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川乌中总生物碱提取工艺优化研究
目的:优选川乌药材中总生物碱的佳提取工艺.方法:采用L_9(3~4)正交法,以提取物得率和乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的含量为考察指标,并用RP-HPLC法测定三种生物碱的含量,流动相为甲醇-水-氯仿-二乙胺(70:30:2:0.1).结果:筛选出的佳提取工艺为药材用氨试液浸润,加入15倍乙醚溶剂,冷浸24h.结论:该实验提取工艺合理、科学.
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制附子总碱的急性毒性及对过敏性鼻炎豚鼠鼻黏膜和组胺的影响
目的:探讨制附子总碱对过敏性鼻炎(AR)豚鼠行为学指标、鼻黏膜病理形态和血液组胺含量的影响,同时测定制附子总碱的半数致死量(LD50),对其临床应用进行安全性评价.方法:40只FMMU豚鼠按体质量随机分为正常对照组、AR模型组、辛芩颗粒组、制附子总碱组,每组10只.采用卵清蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR豚鼠模型,正常对照组和AR模型组给予生理盐水,辛芩颗粒组每天给予辛芩颗粒4.65g/kg,制附子总碱组每天给予总碱提取物按生药量计1.13g/kg,观察豚鼠行为学指标和鼻黏膜病理形态的变化,测定血液组胺含量；对制附子总碱进行小鼠急性毒性实验.结果:制附子总碱组鼻痒、喷嚏、清涕等行为学指标及鼻黏膜炎症程度均有明显改善,血液组胺含量明显降低；制附子总碱的LD50为56.3g/kg制附子.结论:制附子总碱在临床用药方面是安全的；制附子总碱能有效缓解过敏性鼻炎的症状,降低血液组胺含量,改善鼻黏膜炎症的局部浸润,达到治疗过敏性鼻炎的目的.
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蒙药材阿给有效成分的积累规律
目的:比较不同采集期阿给茎和叶有效成分含量.方法:以索氏提取法提取总黄酮类成分,以硝酸铝-亚硝酸钠分光光度法测定总黄酮含量;采用酸碱提取法提取总碱,以硫酸阿托品为对照品,酸性染料比色法测定阿给地上部分总生物碱的含量.结果:不同采集期阿给叶总黄酮显著高于茎总黄酮的含量(P＜0.05),其中茎和叶中均为7月总黄酮含量高,6月次之,5月低.不同采集期阿给叶总生物碱显著高于茎总生物碱的含量(P＜0.05),6月阿给总生物碱含量高,为0.437％,7月次之,5月阿给含量低,为0.112％.结论:6月和7月是阿给的佳采集期.
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小飞蓬总生物碱提取工艺优选
目的:优选小飞蓬中总生物碱的提取工艺.方法:以总生物碱提取率为指标,采用单因素和正交试验法考察提取次数、提取时间、乙醇浓度及料液比对总生物碱提取率的影响.结果:小飞蓬中总生物碱的佳提取工艺为12倍量90％乙醇提取3次,每次1h.结论:优选的提取工艺稳定可行,提取率高.
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葛根芩连汤发酵前后总黄酮和总生物碱含量变化研究
目的:建立葛根芩连汤酵母菌发酵样品总黄酮和总生物碱的含量测定方法,为葛根芩连汤的深入开发提供科学依据.方法:利用酿酒酵母ATCC9763和酿酒酵母GIM2.9对葛根芩连汤进行发酵.采用紫外可见分光光度法在波长510nm处,测定葛根芩连汤发酵样品总黄酮的含量.以中性氧化铝柱处理样品,溴甲酚紫显色,在405nm波长处测定葛根芩连汤发酵样品总生物碱的含量.结果:葛根芩连汤经过两种酵母菌发酵后,总黄酮含量分别提高了32.90％和30.20％,总生物碱含量分别提高了24.91％和30.89％.结论:酵母菌发酵中药葛根芩连汤,可以减少服用量,提高有效成分相对含量.
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响应面法优化大孔树脂纯化麻黄总生物碱的工艺研究
目的:筛选用于纯化麻黄中总生物碱的较佳大孔树脂,并对影响分离纯化的主要因素进行优化,得到佳的分离条件.方法:实验采用9种型号的大孔树脂对麻黄总生物碱进行吸附与解吸,以总生物碱和3种主要成分(麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱)的吸附量、吸附率、解吸率为指标筛选出较佳大孔树脂;然后运用熵权法为麻黄总生物碱和3种主要成分的比吸附量、比解吸量赋予相应的权重,根据权重得出单因素考察和响应面分析的综合指标,进而优化工艺参数.结果:9种大孔树脂中,HPD100型大孔树脂具有较好的静态吸附与解吸性能.响应面优化的动态吸附条件为:上样液pH值为5.5,上样浓度0.12g/mL,上样流速0.50mL/min.动态解吸条件为:洗脱剂用量7.83BV,洗脱剂中乙醇浓度95％,洗脱流速0.94mL/min.此条件下麻黄总生物碱及3种主要成分的得率分别提升为纯化前的2.18倍和2.25倍.结论:HPD100型大孔树脂能较好地用于分离纯化麻黄总生物碱,为进一步的制剂学和药效学研究提供参考.
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不同比例士的宁对马钱子碱体外经皮渗透性质的影响
目的:研究马钱子碱与士的宁不同比例时,士的宁对马钱子碱的体外经皮渗透性能的影响.方法:建立透皮接受液中马钱子碱的含量测定方法,采用改良的Franz扩散池法,选择离体小鼠背部皮肤为渗透屏障,分别考察当马钱子总生物碱提取物组和马钱子碱、士的宁纯品组中马钱子碱与士的宁比例为1:0、1:0.2、1:0.4、1:0.6时,马钱子碱和士的宁的透皮行为.结果:所建立的透皮接受液中马钱子碱、士的宁高效液相色谱(HPLC)法测定方法稳定、可靠.总生物碱提取物组和马钱子碱、士的宁纯品组中马钱子碱的累积透过量和累积透过百分率随士的宁比例增加显著降低,士的宁的累积透过量和累积透过百分率随之显著升高.结论:马钱子总生物碱中士的宁的存在可抑制马钱子碱的透皮吸收性能,并随着士的宁比例的增加抑制效果更加明显;马钱子总生物碱中其他生物碱等可能促进士的宁渗透.
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粉防己总生物碱的提取与纯化研究
目的:研究粉防己总生物碱的酶法辅助提取和阳离子树脂纯化的方法.方法:以粉防己总生物碱为指标,在单因素试验基础上,利用正交试验设计对粉防己总碱的酶法提取工艺进行了优选.采用阳离子树脂交换法,通过动态吸附与解吸试验,并采用响应面设计优选了佳纯化工艺.结果:佳酶解工艺为:纤维素酶和果胶酶的复合酶用量为2％,pH为4.5,50℃,酶解lh.佳纯化工艺为:采用D001阳离子树脂,上样药液浓度为0.2g/mL,酸度为2％盐酸,体积为5BV,洗脱液为5BV的7％氨水90％乙醇.结论:该提取纯化工艺稳定、可行,效果好.
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蒙药白益母草总生物碱的提取分离及含量测定
目的:寻找一种有效的提取分离白益母草总生物碱的方法,测定样品中总生物碱及盐酸水苏碱的含量.方法:70％乙醇提取总生物碱,采用SP825树脂将生物碱类物质与黄酮类物质分离,无水乙醇纯化总生物碱；采用比色法测定样品总生物碱含量,采用HPLC-ELSD法测定样品中盐酸水苏碱含量.结果:白益母草总生物碱含量为12.33mg/g；所得纯化样品中总生物碱含量为32.08％,盐酸水苏碱含量为30.01％；纯化固体物收率为77.48％.结论:该法操作简便,提取分离效率高,可为后续的富集纯化工作打下良好基础；研究发现白益母草生物碱类物质的主要成分是盐酸水苏碱,约占总生物碱的93％.
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正交试验法优选延胡索的醇提工艺
延胡索为罂粟科植物延胡索的干燥块茎,为中药复方制剂中常用药.现代研究表明,延胡索主要含有生物碱成份,即延胡索甲素、乙素、丙素等20个生物碱,其中叔铵类生物碱约0.65%,季铵类生物碱约0.3%.
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萸黄连的炮制辅料——吴茱萸汁的提取工艺优选研究
目的 探讨萸黄连的炮制辅料--吴茱萸汁的佳水提工艺.方法 采用紫外分光光度法测定正交设计所得9个样品的含量,以吴茱萸中总生物碱含量的多少来评价提取方法的优劣.结果 A3B2C1的工艺即浸泡60 min,加12、9.6倍量水,提取40 min,提取2次的样品中总生物碱含量高.结论 本研究为萸黄连的炮制辅料--吴茱萸汁的制备提供了一个切实可行的佳提取工艺.
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药用霍山石斛原球茎的液体悬浮培养
目的:考察霍山石斛原球茎在液体培养中增殖、水溶性多糖与总生物碱积累的特征.方法:在霍山石斛试管苗茎段原球茎诱导与继代培养的基础上,进行原球茎的液体悬浮培养,分析原球茎生长动态,用比色法测定水溶性多糖与总生物碱的含量.结果:霍山石斛茎段在NAA或NAA与KT组合的MS培养基上可诱导出原球茎,MS基本培养基适合原球茎继代培养增殖;原球茎在液体悬浮培养中大比生长速率0.044 * d-1,倍增时间15.8 d,适生长周期为4周,水溶性多糖和总生物碱含量分别是3.75%和0.0261%.结论:霍山石斛原球茎液体培养生长良好,具有目的化学成分的合成能力,为发酵培养开发霍山石斛资源提供可能.
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助剂对小鼠吸收黄连总生物碱的影响及药代动力学的研究
目的:筛选促进小鼠吸收黄连总生物碱的助剂,研究黄连总生物碱的药代学.方法:黄连总生物碱与助剂按1:1配成制剂,灌胃小鼠后收集小鼠粪便和灌胃后眼眶采血,HPLC测定粪便和血液中总生物碱含量.结果:明胶使药根碱、黄连碱、小檗碱和总生物碱的吸收均提高约30%;聚山梨醇酯和阿拉伯树胶对小檗碱的吸收无影响,而抑制其他3种生物碱和总碱的吸收;卵磷脂几乎不影响各生物碱的吸收.总生物碱在血液中的达峰时间分别为2 h(C_(max)1=5.9 mg·L~(-1))和5.0h(C_(max)2=3.4 mg·L~(-1)),AUC为17.6mg·h·L~(-1),消除半衰期t1/2为5.2 h:添加明胶后,总生物碱的达峰时间分别为1.5 h(C_(max) 1=7.6mg·L~(-1))和4.8 h(C_(max) 2=8.5 mg·L~(-1)),AUC增大为31.1 mg·h·L~(-1), 消除半衰期t_(1/2)为6.2 h.结论:明胶可以加快小鼠对黄连总生物碱的吸收,延长消除半衰期,增加血药浓度和生物利用度.
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昆明山海棠抗肿瘤活性部位筛选研究
目的:采用体内外抗肿瘤实验模型,筛选昆明山海棠的抗肿瘤活性部位.方法:采用离子吸附树脂柱层析法、大孔吸附树脂柱层析法,对昆明山海棠醇提物进行分离、纯化;采用MTT法测定昆明山海棠醇提物各分离部位的体外抗肿瘤活性,通过荷瘤小鼠模型考察各部位对S180实体瘤生长的影响.结果:昆明山海棠醇提物、离子树脂部位(IRP)、大孔树脂部位(MRP)均显示出较强的体内外抗肿瘤活性.IRP部位主要为生物碱类成分,其IC_(50)低至29.90 mg·L~(-1),IRP25,50,100 mg·kg~(-1)剂量组对S180实体瘤的抑瘤率分别为38.10%,50.60%,60.71%.MRP部位的IC_(50)低为98.56 mg·L~(-1),MRP 100,200,400 mg·kg~(-1)剂量组对S180实体瘤的抑瘤率分别为42.96%,53.57%,63.69%.大孔树脂不吸附的水溶性部位(WSP)未表现出明显的作用.结论:昆明山海棠具有较强的体内外抗肿瘤活性,总生物碱是其抗肿瘤作用的主要活性部位之一.
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半夏不同种质资源AFLP指纹系谱分析及其应用
目的:获得更多半夏DNA指纹信息,验证AFLP与其他方法是否一致,为半夏及其他中药材道地性研究、种质资源鉴定、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供分子水平生物学依据.方法:选择全国10个主要产地的野生或栽培半夏为材料,采用扩增酶切片段多态性AFLP方法研究,用NTSYSpc 2.1软件包利用UPGMA法进行聚类分析,构建遗传系统树.结果:筛选12对引物,共扩增出1673条带.进行聚类分析,结果与利用总生物碱含量差异结果相吻合.结论:本研究所获得的特征带和缺失带体现了AFLP的高特异分辨率在中药半夏品种鉴定上的潜力,绘制的系统进化树不同种源之间遗传关系的远近与其总生物碱含量差异趋势一致.
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大孔吸附树脂纯化两面针总生物碱
目的:研究大孔树脂分离和纯化两面针中总生物碱的工艺条件.方法:以总生物碱的吸附量和解吸率为考察指标,对8种不同类型的树脂进行评价.结果:XDA-5型大孔吸附树脂对两面针中总生物碱具有较好的分离能力.通过大孔树脂分离纯化后,终产品中总生物碱的纯度为33.25%,保留率达到90.15%.结论:采用本法分离纯化两面针中总生物碱是简单、可行的.
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温度对川贝母生理指标、鳞茎产量及总生物碱含量的影响
目的:研究不同温度处理对川贝母生理指标及鳞茎产量和总生物碱含量等的影响,为川贝母的合理栽培生产提供一定理论依据.方法:用人工气候箱控制川贝母的生长温度,观察不同温度15,20,25,30℃下川贝母的生长发育变化,检测其叶片叶绿素a和b、可溶性糖、丙二醛和脯氨酸含量,并测定鳞茎产量以及总生物碱含量.结果:15,20℃处理的川贝母生育期较长;4种温度处理下川贝母叶绿素b含量差异均不显著,且15,20,30℃下川贝母总叶绿素以及叶绿素a含量差异也不显著.此外,川贝母叶片可溶性糖、丙二醛、脯氨酸和鳞茎总生物碱含量,以及鳞茎增长率和干重均随温度降低而增加.结论:川贝母不宜生长在过高温度环境,相对较低温度下其生育期较长,鳞茎可适当生长,生物碱含量也有所增加.此外,低温下川贝母通过增加脯氨酸以及可溶性糖含量等来提高抗寒性,并能维持正常的叶绿素含量.
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马钱子总生物碱脂质体静脉注射给药后马钱子碱在大鼠体内的药物动力学研究
目的:比较不同磷脂组成马钱子总生物碱脂质体静脉注射给药于大鼠后马钱子碱的体内药物动力学性质.方法:采用硫酸铵梯度法和隐形脂质体技术制备了马钱子总生物碱脂质体,除去游离药物后,测定了其中总生物碱、马钱子碱的含量.测定了马钱子总生物碱溶液和不同磷脂组成马钱子总生物碱脂质体静脉注射给药后不同时间点马钱子碱的血药浓度,药动学参数采用3P97程序进行拟合.结果:马钱子总生物碱溶液与不同磷脂组成脂质体中马钱子碱占总生物碱的比例相同.与大豆磷脂(SPC)脂质体相比,氢化大豆磷脂(HSPC)脂质体给药后的马钱子碱的药动学性质发生了极显著的改变,AUC显著提高了13.3倍,而表观分布容积下降到3.6%,复合磷脂脂质体仅AUC有所提高,其他参数不变.结论:磷脂组成对马钱子总生物碱脂质体静脉注射给药后的体内药动学过程有显著影响.
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粗叶悬钩子总生物碱抑制肝细胞凋亡的超微结构与TUNEL染色观察
目的:研究粗叶悬钩子总生物碱对肝细胞凋亡及肝细胞超微结构的影响.方法:60只大鼠随机分为正常组、模型组、粗叶悬钩子总生物碱处理组和阳性药对照组.采用CCl4腹腔内注射建立肝损伤大鼠模型.应用TUNEL检测各组肝组织的凋亡指数,电镜观察肝细胞超微结构.结果:粗叶悬钩子总生物碱处理组与阳性药对照组的大鼠肝细胞超微结构损伤程度、肝组织中凋亡指数,均分别较模型组显著减轻与下降.结论:粗叶恳钩子总生物碱能明显减轻肝细胞超微结构损伤,抑制肝组织中细胞凋亡.
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天目藜芦生物碱的化学研究
天目藜芦Veratrum schinedleri Loes.,亦称邢氏藜芦,为百合科藜芦属植物,分布于浙江、江苏、江西省,与黑藜芦、毛穗藜芦、兴安藜芦、蒜藜芦、小藜芦等统称为中药藜芦入药应用.赵国举等曾对其含有的总生物碱进行过降血压研究[1],朱任宏等的化学研究曾提出天目藜芦碱甲和天目藜芦碱乙的化学组成,但是未鉴定分子结构[2].
