阿斯匹林抗ACC-M裸鼠肺转移的实验研究

目的应用ACC-M裸鼠肺转移模型研究阿斯匹林对腺样囊性癌细胞转移的抑制作用.方法裸鼠尾静脉注射肿瘤细胞前后各7天连续服用分别含1mg%、10mg%和50mg%阿斯匹林饮用水或消毒饮用水14天,接种肿瘤后6周处死动物,比较各实验组与对照组的裸鼠肺重量和肺转移灶面积比.结果服用含1mg%和50mg%阿斯匹林饮用水的实验组与对照组相比较,两项指标的差别均有显著性(P＜0.05).结论阿斯匹林对腺样囊性癌细胞ACC-M裸鼠肺转移有抑制作用.

建立裸鼠FaDu喉咽癌原位种植瘤模型及其CT和病理研究

目的 建立FaDu喉咽癌原位种植瘤模型并对其CT及病理诊断进行分析.方法 FaDu肿瘤细胞株复苏培养传代建立荷瘤裸鼠,在裸鼠喉咽部注入,建立FaDu喉咽癌原位种植瘤模型.结果 裸鼠喉咽部接种FaDu肿瘤细胞悬液,2周后可成功建立裸鼠喉咽肿瘤模型,成瘤率100％(30/30),动物CT检查能明确发现肿瘤占位,HE染色证实肿瘤组织为中至高分化鳞状细胞癌.结论 FaDu细胞悬液喉咽癌接种建立的裸鼠头颈部肿瘤模型具有建模周期短,稳定性好、易于重复、移植瘤成功率高、操作简单等特点.

亲和素促排减轻荷瘤裸鼠放免治疗毒副作用的实验研究

本研究将188Re标记生物素化单克隆抗体(McAb-Bt)和亲和素(Av)用于荷人结肠癌裸鼠模型,评价其在肿瘤放免忖治疗(RIT)中的价值,现报道如下.

复方参七汤在人结肠癌细胞株裸鼠肝转移中的应用

目的:建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型,研究复方参七汤对裸鼠肝转移的影响.方法:对24只BALB/C裸鼠,经脾脏注入指数生长期的人结肠癌(低分化腺癌)细胞悬液(Ls174t)0.1ml,含细胞数1×106个,切除脾脏,分成实验组和对照组各12只.实验组每天喂以含0.6ml/20g体重复方参七汤颗粒饲料,对照组裸鼠喂以颗粒饲料,记录裸鼠体重、神志、摄食.喂养3周后,抽取各组裸鼠心脏血后处死,观察腹腔内肿瘤生长情况,检查肝转移癌灶数目,挖出各个癌结节并称重.标本作病理组织学检查,同时采用免疫组化(SP)方法检测肿瘤转移抑制基因nm23H1-NDPK表达;采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测裸鼠血中CK20 mRNA表达.结果:(1) 建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型,肝转移率100%.病理组织学证实肝转移癌细胞具有人结肠癌(低分化腺癌)特征.(2)实验组裸鼠实验前后体重增长4.12±0.53g,明显高于对照组3.21±0.59g(P<0.05).(3)实验组裸鼠肝转移癌结节的数目2.42±0.99个,明显低于对照组4.17±1.99个(P<0.05).(4)实验组裸鼠肝转移癌重63.67±21.29mg,明显低于对照组94.32±37.86mg(P<0.05).(5)实验组裸鼠肝转移癌重/肝重为(8.9±3.1)%,明显低于对照组(13.2±5.3)%(P<0.05).(6)实验组裸鼠肝转移nm23H1-NDPK阳性表达率为66.7%明显高于对照组16.7%(P<0.05).(7)实验组裸鼠肝转移血中CK20 mRNA表达采用半定量方法测定的相对值为 0.398±0.143,明显低于对照组0.518±0.090(P<0.05).结论:复方参七汤可抑制人结肠癌细胞株裸鼠肝转移的发生及发展.

人卵巢癌细胞株荷皮下瘤裸鼠模型的建立

研究卵巢癌的生物学行为,筛选新的药物和更有效的治疗方案,都需要合适的实验动物模型.尽管很多文献都涉及到荷瘤动物模型的制备,但其接种部位、接种细胞数量及成瘤时间等报道很不一致[1～3].因此,我们选用人上皮性卵巢癌细胞株SKOV-3以不同方法建立荷皮下瘤裸鼠模型,以探讨建立该模型的佳方案.

裸鼠人大肠癌移植模型的建立

裸鼠是建立肿瘤模型的良好动物品系,以往大多是用能传代培养的大肠癌细胞株建立的人大肠癌裸鼠模型,本研究采用病人的肿瘤组织建立了三组人大肠癌裸鼠移植模型.

研究肿瘤转移的工具——高转移人肝癌裸鼠模型和细胞系

青蒿琥酯诱导胃癌BGC-823细胞死亡的实验研究

目的 观察青蒿琥酯(ART)对胃癌细胞株BGC-823的裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 将胃癌BGC-823细胞注射至裸鼠右侧背部近腋下部位皮下,建立荷瘤裸鼠模型并随机分为空白对照组(0mg/kg ART组)、60mg/kgART组、120mg/kg ART组、240mg/kg ART组,每组5只.各组裸鼠每天腹腔注射ART1次(空白对照组注射0.9％氯化钠溶液),连续15d,观察裸鼠移植瘤生长情况,并采用RT-PCR、免疫组化及Western blot法测定血管内皮生长因子(VEGF)及钙中性蛋白酶2(Calpain2)表达情况.结果 4组裸鼠移植瘤体积比较有统计学差异(P＜0.05),两两比较亦有统计学差异(均P＜0.05),与空白对照组比较,60mg/kg ART组、120mg/kg ART组、240mg/kg ART组裸鼠移植瘤体积均明显缩小,ART表现出剂量依赖性的抑瘤作用.4组胃癌BGC-823细胞VEGF、Calpain2 mRNA与蛋白表达水平比较均有统计学差异(均P＜0.05),两两比较亦有统计学差异(均P＜0.05),与空白对照组比较,60 mg/kg ART组、120 mg/kg ART组、240 mg/kg ART组细胞VEGF mRNA与蛋白相对表达水平均下降,Calpain2 mRNA与蛋白相对表达水平均升高,且VEGF相对表达水平随ART浓度升高而降低,而Calpain2相对表达水平随ART浓度升高而升高.结论 ART在胃癌移植瘤模型体内起剂量依赖性的抑瘤作用,该作用机制可能与下调VEGF的表达、上调Calpain2的表达有关.

小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型建立及其MicroPET检测研究

目的：探索理想的小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型建立方法和移植瘤生长检测方法。方法将小鼠人胰腺癌皮下移植瘤制成瘤体，原位包埋于健康的BALB/c雌性小鼠胰腺尾部被膜下，20只小鼠均接种成功，建模4周后应用MicroPET检测小鼠体内移植瘤的生长情况。结果 MicroPET检测显示所有小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型均建立成功，成功率为100%；检测到肿瘤对18FDG的平均标准摄取值为（4.30±0.35）。结论瘤体原位包埋法是建立小鼠人胰腺癌原位移植瘤模型较理想的方法，操作简便，成功率高；MicroPET是检测移植瘤生长情况的可靠辅助检查方法，可以用于胰腺癌动物模型的监测。

低分子肝素对裸鼠原位胃癌生长及人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的 探讨低分子肝素(LMWH)的抗癌机制.方法 应用原位移植方法建立裸鼠胃癌原位模型并随机分为4组各10只,术后1周5-氟尿嘧啶(5-Fu)组、对照组分别腹腔注射5-Fu 30 mg/kg及等量生理盐水,LMWH组皮下注射LMWH 1 500 IU/kg),联合组按上述方法同时予5-Fu及LMWH,均为每周2次,共5周.第6周处死动物,测定裸鼠原位胃癌肿瘤体积、肿瘤增长抑制率(TGI),并采用RT-PCR 法测定hTERT mRNA表达(OD值).结果 5-Fu组、LMWH组和联合组肿瘤体积明显小于对照组(P＜0.05),联合组体积显著小于5-Fu组(P＜0.05);LMWH组和联合组hTERT mRNA表达量均显著低于对照组和5-Fu组低(P均＜0.05).结论 LMWH可抑制裸鼠原位胃癌瘤体生长并与5-Fu有协同作用,其机制可能与降低肿瘤hTERT mRNA的表达有关.

5-脱氧杂氮核苷对裸鼠肝癌细胞生长及p53蛋白表达的影响

实验证实,多种恶性肿瘤的发生、发展与基因甲基化有关,即癌细胞基因呈现低甲基化而抑癌基因呈现高甲基化.5-脱氧杂氮核苷是DNA甲基转移酶抑制剂,可以降低癌细胞抑癌基因的高甲基化状态[1].为探讨纠正癌细胞抑癌基因高甲基化状态对肿瘤生长及p53蛋白表达的影响,进一步证实基因甲基化及其改变在恶性肿瘤中的作用,我们于2004年3月进行了本研究.

突变型p27对大肠癌裸鼠模型肿瘤生长及转移的作用

目的 研究外源性突变型p27(p27 mt)基因对大肠癌体内抑制作用.方法 以腺病毒为载体,采用细菌内同源重组方法制备Ad-p27mt,应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BALB/c裸鼠皮下,构建荷大肠癌裸鼠模型,将已成功构建的Ad-p27mt及Lac-Z采用瘤体内直接注射法注射到瘤体内,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤生长抑制率,进行细胞凋亡及MMP-9检测.结果 Ad-p27mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,有更强促凋亡作用,MMP-9表达明显降低,与Lac-Z、对照组比较,有显著性差异.结论 Ad-p27mt基因对大肠癌肿瘤生长有明显抑制作用并能减少其转移.

维甲酸对胃癌生长和肝转移抑制作用的实验研究

[目的]研究维甲酸(RA)对裸鼠原位荷人胃癌细胞BGC-803移植瘤和肝转移的抑制作用.[方法]建立人胃癌裸鼠原位种植肝转移模型,分为2组,对照组和RA组,种植后第5天开始,分别自腹腔注射0.85%氯化钠、RA(1mg/kg),每日1次,第8周处死动物,检测抑瘤率、胃癌细胞凋亡指数(AI),观察肿瘤细胞肝转移以及金属基质蛋白酶2(MMP-2)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.[结果]RA组的抑瘤率为37.8%.与对照组相比,RA组胃癌生长、肝转移受到明显抑制(P＜0.05),AI明显增高(P＜0.05),MMP-2、PCNA的表达降低.[结论]RA对胃癌生长和肝转移的抑制可能通过诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞增殖以及肿瘤细胞外基质降解实现的.

辛二酰苯胺异羟肟酸联合顺铂对裸鼠肾上腺皮质癌的实验研究

目的:通过荷瘤裸鼠模型研究辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)联合顺铂对肾上腺皮质癌的疗效及毒副作用.方法:建立肾上腺皮质癌裸鼠荷瘤模型,随机分为对照组、顺铂组、SAHA组和SAHA联合顺铂组(联合组)4组,连续21天经腹腔注射药物后处死裸鼠,测定瘤体直径、瘤重,计算移植瘤的体积及肿瘤生长抑制率,同时检测裸鼠的红细胞、白细胞、血小板、血清总胆固醇、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐含量,对数据进行统计分析.结果:与对照组相比,各治疗组均显示出肿瘤体积缩小及肿瘤生长抑制率增加(P＜0.05);治疗组间两两相比,联合组显示出明显的肿瘤体积缩小及肿瘤生长抑制率增加(P＜0.05).顺铂组、联合组较对照组均出现白细胞计数下降,血清谷丙转氨酶、尿素氮及肌酐水平升高(P＜0.05);而在顺铂组与联合组的比较中,上述四项指标差异均无统计学意义(P＞0.05);SAHA组与对照组相比较,血清谷丙转氨酶水平升高,但白细胞及尿素氮、肌酐水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:在荷瘤裸鼠模型实验中,SAHA可增强顺铂对肾上腺皮质癌疗效而毒副作用无明显增加.

低相对分子质量肝素对裸鼠胃癌模型CD40/CD40L表达的影响

目的 观察低相对分子质量肝素(LMWH)对裸鼠胃癌模型CD40/CD40L表达的影响.方法 应用原位移植方法建立裸鼠胃癌原位模型,术后7d将裸鼠模型随机分为2组:对照组、LMWH治疗组.每周注射药物2次,共5周,第6周处死裸鼠,观察两组裸鼠胃癌模型成瘤情况,采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织CD40/CD40L的表达.结果 LWMH组胃癌原位模型肿瘤体积较对照组明显缩小,抑瘤率为42.25％,远处转移率为20％,较对照组70％显著降低(P＜0.05)；LMWH组CD40表达水平显著低于对照组(P＜0.05),而CD40L表达水平显著高于对照组(P＜0.05).结论 LMWH可抑制裸鼠胃癌的增殖及转移,其机制可能与干预肿瘤CD40/CD40L通路有关.

125I粒子植入对荷肝癌裸鼠肿瘤增殖及微血管生成的抑制作用

为探讨125I粒子植入治疗肝癌的生物学机制,我们利用BEL-7402肝癌细胞株建立肝癌裸鼠模型,在肿瘤组织内植入125I粒子,观察其对肿瘤的抑制效果及对肿瘤细胞增殖和微血管生成的影响.

人肝癌多药耐药裸鼠模型的建立及其生物学特性研究

本实验旨在为体内逆转肿瘤多药耐药(MDR)而制作人肝癌裸小鼠模型,并对其生物学特征进行研究.一、材料与方法1.细胞株与裸鼠多药耐药模型建立:人肝癌HepG2细胞株(重庆医科大学医学超声工程研究所提供)及耐药细胞株HepG2/Adm[可在浓度为1.0 mg/L的阿霉素(ADM)培养基中生长并传代,对ADM耐药26倍]由重庆医科大学超声医学工程研究所建立.BALB/C-nu/nu裸小鼠(中国科学院药物研究所)在无特定病原体(SPF)条件下饲养.4～6周龄裸小鼠共100只,雌雄兼用.对数生长期细胞(HepG2及HepG2/Adm)浓度为1×109/ml.微量注射器抽取细胞悬液200 μl,分别接种于裸鼠的右腋下(各50只).

高淋巴道转移潜能人肝癌单克隆细胞株的优化和裸鼠移植模型的建立

目的 从淋巴道转移潜能的人肝癌细胞株中分离出高转移潜能的单克隆细胞株并建立相应的裸鼠移植模型.方法 采用有限稀释法,对高淋巴转移潜能的人肝癌细胞株HCCLY-H进行单克隆培养,得到25个单克隆细胞株(编号1 ～ 25).取能在体外连续增殖的9个细胞株接种于4周龄裸鼠爪垫进行第1轮筛选,再取其中淋巴转移率为100％的4个细胞株进行肝脏原位移植,5周后解剖观察体内淋巴转移情况并进行病理学检查,筛选出不同转移潜能的细胞株.结果 筛选出高淋巴转移、低肺转移的人肝癌单克隆细胞株,命名为HCCLYM-H2,该细胞株的肺转移率为20％,淋巴转移率为100％.结论 成功建立人肝癌高淋巴道转移细胞株和裸鼠移植模型,同时证实了肿瘤细胞的异质性.

VEGF及EGFR抑制剂联合放疗对裸鼠鳞状细胞癌增殖的抑制作用

目的 探讨VEGF及EGFR抑制剂ZD6474联合放疗抗肿瘤效果,并探讨其对肿瘤微血管生成,细胞增殖及凋亡影响的机制.方法 建立裸鼠鳞状细胞癌荷瘤模型,随机均分成4组:对照组、放疗组(RT)、ZD6474组、联合治疗组(ZD6474+ RT)观察肿瘤大体增殖情况,用免疫荧光法检测肿瘤组织CD34表达、细胞增殖相关抗原Ki67,凋亡抗原capase-3表达,计数微血管密度(MVD),肿瘤增殖及凋亡.结果 VEGF及EGFR抑制剂同步联合放疗组相较于单药治疗及单纯放疗明显延迟肿瘤增殖时间,同时通过针对CD34、Ki67、caspase-3免疫荧光染色,显示明显减少微血管密度,降低肿瘤增殖、提高细胞凋亡(P＜0.05).结论 VEGF及EGFR抑制剂与放疗同步,从机制上抑制肿瘤新生血管形成,抑制肿瘤增殖,从而增进放疗疗效.

裸小鼠人大肠癌淋巴道转移模型的建立

目的 建立一种人大肠癌简便,可行、稳定的淋巴道转移研究动物模型.方法 裸鼠爪垫皮下注射人结肠癌HCT-116细胞.接种后在1～6周及8周不同时间段取材;收集腹股沟、胭窝,髂血管旁,肾门淋巴结以及肝肺脏器;进行HE染色及CEA免疫组化检测.观察种植瘤的成瘤率、生长情况以及淋巴结转移规律.结果 爪垫种植1周后成瘤率100%.3周后淋巴结开始转移,到6周时第一级腹股沟胭窝淋巴结完全转移,转移率100%,其中腹股沟淋巴结转移阳性率76.9%(10/13);第二级髂血管旁淋巴结部分转移,转移率40%(2/5);未见第三级肾门淋巴结转移.到8周时见髂血管旁淋巴结转移率60%(3/5),肾门淋巴结开始转移(1/5),但均未见肝肺远处转移.HE染色及CEA免疫组化染色发现淋巴结有弥漫性癌细胞浸润.结论 裸鼠爪垫皮下注射可成功建立人大肠癌淋巴道转移模型.此模型快速简便、转移集中、转移率高,可为研究结直肠癌淋巴道转移机制,药物干预等抗转移治疗提供理想的动物模型.