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淫羊藿化学成分分离鉴定
[目的]研究淫羊藿叶的化学成分。[方法]综合运用溶剂法提取、萃取、正相硅胶、Sephadex LH-20、反相ODS 以及制备高效液相色谱等分离纯化方法，对淫羊藿叶化学成分进行分离，通过质谱、核磁共振波谱等方法鉴定各单体化合物结构。[结果]从淫羊藿干燥叶的95%乙醇提取物（V/V）中共分离鉴定7个化合物，分别为2，3，4，6，7-五甲氧基-菲（1）、4，5，-二羟基-2，3，6-三甲氧基-9，10-二氢菲（2）、5，7，4＇-三甲氧基-4-苯基香豆素（3）、3，5，7，4＇-四甲氧基黄酮（4）、4-羟基-3-异戊二烯基-苯甲酸（5）、4-羟基肉桂酸甲酯（6）、4-羟基-（2E）-2-壬烯酸（7）。[结论]化合物1～7均为首次从淫羊藿属分离得到化合物。
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益智复方汤的化学成分研究(Ⅳ)
益智复方汤主要由何首乌、红参和淫羊藿等药材合煎而得,具有益肾助阳、补气安神、益智养精之功效,为一临床验方,药理实验表明其具有显著防治老年性痴呆(又称阿尔茨海默病,Alzheimer's disease,AD)的疗效[1～3].
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淫羊藿中黄酮类成分研究
目的 对淫羊藿Epimedium brevicornu中的化学成分进行研究.方法 采用D101大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构.结果 从淫羊藿总黄酮提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为5-羟基-2-异戊烯基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、kaempferol-3-O-rhamnopranosyl-(1→2)-rhamnopyranoside (2)、3-O-α-L-rhamnosyl-7-O-β-D-glucosyl kaempferol (3)、sagittasine C(4)、山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷(5)、槲皮素-3,7-二氧-α-L-双鼠李糖苷(6)、山柰酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷(7)、rhamnocitrin-3-O-β-neohesperidoside (8)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-β-D-葡萄糖]苷(9)、hexandraside E(10)和柔藿苷(11).结论 其中化合物1、5为淫羊藿中首次分得,化合物2、3、4、6和9为淫羊藿属植物中首次分得.
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基于UPLC-Q-TOF-MS的淫羊藿化学成分分析
目的 建立超高效液相色谱-飞行时间质谱联用法(UPLC-Q-TOF-MS)快速鉴定淫羊藿饮片中的化学成分.方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1％甲酸水溶液(A)-0.1％甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,柱温35℃,进样量5 μL.质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据,通过保留时间、精确相对分子质量和二级质谱碎片对检测到的化学成分进行鉴定.结果 检测到淫羊藿饮片中以脱水淫羊藿素为母核的黄酮类成分17个、以去甲基脱水淫羊藿素为母核的黄酮类成分6个、其他类型化合物6个.再通过分析10批样品中的化学成分,确定了淫羊藿饮片中16个普遍存在的化学成分.结论 UPLC-Q-TOF-MS方法能快速、准确、较全面地鉴定淫羊藿饮片中的化学成分;淫羊藿化学成分的鉴定及普遍存在化学成分的确定为其药效物质基础和质量控制研究提供了实验依据.
关键词： 淫羊藿 超高效液相色谱-飞行时间质谱 黄酮类 脱水淫羊藿素 去甲基脱水淫羊藿素 -
基于UPLC-ESI-IT-TOF/MS方法的芪苓温肾消囊方化学成分分析
目的 通过建立UPLC-ESI-IT-TOF/MS分析方法对芪苓温肾消囊方提取物化学成分进行分析,结合文献报道,初步推测可能的起效成分.方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7 μm);以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;ESI源正负离子模式检测.结果 通过对照品比对、质谱数据以及参考文献,共指认出来源于黄芪、淫羊藿、苍术、丹参4味药材共36个化学成分,其中包括19个黄酮类成分、11个酚酸类成分、4个三萜皂苷类成分、1个倍半萜苷类及1个生物碱类成分.结论 对芪苓温肾消囊方提取物的化学成分进行了较为全面的分析,初步阐明了芪苓温肾消囊方的药效物质基础,对于复方中药化学成分物质基础研究及质量控制具有重要意义.
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淫羊藿中不同部位及单体化合物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响
目的 通过比较淫羊藿Epimedium brevicormon不同洗脱部位及其单体化合物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用,筛选淫羊藿活性部位和活性成分.方法 淫羊藿提取物经大孔树脂柱、硅胶柱、Sephadex LH-20及制备液相的分离纯化,得到不同洗脱部位和单体化合物.运用Aβ25-35体外诱导的神经细胞损伤模型,采用Hoechst33342和PI双染法,对淫羊藿的不同洗脱部位和成分进行活性筛选.结果 与模型组比较,除淫羊藿95％乙醇部位外,所有洗脱部位及其中的单体化合物山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基(1 →6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B均对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞损伤有显著保护作用.结论 淫羊藿对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其二氯甲烷-甲醇(5∶1)部位作用强,其次是30％乙醇部位、50％乙醇部位.
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淫羊藿醇提物对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用及机制研究
目的 评价淫羊藿醇提物对去除卵巢致骨质疏松大鼠的治疗作用,初步探讨其作用机制.方法 SD大鼠切除双侧卵巢,造成骨质疏松大鼠模型.手术4周后,以阳性药依普黄酮片(200 mg/kg)和不同剂量的淫羊藿醇提物(170、85 mg/kg)连续ig给药8周,然后取血清测定其碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活性;采用免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;采用三点弯曲法测定其胫骨的生物力学性质;后运用micro-CT对股骨远端的骨小梁参数进行分析,并对其进行三维重建,得到骨小梁的3D图形来直观地说明淫羊藿醇提物对骨质疏松大鼠的作用.结果 淫羊藿醇提物高剂量组不仅能够显著降低血清ALP和StrACP活性,还能显著增加OPG蛋白表达,降低RANKL蛋白表达,且能有效地改善胫骨生物力学性质和股骨骨小梁参数.结论 淫羊藿醇提物高剂量(170 mg/kg)对骨质疏松大鼠具有明显的治疗作用,其可能是通过促进成骨细胞活性、抑制破骨细胞活性来实现的.
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淫羊藿总苷对实验动物心血管系统的影响
淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.气味甘温,兼具辛香,既能补肾壮阳、培补元气之本,还具有通络止痛、开痹散结之能.为了进一步探讨淫羊藿总苷对心血管系统的作用,本实验研究淫羊藿总苷对冠状动脉结扎犬心肌缺血的保护作用及对急性血瘀大鼠血液流变学的影响,为其进一步开发提供依据.
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淫羊藿提取物对去卵巢大鼠骨转换率增强的抑制作用
目的研究淫羊藿提取物对去卵巢大鼠骨转换的影响.方法取3月龄SD大鼠手术切除双侧卵巢,1个月后ig给予阳性药17β-雌二醇(2 mg/kg)以及淫羊藿提取物混悬液(110 mg/kg),连续给药3个月.采用全自动生化分析仪测定血清中钙(s-Ca)、磷(s-P)的量和碱性磷酸酶(ALP)的活性及尿中钙(u-Ca)、磷(u-P)和肌酐(Cr)的量.利用ELISA试剂盒测定尿脱氧吡啶酚(DPD)的量.取胫骨近端制成不脱钙骨切片进行骨组织形态计量学分析.结果与假手术组相比,去卵巢大鼠s-Ca、s-P没有变化,ALP活性增强,u-Ca排出显著升高,尿中DPD与Cr的比值(DPD/Cr)显著增加,子宫萎缩.骨小梁面积百分比降低,骨小梁间隙增加.ig给予雌二醇或淫羊藿提取物3个月,血清ALP活性降低,u-Ca排出量减少,尿中DPD/Cr降低,骨小梁增加,且骨小梁间隙减小.雌二醇组大鼠子宫增生,淫羊藿组大鼠子宫与模型组相比没有变化.结论淫羊藿提取物能够显著抑制由于雌激素缺乏引发的骨转换增强,调整骨形成和骨吸收的关系,对遏制去卵巢造成的骨质疏松有一定的作用,且长期服用对子宫没有刺激作用.
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基于淫羊藿苷测定及HPLC指纹图谱分析的淫羊藿药材质量差异评价
目的 建立客观评价淫羊藿药材质量差异的方法.方法 采用高效液相色谱法,Kromasil C18 柱(250 mm X4.6 mm,5 ltm),流动相为乙腈-水(23:77),体积流量1 mL/min,检测波长270 nm,进样量10 μL,建立不同产地、不同品种淫羊藿药材不同生长部位(茎与叶)的HPLC指纹图谱,并测定其不同生长部位中淫羊藿苷的量.结果 淫羊藿药材不同生长部位(茎与叶)的HPLC指纹图谱和淫羊藿苷的量存在差异,从其叶和茎的特征指纹图谱中分别提取出19和10个共有峰,且叶中淫羊藿苷的量是茎中的4～8倍;叶与叶、茎与茎之间的化学特征存在差异,叶与茎化学特征差异显著.结论 建立的淫羊藿苷测定方法和指纹图谱的精密度、稳定性、重现性好,可表征淫羊藿药材质量的差异性,为淫羊藿药材的质量研究和建立淫羊藿药材的商品规格提供参考依据.
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一测多评法测定淫羊藿中淫羊藿苷和朝藿定A、B、C
目的 建立一测多评(QAMS)法测定淫羊藿中的黄酮类成分,以提高淫羊藿药材的质量控制水平.方法 采用HPLC法,检测波长为270 nm,在一定的线性范围内,测定淫羊藿苷与朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的相对校正因子,并考察不同色潜柱、不同仪器测定各成分相对校正因子的重现性,以淫羊藿苷为对照品,用所建立的相对校正因子计算淫羊藿药材中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的量;同时采用外标法测定100批淫羊藿药材中4种成分的量,以验证QAMS法的准确性和科学性.结果 所建立各成分的相对校正因子重现性良好,分别为1.352、1.384、1.340,其RSD值均小于5％,采用该校正因子计算的朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的量与外标法实测值之间没有显著性差异.结论 该方法准确可靠,简便可行,且节约对照品及检测成本,该方法可以作为淫羊藿药材多指标成分测定质量控制方法.
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薄层扫描法测定益气养血冲剂中黄芪甲苷含量
益气养血冲剂是由黄芪、淫羊藿等中药制成的复方制剂,具有益气养血的功能,适用于肿瘤患者,配合化疗、放疗以提高免疫,达扶正固本.黄芪是该方君药,药理研究表明,其具有明显抗癌[1]和调节免疫作用[2].据此,我们测定益气养血冲剂中君药的主要成分--黄芪甲苷,以便更好的控制其质量.
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肺心片的质量控制
肺心片具有补血养心,益肾活血之功效,主要用于慢性肺源性心脏病缓解期及阻塞性肺气肿.本品原标准中仅有丹参的薄层色谱鉴别,现在根据其配方,对方中虎杖,淫羊藿进行薄层层析鉴别.
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淫羊藿茎叶中5种黄酮类成分分析及质量评价
目的 测定不同品种和产地淫羊藿茎叶中朝藿定A、B、C、宝藿苷Ⅰ、淫羊藿苷5个黄酮类成分的量,分析结果差异,并依照《中国药典》2010年版进行质量评价.方法 建立HPLC方法,色谱条件为HederaTM ODS-2 C18柱(300mm×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-水(B)梯度洗脱,0～8 min,17％A；8～32 min,27％ A; 60～70 min,85％A; 70～80min,90％A.检测波长270 nm.结果 5种黄酮类化合物在48.0～2197.5 μg线性关系良好,r值均大于0.999 0(n=8)；平均回收率为97.8％～100.35％,RSD为1.37％～2.48％(n=6).27批淫羊藿叶中有20批淫羊藿苷的量低于《中国药典》规定,16批淫羊藿茎中只有4批检出淫羊藿苷.结论 淫羊藿中各黄酮量随品种、部位和产地小同而不同,药用部位叶中的量是茎的10倍至数10倍,品种差异是各黄酮量变化的主要因素.
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婴幼儿支气管炎中药洗液质量稳定性研究
目的 通过加速实验和长期实验,以婴幼儿支气管炎中药洗液中的主要药材麻黄及白芍的有效成分量作为主要考察指标,考察洗液的稳定性.方法 根据婴幼儿支气管炎中药洗液药品质量标准指标,通过薄层色谱法鉴别样品中的麻黄、茯苓、白芍、枳壳、淫羊藿,HPLC法测定样品中麻黄(盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱总量)和白芍(芍药苷量)的有效成分量,平皿法检测样品中微生物的限度,并评定中药洗液样品的稳定性.结果 洗液样品经加速和长期实验测定,性状为深褐色液体;均可检出麻黄、茯苓、白芍、枳壳、淫羊藿;麻黄和白芍的有效成分量分别高于0.18、0.72 mg/mL;需氧菌总数、霉菌酵母菌总数均未超过100 cfu/mL,均未检测出大肠埃希菌、铜绿假单胞菌以及金黄色葡萄球菌,符合质量标准规定.结论 3批婴幼儿支气管炎中药洗液的加速稳定性和长期稳定性良好,可为本品的包装、运输、贮存及有效期的制订提供必要依据.
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淫羊藿药理作用研究概况
综述了淫羊霍对免疫系统、生殖系统、核酸代谢、心脑血管系统、神经内分泌系统、抗衰老、骨代谢和抗肿瘤等方面的药理作用.
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黄酮类化合物生物合成途径的进化及其在淫羊藿中的研究展望
黄酮类化合物是植物重要的次级代谢产物之一.大多数植物黄酮类化合物的生物合成具有相同的步骤,其合成途径是植物进化过程中的保守代谢途径.迄今已经克隆、鉴定了多种植物黄酮类化合物生物合成相关酶的结构基因,并进行了一些黄酮类化合物合成代谢的分子调控研究.结合本实验室研究实践,综述了植物黄酮类化合物生物合成途径的进化研究进展,并在此基础上初步比较研究了淫羊藿与其他植物的黄酮类化合物合成途径,提出了研究淫羊藿黄酮类化合物生物合成的比较基因组学和比较代谢组学方法,指出应当从保守的代谢中间产物和结构酶人手,结合淫羊藿种间和种内黄酮类化合物水平的比较,研究淫羊藿黄酮类化合物的代谢途径及其调控机制.
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淫羊藿药材质量评价研究现状与思考
在系统分析淫羊藿药材质量评价文献资料的基础上,对影响淫羊藿药材质量的主要因素:物种、产地、采收期、用药部位和炮制方法等方面进行综述.分析淫羊藿药材质量评价研究中存在的关键问题,提出未来质量评价研究应保证采收期一致,注重取样策略及分析样本的全面性和代表性,开展药材质量与其他表型性状的整合研究,同时,药材质量差异的遗传机制应是未来研究的重要方向之一.后指出药材质量研究应指导药用植物的优良品种筛选、服务于药材市场的规范,并促进中药现代化进程.
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淫羊藿的化学成分及质量控制研究进展
淫羊藿在我国具有悠久的药用历史,亦是苗族习用药材,淫羊藿属植物中含有黄酮、木脂素、苯酚苷、生物碱、多糖等多种化学成分,在广泛的文献检索基础上,以国内7种药用淫羊藿为对象,对淫羊藿中所含化学成分进行了较全面的分类汇总,并对其品种鉴别和质量控制方面的研究进展进行了综述,以期为淫羊藿药材进一步的开发利用提供参考.
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基于淫羊藿黄酮类化合物的体内代谢阐述其抗骨质疏松药效物质基础
全面系统阐述了淫羊藿饮片中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷I、淫羊藿苷5种主要黄酮类化合物的体内代谢过程,整理了5种黄酮类化合物的体内代谢产物与代谢途径;基于5种黄酮类化合物主要体内代谢产物,总结其共性代谢规律和共有代谢产物,并结合淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷、宝藿苷I、淫羊藿素的抗骨质疏松药理作用及其作用机制,初步推断淫羊藿黄酮类化合物中的次糖苷和苷元是淫羊藿黄酮类化合物的主要体内代谢产物,次糖苷和苷元也可能是淫羊藿总黄酮抗骨质疏松重要药效物质基础.为淫羊藿饮片及淫羊藿黄酮类化合物抗骨质疏松药效物质基础及机制研究和抗骨质疏松有效药物研发提供了重要依据和指导.
