首页 > 文献资料
-
大鼠C6脑胶质瘤模型的实验研究
应用定向法将体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞悬液10μl注入大鼠右脑尾状核，悬液内含1％琼脂糖和1×106个C6细胞。接种后行一般和MRI检查，对5组接种大鼠分别在第10、15、20、25天和自然死亡前做主动脉多聚甲醛灌注固定，对脑组织和瘤体标本行HE染色。MRI结果表明，50只接种大鼠脑内均有肿瘤生长，远处和颅外转移率为4％。所建C6脑胶质瘤模型生长稳定、大鼠生存时间易于判定，为脑胶质瘤化疗、放疗和基因治疗奠定了实验基础。
-
PDGF-B链基因TFO抑制C6胶质瘤细胞PDGF-B链基因表达及细胞生长
目的:观察 PDGF-B 链基因三链形成寡核苷酸(triplex-forming oligonucleotide,TFO)对 C6 胶质瘤细胞 PDGF-B 链基因表达和细胞生长的作用.探索 PDGF-B 链基因 TFO 作为抗肿瘤治疗新药的可能性.方法:应用MTT法观察 PDGF-B 链基因 TFO对 C6 胶质瘤细胞生长的抑制作用;应用流式细胞技术观察 PDGF-B 链基因 TFO 对 C6 胶质瘤细胞 PDGF-B 链基因表达的影响.结果:PDGF-B 链基因 TFO 对 C6 胶质瘤细胞 PDGF-B 链基因的表达和细胞生长有明显抑制作用,而且抑制作用存在浓度依赖性.结论:PDGF-B 链基因 TFO 能够抑制 C6 胶质瘤细胞 PDGF-B 链基因的表达和细胞生长,有望成为抑制 PDGF-B 原癌基因表达的一种全新药物.
-
131I近距离放射对C6胶质瘤细胞杀伤的实验研究
目的 探讨131I近距离放射杀伤培养C6胶质瘤细胞的有效剂量率及有效剂量,指导治疗计划.方法 将负载活度60mCi 131I的放疗囊置于距离培养的C6胶质瘤细胞5mm、30mm处照射,持续72h/次,每隔4d用Annexin V-FITC/PI双染、流式细胞术以及克隆形成率法检测照射后C6胶质瘤细胞的凋亡率和细胞存活分数.结果 照射72h后能诱导部分瘤细胞凋亡,凋亡率可达16.42％±1.66％；瘤细胞存在增殖性死亡现象；瘤细胞存活分数在72h照射后下降,低为59.0％±2.39％；在131I近距离放射时,较低剂量率(＜400mGy/h)情况下,也可诱发C6胶质瘤细胞凋亡.在剂量率186.6-677.8mGy/h区间,随剂量率加大凋亡率反而减小.诱导瘤细胞凋亡的有效吸收剂量率应≥47.64-61.65mGy/h,72h累计吸收剂量≥3.9Gy.结论 放疗囊负载131I近距离照射72h后可诱发C6胶质瘤细胞部分凋亡,瘤细胞存活分数下降.诱导C6胶质瘤细胞凋亡的有效剂量率应≥47.64-61.65mGy/h,72h有效累计吸收剂量≥3.9Gy.
-
槲皮素对胶质瘤C6细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响
目的 探究黄酮类化合物槲皮素对大鼠胶质瘤C6细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响.方法 将C6胶质瘤细胞分成Q0、Q50、Q100和Q1504个组；Q0组加适量二甲亚砜处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100和150μmol/L.分别通过transwell体外侵袭实验,transwell体外迁移实验,Click-iT Edu test技术和流式细胞术检测槲皮素对其侵袭迁移,增殖能力及其细胞周期的影响.结果 槲皮素处理36h后,Q50、Q100和Q150组的侵袭细胞比率分别为45.81％、13.63％和4.63％；与对照组(100％)相比,其侵袭细胞比率显著降低(P均＜0.05).槲皮素处理12h后,Q50、Q100和Q150的迁移细胞比率分别为:57.98％、33.60％和11.79％；与对照组(100％)相比,其迁移细胞比率显著降低(P均＜0.05).槲皮素处理24h后,Q0、Q50、Q100和Q150组的增殖细胞百分比分别为45.37％、21.49％、7.30％和1.12％；G0/G1期C6细胞所占比例分别为60.86％、52.11％、35.64％、39.63％,S期分别为34.39％、40.86％、63.48％、60.36％,G2/M期分别为4.76％、6.87％、0.88％、0.11％；Q50、Q100、Q150组的G0/G1、S、G2/M期细胞比例与Q0组比较,具有显著的统计学差异(P均＜0.05)；结论 研究发现,槲皮素能明显降低胶质瘤细胞的侵袭迁移能力；并可通过阻滞C6细胞的细胞周期进程来抑制其增殖.
-
强啡肽A1-13对谷氨酸诱导的大鼠C6胶质瘤细胞肿胀的影响
目的和方法：探讨脑水肿发病的细胞机制，采用［3H］OMG摄取的方法测 定细胞含水量，观察DynA对谷氨酸诱导的大鼠C6胶质瘤细胞肿胀的影响。结果：①给予0．5，1．0，10．0 mmol／L的谷氨酸作用1 h均可引起细胞的含水量增加；②Dy nA可显著降低谷氨酸诱导肿胀的大鼠 C6胶质瘤细胞含水量；③κ阿片受体拮抗剂nor-BNI 可阻断 DynA1-13降低谷氨酸诱导肿胀的大鼠C6胶质瘤细胞含水量的作用。结论 ：谷氨酸可诱导大鼠 C6胶质瘤细胞肿胀；DynA1-13可通过激活κ阿片受体抑制 谷氨酸诱导的大鼠C6胶质瘤细胞肿胀。
-
鸦胆子油乳注射液联合普通放疗对C6胶质瘤细胞作用实验研究
目的：探讨鸦胆子油乳注射液联合常规放疗对C6胶质瘤细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠C6胶质瘤细胞，用MTT比色法检测抑制作用。实验分成对照组，单纯放疗组，单纯用药组，用药联合放疗组。药物与放疗联合组分先放疗后给药和先用药后放疗二种。单纯用药组及药物与放疗联合组设药物浓度设为1．25、2．5、5、10g/L四个亚组。结果MTT比色法显示常规放疗联合鸦胆子油乳注射液与单纯常规放疗相比，早期（24h）药物浓度≥2．5g/L时药物联合放疗抑制率高于单纯放疗；随作用时间延长（48h）药物联合放疗抑制率均大于普通放疗。常规放疗联合鸦胆子油乳注射液与单纯应用鸦胆子油乳注射液相比，早期（24h）药物浓度≥2．5g/L时联合放疗对C6胶质瘤细胞抑制率高于单纯用药，但随作用时间延长（48h）抑制率差异不明显。结论体外鸦胆子油乳注射液能抑制C6胶质瘤细胞增殖，并呈时间-剂量依赖性。随时间延长（48h）放疗联合鸦胆子油乳抑制作用高于常规放疗；放疗联合药物与单独用药对C6胶质瘤细胞作用无明显差异。放疗后用药好于放疗前用药。
-
C6/IL-24对鼠脑胶质瘤治疗作用的研究
目的 观察C6/IL-24对大鼠脑胶质瘤的治疗作用.方法 建立SD大鼠脑胶质瘤模型,实验组皮下注射C6/IL-24细胞,对照组皮下注射同等体积的生理盐水,观察大鼠的生存期及颅内肿瘤的生长变化.结果 实验组肿瘤生长速度明显减慢,实验组大鼠各时段肿瘤体积明显小于对照组,实验组大鼠存活时间明显长于对照组.结论 通过逆转录病毒将IL-24导入C6细胞而形成的C6/IL-24细胞对鼠脑胶质瘤具有较好的治疗效果,建立稳定可靠的脑胶质瘤动物模型是进行各种脑胶质瘤在体实验研究的基础,治疗时间窗的选择应在肿瘤指数生长期以前.
-
C6/IL-24对鼠脑胶质瘤预防作用的研究
目的 观察 C6/IL-24对大鼠脑胶质瘤的免疫预防作用.方法 实验组皮下注射 1 × 105 C6/IL-24细胞,对照组皮下注射同等体积的0.9%氯化钠溶液.28 d后,2 组均于对侧颅内接种C6细胞.观察大鼠的生存期及颅内肿瘤的增殖性、致瘤性及生长变化.结果 实验组肿瘤生长速度明显减慢、增殖率下降、致瘤性降低(P＜0.05);实验组大鼠各时段肿瘤体积明显小于对照组(P＜0.05),存活时间明显长于对照组(P＜0.05).结论 通过逆转录病毒将 IL-24 导入 C6 细胞而形成的,C6/IL-24 细胞对鼠脑胶质瘤具有较好的免疫预防效果.
-
脑血通颗粒对凝血酶致C6细胞损伤的保护作用
目的 观察脑血通颗粒对凝血酶致C6细胞损伤的保护作用.方法 用MTT法检测细胞存活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定LDH值,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 与凝血酶组比较,中药组MTT比色分析结果显著升高,培养液内LDH值显著降低,细胞凋亡率显著下降.结论 脑血通颗粒具有减轻凝血酶对C6胶质瘤细胞损伤的作用.
-
鼠脑C6胶质瘤细胞上清液诱导人骨髓间充质千细胞向神经元样细胞的分化
目的:观察人骨髓间充质干细胞经鼠脑C6胶质瘤细胞上清液诱导后向神经元样细胞方向的分化情况.方法:取肝素抗凝人骨髓血,Percoll梯度法体外分离培养骨髓间充质干细胞,胰酶消化后传代扩增.取第4～6代骨髓间充质干细胞,当细胞达90%融合时,按2×103/孔接种于24孔板内,第2天分为两组,诱导组用含有50%C6胶质瘤细胞上清液的完全培养基(含体积分数为0.1胎牛血清的L-DMEM培养基)诱导,每隔2 d换液1次;对照组单纯加入完全培养基进行培养.诱导后3 d,两组细胞采用S-P法进行免疫细胞化学染色,检测神经元特异性标志物的表达.结果:诱导24 h后,诱导组多数骨髓间充质干细胞表现出典型的神经元样外观,对照组细胞形态无明显变化.诱导3 d后,诱导组神经元烯醇化酶阳性细胞率显著高于对照组(P<0.01);诱导组神经丝蛋白阳性细胞率为(44.2±2.4)%,对照组为阴性:两组胶质纤维酸性蛋白均呈阴性表达.结论:鼠脑C6胶质瘤细胞上清液可成功诱导入骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化.
-
鼠胶质瘤模型在紫杉醇-聚乳酸纳米缓释纤维片抗胶质瘤中的应用
目的:紫杉醇由于水溶性低及全身毒性的问题而限制了其抗癌的临床应用,为克服这些缺陷,应用紫杉醇-聚乳酸纳米缓释膜片对鼠脑胶质瘤进行了局部缓释化疗,观察其对人脑胶质瘤细胞系C6抑瘤作用.方法:实验于2005-05/2006-03在中科院长春应用化学研究所高分子与物理国家重点实验室和吉林大学基础医学院实验室完成.Wistar雌性大鼠40只,在立体定向条件下选取大鼠脑右侧尾状核区为靶点,接种2×105个处于对数生长期的C6细胞,1周后经MRI检查后证实32只大鼠种植成功,将其随机分成2组各16只:①实验组:于接种C6脑胶质瘤细胞后第7天将紫杉醇-聚乳酸纳米缓释膜片(由中科院长春应用化学研究所徐秀玲博士惠赠)植入瘤细胞接种部位.②对照组:手术,但不植入膜片.观察两组一般情况及死亡时间;采用复查MRI检测及苏木精-伊红染色组织病理和免疫组织化学染色观察肿瘤生长情况.结果:①接种1周后MRI检查,脑内形成实体瘤,成瘤率为80%,无远隔转移;苏木精-伊红组织病理证实是胶质瘤,GFAP免疫组化染色阳性.②实验组平均生存期长于对照组[(56.5±18.7),(17.6±1.6)d,P＜0.05];实验组肿瘤平均直径小于对照组(P＜0.05).结论:紫杉醇-聚乳酸纳米缓释膜片进行局部化疗可有效抑制脑胶质瘤细胞的生长.
-
海洛因对大鼠C6胶质瘤细胞的双向电泳图谱比较
目的 比较海洛因对大鼠C6胶质瘤细胞的双向电泳图谱差异,从蛋白质水平初步探索阿片类毒物-海洛因的作用机制.方法 提取对照组与海洛因组C6胶质瘤细胞的蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDSPAGE垂直电泳为第二向进行2-DE.以图像分析软件ImageMaster V 5.0分析电泳图谱.结果 将对照组与海洛因组C6胶质瘤细胞的2-DE图谱匹配后,检测到570个蛋白点,差异大于1.5倍的斑点有29个,其中20个下调,9个上调.结论 初步建立了大鼠C6胶质瘤细胞的蛋白质组学分析方法;差异点的发现为深入理解海洛因的分子机制提供了线索.
-
抑胶素对C6胶质瘤细胞p16蛋白表达的影响
目的探讨不同浓度的抑胶素对C6胶质瘤细胞p16蛋白表达的影响.方法体外培养C6胶质瘤细胞,应用顺铂作为对照,通过免疫细胞化学染色法检测不同浓度的抑胶素作用后细胞周期负性调控基因p16在不同时间点的蛋白表达.结果 C6胶质瘤细胞经过抑胶素处理后,随着抑胶素浓度的增加,p16蛋白的表达也明显增强.结论抑胶素能够抑制C6胶质瘤细胞的增殖,并且具有改变肿瘤细胞增殖周期的作用.
-
苦参碱引起C6胶质瘤细胞凋亡及其对TRADD表达的影响
目的:应用一系列分子生物学检测技术采检测苦参碱对胶质瘤细胞中TRADD表达的影响,以进一步推测其诱导胶质瘤细胞凋亡的作用机制.方法:采用MTT法测定不同浓度苦参碱作用于C6胶质瘤细胞后的吸光值以计算其抑制率:采用Annexin/FITC染色进行流式细胞术检测来测定不同浓度苦参碱诱导C6胶质瘤细胞的凋亡率;采用ICC(免疫细胞化学)、Westem-blotting及Real-timePCR array(实时定量PCR芯片)方法来检测苦参碱对胶质瘤细胞TRADD表达的影响.结果:MTT结果显示细胞抑制率随着药物剂量的增加而增加;Annexin/FITC染色进行流式细胞术的检测结果显示胶质瘤细胞的凋亡率随着药物剂量的增加而增加;ICC、Western-blotting及Real-time PCR array结果显示苦参碱可诱导胶质瘤细胞TRADD基因及蛋白表达的上调.结论:苦参碱可以诱导胶质瘤细胞凋亡,其诱导胶质瘤细胞凋亡可能是通过上调TRADD的表达,以死亡受体途径来实现的.
-
钾通道阻滞剂四乙胺诱导胶质瘤细胞增殖抑制作用的实验研究
目的：研究钾离子通道阻滞剂四乙胺（T EA ）在体外是否具有抗胶质瘤作用，对胶质瘤细胞是否具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。方法四甲基噻唑蓝比色法（MTT 法）观察 TEA对胶质瘤细胞生长、增殖的影响。结果 MTT法发现 TEA可显著抑制胶质瘤细胞株的生长，且呈时间和剂量依赖性。结论 T EA在体外可显著抑制C6与9L胶质瘤细胞株增殖，其作用机制可能和细胞凋亡有关。
-
PDGF-B链基因三链形成寡核苷酸对C6胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响
目的观察PDGF-B链基因三链形成寡核苷酸(triplex-forming oligonucleotide,TFO)对C6胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响.方法应用免疫荧光流式细胞技术观察PDGF-B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF-B、PCNA表达的影响.应用流式细胞技术观察PDGF-B链基因TFO对C6胶质瘤细胞细胞周期的影响.结果 PDGF-B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF-B链基因、PCNA的表达有明显抑制作用,而且抑制作用存在浓度依赖性.PDGF-B链基因TFO能使C6胶质瘤细胞S期的百分率明显降低,阻止细胞由静止期(G0-G1期)进入(S期).结论 PDGF-B链基因TFO能够抑制C6胶质瘤细胞PDGF-B链基因的表达,阻碍细胞进入S期,降低细胞增殖能力.
关键词： 血小板源生长因子 细胞增殖 细胞周期 三链形成寡聚脱氧核苷酸 C6胶质瘤细胞 -
GFP报道基因转染大鼠C6胶质瘤细胞系动态表达的研究
目的:研究绿色荧光蛋白报道基因体外转染C6胶质瘤细胞系的动态表达.方法:脂质体转染后荧光显微镜筛选荧光克隆、激光共聚焦显微镜观察荧光蛋白在细胞内分布,并分析荧光蛋白转染细胞后对其增殖能力的影响.结果:荧光蛋白主要分布在细胞核周围区域.冻存后复苏对细胞存活和荧光强度没有明显影响.C6细胞的增殖没有明显变化.结论:荧光蛋白可以作为胶质瘤基因转染时的优选报道基因.
-
尼莫司汀缓释微球对C6胶质瘤细胞的毒性作用
目的 考察BCNU-PLGA缓释微球浸出液对肿瘤细胞的毒性作用.方法 以含不同载药量及不同释放时间(4h、1、2、3、7、14 d)的BCNU-PLGA-MS浸提液作用于培养的C6胶质瘤细胞,以流式细胞仪检测细胞的凋亡和细胞周期的变化.并观察凋亡细胞的电镜形态学变化.结果 缓释微球可以引起明显的细胞坏死和凋亡,不同载药量缓释微球引起的细胞死亡率由(5.35±1.99)%上升到(20.15±2.96)%,晚期凋亡率由(4.25±1.11)%上升到(32.33±2.62)%,细胞早期凋亡率由(6.44±0.57)%上升到(21.82±3.04)%,G0G1期细胞上升,S期细胞比例降低,增殖指数呈现降低的趋势.电镜下可见典型的凋亡形态特征.结论 BCNU-PLGA缓释微球可以抑制C6胶质瘤细胞的增殖,随释放时间延长细胞生长抑制率逐渐上升.
-
葡萄糖调节蛋白75基因对H2O2诱导的C6胶质瘤细胞氧化应激性损伤有保护作用
目的:研究葡萄糖调节蛋白75(grp75)基因对H2O2诱导的C6胶质瘤细胞氧化应激性损伤的保护作用.方法:以grp75基因瞬时转染C6胶质瘤细胞,以H2O2作为氧化应激刺激物,建立细胞损伤模型,运用MTT、LDH、苔盼兰拒染、细胞周期流式细胞术(FCM)和凋亡小体方法观察grp75对H2O2引起的C6细胞氧化应激性损伤的影响.结果:grp75转染组C6细胞在H2O2(0.1 mmol/L,24 h)刺激后MTT增加、LDH活性降低,细胞凋亡明显抑制,与空载体转染组相比有显著差异.结论:grp75基因对H2O2引起的C6细胞氧化应激性损伤有保护作用.
关键词： 葡萄糖调节蛋白75基因 氧化应激 C6胶质瘤细胞 -
Ttll1对C6胶质瘤细胞作用的研究
目的:探讨微管酪氨酸连接酶1(tubulin tyrosine ligase-like 1,Ttll1)对C6胶质瘤细胞生长的影响.方法:构建pEGFPN1-Ttll1真核表达载体,将pEGFPN1-Ttll1表达载体和pEGFPN1荧光空载体分别转染C6细胞系,荧光显微镜观察拍照,采用Scion Image软件测量每个视野中转染细胞总数和每个转染细胞的突起总长度及细胞体的面积;流式细胞术分析细胞周期;MTT试验检测细胞活力.结果:转染pEGFPN1-Ttll1的C6细胞的胞体面积比转染pEGFPN1的C6细胞的胞体面积小,且前者的突起长度比后者短,两者都有极显著性差异;转染pEGFPN1-Ttll1后未影响C6细胞的细胞周期,也未发现细胞凋亡;转染pEGFPN1-Ttll1后与转染pEGFPN1相比,细胞活力差异无统计学意义.结论:Ttll1可能对C6胶质瘤细胞胞体和突起的生长起负性调控作用,但并没有影响细胞周期和细胞的活力.
