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夹脊电针对腰椎间盘退行性病变兔模型椎间盘髓核蛋白聚糖表达的影响
目的 观察夹脊电针对腰椎间盘退行性病变(LDD)兔模型腰椎间盘髓核蛋白聚糖表达的影响.方法 40只新西兰兔随机分为正常组、假手术组、模型组和治疗组,组内分为28 d、56 d两个取材时间点作为亚组,每个亚组5只.轴向压力诱导LDD后行L4、L5夹脊穴电针干预28 d,各组于28 d、56 d取椎间盘组织,Western Blot法检测二聚糖(BGN)及核心蛋白多糖(DCN)蛋白表达.结果 与正常组同期比较,假手术组各时间点BGN及DCN蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);模型组28 d、56 d BGN及DCN蛋白表达降低(P＜0.05).与模型组同期比较,电针组56 d BGN及DCN蛋白表达升高(P＜0.05).结论 夹脊电针可以通过上调退变椎间盘髓核组织中蛋白聚糖的表达防治LDD.
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实时荧光定量聚合酶链式反应检测瘢痕疙瘩中核心蛋白多糖的表达
目的 探讨瘢痕疙瘩成纤维细胞中核心蛋白多糖的表达、含量,及其在瘢痕疙瘩形成中的作用和机制.方法对瘢痕疙瘩、正常瘢痕以及正常皮肤成纤维细胞进行体外培养,采用光镜、透射电镜观察成纤维细胞形态、活性及凋亡；应用实时荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)对核心蛋白多糖以及β1转化生长因子(TGF-β1)的mRNA表达进行检测、分析.结果 瘢痕疙瘩成纤维细胞形态不规则、排列紊乱,线粒体增多,粗面内质网扩张呈囊,细胞核常染色质丰富,表明其合成蛋白的功能活跃；瘢痕疙瘩成纤维细胞中核心蛋白多糖mRNA含量较正常瘢痕或正常皮肤成纤维细胞降低,而TGF-β1 mRNA表达则较正常皮肤及瘢痕组织成纤维细胞升高.结论 核心蛋白多糖在瘢痕疙瘩成纤维细胞内含量较正常皮肤明显减少,提示其对成纤维细胞增殖、合成的抑制作用随之减弱,同时使TGF-β1表达上调,导致成纤维细胞的大量增生、迁移,合成过量胶原.表明核心蛋白多糖是抑制瘢痕疙瘩形成的重要因子.
关键词： 瘢痕疙瘩 核心蛋白多糖 β1转化生长因子 成纤维细胞 实时荧光定量聚合酶链式反应 -
核心蛋白多糖在病理性瘢痕形成中的作用
核心蛋白多糖(decorin)是蛋白多糖家族中的一员.其生物活性十分活跃,它能中和、灭活转化生长园子-β(TGF-β)等多种细胞因子,具有调节基质重构、抗凋亡、抗炎及抗黏附等作用,是一种抗纤维化的蛋白质.本文主要对其生物学效应、调控方式及在病理性瘢痕中的作用作一综述.
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核心蛋白多糖及其mRNA在硬皮病模型小鼠皮损中的表达
目的 观察核心蛋白多糖及其mRNA在正常小鼠皮肤和硬皮病小鼠皮损中的表达,探讨其在硬皮病发病中的作用.方法 构建博来霉素诱导的硬皮病小鼠模型,从皮肤和肺组织病理及胶原含量2个方丽来验证模型;用免疫组织化学法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定核心蛋白多糖及其mRNA在硬皮病小鼠及正常小鼠皮肤中的表达.数据采用秩和检验和t检验进行分析.结果 根据模型组小鼠和对照组小鼠的皮肤和肺组织病理、皮肤胶原含量的比较,确定硬皮病小鼠模型构建成功.免疫组织化学示:核心蛋门多糖mRNA在对照组没有显著的阳性表达变化;RT-PCR示:核心蛋白多糖在空白对照组小鼠皮肤中呈阳性高表达(0.60±0.15),而在模型组小鼠呈现表达下调[(0.26±0.03),P<0.05].结论 核心蛋向多糖及其mRNA在硬皮病小鼠中呈低表达;推测这种低表达可能与转化生长因子(TGF)-β1与TGF-β2在硬皮病小鼠中高表达,中和或消耗核心蛋白多糖有关.
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碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜细胞内核心蛋白多糖基因表达的影响
目的:研究己证实,碱性成纤维细胞生长因子刺激牙周膜细胞后可促进人牙周膜细胞的增殖,以利于重建丧失的牙周组织.利用不同质量浓度碱性成纤维细胞生长因子刺激体外培养的人正常牙周膜细胞,观察牙周膜细胞内核心蛋白多糖基因表达.方法:采用胰酶消化法分离培养牙周膜细胞.取第3代对数生长期的细胞,加入含有10%二甲基亚砜和含体积分数20%胎牛血清冻存液的DMEM中进行冻存,第2天移入液氮中保存.免疫组织化学方法行抗波形丝蛋白、角蛋白染色鉴定.取第6代人牙周膜细胞,分为实验组和空白组.实验组分别用含质量浓度为0.1,1,10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子的DMEM培养液标准条件下培养24 h;空白组用DMEM培养液标准条件下培养24 h.RT-PCR法检测细胞内核心蛋白多糖基因表达变化.结果:镜下观察空白组细胞未见明显变化,实验组可见细胞增殖,刺激前瓶底细胞较稀疏的区域变得密集了.加入碱性成纤维细胞生长冈了的牙周膜细胞内核心蛋白多糖的mRNA表达水平明显下降了,而且随着碱性成纤维细胞生长因子质量浓度的增加,抑制作用逐渐减弱,在0.1 μg/L时抑制作用强,在10 μg/L时抑制作用弱.结论:碱性成纤维细胞生长凶子刺激可促进牙周膜细胞增殖,呈剂量依赖性抑制核心蛋白多糖的合成,0.1 μg/L时抑制作用强.
关键词： 牙周组织再生 碱性成纤维细胞生长因子 核心蛋白多糖 组织工程 -
骨缺损区核心蛋白多糖含量变化的实验研究
目的 观察骨缺损区随时间变化骨断端组织成分和核心蛋白多糖(decorin,DCN)含量的变化,分析两者的关系.方法 选取新西兰大白兔,于桡骨中段截除1.0 cm骨段,去除骨外膜,石蜡封闭髓腔,分别于术后4、6、8周后行大体观察、影像学和组织学检测,比较骨断端组织成分的变化,免疫组化检测组织中DCN的表达.结果 随着骨缺损形成时间延长,骨断端的骨痂逐渐减少,组织成分渐向纤维瘢痕组织变化,DCN的表达在骨缺损形成8周时明显降低.结论 骨缺损区组织纤维瘢痕化转变与局部组织成骨能力低下和DCN分泌减少密切相关.
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Decorin对人僵直膝关节滑膜囊成纤维样滑膜细胞增殖及蛋白合成的抑制作用
[目的]探讨重组核心蛋白多糖(decorin)对培养的人僵直膝关节滑膜成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的增殖和Ⅰ型胶原蛋白及mRNA合成的影响,为Decorin治疗人膝关节僵直提供理论依据.[方法]分离培养人僵直膝关节滑膜FLS,分别加入不同质量浓度(10 μg/ml,0.1μg/ml)的Decorin;培养24、48、72h后用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法测定FLS的增殖速度;用流式细胞仪检测FLS的周期和凋亡;用RT-PCR法检测FLS合成Ⅰ型前胶原蛋白(PcⅠ)mRNA的含量,westem Blot检测Ⅰ型胶原蛋白的合成量,并与对照组比较.[结果] 10 μg/ml的Decorin可有效抑制滑膜FLS的增殖(P＜0.05),明显增加FLS处于G0/G1期的百分比(P＜0.05),并通过下调Pc Ⅰ mRNA的表达,在转录水平上抑制Pc Ⅰ的合成;实验组和对照组均未检测到终末期凋亡细胞.[结论] Decorin可抑制人僵直膝关节滑膜FLS的增殖及Pc Ⅰ mRNA的表达和Ⅰ型胶原蛋白合成,在防治膝关节僵直中起一定的作用.
关键词： 膝关节僵直 成纤维细胞样滑膜细胞 核心蛋白多糖 Ⅰ型胶原蛋白 -
UVA1对硬皮病小鼠模型影响的实验观察
目的:观察UVA1对硬皮病小鼠模型的影响.方法:用波长365 nm UVA1照射博来霉素诱导的硬皮病小鼠模型,观察照射前后局部皮肤的变化,进行皮肤病理检查、羟脯氨酸含量测定及免疫组化法测定核心蛋白多糖、TGFβ1及TGFβ2等因子.结果:照射组与模型组相比,局部硬化皮肤明显软化,羟脯氨酸含量显著降低(P<0.05);病理示真皮层变薄,胶原纤维排列疏松,数量减少;免疫组化示核心蛋白多糖无阳性表达;TGFβ1 和TGFβ2呈阳性表达,且照射对其阳性表达有影响.结论:UVA1照射的有效性可能与其下调与硬皮病相关的细胞因子TGFβ1和TGFβ2等表达有关.
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Decorin抑制骨髓炎所致骨骼肌过度纤维化机制研究进展
慢性骨髓炎时骨骼肌受炎性因子的持续刺激而发生过度纤维化,导致瘢痕形成,修复极度困难.近年来对骨骼肌纤维化机制的研究显示,多种细胞和系列调控分子参与该过程,根据其发生过程多种方法被用于瘢痕再治疗.核心蛋白多糖(Decorin)是肌肉、皮肤、软骨、韧带、肝、肾等组织细胞外基质中的小分子蛋白多糖,主要通过与转化生长因子-β及Ⅰ型胶原的作用来抑制纤维化的进程,广泛用于瘢痕的治疗.本文就Decorin抑制骨髓炎所致骨骼肌过度纤维化机制进行综述.
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首发未服药精神分裂症患者血清核心蛋白多糖水平与认知功能的关系
目的 通过分析首发未服药精神分裂症患者血清核心蛋白多糖(Decorin,DCN)水平与认知损伤的关系,探讨DCN在精神分裂症发病机制中可能的作用.方法 纳入首发未服药的精神分裂症患者30例(精神分裂症组);同期纳入年龄、性别与疾病组匹配的健康对照30名(对照组).采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评估精神分裂症组的精神病理症状,MATRICS共识认知成套测验(MCCB)评估所有研究对象的认知功能;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测所有被试的血清DCN水平.结果 精神分裂症组血清DCN水平显著低于对照组[(1.56± 0.96) ng/ml,(3.35± 1.71) ng/ml,P＜0.01];血清DCN水平与PANSS阳性症状评分呈正相关(r=0.41,P=0.03),与MCCB言语流畅度(r=-0.40,P=0.04)、言语记忆(r=-0.42,P=0.02)、视觉记忆(r=-0.39,P=0.04)、持续操作(r=-0.41,P=0.03)、符号编码(r=-0.49,P=0.01)、连线T分(r=-0.42,P=0.02)及总分(r=-0.55,P＜0.01)呈负相关;控制年龄、性别和受教育程度后,上述相关关系仍然存在.结论 首发未服药精神分裂症患者血清DCN水平与认知功能相关;DCN可能参与了精神分裂症疾病的发生.
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多重酪氨酸激酶受体抑制剂decorin对高糖低氧条件下血-视网膜内屏障的保护作用及机制研究
目的 研究核心蛋白多糖(decorin)对高糖低氧条件下血-视网膜内屏障的保护作用及机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞,采用细胞计数试剂盒检测不同浓度decorin对人脐静脉内皮细胞存活率的影响;高糖低氧条件下(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+100 μmol·L-1 CoCl2)孵育人脐静脉内皮细胞,通过ELISA检测不同浓度decorin处理后,不同时间点人脐静脉内皮细胞分泌血管内皮生长因子水平.将细胞分为正常对照组(5.5 mmol·L-1右旋葡萄糖)、高糖低氧组(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+100 μmol·L-1 CoCl2)、甘露醇对照组(5.5 mmol·L-右旋葡萄糖+ 19.5 mmol·L-1甘露醇)及decorin处理组(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+ 100 μmol·L-CoCl2+100 nmol · L-decorin),通过检测跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TER)、异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(fluorescein isothiocyanate,FITC-dextran)的渗漏率来评估单层人脐静脉内皮细胞的屏障功能;Western blotting检测内皮细胞间紧密连接蛋白(claudin-5、occludin、ZO-1)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)的磷酸化水平.结果 细胞计数试剂盒检测发现,10 nmol·L-1、50 nmol·L-、100 nmol·L-1、200nmol·L-1 decorin处理人脐静脉内皮细胞24h后,各组人脐静脉内皮细胞的存活率均大于90％,差异无统计学意义(均为P＞0.05).在接种后14 d,单层人脐静脉内皮细胞的TER达到大值且趋于稳定为(170.67±9.07)Ω.与正常对照组比较,高糖低氧处理48 h后,高糖低氧组的TER显著降低至(97.33±6.11)Ω,而decorin组的TER能够维持在(157.67±11.72)Ω,与高糖低氧组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).高糖低氧处理48 h后,高糖低氧组FITC-dextran的渗透性明显增加,488nm处的吸光度值为正常对照组的(2.12±0.07)倍(P＜0.05).加入100 nmol·L-1的decorin处理后,FITC-dextran的渗透性明显减少,吸光度值是正常对照组的(1.16±0.03)倍,与高糖低氧组的差异有统计学意义(P＜0.05).高糖低氧处理48 h后,高糖低氧组紧密连接蛋白claudin-5表达量为0.38±0.05、occludin为0.43±0.02及ZO-1为0.25±0.02与正常对照组表达量0.72±0.05、0.90±0.01和0.75±0.02相比,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).decorin组claudin-5、occludin及ZO-1表达量分别为0.65 ±0.08、0.87±0.03和0.60±0.01,与高糖低氧组相比,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).高糖低氧组p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值增加,为0.88±0.02,而decorin组p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值(0.58±0.04)接近正常对照组水平(0.56±0.02),与高糖低氧组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 decorin能够保护高糖低氧条件下单层人脐静脉内皮细胞的屏障功能并下调p38 MAPK的表达水平,是治疗糖尿病视网膜病变的可能药物.
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核心蛋白多糖抑制翼状胬肉成纤维细胞增生的实验研究
目的 观察核心蛋白多糖对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibroblasts,HPF)增生和凋亡的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉切除术后复发的新方法.方法 采用组织块法体外培养HPF,将处于对数生长期的细胞用于实验.将0.1 mg·L-1、1.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1的Decorin分别加入细胞培养基中培养24 h、48 h、72 h.MTT比色法分别测定不同浓度的Decorin作用于HPF不同时间后的细胞生长抑制率,流式细胞仪测定细胞周期时相变化,免疫组织化学法染色PC-NA检测细胞生长活性.结果 MTT结果显示不同浓度组Decorin作用HPF 24 h细胞生长抑制率分别为(7.8l±1.26)％、(19.52±2.14)％、(42.69±1.62)％,作用48 h分别为(10.19±2.74)％、(22.28±0.97)％、(45.73±0.82)％,作用72 h分别为(20.49±1.39)％、(29.50±2.47)％、(59.4l±1.71)％.随着药物浓度的逐渐增高和作用时间的延长,细胞生长抑制率逐渐增加,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).流式细胞仪检测各浓度Decorin组HPF中G0/G1期细胞比率均较空白对照组高,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).当Deeorin浓度在0.1～10.0mg· L-1范围内作用HPF 72 h,均能够明显抑制细胞表达PCNA(均为P＜0.05).结论 Decorin可以抑制HPF的增生,诱导其凋亡,且呈明显的剂量和时间依赖性,有望成为防治翼状胬肉的药物之一.
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核心蛋白多糖对兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用
目的 探讨核心蛋白多糖(Decorin)对兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)增生的抑制作用及其剂量-效应与时间-效应的关系,为药物防治后发性白内障提供新的选择.方法 MTT比色法分别测定不同浓度的Decorin(0.1 mg·L-1、1.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1)作用于LEC不同时间后的细胞生长抑制率;采用流式细胞技术测定细胞周期,用ELISA法检测各组培养液上清中TGF-β的水平,RT-PCR测定TGF-β mRNA的表达,免疫细胞化学观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA).结果 ELISA示每100万个细胞中对照组TGF-β含量为(427.24±41.34)ng,0.1 mg·L-1、1.0 mg·L-1和10.0 mg·L-1 Decorin组TGF-β的含量分别为(236.01±28.63)ng、(117.86±18.14)ng、(111.72±26.72)ng,与对照组比较差异均有显著统计学意义(均为P＜0.01).MTT比色法实验结果显示,作用24 h对照组抑制率为(3.62±1.34)%,0.1 mg·L-1、1.0 ng·L-1和10.0mg·L-1 Decorin组抑制率分别为(4.14±2.08)%、(12.93±2.47)%、(23.47±1.78)%,LEC生长抑制率增加,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);随着Decorin作用时间延长,生长抑制率增加,差异均有统计学意叉(均为P＜0.05).随药物浓度及作用时间延长,LEC出现明显的G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞所占比例明显升高(P＜ 0.05).RT-PCR示Decorin组TGF-β mRNA表达明显减少,与MTT法检测结果呈现大致相同的趋势,免疫细胞化学观察,对照组α-SMA表达较多,细胞肥大,细胞质呈棕色,Decorin组α-SMA较少表达.Decorin表现出明显的抑制作用.结论 Decorin对LEC有抑制增生和诱导凋亡作用.且呈明显的剂量-效应与时间-效应关系,可望成为后发性白内障的防治药物.
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抗眼组织纤维化药物的研究进展
纤维化是许多眼科手术失败的主要原因之一,应用抗纤维化药物能提高手术的成功率.如:5-氟尿嘧啶、丝裂霉素C、组织型纤溶酶原激活剂等已用于实验和临床研究,本文重点提出转化生长因子-β抑制剂核心蛋白多糖(Decorin)有可能作为抗眼组织纤维化的药物.
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核心蛋白多糖对兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用
背景 研究发现,白内障囊外摘出术后组织修复反应可诱导房水中活性转化生长因子β(TGF-β)的增加,残留的晶状体上皮细胞(LECs)移行、分化,细胞外基质沉积,引起上皮-间质转化,导致后囊膜混浊(PCO)的发生.寻求有效的抑制LECs增生的药物对于临床上防治PCO的发生具有重要意义. 目的 探讨核心蛋白多糖( decorin)对兔LECs增生的抑制作用及其剂量-效应与时间-效应的关系. 方法 兔LECs细胞株进行培养和传代,将处于指数生长期的细胞以8×106个/L密度接种于96孔板,将0.1、1.0、10.0 mg/Ldecorin分别加入培养基中培养24、48、72 h,加入体积分数0.1％ DMSO培养的细胞为阳性对照组,常规培养基培养的细胞为空白对照组.MTT比色法分别测定不同质量浓度的decorin作用于LECs不同时间后的细胞生长抑制率；采用流式细胞技术测定各组细胞的细胞周期,用ELISA法检测各组培养液上清中TGF-β的水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定TGF-βmRNA在LECs中的表达,免疫细胞化学法观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 ELISA检测结果表明,各组培养基上清液中TGF-β表达量的差异有统计学意义(F=39.24,P=0.03),不同质量浓度组TGF-β水平均明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),1.0 mg/L、10.0 mg/L decorin组TGF-β水平均明显低于0.1 mg/L decorin组(P＜0.05).MTT比色法结果显示,≥1.0 mg/L decorin组LECs增生的抑制率明显高于空白对照组,各质量浓度decorin组药物作用48 h和72 h后LECs增生的抑制率明显高于24 h的值,药物作用72 h后LECs增生的抑制率明显高于48 h的值,差异均有统计学意义(P＜0.05),各质量浓度decorin组G0/G1期LECs所占比例均较空白对照组明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测显示,TGF-β mRNA的表达随着decorin质量浓度的升高而降低.免疫组织化学染色表明,10.0 mg/L decorin组α-SMA在LECs中的表达明显弱于空白对照组. 结论 Decorin可以抑制LECs的增生,也可以诱导LECs凋亡,其效应呈明显的剂量和时间依赖性,有望成为具潜力的防治PCO的药物之一.
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应用肝细胞生长因子凝胶修复慢性声带瘢痕
慢性声带瘢痕(chronic vocal fold scar)一般继发于喉部创伤、炎症或者手术之后,由于声带固有层组织结构破坏而使声带生物力学功能发生改变,可导致声门功能障碍和严重的发声困难.以往组织学研究发现,声带瘢痕存在细胞外组织结构的改变,如:Ⅰ型胶原沉积物密集或者紊乱,弹性蛋白和核心蛋白多糖减少,纤连蛋白增加以及透明质酸(hyaluronic acid,HA)降低等.这些组织学变化说明慢性声带瘢痕中成纤维细胞的表型合成异常,从而导致声带组织僵硬,因此,若使声带瘢痕恢复振动功能,改变纤维母细胞的表型以及修复细胞外基质结构是必需的.
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碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜成纤维细胞内核心蛋白多糖基因表达的影响
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜成纤维细胞内核心蛋白多糖(decorin)的影响,探讨bFGF在牙周再生中的意义.方法 体外原代培养人牙周膜成纤维细胞,用外源性bFGF刺激细胞,半定量RT-PCR法检测牙周膜成纤维细胞内decorin基因表达的变化.结果 电泳结果表明,bFGF抑制人牙周膜成纤维细胞内deeorin的mRNA合成,并且随着质量浓度的增加抑制作用减弱.结论 decofin具有很多生物学功能,bFGF对decorin的抑制作用很可能是牙周炎损伤修复过程中一个重要的调节因素,为bFGF在牙周组织再生中的作用提供理论基础.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 核心蛋白多糖 牙周膜成纤维细胞 牙周组织再生 -
核心蛋白多糖对TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖的影响
目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)促进Tenon囊成纤维细胞的增殖作用及核心蛋白多糖(decorin)对TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖的影响.方法:(1)取青光眼患者的Tenon囊组织,采用组织块贴壁培养法进行原代培养细胞培养,细胞经过冷冻与复苏后,观察细胞形态结构与生物学特性.(2)用不同浓度(0.01、0.1、1、5、10ng/mL)TGF-β1作用于Tenon囊成纤维细胞48 h.(3)终浓度为5 ng/mL的TGF-β1 和不同浓度(0.01、0.1、1、2、5μg/mL)的decorin共同作用于Tenon囊成纤维细胞48h.MTT比色法检测Tenon囊成纤维细胞增殖.结果:(1)体外成功培养Tenon囊成纤维细胞,细胞生长活跃,形状稳定,细胞经过冷冻与复苏后,仍能保持其原来的细胞形态结构与稳定的生物学特性.(2)1～10ng/mL TGF-β1能促进Tenon囊成纤维细胞的增殖,并与浓度成正比.(3)2～5μg/mL decorin 能抑制TGF-β1促Tenon囊成纤维细胞增殖作用,其抑制作用与浓度成正比.结论: TGF-β1可刺激Tenon囊成纤维细胞增殖,Decorin能抑制TGF-β1促进细胞增殖的作用,其机理可能通过与TGF-β1结合抑制青光眼滤过手术后瘢痕形成.
关键词： 转化生长因子β1 核心蛋白多糖 Tenon囊成纤维细胞 -
探讨核心蛋白多糖体外抑制兔晶状体上皮细胞的转分化
目的:探讨核心蛋白多糖(decorin)对体外培养的兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells, LEC)分泌转化生长因子β1(transforming growth factor β1, TGF-β1)和表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响. 方法:体外原代培养兔LEC,当细胞接近融合时转板培养,分别设置对照组和实验组,对照组为不用药培养12d;实验组为培养6d后加入不同浓度的decorin(10,1.0,0.1mg/L 3个浓度组)继续培养6d,用ELISA法检测各组培养液上清中TGF-β1的水平,免疫细胞化学和计算机图像分析统计各组细胞中α-SMA的表达水平. 结果:实验组TGF-β1水平和α-SMA水平均明显低于对照组的水平(117.9±18.1→427.2±41.3, 111.7±26.7→427.2±41, 236.0±28.6→427.2±41.3;15.7±8.7→97.2±26.9,16.2±9.5→97.2±26.9,54.9±29.6→97.2±26.9,P<0.01),decorin表现出明显的抑制作用;α-SMA的表达量随着TGF-β1水平的下降而下降,两者高度正相关(r=0.995,P<0.01).结论:Decorin抑制活性TGF-β1的水平,下调α-SMA的表达.
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核心蛋白多糖对大鼠创伤性骨髓炎中骨骼肌瘢痕增生的抑制作用
目的 探讨核心蛋白多糖对大鼠骨骼肌钝挫伤后致骨髓炎中瘢痕增生的抑制作用.方法 60只SPF级成年雄性Wistar大鼠,采用自行改良设计的钝挫伤装置造模,造成大鼠股外侧肌群钝挫伤.显露股骨及股骨大转子,向髓腔内注射金黄色葡萄球菌菌液,建立骨髓炎模型.按随机数字表法分为对照组(A组)和核心蛋白多糖干预组(B组),每组30只.A组于术后0,5,10,15,20,25 d局部肌肉注射50μl磷酸盐缓冲液(PBS),B组给予10 μg/ml核心蛋白多糖局部肌肉注射.两组分别于术后7,14,28 d取骨骼肌组织检测,采用HE染色评价慢性骨髓炎中骨骼肌瘢痕化的程度,Western blot检测肿瘤坏死因子-β1(TGF-β1)、磷酸化Smad3和Ⅰ型胶原细胞因子的表达. 结果 HE染色观察发现,与A组比较,B组术后14 d及28 d组织纤维化程度明显减轻.术后7d,A组TGF-β1、磷酸化Smad3和Ⅰ型胶原蛋白表达水平分别为0.152±0.031,0.439±0.035,0.714±0.116;B组分别为0.145±0.039,0.446±0.036,0.712±0.078.B组与A组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).术后14 d,A组TGF-β1、磷酸化Smad3和Ⅰ型胶原蛋白表达水平分别为0.263±0.015,1.082±0.017,1.171±0.138;B组分别为0.136±0.004,0.155±0.040,0.217±0.025;术后28 d,A组TGF-β1、磷酸化Smad3和Ⅰ型胶原蛋白表达水平分别为0.754±0.042,1.197±0.086,1.825±0.044;B组分别为0.307±0.006,0.193±0.028,0.256±0.057.B组较A组的表达水平明显降低(P＜0.05). 结论 局部肌肉注射核心蛋白多糖可以有效抑制大鼠骨髓炎中骨骼肌瘢痕化程度.
