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肝片吸虫感染对大鼠血清和组织自由基代谢的影响
目的通过大鼠感染肝片吸虫复制感染模型,研究肝片吸虫感染后血清和组织器官抗氧化功能的动态变化.方法将60只SD大鼠随机分成感染组(n=30)和对照组(n=30),感染组大鼠1次口服25个囊蚴,对照组不感染,于感染前(0周)和感染后(l、3、5、7、9周)宰杀采集血清、肝、肺、心、肾和脾组织,检测感染后GSH-Px、SOD、CAT活性和MDA含量的变化. 结果 SD大鼠感染肝片吸虫后,血清中GSH-Px先升高后下降;CAT活性在感染后下降;MDA含量在前5周变化不明显.肝组织的GSH-Px活性变化不明显;SOD活性缓慢下降后又缓慢升高;CAT活性降低;MDA含量开始有所升高,稍后有轻微下降;肾脏的GSH-Px活性先缓慢升高,以后则低于对照组;SOD活性呈现平稳下降的趋势,CAT活性开始升高.随后降至低于对照组,MDA含量开始缓慢下降,以后则上升.心组织的GSH-Px活性开始升高,以后迅速下降;SOD活性逐渐升高,然后又缓慢下降;CAT活性逐渐升高,然后又有所下降;MDA含量感染后有所下降.肺组织中的GSH-Px活性逐渐升高,以后逐渐下降;SOD活性5周后开始急剧下降;CAT活性的变化在整个实验期间,除第7周外,其他各周和对照组相比差异均不显著;MDA含量在感染后开始升高,以后又缓慢下降.脾组织中GSH-Px和SOD活性下降;试验组CAT活性先下降,然后升高;MDA含量在前3周变化不明显,基本上处于同一水平,随后缓慢下降,且在第7、9周与对照组差异极显著. 结论自由基参与了肝片吸虫病的发病过程,肝片吸虫感染后机体的器官组织发生了脂质过氧化损伤.
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寄生虫相关性胰腺疾病
文献报道,多种人体寄生虫能移行进入胆胰管,引起胆胰管上皮病变,影响或阻塞胆胰液流出,致急性或慢性炎症.寄生虫性胰腺疾病的发生有明显的地域性,西方发达国家并不多见,在落后和发展中国家的寄生虫流行地区则有较高的发病率.蛔虫或华支睾吸虫感染相关胰腺疾病以急性胰腺炎为主,而肝片吸虫、蓝氏贾第鞭毛虫、肝包虫等引起的胰腺疾病则分别表现为胰腺炎、胰腺外分泌功能不全和胰腺囊肿.上述疾病在发病机制、临床表现和治疗等方面有许多相似之处,但各有特点.
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一类新的羟基苯二磺酰苯胺类化合物的合成及其杀虫活性
目的合成并筛选出杀虫活性较好的新型抗肝片吸虫病化合物.方法分别以邻(间、对)氯苯酚为原料,通过磺酰化和亲核取代反应合成了14种羟基苯二磺酰苯胺类化合物;通过元素分析、红外光谱及核磁共振氢谱对合成的14种新型抗肝片吸虫病化合物羟基苯二磺酰苯胺类化合物(1~14)的结构进行了表征,并测定其对线粒体呼吸控制率的影响以及线粒体呼吸过程无机磷的变化,以此对化合物的解偶联活性(杀虫活性)进行了评价.结果所合成的大部分羟基苯二磺酰苯胺类化合物均具有较好的解偶联活性,其中3,5,6,9的杀虫活性好.结论化合物3,5,6,9均有望成为较好的新型抗肝片吸虫病药物.
关键词: 肝片吸虫 羟基苯二磺酰苯胺类化合物 杀虫活性 -
肝片吸虫三倍体的出现及其重要性
关键词: 肝片吸虫 -
Tscherskia triton仓鼠是孤雌生殖肝片吸虫的适宜宿主
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177肝片吸虫脂肪酸结合蛋白异构体的分离及免疫学特性
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活性氮介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用离体杀伤肝片吸虫童虫的机制
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095肝片吸虫含Cu/Zn超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)的分子克隆与表达
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064 肝片吸虫排泄-分泌型谷胱甘肽-S-转移酶的潜在作用
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063 肝片吸虫与巨片吸虫自然杂交的分子证据
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065 单剂感染、涓流感染和攻击感染肝片吸虫的小牛细胞免疫反应
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101 肝片吸虫分泌的蛋白酶降解人类 IgG亚类,对其特异断裂位点的确定及对产生的免疫球蛋白片段鉴定
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099 肝片吸虫童虫与曼氏血吸虫童虫体外抗自由基杀伤作用的比较研究
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100 肝片吸虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的克隆表达及功能特性
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181法国中部三种淡水螺自然感染肝片吸虫和/或Paramphistomum daubneyi吸虫的研究
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肝片吸虫组织蛋白酶L基因的克隆、表达和免疫原性分析
目的 克隆和表达肝片吸虫组织蛋白酶L基因(FhCL),分析其免疫原性.方法 根据GenBank公布的FhCL基因序列设计引物,以肝片吸虫总RNA为模板,通过RT-PCR扩增FhCL基因编码序列,PCR产物经TA克隆,通过EcoR Ⅰ、HindⅢ双酶切和测序鉴定获得重组质粒pMD18-T/FhCL,并将其亚克隆入原核表达载体pET30a(+),经PCR,以及BamH Ⅰ、HindⅢ双酶切和测序鉴定,构建原核表达质粒pET30a(+).FhCL,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)pLysS,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并获得纯化的重组蛋白FhCL,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,以及蛋白质印迹(Western blotting)分析该重组蛋白对感染肝片吸虫的山羊血清及免疫的SD大鼠血清的免疫反应性.结果 PCR和BamHⅠ、HindnⅢ双酶切均可见约1 000 bp的条带,测序结果显示重组质粒pET30a(+)-FhCL构建成功.SDS-PAGE结果表明,重组蛋白相对分子质量约为Mr42000(含6个组氨酸标签),与目的 蛋白相符,以包涵体形式表达.Western blotting分析结果显示,纯化的重组蛋白FhCL可被感染肝片吸虫的山羊血清和免疫的SD大鼠血清识别,在目的 条带Mr42000处见单一特异性条带,而阴性对照血清则无反应带.结论 克隆及表达了肝片吸虫组织蛋白酶L编码基因,重组蛋白具有良好的免疫原性.
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肝片吸虫组织蛋白酶L1基因cDNA序列的克隆与分析
目的研制肝片吸虫的候选DNA疫苗.方法根据国际发表的相关序列设计引物,在引物端加酶切位点,应用RT-PCR方法.结果成功地将肝片吸虫组织蛋白酶L1(FheCL1)基因cDNA序列克隆进真核表达载体pcD-NA3.1中.对所克隆的FheCL1基因序列及其推导的氨基酸序列进行分析,发现其与已发表序列相比,核苷酸序列有4.3%的差异;推导的氨基酸序列有6.9%的差异.两者蛋白质二级结构主要有3个区域的区别,磷酸化位点有10个不同,但共有一由20个疏水氨基酸残基组成的保守区域.结论实验构建的pcDNA3.1-FheCL1重组质粒是一种新型的抗肝片吸虫DNA疫苗候选重组质粒;肝片吸虫可能存在不同的亚种,两者的FheCL1基因编码的第1~20个氨基酸残基可能组成膜螺旋.
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肝片吸虫和猪蛔虫谷胱甘肽S转移酶免疫小鼠对日本血吸虫尾蚴攻击感染的保护力
[目的]观察天然肝片吸虫谷胱甘肽转移酶(FhGST)和猪蛔虫谷胱甘肽转移酶(AsGST)免疫的小鼠对日本血吸虫大陆株尾蚴攻击感染的保护力.[方法]从肝片吸虫和猪蛔虫中提取天然谷胱甘肽转移酶(GST),免疫3次,间隔时间为14d和7d.第3次免疫后5d经腹部皮肤攻击感染大陆株日本血吸虫尾蚴30条/鼠.感染6wk后用肝门静脉灌注法收集成虫,分别计数肝脏、脾脏和大肠组织沉积虫卵数,并计算减虫率和减卵率.[结果]3个免疫组(FhGST、AsGST和日本血吸虫Rgst)分别与佐剂对照组和空白对照组比较的减虫率分别为27.8%、37.9%、33.1%和31.3%、41.0%、36.4%(P<0.01).肝脏的EPG减卵率为13.5%~17.7%(佐剂对照组,P<0.05)和23.9%~27.6%(空白对照,P<0.01).脾脏的EPG减卵率为30.4%~59.6%(P<0.05),大肠的为38.7%~62.3%(P<0.01).[结论]FhGST和AsGST具有明显抗血吸虫感染的保护力.
关键词: 谷胱甘肽S转移酶(GST) 日本血吸虫 肝片吸虫 猪蛔虫 -
3种ELISA试剂盒检测片形吸虫病的效果评价
目的 评价3种人体片形吸虫病ELISA试剂盒的检测效果.方法 采用本研究室大片吸虫抗原、肝片吸虫成虫可溶性抗原包被的人体片形吸虫病ELISA试剂盒(Fg-ELISA和Fh-ELISA)及德国DRG公司生产的人体片形吸虫IgG抗体ELISA试剂盒(DRG-ELISA),分别检测26份大片吸虫患者血清、180份其他寄生虫病患者血清和26份健康人血清,评价3种检测试剂盒的检测效果.结果 Fg-ELISA、Fh-ELISA和DRG-ELISA 3种检测盒的敏感性分别为100.0%、80.8% (95%CI:65.7%~ 95.9%)和100.0%,特异性分别为87.9% (95% CI:83.5%~ 92.4%)、85.0% (95% CI:80.1% ~ 89.9%)和83.5%(95% CI:78.4%~ 88.6%),约登指数分别为0.88、0.66和0.84.其中,Fg-ELISA检出率(100%)明显高于Fh-ELISA(80.8%) (P< 0.05);Fg-ELISA检测26例大片吸虫病患者血清的吸光度(A)绝对值(A/ CO)为1.70,明显高于Fh-ELISA的1.18 (P< 0.000 1).结论 Fg-ELISA试剂盒检测效果较好,且成本相对较低,比Fh-ELISA和DRG-ELISA两法更适宜用于我国西南大片吸虫病流行区临床样本检测及大规模筛查.
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肝片吸虫组织蛋白酶L真核表达载体构建及重组蛋白活性分析
目的 构建肝片吸虫组织蛋白酶L(CatL)的真核表达载体,研究重组蛋白的生物学活性.方法 以构建好的重组质粒pET30a-FhCatL为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫组织蛋白酶L基因(catL),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-N1-CatL,转染HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况.结果 重组质粒pEGFP-N1-CatL在HeLa细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应.结论 肝片吸虫CatL真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有免疫反应性,可做为分子疫苗的候选和诊断抗原进行进一步的研究.