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  • 索拉非尼联合维生素K2对人肝癌细胞裸鼠转移瘤模型的协同治疗效应

    作者:张亚飞;章必成;张安然;吴婷婷;杨波;赵勇;刘健;房殿春;高建飞;饶智国

    目的 利用小鼠人肝癌细胞转移瘤模型,探讨索拉非尼联合维生素K2的协同治疗效应.方法 构建小鼠人肝癌细胞转移瘤模型,分别用1.25mg/kg的索拉非尼和2mg/kg的维生素K2单独或联合给药,观察用药后小鼠肝内、肺内转移瘤情况及生存时间的变化.结果 索拉非尼和维生素K2联合作用较空白对照及单独作用能够显著抑制小鼠肝、肺内转移灶的数量及体积,维持给药可显著改善小鼠生存状态并延长生存时间.结论 索拉非尼和维生素K2对人肝细胞癌有良好的协同治疗效应,可抑制肿瘤肝、肺转移并延长生存期.

  • 大黄素对荷人K562细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

    作者:王春光;刘北忠;金丹婷;王翀;吴燕;朱丹;钟梁

    目的:观察大黄素对白血病K562细胞BALB/c裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2的表达水平,探讨其作用机制.方法:建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,腹腔连续给药12 d,处死裸鼠,称取瘤体质量,计算抑瘤率.采用HE染色光镜和透射电镜方法观察肿瘤细胞的凋亡情况,免疫组化方法观察肿瘤组织中Bax和Bcl-2蛋白表达情况,应用RT-PCR检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2的mRNA水平.结果:各用药组抑瘤作用与阴性对照组相比差异均具有显著性(P<0.05),高浓度组与羟基脲组具有同等的抑瘤效应(P>0.05),光镜和电镜检测发现大黄素低、中、高浓度组均可见瘤细胞凋亡和坏死,其中以高浓度处理组为显著,羟基脲处理组部分瘤细胞以坏死为主.免疫组化和RT-PCR结果表明大黄素处理后肿瘤组织中Bax蛋白和Bax mRNA表达上调,Bcl-2蛋白和Bcl-2 mRNA表达下调.结论:大黄素可以明显抑制K562细胞在裸鼠体内的生长,其作用机制可能是通过调控肿瘤中Bax及Bcl-2的表达,从而促进细胞凋亡.

  • 下调N-cadherin表达对裸鼠原位种植人肝癌细胞转移能力的影响

    作者:纪桂宝;游建;黄志勇;占大钱;梁宾勇

    目的 研究在裸鼠原位种植人肝癌模型中,下调N-cadherin表达对肝癌转移能力的影响.方法 通过原位种植的方法,将极弱表达N-cadherin的LM3-N7细胞与正常表达N-cadherin的LM3-E2细胞分别注射到两组BALB/c裸鼠的肝脏内,6周后取裸鼠肺、肝内转移灶,通过苏木精-伊红(HE)染色观察肺、肝转移灶的情况,分析N-cadherin表达的下调对肝癌细胞转移能力的影响.结果 解剖裸鼠,观察腹水形成及转移灶发现,分别注射LM3-N7和LM3-E2细胞克隆的裸鼠腹水形成(腹腔转移)、肝转移及肺内转移的发生率分别为46.2%(6/13)v s.0%(0/12),46.2%(6/13)vs.41.7%(5/12),23.1%(3/13)vs.16.7%(2/12),统计学分析显示,在腹水形成方面两组差异具有统计学意义(P=0.026),肺转移及肝内转移发生率的差异无统计学意义(均P>0.05).结论 下调N-cadherin表达对裸鼠原位移植癌转移(主要是腹腔转移)具有一定的促进作用,为N-cadherin在肝癌转移机制方面的下一步研究奠定了一定理论基础.

  • 裸鼠阳虚证乳腺癌骨转移模型的建立

    作者:龚辉;黄立中;毛丹;冯磊;刘吉勇

    目的:采用病、证复合模型的方法建立裸鼠阳虚证乳腺癌骨转移模型.方法:采用臀部肌肉注射氢化可的松的方法建立裸鼠阳虚证模型;采用左心室注射乳腺癌细胞MDA-MB-231悬液建立裸鼠乳腺癌骨转移模型;动态观察各组裸鼠生存情况、体重变化,进行X线摄像观察,测定环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、血清甲状腺三碘原氨酸(T3)等值.结果:肌注氢化可的松后,裸鼠出现畏寒肢冷、活动减少、精神萎靡、皮毛少光泽、饮食减少、大便清稀等阳虚表现,且cAMP明显下降、cGMP明显升高、cAMP/cGMP值下降,T3值明显升高;左心室注射乳腺癌细胞悬液后裸鼠出现不同程度的骨转移,且经X线摄像检查确诊.结论:对裸鼠肌注氢化可的松可成功建立阳虚证模型;左心室注射法建立乳腺癌骨转移模型的成功率较高.

  • 放射性碘标胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤特性研究

    作者:徐浩;罗劲祥;陈健

    目的:观察放射性碘标胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤特性.方法:采用荷人肝癌裸鼠模型.用放射性碘标记胰岛素进行荷人肝癌裸鼠体内分布实验、抑制实验和显像研究.结果:体内分布实验显示,肝癌组织摄取[125I]-胰岛素明显高于本底组织(肌肉);肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性比值随时间延长而增高.体内抑制实验肿瘤组织的抑制率为35%.接种肿瘤部位有明显的局部放射性浓聚,非标记胰岛素能明显抑制肿瘤组织中的放射性浓聚.结论:放射性碘标胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内,通过受体介导作用,能被肝细胞癌组织特异性摄取.

  • H1受体拮抗剂异丙嗪降低紫杉醇对卵巢癌的化疗作用

    作者:李于鑫;杜安通;范梦迪;朱晓彤;陈玉霞

    目的:观察紫杉醇化疗时为缓解过敏反应而常规联用的组胺H1受体拮抗剂是否影响其疗效。方法:构建荷人卵巢癌裸鼠模型,随机分为对照、单用紫杉醇、单用异丙嗪、异丙嗪+紫杉醇4组,6.5 mg/kg异丙嗪或生理盐水腹腔注射给药0.5 h后,再予腹腔注射10 mg/kg紫杉醇或生理盐水(每3 d 1次,共4次),测量肿瘤体积和瘤重。免疫组化检测肿瘤血管标志物CD31的表达;MTT法检测卵巢癌细胞株SKOV3和CAOV3的增殖情况;Annexin V/PI流式分析细胞的凋亡情况;荧光定量PCR检测VEGF mRNA的表达。结果:上述4组瘤体体积增加量和瘤重分别为461.52 mm3(0.451 g)、314.66 mm3(0.320 g)、571.81 mm3(0.503 g)和462.47 mm3(0.454 g)。单用异丙嗪组瘤体CD31的表达量高,异丙嗪+紫杉醇联用组者亦明显多于单用紫杉醇组。异丙嗪对卵巢癌细胞的增殖、VEGF的表达和紫杉醇诱导的凋亡没有影响。结论:卵巢癌化疗时使用H1受体拮抗剂异丙嗪会降低化疗药的效果,机制可能与异丙嗪促进肿瘤血管生成有关。

  • Avastin对胃癌裸鼠原位移植模型血管生成的影响

    作者:王宁;王斌;王雅杰

    背景与目的:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和肿瘤的生长和转移密切相关,本实验通过VEGF单克隆抗体Avastin联合或不联合氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),对人类胃癌裸鼠原位种植模型的肿瘤生长和转移进行干预治疗,从而探讨Avastin对胃癌生长、转移和血管生成的抑制作用.方法:应用原位移植方法建立裸鼠胃癌转移模型,术后10天将裸鼠随机分为4组:对照组、5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组.经过6周的治疗,对裸鼠原位肿瘤的瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度、凋亡指数以及肝脏转移灶进行检测和分析.结果:和对照组相比,5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组原位移植肿瘤重量明显降低,抑瘤率分别为37.52%,58.76%和98.51%.微血管密度Avastin单药组和联合用药组均比对照组明显减少(8.40±1.26和7.20±1.23 vs 15.30±1.06),而5-FU组与对照组之间没有显著的差别;Avastin单药组和联合用药组的凋亡指数比对照组明显升高[(11.50±1.58)%和(13.60±1.35)%vs(4.70±1.70)%].联合应用Avastin和5-FU对肝脏转移灶具有明显的抑制作用,而其他3组的抑制肝转移效果没有明显的差别.结论:抗VEGF抗体Avastin通过抑制肿瘤新生血管的生成而诱导胃癌细胞凋亡,进而显著抑制裸鼠原位肿瘤的生长.联合应用Avastin和5-FU不仅对原位肿瘤的生长抑制为明显,而且对肝脏转移有显著的抑制作用.因此,联合应用Avastin和传统的细胞毒化疗药物对胃癌的治疗效果更显著.

  • 5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌裸鼠移植瘤的抑制作用

    作者:张松;孔维佳;王彦君;韩月臣;张丹

    背景与目的:5-杂氮-2′-脱氧胞苷是DNA甲基转移酶抑制剂,能使因甲基化而失活的抑癌基因重新激活,进而抑制肿瘤的生长.本文观察了5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其抗肿瘤效应及可能的机理,寻找鼻咽癌治疗的新靶点.方法:用5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理人鼻咽癌细胞,观察其对细胞生长的抑制及死亡相关蛋白激酶基因(death-associated protein kinase,DAPK)甲基化情况.建立人鼻咽癌移植瘤裸鼠模型,用5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理裸鼠,观察移植瘤的生长情况,并用RT-PCR和免疫组织化学技术检测DAPK基因mRNA及蛋白表达的变化.结果:未经5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理的CNE细胞中DAPK mRNA不表达.经5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理后,不同药物浓度组的细胞中均有DAPK mRNA表达,且表达随浓度增高而增强.5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长均有明显的抑制作用,且能使失活的DAPK基因重新激活.药物作用4周后,用药组裸鼠体重(22.35±2.02)g与对照组(21.68±2.14)g之间无显著性差异(t=0.011,P>0.05),用药组肿瘤的体积(195.32±27.57)mm3较对照组(343.67±23.08)mm3明显减小,两者之间有显著性差异(t=10.11,P<0.01).在鼻咽癌移植瘤中,对照组DAPK均不表达,而用药组出现表达.结论:5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的抑制作用可能是因为其使因甲基化而失活的抑癌基因DAPK再转录,诱导该基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长和增殖.

  • 人单核细胞白血病多器官浸润裸鼠模型的建立

    作者:李振江;陈子兴;岑建农;路军;何军

    背景与目的:急性白血病常伴有髓外多器官的浸润,髓外复发为白血病患者的一种复发形式,而白血病细胞浸润机制并未完全阐明.本文通过建立人单核细胞白血病裸鼠多器官浸润模型,为对其机制进行研究提供模型基础.方法:对4和6周龄的BALB/c裸鼠进行切脾(splenectomy),环磷酰胺腹腔注射(cytoxan intraperitoneal injection)及全身亚致死剂量辐照(sublethal irradiation)等预处理(SCI)后,经尾静脉接种5×106或1×107个人单核细胞白血病SHI-1细胞,应用RT-PCR、组织病理切片、免疫组织化学以及流式细胞术等检测裸鼠各脏器中SHI-1细胞浸润生长情况.结果:SHI-1细胞可植入经预处理的裸鼠体内,检测发现各组裸鼠全身多脏器如肝、肺、肾、睾丸均可受累,并可于体表及体内多部位形成淡绿色的肿块.4周龄裸鼠可于多部位如胃、头颅、椎体、纵隔内、骨骼上形成肿块,并于骨髓中可检测到人CD45阳性细胞,平均为2.85%;而6周龄组仅于少部分脏器形成肿块,骨髓中不能检测到人CD45阳性细胞.结论:人单核细胞白血病细胞株SHI-1能在经SCI预处理的裸鼠体内形成白血病及多器官浸润模型,可作为研究白血病及髓外浸润的一种有用工具.

  • VEGF在人子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义

    作者:杨芳;马颖;何援利

    目的 建立人子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型,检测血管内皮生长因子(VEGF)在正常在位内膜及裸鼠异位内膜的表达,探讨其在EMs发生发展中的作用.方法 分别采用皮下种植和腹腔注射的方法,建立EMs裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,并采用免疫组化法检测正常在位内膜及裸鼠异位内膜中VEGF蛋白表达水平.结果 实验裸鼠共20只,皮下种植组10只,8只成模,腹腔注射组10只,7只成模,异位病灶在光镜下呈现增生期特点;正常在位内膜10例,VEGF蛋白在异位内膜中的表达有增多趋势(t=2.632,P<0.05).结论 成功建立人EMs裸鼠皮下种植及腹腔注射模型,检测到VEGF表达较正常在位内膜增多,该模型可用于进行人EMs血管生成及抗血管生成治疗的研究模型.

  • 应用CSC-GE-80基因芯片筛查人子宫内膜早期异位种植的血管生长相关基因

    作者:王宁宁;张玉凤;张红霞;谭金凤;谢洪哲;姚书忠;庄广伦;牛刚;黄建昭;何勉

    [目的]探讨子宫内膜异位早期种植的相关基因,特别是与早期种植相关的血管生长基因.[方法]采用裸鼠人子宫内膜皮下种植的方法,建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,在种植后14 d,取出成模病灶与未种植内膜进行CSC-GE-80基因芯片筛查比较.[结果]在基因表达谱中有显著性上调基因50个,有显著性下调基因47个,包括生长因子和细胞因子及其受体的变化,其中生长因子受体结合蛋白10(growth factorreceptor-bound protein 10,Grb10)与丁酸盐反应因子1(butyrate response factor 1)中表皮生长因子(EGF-response factor 1)上调明显,下调明显胰岛素样生长因子结合蛋白7(insulin-like growth factor binding protein 7).[结论]通过基因筛查我们初步考虑生长因子结合蛋白10(growth factor receptor-bound protein 10)有可能参与早期异位内膜的血管生长.

  • 裸鼠人子宫内膜异位症模型建立与病灶血管形成相关检测

    作者:王宁宁;姚书忠;庄广伦;黄建昭;谢洪哲;吴惠茜;董愉;郑树森

    [目的]探讨裸鼠人子宫内膜异位症模型的建立方法,研究血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管生成与异位人内膜病灶病理组织发生的关系.[方法]分别采用皮下接种、腹腔放置与腹腔注射的方法,建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,连续切片观察病灶的血管生成,再使用S-P免疫组化染色法检测10例成模裸鼠的14处病灶中VEGF的表达及微血管密度(MVD).[结果]实验裸鼠共18只,皮下接种组10只,8例成模;腹腔放置组4例,1例死亡,2例成模;腹腔注射组4只,均无成模.连续切片结果发现于种植第4天组织内出现血管生长,异位人子宫内膜病灶的VEGF表达阳性率腺上皮动情前期10.1±3.2,动情后期12.5±5.4;间质动情前期4.9±2.5,动情后期5.2±3.7;MVD动情前期(80±15)/mm2,动情后期(84±23)/mm2,腺上皮表达VEGF有增多趋势.[结论]成功建立裸鼠皮下与腹腔人异体移植模型,同时发现异位人内膜于种植第4天出现血管生长.模型病灶种植后15d检测到血管增生与腺上皮VEGF的表达增高,可适宜进行抗血管生成治疗评估.

  • 内皮抑素在人子宫内膜异位症裸鼠模型中的治疗作用术

    作者:杨芳;何援利;马颖

    目的 建立人子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型,探讨内皮抑素治疗内异症的作用.方法 采用皮下种植方法,建立内异症裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,采用免疫组化法检测内皮抑素的不同给药方法裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平.结果 实验裸鼠共25只,加只成模,以内皮抑素按2 mg/(kg·d)分别自尾静脉注射(静脉注射组8只)及局部注射(局部注射组7只),对照组注射5只(局部注射)同体积PBS,比较3组异位病灶VEGF的表达.注射内皮抑素的两组异位病灶的VEGF表达均明显降低,差异均有显著性(P<0.05),而两组之间比较,局部注射组VEGF的表达较静脉注射组低,差异有显著性(P<0.05).结论 成功建立人子宫内膜异位症裸鼠皮下种植模型,通过不同给药途径内皮抑素对内异症裸鼠异位内膜VEGF分泌的抑制、局部给药效果好于全身用药,给今后内皮抑素应用于临床治疗子宫内膜异位症提供了实验依据.

  • 大剂量分割照射人肝癌细胞系移植瘤的实验研究

    作者:黄莹;高远红;郭芬芬;田莹;罗容珍;何洁华

    目的:研究不同大剂量分割照射模式对BALB/c-nu裸鼠移植瘤(人原发性肝细胞癌细胞系HepG2)抑制肿瘤作用的差异.方法:将原发性肝细胞癌移植瘤种鼠的肿瘤组织制备成1 mm3大小的肿瘤组织块,选择实验裸鼠右后肢外侧小腿腓肠肌处接种,建立原发性肝细胞癌细胞系移植瘤裸鼠照射模型.待肿瘤直径达1.0 cm时将40只实验裸鼠分成4个组:未照射空白对照组、5 Gy×6次分割组(5 Gy组)、10 Gy×3次分割组(10 Gy组)、15 Gy * 2次分割组(15 Gy组).各照射组均在2周内完成照射,照射完成后继续观察裸鼠肿瘤体积的变化.结果:实验过程中无出现裸鼠死亡,亦未观察到明显的裸鼠进食、活动减少,皮疹、腹泻、脱皮等不良反应.三种大剂量分割方案均对裸鼠的移植瘤有明显抑制作用.5 Gy组、10 Gy 组和15 Gy组肿瘤抑制率分别为30.2%,68.4%,73.1%.相对于5Gy和10 Gy照射组,15 Gy组对移植瘤的抑制作用更显著.结论:BALB/c-nu裸鼠移植瘤(人肝细胞癌细胞系HepG2)对大剂量分割照射模式能较好耐受.在相同总剂量情况下,剂量越高,移植瘤的生长抑制作用越强.15 Gy×2次较10 Gy×3次和5Gy×6次有更强的肿瘤生长抑制作用.

  • p27基因修饰后对大肠癌的抑制作用

    作者:杜勇;徐少勇;陈珺;杨建业

    目的:以腺病毒为载体,研究外源性突变型p27(p27mt)基因对大肠癌的体内抑制作用.方法:应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BALB/c裸鼠皮下,构建大肠癌裸鼠模型,将已成功构建的腺病毒介导的突变型p27(Ad-p27mt)及Lac-Z采用瘤体内直接注射法注射到瘤体内,与空白对照组比较,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤生长抑制率,并进行细胞凋亡的相关检测.结果:Ad-p27mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,有更强的促凋亡作用,与Lac-Z组、空白对照组比较,差异有显著性(P<0.01).结论:Ad-p27mt基因对大肠癌裸鼠模型的体内肿瘤有明显抑制作用.

  • 沉默STC2对裸鼠结肠癌模型中肝转移瘤形成情况及IL-10和VEGF表达水平的影响

    作者:龚立刚;王梦萍;刘文俊;李菲;任斌

    目的 建立结肠癌肝转移裸鼠模型,探讨斯钙素2 (Stanniocalcin 2,STC2)在结肠癌肝转移中的作用.方法 利用慢病毒载体将shRNA转染入HCT116细胞以沉默STC2,构建沉默STC2的HCT116细胞系,并用Western Blot验证沉默STC2效果,建立结肠癌肝转移动物模型,分析STC2在结肠癌肝转移中的作用.将24只雄性Balb/c裸鼠随机分为实验组及对照组,每组12只.实验组将沉默STC2的HCT116细胞系—HCT116pLL3.7-STC2注射入Balb/c裸鼠脾脏并保留脾脏建模;对照组将未沉默STC2的HCT116细胞系—HCT116pLL3.7-Con注射入Balb/c裸鼠脾脏并保留脾脏建模.观察两组Balb/c裸鼠肝转移瘤形成情况,采用免疫组织化学方法检测Balb/c裸鼠肝脏内转移瘤中IL-10和VEGF的表达.结果 Western Blot实验提示造模成功,沉默STC2的实验组细胞HCT 116pLL3.7-STC2中STC2蛋白量的表达少于对照组细胞HCT116pLL3.7-Con.实验组肝转移瘤发生率为41.67%(5/12),对照组为91.67%(11/12),组间差异有统计学意义(P<0.05).实验组肝转移瘤数量少于对照组(P<0.05),两组肝转移瘤大小和肝脏重量的差异均无统计学意义(均P> 0.05).实验组肝转移瘤中IL-10及VEGF表达水平均低于对照组(均P<0.05).结论 在裸鼠模型中,将STC2沉默后的结肠癌细胞肝转移潜能下降,且其肝转移瘤中IL-10及VEGF的表达水平低于未沉默者.

  • c-jun基因沉默对放射抗拒鼻咽癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响

    作者:林国享;李龄;曲颂;余彬彬;梁忠国;孙永楚;周磊;陈凯华;卢其腾;朱小东

    目的 探讨c-jun基因沉默对人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响.方法 用携带shRAN慢病毒载体感染CNE-2R细胞以沉默c-jun基因,构建c-jun-shRNA-CNE-2R细胞组(c-jun-shRNA组)以及阴性对照NC-shRNA-CNE-2R细胞组(NC组),以CNE-2R细胞为空白对照组,采用Western blot检测3组细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达水平.构建裸鼠模型,观察3组细胞裸鼠皮下种植瘤生长曲线及体积;采用免疫组化法检测移植瘤组织中VEGF、CD34的表达,并检测组织内微血管密度(microvessel density,MVD).结果 Western blot结果显示,c-jun-shRNA组细胞VEGF蛋白表达较NC组及空白对照组明显下调(P<0.05).裸鼠模型实验中,c-jun-shRNA组移植瘤体积为(720.85±72.10) mm3,质量为(0.42±0.04)g,MVD为11.69±3.30;NC组移植瘤体积为(1 196.81±90.69) mm3,质量为(0.80±0.08)g,MVD为32.56±7.33;空白对照组移植瘤体积为(1 203.76±100.42) mm3,质量为(0.83±0.05)g,MVD为35.45-±4.87;c-jun-shRNA组种植瘤体积、质量、MVD较NC组和空白对照组低(P<0.05).免疫组化检测结果显示,移植瘤组织中VEGF蛋白表达c-jun-shRNA组呈弱阳性,NC组及空白对照组组均呈强阳性.结论 c-jun基因沉默可抑制放射抗拒性鼻咽癌移植瘤生长及血管生成.

  • 人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型的建立及意义

    作者:邹欣妤;罗佐杰;邝晓聪;秦映芬;梁杏欢;巫丽丽;卢德成

    目的:建立人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型并探讨其生物学特性.方法:将1×10(6) /mL体外培养的人肾上腺皮质癌SW-13细胞悬液接种于10只裸鼠腹腔内,分别于接种后第2、3周随机处死3只裸鼠,余下裸鼠于第4周全部处死取材.动态观察裸鼠体内成瘤及组织浸润转移情况,对肿瘤组织和可疑转移脏器进行病理形态学观察及免疫组化检测Ki67的表达.结果:10只裸鼠接种第8天于接种部位成瘤率100%,接种后3、4周裸鼠腹腔内均可见到转移瘤结节,以肠系膜为显著,转移率均为100%,第4周时可见到2只裸鼠肾转移,1只裸鼠胰腺转移.镜下发现受侵犯的肠系膜淋巴结大部分被破坏,受累的肾、胰腺组织有明显肿瘤细胞浸润.SW-13细胞在体内外均高表达Ki67.结论:成功构建人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型,为深人研究肾上腺皮质癌浸润转移机制及防治研究提供较为理想的动物模型.

  • 人结肠癌细胞系裸小鼠淋巴结转移的观察

    作者:涂经楷;傅仲学;叶晓莉;赵立波;王春毅;周建荣;汪斌

    目的 建立人结肠癌细胞系裸小鼠爪垫淋巴道转移动物模型,并评价卡培他滨抗癌药物效果.方法 裸小鼠爪垫皮下注射人结肠癌HCT-116细胞,在1~6周及8周取材,进行HE染色及CEA免疫组化检测,观察种植瘤的成瘤率、生长情况、淋巴结转移规律,并口服卡陪他滨抗癌药物观察其疗效.结果 种植1周后成瘤率100%.肿瘤在3~4周成指数生长.3周时见第一级胭窝腹股沟淋巴结转移(2/5),到6周时100%转移,其中腹股沟淋巴结转移阳性率76.9%(10/13);5周时见第二级髂血管旁淋巴结转移(1/5);到8周时见第三级肾门淋巴结转移(1/5),髂血管旁淋巴结转移(3/5),但均未见肝肺远处转移.淋巴结转移发生在肿瘤指数生长之前,HE染色及CEA免疫组化染色证实淋巴结有弥漫性癌细胞转移浸润.口服化疗药物卡培他滨能有效抑制肿瘤生长及淋巴结转移.结论 成功建立了人结肠癌裸小鼠爪垫淋巴道转移模型.此模型快速简便、转移集中、转移率高,且应用此模型能够评价抗癌药物卡培他滨抗癌疗效.

  • 裸鼠肝癌移植瘤模型体内微量蛋白谱分析

    作者:于卉;陶华林;汪碧琼

    目的 采用Bel-7402人肝癌细胞悬液接种裸鼠构建肝癌裸鼠移植瘤模型,探讨模型体内微量差异蛋白的表达情况.方法 在裸鼠皮下接种浓度为1×107/mL的肝癌细胞悬液构建肿瘤模型,剂量为每只0.1 mL,对照组接种相同剂量无血清培养液,观察肿瘤生长情况.在不同时间点取血,用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测分析裸鼠血清中的小分子蛋白.利用Ciphergen ProteinChip 3.0和Ciphergen Biomaker Wizard 3.1软件进行蛋白质数据采集和分析,筛选与肝癌相关的差异蛋白.结果 筛选出115个差异表达蛋白(P<0.01),其中有5个差异蛋白表达规律性较强,质荷比(M/Z)分别为2 016、3 309、3 442、3 745、2 747 Da.结论 Bel-7402人肝癌细胞在裸鼠体内生长过程中能够表达与肝癌相关的微量蛋白质,经进一步蛋白鉴定和试剂开发可用作肝癌早期诊断的标志物.

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