首页 > 文献资料
-
循环纤维细胞与肺部疾病
循环纤维细胞是一类外周血中骨髓来源的间充质祖细胞,其细胞表面表达造血细胞、单核细胞和成纤维细胞系的三种细胞标记,参与组织应对损伤和破坏后的反应.根据近年来大量动物实验的研究,循环纤维细胞的分化、迁移以及功能提示其在以慢性炎症和大量胶原沉积为特征的疾病中起着重要作用.尽管这些细胞参与疾病发生发展的具体机制仍然不清楚,但是近年来积累的临床资料表明循环纤维细胞计数可以作为慢性肺部疾病(包括肺纤维化、哮喘)进展的生物学标志.通过免疫调节来影响循环纤维细胞的分化、迁移以及功能,进而改善慢性炎症并减少胶原沉积,可能成为治疗慢性肺部疾病特别是肺纤维化研究的新方向.
-
荧光染料CFSE作为细胞标记的特性研究
目的:探讨荧光染料CFSE在作为细胞标记时的特性.方法:应用激光共聚焦扫描显微术,观察CFSE在细胞中的准确定位.利用MTT比色法测定CFSE标记的细胞及未标记细胞的增殖情况;通过细胞计数和流式细胞仪(FCM),测定细胞在不加任何刺激及诱导的情况下细胞数及平均荧光强度的变化趋势.结果:在共聚焦显微镜下,可见CFSE标记的细胞的细胞膜、细胞核及细胞质中都带有绿色荧光,以胞核荧光强.利用MTT比色法测定标记及未标记细胞的A值无显著差异.连续6d记录的细胞数与FCM测定的平均荧光强度呈负相关.结论:CFSE可作为细胞的标记物,用于细胞移植的体内检测、细胞增殖试验及细胞分裂周期的估算等研究.
-
绿色荧光蛋白逆转录病毒载体的构建及其表达
目的实现绿色荧光蛋白(GFP)报告基因在组织工程化细胞中的高效、稳定、长久表达.方法构建重组逆转录病毒表达载体RV-GFP, 通过PT67包装细胞克隆, 经G418筛选、扩增, 获得大量含GFP基因的病毒液, 并直接感染靶细胞.结果转染细胞于48 h后,在荧光显微镜蓝光激发波长下, 可发出明亮的绿色荧光, 转染率达20%~50%.感染靶细胞内GFP的有效表达可维持2个月.结论构建的重组逆转录病毒GFP载体, 可作为组织工程化细胞标记, 用于细胞动态研究, 其方法简便、灵敏、可靠.
-
绿色荧光标记共培养睾丸体细胞体内、外培养观察
目的:对Wistar大鼠睾丸间质体细胞转染携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒,为进一步标记睾丸间质体细胞移植组织工程实验奠定基础.方法:获取Wistar大鼠睾丸间质体细胞,用慢病毒转载绿色荧光对其转染标记,体外培养,在共聚焦荧光显微镜下动态观察细胞生长、增殖等情况.回植于去势鼠体内,培养一定时期后取心脏血进行雄激素的检测.结果:睾丸间质体细胞于90h后,在荧光显微镜蓝光激发波长下,可发出明亮的绿色荧光,转染率达80%.传代后的细胞仍能发出明亮的绿色荧光.回植后血清学检测有明显高于对照组的激素检出.结论:经GFP转染后的睾丸间质体细胞仍具有睾丸间质体细胞的特性.采用携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒标记睾丸体细胞中梭形及不规则形细胞(SLCs等)转染细胞效率高且持久,简便有效,且能保持睾丸间质体细胞原有生物学特性.
-
骨髓间充质干细胞标记及活体示踪技术研究进展
骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植后,如何从宿主辨别移植细胞,并观察其在体内的生存和转归情况,一直是让人困扰的问题.目前国内外常采用在BMSCs移植前对其进行标记,在离体的情况下对组织进行免疫组化切片来分析鉴定.这类侵袭性的方法,不能动态观察移植细胞在活体宿主体内的生长分化情况,难以客观评价细胞移植术的疗效,这显然难以满足BMSCs移植已进入临床应用的现状.分子成像技术的兴起为无创动态地监测活体内移植细胞提供了新的路径.现就对活体细胞示踪标记物的研究进展作一综述.
-
内皮细胞微粒与创伤脓毒症关系研究进展
脓毒症是烧(创)伤后一种严重的并发症,其病死率居高不下,可达30%~70%.脓毒症的发病机制非常复杂,但目前认为主要由过度炎性反应、微血管栓塞和内皮细胞功能失调这三方面因素造成.活化或凋亡的内皮细胞能释放带有来源于该细胞标记的内皮细胞微粒(EMP),这种微粒具有一系列生物学和病理生理学作用.