (HA-MRSA)之间耐药性的比较及PVL基因携带率的比较.结果 对不同来源的9l株MRSA分离株耐药性分析,CA-MRSA对环丙沙星、利福平、庆大霉素和左旋氧氟沙星的敏感性明显高于HA-MRSA.经PCR检测发现,所有菌株均携带有mecA基因,21株携带有PVL基因,其中65株HA-MRSA有仅8株携带有PVL基因,而26株CA-MRSA中有13株携带有PVL基因,携带率差异有统计学意义.结论 本地区CA-MRSA是携带PVL基因的主要菌株,HA-MRSA对抗菌药物的耐药性明显高于CA-MRSA,尚未发现对万古霉素和替考拉宁的耐药菌株.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 PVL基因 耐药性 -
金黄色葡萄球菌儿童临床分离株携带PVL基因状况的分析
目的 了解金黄色葡萄球菌儿童分离株携带Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因的状况及感染类型.方法 采用多重PCR同时检测金黄色葡萄球菌16S rRNA基因、PVL基因和mecA基因；多重PCR检测MRSA的SCCmec基因型及亚型.结果 66株金黄色葡萄球菌儿童临床分离株经多重PCR检测,其中MRSA有7株(10.6％),MSSA有59株(89.4％)；携带PVL基因金黄色葡萄球菌有31株,总阳性率为47.0％ (31/66),其中2株为MRSA,29株为MSSA,阳性率分别为28.6％( 2/7)和49.2％ (29/59).2株MRSA都属于SCCmecⅣ型；31株PVL基因阳性分离株有21株分离自脓液,7株分离自血液,仅1株分离自痰液.结论 儿童MSSA是携带PVL基因的主要菌株,携带PVL基因的金黄色葡萄球菌主要引起化脓性感染和血流感染.
-
多重PCR系统的建立及其在社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌中PVL噬菌体分型中的应用
从基因组型和表型两方面解析从医院环境中分离出的社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌( MRSA),对携带杀白细胞素(PVL)基因的MRSA中的PVL溶原噬菌体进行分型.方法 聚合酶链式反应(PCR)解析菌株所携带的SCCmec基因岛型及PVL毒素基因；凝固酶试验测定菌株的凝固酶型；设计8组PCR反应组合检测PVL溶原噬菌体型.结果 36株菌株所携带的SCCmec基因岛分型多样化.携带Ⅳc型SCCmec的菌株占多数,为16株(44.4%),其次为携带Ⅱ型SCCmec的菌株,为10株(27.8%).各菌株所携带的SCCmec型别与菌株的凝固酶分型高度一致.经多重PCR检测,6株PVL阳性菌株所携带的PVL噬菌体型分别为φ108PVL型(3株),φ2958PVL型(1株)和φSa2mw型(2株).结论 院内分离的社区型MRSA的基因型和表型多样化,PVL噬菌体分型的多重PCR系统具有可应用性,应用此系统对鉴别具有异构六角形头部和伸长形头部的PVL溶原噬菌体有意义.
-
tst和pvl基因阳性金黄色葡萄球菌流行情况及分子特征
目的：了解中毒性休克综合征毒素-1的tst基因和杀白细胞素的pvl基因阳性金黄色葡萄球菌（金葡菌）流行情况及其附属基因调节子（agr）和葡萄球菌盒式染色体（SCCmec）型别。方法收集上海市及浙江省共7所医院的916株金葡菌，聚合酶链反应（PCR）检测tst、pvl、mecA和mecC基因，并对tst或pvl基因阳性菌株作agr及SCCmec（针对甲氧西林耐药金葡菌，MRSA）遗传学分型。结果916株金葡菌中tst阳性208株，阳性率22.7%；pvl阳性35株，阳性率3.8%；mecA阳性665株（MRSA），未检测到mecC基因。在665株MRSA中，tst阳性198株（29.8%），agr和SCCmec分型均以2/Ⅱ型为主，分别占97.0%和94.4%；pvl阳性14株（2.1%），agr分型以1型（85.7%）为主，SCCmec分型以Ⅲ型（42.9%）和Ⅳa型（28.6%）为主。在251株甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）中，tst阳性10株（4.0%）；pvl阳性21株（8.4%）。tst阳性率在MRSA菌株中较MSSA中高，而pvl检出率则在MSSA菌株中较高，且浙江地区MRSA中 pvl的阳性率高于上海菌株，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 tst基因在MRSA菌株中阳性率较MSSA高；pvl阳性率相对较低，但因其与某些严重的金葡菌感染相关，临床应予以关注。
-
儿童与成人金黄色葡萄球菌分离株携带PVL基因状况比较
目的 了解从儿童或成人中分离获得的金黄色葡萄球菌(金葡菌)菌株携带Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因的差异.方法 分别对66株从儿童中及76株成人中分离获得的金葡菌菌株采用多重PCR,检测金葡菌16SrRNA基因、PVL基因和甲氧西林耐药决定分子A(mecA)基因;并同时检测耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)基因型及亚型.结果 在66株从儿童分离的金葡菌株中,共检出7株,mecA基因阳性,MRSA 7/66(占10.6%);而在76株从成人分离的菌株中,共检出39株mecA基因阳性,MRSA 39/76(占51.3%),成人菌株MRSA发生率显著高于儿童(χ2=26.73,P<0.01).从儿童或成人中分离的金葡菌菌株PVL基因携带率分别为31/66(占47.0%)和6/76(占7.9%);从儿童或成人中分离的甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)的PVL基因携带率分别为29/59(占49.2%)和2/37(占5.4%),儿童与成人的差异均有统计学意义(P<均0.01);从儿童中分离的2株携带PVL基因的MRSA菌株都属于SCCmecIV型,从成人中分离的4株携带PVL基因的MRSA菌株中,SCCmec Ⅰ型、Ⅱ型各1株,SCCmecⅢ型2株.结论 从儿童中分离的金葡菌株携带PVL基因阳性率较成人高,携带PVL基因以MSSA菌株为主.
-
成都地区儿童金黄色葡萄球菌定植/感染分离株的流行病学研究
目的 调查成都地区儿童金黄色葡萄球菌定植/感染分离株的流行病学特征.方法 2004年1月 - 2009年4月,以成都市健康儿童、门诊呼吸道感染患儿和金黄色葡萄球菌感染住院患儿为研究对象,采集鼻拭子或感染部位标本进行培养,并对分离的金黄色葡萄球菌进行药敏实验,应用PCR方法检测菌株的PVL毒力基因和mecA耐药基因,对菌株进行多位点序列分析(MLST).结果 培养分离金黄色葡萄球菌定植株174株、感染株51株.门诊呼吸道感染患儿金葡菌的多重耐药率分别为,定植株59.3%,感染株52.9%;PVL基因阳性率分别为,定植株55.6%(15/27),感染株80.4%(41/51);mecA耐药基因阳性率分别为,定植株11.1%(3/27),感染株62.7%(32/51).对健康儿童定植株以及感染株进行MLST分析,共发现33个ST类型,定植株以ST121、ST59和ST398为主,感染株以ST121、ST88和ST398为主;这些菌株属于15个克隆类型,以CC121、CC59和CC398为主.结论 成都地区儿童金黄色葡萄球菌定植和感染分离株具有较高的PVL毒力基因和mecA耐药基因携带率,具有明显不同于其他地区的独特的遗传背景.
-
mecA基因与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床特点的相关性研究
目的 探讨mecA基因与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床感染的关系,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 收集2013年-2015年本院患者感染分离的MRSA 83株,分为血流感染组(39株)和非血流感染组(44株).2组菌株分别进行necA、PVL基因检测,mecA基因阳性菌株进行荧光定量PCR测定mecA基因RNA相对表达量.结果 83株MRSA mecA阳性77株,阳性率为92.8％,血流感染组mecA基因阳性率为100.0％,非血流感染组86.4％,两者差异有统计学意义(x2=3.880,P＜0.05).两组mecA基因RNA相对表达量差异无统计学意义(P＞0.05).利福平耐药菌株的mecA基因mRNA相对表达量高于敏感菌株的相对表达量,差异有统计学意义(P＜0.05).PVL基因阳性率为12.0％,其中血流感染组PVL基因阳性率为7.7％,非血流感染组为15.9％,两者差异无统计学意义(x2=0.656,P＞0.05).结论 mecA基因在血流感染的MRSA中分布较高,其RNA相对表达量与利福平的耐药性密切有关.因此,检测mecA基因,对治疗及控制MRSA感染具有一定的临床指导作用.
关键词： mecA基因 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性 PVL基因 -
临床分离金黄色葡萄球菌的耐药特点和MRSA分子分型
目的 研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其基因分型.方法 收集某院2014年1月—2015年11月检出的非重复金黄色葡萄球菌967株,检测其药敏结果及m ecA抗性基因、杀白细胞素(PVL)基因;MRSA菌株经多重PCR进行葡萄球菌盒式染色体mec(SCC m ec)分型、多位点序列分型(MLST)、金黄色葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型、金黄色葡萄球菌附属因子调节子(agr)分型.结果 967株金黄色葡萄球菌共检出210株 MRSA,MRSA检出率为21.72%;痰标本 MRSA 检出率高于皮肤软组织标本(68.09% vs 11.83%,P<0.05);金黄色葡萄球菌中未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,MRSA对庆大霉素、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、呋喃妥因、利福平的敏感率均低于 MSSA,差异均有统计学意义(均P<0.05);MRSA对复方磺胺甲口恶唑的敏感率高于 MSSA,差异有统计学意义(P<0.05).皮肤软组织分离的 MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平的敏感率为86.90% ~95.24%,而痰分离的 MRSA仅为1.56% ~15.63%.967 株金黄色葡萄球菌检测出210 株携带m ecA基因,10 株携带PVL基因,210 株MRSA 中有8 株未分型,占3.81%.MLST主要以ST 239(177株)为主;SCCmec分型主要以Ⅲ型(177株)为主;spa 分型主要以 t 030 (177株)为主;agr分型主要以Ⅰ型(196株)为主.结论 该院 MRSA 菌株主要流行克隆 ST239-MRSA-SCCmecⅢ-t030,耐药形势严峻,应加强医院内耐药菌株的监测.
-
医院获得性感染中出现携带SCCmecⅣ/Ⅴ的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
目的 研究某院临床分离的医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型及分子流行病学特征.方法 收集中南大学湘雅医院2012年1月~2012年12月临床分离的71株HA-MRSA,采用多重PCR进行SCCmec分型,PCR检测PVL毒素基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性.结果 71株HA-MRSA以SCCmecⅢ型为主,占69.0%(49/71),其次为SCCmecⅣ型、SCCmecⅤ型和SCCmecⅡ型,分别占14.1%(10/71)、4.2%(3/71)和4.2%(3/71),另有6株(8.5%)菌株未能分型.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA感染者年龄显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,携带PVL基因阳性率显著高于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,而两者入院至检出菌株的时间及住院天数均未见明显差异.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA对左旋氧氟沙星、环丙沙星、利福平、庆大霉素、四环素等的耐药率均显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA(P<0.05).13株HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA菌株在55%的相似度水平形成一个大的组群.按照≥85%的相似度,这些菌株共形成3个PFGE簇以及4个单一菌株的PFGE型.结论 在国内首次发现携带SCCmecⅤ型的HA-MRSA菌株,HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA已有在医疗机构传播的趋势,并成为医院内感染的重要来源.
-
金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的相关性研究
目的 研究携带TSST-1和PVL基因的金黄色葡萄球菌耐药特点、分布特征及与致病性的关系.方法 临床收集74株金黄色葡萄球菌,采用PCR法检测TSST-1、PVL和mecA基因,纸片扩散法进行17种抗菌剂的耐药性检测.结果 74株金黄色葡萄球菌中mecA基因检出率为55.4%,其中22株检出 PVL基因(30.3%),PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为15株(36.6%),甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)为7株(21.2%),两者间差异无统计学意义(P＞0.05).5株金黄色葡萄球菌中检出TSST-1基因(6.3%),均为 MRSAMRSA耐药性严重,并呈多重耐药性,携带基因PVL和TSST-1的MRSA除对万古霉素敏感外,对其他抗菌剂均耐药.结论 携带基因TSST-1和PVL的金黄色葡萄球菌耐药性及致病力更强,增加了临床抗感染治疗的难度.
-
我国猪源甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的分离与分子分型研究
目的:近期研究发现,养殖生猪是甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(Methicillin -resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的重要宿主,本研究旨在阐明MRSA在我国养殖生猪中的分布和遗传学特征.方法:从我国河北、陕西、湖北和四川的生猪养殖场或屠宰场采集生猪鼻咽部拭子进行MRSA分离和鉴定,并对分离株进行了表型和基因型的分析.结果:从569份生猪鼻咽部拭子中分离出58株MRSA,这些菌株的耐药表型主要有2种:CIP - CLI - ERY - FOX - GEN - TET - CHL和CIP - CLI -ERY-FOX-GEN-TET;所有菌株均属于spa t899和SCCmecⅢ型,未检出PVL基因.经多位点测序分型分析后发现,我国猪源MRSA菌株以ST9型为主；脉冲场电泳(Pulssed Gel Electrophoresis,PFGE)分型分析显示,猪源MRSA菌株中存在优势的PFGE基因型和基因簇.结论:在我国养殖生猪中广泛存在ST9 - spa899 - SCCmecⅢ型MRSA菌株,这些菌株可能成为社区MRSA感染的新来源.
