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破伤风人免疫球蛋白过敏的抢救护理体会
破伤风是厌氧菌破伤风杆菌产生的破伤风外毒素引起的一种急性危重疾病.近20年,破伤风的患病率有逐年下降的趋势,这归功于绝大多数国家采取了计划免疫(小儿注射百、白、破混合制剂)措施有关.但如果发病,仍极具威胁性.所以,预防工作很重要.人类应用精制破伤风抗毒素(TAT)防治破伤风已近百年,在我国也有半个多世纪,曾挽救了许多人的生命.但TAT系马血清制品,其马血清蛋白对人体有很强的过敏原性,常引起过敏反应.
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新技术对整形外科的影响
1 生长因子与创面愈合 创面愈合现在认为是包括高度协调的生长因子调控的细胞的迁移、增生、细胞外基质的合成 与分解、炎症和程序性细胞死亡综合作用的动态过程。 过去12年，已发现12种或用基因重组技术获得的更多生长因子，它们在动物模型中可促进创 面愈合。目前，仅有rhPDGF-BB被FDA认可用于临床。0.01%Regranex gel是PDGF是目前唯一 认可用于糖尿病足溃疡的生长因子。在临床试验和动物研究中发现还存在一些其他促生长因 子。随着PDGF的应用，创面愈合已从传统手术为主要方法发展到其他有肯定疗效更好的方法。2 整形外科植入材料 植入材料作为整形材料已上千年，然而直到20世纪40年代材料科学的发展，使许多植入材料 改进，才使植入材料应用推广。理想的植入材料必须符合几个严格的标准：①非过敏原性； ②非异体反应结构；③非致癌性；④能抗应力和应变；⑤能灭菌；⑥与所替代组织生物力学 性能相配。
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甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在动物体内诱导中和抗体水平及其过敏原性
目的 评价甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在动物体内诱导的中和抗体水平及其过敏原性.方法 将昆明小鼠随机分为7组,分别经腹腔注射3批甲型H1N1流感病毒裂解疫苗(剂量分别为15、30、45 μg/0.5 ml)、3批季节性H1N1流感病毒裂解疫苗(剂量分别为15、30、45 μg/0.5 ml)和PBS(阴性对照),每只0.5ml,间隔21d加强免疫1次,分别于免疫前、初次免疫后21 d及加强免疫后14 d采血,分离血清,采用固定病毒-稀释血清法检测小鼠血清中和抗体滴度.将豚鼠随机分为4组,分别经腹腔注射上述3批甲型H1N1流感病毒裂解疫苗和PBS(阴性对照)各0.5ml,隔日注射1次,共3次,第1次注射后第14和21 d,分别经静脉注射同一批号的疫苗1.0ml攻击,观察豚鼠的过敏反应.结果 初次免疫后21 d,甲型H1N1流感病毒裂解疫苗15、30、45 μg剂量组免疫小鼠血清中和抗体滴度分别为免疫前和阴性对照组的47.9、113.5和319.9倍,且呈剂量依赖性;加强免疫后14 d,甲型H1N1流感病毒裂解疫苗各剂量组中和抗体滴度比初次免疫后21d均明显升高,也呈剂量依赖性,且均高于与相应剂量的季节性H1N1流感病毒裂解疫苗.甲型H1N1流感病毒裂解疫苗各剂量组豚鼠均无过敏反应发生.结论 甲型H1N1流感病毒裂解疫苗在昆明小鼠体内可诱导产生保护性中和抗体,对豚鼠无过敏反应.
关键词： 甲型H1N1流感病毒裂解疫苗 中和抗体 过敏原性 -
重组屋尘螨变应原突变体的免疫原性与过敏原性研究
目的 构建屋尘螨Der p2变应原突变体的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达、纯化,以观察屋尘螨Der p2变应原突变体的免疫原性以及抗原性.方法 基因敲除屋尘螨Der p2变应原的部分氨基酸残基序列,将编码基因定向克隆到pET32a原核表达质粒中,转入BL21表达菌中并提纯;将18只Balb/c小鼠随机分为Der p2变应原突变体组、重组Der p2组和对照组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠血清中IgE、IgG1与IgG2a抗体变化,用免疫斑点试验测定Der p2突变体的IgE结合能力.结果 成功构建了Der p2变应原突变体的原核表达质粒,表达并纯化了Der p2变应原突变体.腹腔免疫后0d,各组IgE、IgG1与IgG2a抗体表达无明显变化(P=0.067、P=0.052、P=0.078);免疫后第7d,重组Der p2变应原组诱导IgE抗体的产生量高于Der p2变应原突变体组(P =0.002),重组Der p2变应原组诱导的IgG2a抗体高于Der p2变应原突变体组(P=0.0056);腹腔免疫后第14 d,重组Der p2变应原组IgE抗体的产生量高于Der p2变应原突变体组(P=0.001),Der p2变应原突变体组IgG2a低于重组Der p2变应原组(P=0.0034).Der p2变应原突变体与屋尘螨过敏患者的阳性血清结合明显较低.结论 Der p2变应原突变体能诱导小鼠产生IgG1抗体和IgG2a抗体,同时能明显减少IgE抗体的产生,并且Der p2变应原突变体具有较低的IgE结合能力.
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牛奶大分子蛋白的水解及其抗原性变化
目的:将婴儿乳粉以不同的食品级蛋白酶水解,降低牛奶的分子量,考察牛奶酶水解产物过敏原性的变化.方法:采用胃蛋白酶、胰蛋白酶和自制胰酶制品对婴儿奶粉进行酶解,以快速蛋白质液相色谱测得酶解产物分子量分布和所占比例.通过实验动物主动、被动皮肤反应和口服致敏肠腔通透性变化观察不同酶水解后牛奶的过敏原性变化.结果:快速蛋白质液相色谱结果表明蛋白酶水解牛奶后,牛奶蛋白分子量明显降低,尤以自制胰酶对乳粉的水解程度高(分子量<1 000占92%;1 000～10 000 占8%).胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰酶水解产物可以显著抑制由牛奶蛋白引起的小鼠耳速发型主动皮肤过敏,抑制率分别为51%、83%和86%.小鼠同种及异种被动皮肤过敏反应实验中,与未水解奶粉组比较,同种皮肤过敏反应三种酶解产物炎性渗出降低率分别为29%、70%和82%,异种皮肤过敏反应的降低率分别为34%、70%和82%.口服致敏小鼠肠腔通透性及分泌功能测定结果显示,胰酶水解产物致敏小鼠的肠腔伊文思蓝渗出率比未水解前降低了27%.结论:酶水解后牛奶大分子蛋白物质降解,其过敏原性有不同程度的降低,尤以胰酶水解产物变化为显著.
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粉尘螨第24组过敏原cDNA克隆表达及其免疫学特性的研究
目的 克隆表达粉尘螨第24组过敏原eDNA,研究其免疫学特性,为深入研究尘螨致敏机制提供基础.方法 以粉尘螨cDNA文库为模板,根据Der f24基因序列(GenBank Accession No.KC669700)设计引物,PCR扩增Der f24 cDNA,构建原核表达载体pET-His-Derf24,并经酶切鉴定和DNA测序,转化至E.coli BL21(DE3) plysS,用异丙基β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导表达;重组产物经Ni2螯合层析纯化,获得重组的Der f24(14 kDa);对重组蛋白进行IgE-Western blotting(WB)实验和IgE-ELISA实验;通过Swiss-model软件模拟Der f24的3D结构并通过DNAStar软件分析其潜在的B细胞表位,合成三个肽(位置分别为75-88 aa、44 57 aa和104 117 aa)进行IgE-ELISA实验.结果 克隆的Der f24基因cDNA序列全长为357 bp,编码118个氨基酸(GenBank Accession No.KP064571);Der f24原核表达主要形式为不可溶的包涵体,纯化后的重组Der f24蛋白分子量约为14 kDa.IgE-WB结果显示,重组Der f24与10例粉尘螨过敏患者血清呈强阳性反应,而与10例健康对照组均为阴性.IgE-ELISA结果显示,合成表位肽(No.1 75-88 aa:Z=5.6734、No.2 44-57 aa:Z=5.6720和No.3 104-117 aa:Z=5.6791;P＜0.0001)均与22例粉尘螨过敏患者血清呈阳性反应,而与22例健康对照组血清呈阴性反应.结论 本研究成功克隆表达了Der f24 cDNA,重组Der f24可结合粉尘螨过敏血清IgE,鉴定了3个潜在的IgE B细胞表位.本研究为进一步防治螨性过敏性疾病奠定了技术基础.
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屋尘螨Der p7基因的克隆表达、纯化及过敏原性鉴定
目的 探讨屋尘螨Der p7基因的克隆表达、纯化及过敏原性分析.方法 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增屋尘螨Der p7基因,经酶切、连接后转化大肠杆菌,挑取阳性单克隆菌落,扩增培养后测序鉴定正确后大量表达;采用亲和层析法纯化表达产物,免疫印迹(Western blot)法鉴定其过敏原性;生物信息学方法分析其基因的同源性.结果 RT-PCR显示Der p7基因片段大小约700 bp;大量表达后进行的SDS-PAGE电泳分析显示,Der p7蛋白表达于沉淀物中,以包涵体蛋白为主,分子质量约39 kDa.Western blot显示该重组基因所表达的蛋白可与尘螨过敏患者的血清起反应,表明该重组蛋白具有过敏原性.生物信息学分析显示克隆的Der p7基因与Der f7基因的同源性约79.14％.结论 本实验成功获得大量表达及纯化后具有过敏原性的Der p7蛋白,对临床上完善对过敏性疾病的检测与治疗具有积极的意义.
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气传致敏真菌与支气管哮喘相关性研究
目的 研究气传致敏真菌与过敏性哮喘的关系.方法 采用空气中暴片调查法和暴皿调查法,了解本地区气传真菌的品种和数量.应用5组多价真菌变应原对346例支气管哮喘患者进行了皮内试验.应用放射变应原吸附试验方法 对真菌皮试阳性哮喘患者89例和50例健康者进行血清特异性IgE测定.结果 346例支气管哮喘患者真菌变应原皮内试验阳性89例(25.75%).89例真菌变应原皮内试验阳性患者中特异性IgE阳性78例,真菌变应原皮内试验与sIgE两种检测方法 一致率87.64%(78/89),两种检测方法 经一致性卡方检验,χ2=9.09 ,P＜0.01.对照组50例中仅2例阳性反应(4.0%),余均为阴性.两组结果 经卡方检验,χ2= 89.98,P＜0.001.结论 气传致敏真菌是过敏性哮喘的重要致敏原,采用体内外检测方法 联合测定真菌过敏原具有良好的相关性.
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家有过敏宝宝怎么办?
具有过敏原性的物质无处不在,导致过敏性疾病发病率高、涉及面广、危害大,应当积极防治.关键是父母要细心观察、及早发现宝宝的过敏症状,并避开过敏原,再加上有效的治疗,一般就能控制病情.防护过敏儿的7项建议1 寻找并避开过敏原.尤其是那些容易使宝宝产生敏感的过敏原性物质.据观察:过敏体质的宝宝90％以上对螨虫过敏,凡有灰尘的地方就有螨虫存在,所以家庭环境一定要整理干净;避免使用地毯,避免接触毛织品、丝织品及化纤制品;减少宝宝与灰尘、宠物的接触;带宝宝外出时要戴口罩,尽量避免去车多人杂的地方.
