磁导向甲氨蝶呤药物抑制口腔癌的实验研究

1.材料与方法:利用人血清白蛋白作为中间载体,化学交联制备磁微粒-甲氨蝶呤-白蛋白微球新型载体(FM-MTX),探讨其缓释特性及体内外抗肿瘤效果.采用MTT法检测其对人舌癌Tca8113、口底癌HSC-2、腺样囊性癌SACC-83及颊癌BcaCD885细胞系的生长抑制作用.对舌癌裸鼠移植瘤进行外加磁场诱导靶向治疗.2.结果:发现磁导向甲氨蝶呤交联物具有明显的缓释特性.在体外,FM-MTX对4种口腔癌细胞系有明显的抑制作用,随着药物浓度增加,抑制作用增加,表现为浓度依赖性.

DNA依赖蛋白激酶在DNA损伤修复中的研究进展

各种损伤因素如紫外线、天然的或者人造的各种致突变化合物、离子辐射及其体内生物代谢过程产生的活性氧自由基等,均有可能引发染色体和线粒体基因组DNA多种类型的结构损伤(单、双链断裂,碱基修饰,DNA分子链间或DNA-蛋白质分子间化学交联等),基因组拷贝数改变,或表达调控障碍.DNA舣链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)是真核基凶组后果严重的损伤类型之一.

083化学交联抗原组成的无细胞百日咳疫苗的效力

环氧化合物交联明胶水凝胶的制备及表征

目的 明胶水凝胶因其良好的生物相容性而成为一种应用前景很好的组织工程材料.该研究采用不同浓度的明胶,添加了适量的环氧化合物交联剂聚乙二醇二缩水甘油醚(PGDE),制备了不同的明胶水凝胶.红外光谱显示,PGDE以两端开环的方式交联到了明胶分子上.随着明胶和交联剂浓度的增大,水凝胶的溶胀率从1218.19％下降到525.23％,大压缩应力显著增大,从27.64 kPa增大到113.20 kPa,压缩正切模量也从0.19 kPa增大到0.59 kPa,力学性能得到了明显提高.PGDE交联明胶水凝胶具有优异的弹性回复性能,弹性回复率高可达98.03％.溶血率试验结果表明,凝胶有良好的血液相容性.

载血管内皮生长因子层层自组装提高异种去细胞血管生物相容性

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)结合肝素/壳聚糖层层自组装技术修饰异种去细胞血管,提高其生物相容性.方法 采用肝素/壳聚糖在异种去细胞血管表面层层自组装,以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)进行化学交联,并负载VEGF.采用扫描电镜检测血管表面微结构,甲苯胺蓝法定量分析肝素结合量及缓释性能,采用ELISA法定量分析VEGF结合量及缓释性能,抗凝血活性和血小板黏附试验检测材料血液相容性,采用细胞增殖试验评价材料的细胞增殖能力.结果 肝素/壳聚糖层层自组装在异种去细胞血管表面形成纳米颗粒样结构,EDC化学交联显著降低肝素及VEGF释放速率,并提高血管的血液相容性.层层自组装/化学交联并负载VEGF促进内皮细胞增殖.结论 载VEGF层层自组装技术修饰异种去细胞血管,能够改善其生物相容性,促进内皮细胞增殖.

基于聚己内酯/二氧化硅复合材料的骨科固定材料的研究

目的：制备一种基于聚己内酯/二氧化硅（PCL/ SiO2）复合材料的骨科固定材料。方法以 PCL 为基质，过氧化苯甲酰（BPO）为交联剂，气相法二氧化硅为增强剂，采用化学交联法制备 PCL/ SiO2复合材料，并对其力学性能和热性能进行表征。将 PCL/ SiO2复合材料裁制成适宜规格的骨固定材料以初步考察其塑形效果和 X 射线通透性。结果 PCL/ SiO2复合材料的强度较 PCL 明显改善，复合材料中 PCL 的结晶熔融温度为56℃。目标材料60℃即可软化塑形，且其 X 射线通透性优于石膏绷带。结论目标材料是一种理想的骨科固定材料，有望在临床上替代石膏绷带和小夹板。

葡萄球菌A蛋白－聚乙烯亚胺交联物的制备及其理化特性观察

目的：制备葡萄球菌A蛋白－聚乙烯亚胺交联物（SPA-PEI交联物），并观察其理化性状。方法采用异型双功能交联剂N-琥珀酰亚胺基3-（2-吡啶二硫基）丙酸酯（SPDP）化学偶联法将葡萄球菌A蛋白（SPA）与聚乙烯亚胺（PEI）化学交联，用SephadexG75柱层析法纯化SPA-PEI交联物。采用SDS-PAGE法鉴定交联物的纯度；紫外分光光度法测定交联物的吸收峰；采用粒度及Zeta电位分析仪测定交联物的粒径及表面Zeta电位、酸碱滴定法测定交联物的质子缓冲能力。结果 SPA与PEI共价结合形成SPA-PEI交联物，且交联物的纯度较高。SPA-PEI交联物在280 nm处有一吸收峰，其吸收曲线与SPA类似。SPA-PEI交联物粒径为（185．0±28．5）nm，表明Zeta电位为（38．0±6．6）mV，提示其粒径范围合理，带有较强的正电荷，可结合带负电荷的核酸片段。SPA-PEI交联物的酸碱滴定曲线与PEI类似，均有一个明显的缓冲平台，提示该交联物具有较强的质子缓冲能力。结论成功地制备出纯度良好的SPA-PEI交联物。SPA-PEI交联物粒度分布较合理、表面带较强正电荷、并且具有较强的质子缓冲能力。

水凝胶在软骨组织工程中的应用

成熟的关节软骨无血液供应、神经支配及淋巴同流,故软骨的自身修复能力非常有限.全厚软骨损伤在某些情况下可发牛自发性修复反应,但新形成的组织是纤维性软骨组织,不具有天然透明软骨的生物化学和生物力学特征,通常会在生理负荷下发生退变[1].组织工程的提出及应用为关节软骨缺损的再生修复带来了希望.水凝胶是一种以水为分散介质的高分子网络体系,性质柔软,能保持一定的形状和吸收大量的水.凡是水溶性或亲水性的高分子,通过一定的化学交联或物理交联,都可以形成水凝胶.水凝胶应用丁软骨组织工程,克服了以往支架材料的许多缺陷,本文就水凝胶的部分基础研究及其在软骨组织工程中的应用做一综述.

京尼平交联对大鼠脱细胞脊髓生物学特性的影响

目的 探讨新型生物交联剂京尼平对大鼠脱细胞脊髓生物学特性的影响.方法 从成年SD大鼠(体质量200 ～ 250 g,雌雄不限)获取大鼠胸段脊髓,采用化学萃取法对大鼠脊髓组织进行脱细胞处理,再用生物交联剂京尼平(5 g/L)进行化学交联.分别采用HE染色和扫描电镜观察京尼平交联前后脱细胞脊髓的微观结构,并进行孔径大小、交联率、含水量、在PBS溶液及胰酶溶液中的稳定性能检测,再将大鼠骨髓间充质干细胞分别与京尼平交联前后的脱细胞脊髓浸提液共培养,采用MTT法在体外评估该支架材料交联前后的细胞毒性情况.结果 京尼平交联前后的脱细胞脊髓拥有类似的多孔结构,孔径大小约30μm,终交联率可达90％,交联后的脱细胞脊髓含水率从(283.4±11.2)％降至(229.7±12.5)％,但其在PBS及胰蛋白酶中的稳定性得到了明显的增强.交联前后的脱细胞脊髓都未观察到明显的细胞毒性.结论 京尼平交联的脱细胞脊髓部分生物学特性得到改善,为应用于脊髓损伤修复的组织工程材料提供了一种新的选择.

环氧化合物制备丝素凝胶材料的细胞毒性研究

利用环氧化合物与丝素蛋白在冰点以下或较高温度下作用可以获得两种不同结构和性能的凝胶材料.为研究两种材料在生物医用材料方面应用的可行性,本实验测定了两种凝胶材料的浸提液对小鼠成纤维细胞(L-929)细胞增殖率的影响,初步探索了两种凝胶材料的细胞毒性,发现两种凝胶材料均呈现出较高的细胞相对增殖率,细胞毒性均为1级,都在可以医用的合格范围内;另外实验还对环氧化合物和戊二醛两种交联剂的细胞毒性进行了对比,发现环氧化合物的细胞毒性明显低于戊二醛,认为环氧化合物可以作为丝素蛋白材料改性的更为安全的交联剂.

麻疹病毒沪191-CEA单抗交联物的制备和靶向感染性的初步研究

目的 制备MV191-CEA单抗交联物并评估其对CEA阳性细胞的杀伤作用.方法 通过化学交联剂N-羟基琥珀酰亚胺-间(N-马来酰亚胺基)苯甲酸酯(MBS)、N-琥珀酰亚胺3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯(SPDP)和戊二醛三种方法将抗癌胚抗原(CEA)单抗和麻疹病毒沪191(MV191)交联制备MV191-CEA单抗交联物并研究其感染性.结果 与MV191对照相比,MBS、SPDP、戊二醛交联后,病毒感染性有所下降,分别为59.8％、33.3％和71.5％,但MV191-CEA单抗交联物可感染MV191所不能感染的CEA阳性细胞SW480、A549和LoVo,其中LoVo细胞敏感,且细胞裂解液中病毒滴度与CEA表达量有相关性,MV191-CEA单抗交联物不能在CEA阴性细胞MRC-5、HL和MCF-7细胞中增殖.结论 MV191-CEA单抗交联物成功地实现了感染性靶向转导.

陈旧骨骼DNA提取方法的应用研究

在法医实践中,DNA检验已成为个体识别鉴定的常规技术.现场提取的检材中,骨组织具有耐腐败特性,当其他检材完全腐败后,骨组织仍能够作为DNA检验的重要材料.