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基于16S rRNA序列研究华重楼植株可培养内生细菌的多样性
目的 分析华重楼Paris polyphylla健株和茎腐病感病植株内生可培养内生细菌的多样性.方法 用牛肉膏蛋白胨培养基分离华重楼茎腐病及健康植株根茎、茎、叶等不同部位的细菌,采用16 S rRNA通用引物27F/1492R进行PCR扩增结合DNA测序技术,对分离自华重楼健株及茎腐病植株不同部位的细菌进行初步鉴定.结果 从华重楼的健康植株和感病植株中分离到11属23种细菌.从健株分离到4属11种内生细菌,其中根茎、茎、叶分别分离到9、10和5种内生细菌.从病株分离得到10属14种内生细菌,其中根茎、茎、叶分别分离到11、8和3种内生细菌.华重楼健株的根茎部内生细菌量高,达2.999×105 cfu/g,叶部内生细菌量较低,为7.32×104 cfu/g,华重楼健株根茎、茎、叶中的芽孢杆菌量高,比例分别为73.3％、67.1％和81.8％.华重楼病株的茎部内生细菌量高,达2.817×105 cfu/g,叶部内生细菌量较低,为2.76×104 cfu/g,华重楼病株的根茎、茎、叶部的假单胞菌量高,比例分别为35.6％、50.3％和60.5％.华重楼健株不同部位的多样性指数和均匀度指数均高于病株.结论 华重楼健康植株以芽孢杆菌为优势细菌类群,华重楼茎腐病植株以假单胞菌为优势细菌类群.华重楼健株相比病株具有更为丰富的内生细菌群落多样性.
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杜仲叶和果实中内生真菌的分离及抑菌活性
目的 从杜仲Eucommia ulmoides叶和果实中分离具有抑菌作用的内生真菌.方法 采用平板培养法从杜仲叶片和果实中分离内生真菌,通过对峙法和生长速率法考察这些内生真菌的抑菌活性,并通过HPLC法考察其具有代谢产生杜仲有效活性成分的能力.对具有良好抑菌效果和能够代谢杜仲活性成分的内生真菌进行ITS序列测定,鉴定其归属.结果 从健康叶片和果实中分离到52株内生真菌,其中2个菌株的提取液中含有绿原酸,11个菌株至少对4种病原菌具有抑制作用,其中29号菌株(链格孢属Alternaria sp.)对芽孢杆菌Fusarium graminearum的抑制效果好,其抑制率高达82.6％.通过与GenBank数据比对,这些内生真菌分别属于链格孢属Alternaria、黑孢属Niqrospora和座囊菌纲(Dothideomycetes).结论 从杜仲叶和果实中分离到11株具有抑菌作用的内生真菌,这些具有抑菌作用的内生真菌可用于生物制药和农业产业.
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基于16S rDNA序列分析研究根腐病三七根内可培养细菌的多样性
目的 分析根腐病三七根内可培养细菌的多样性.方法 用牛肉膏蛋白胨培养基分离根腐病三七根内的细菌,经细菌通用引物27F/1492R扩增16S rDNA后,分别用Rsa Ⅰ和Hin6 Ⅰ限制性内切酶对扩增产物进行酶切,结合限制性片段长度多态性(RFLP)分析方法和DNA测序技术,对分离自根腐病三七根内的细菌进行初步鉴定.结果 根腐病三七根内的细菌分属于8个类群,依占总菌数的比例分别是芽孢杆菌属Bacillus 22.47％、无色杆菌属Achromobacter 5.62％、寡养单胞菌属Stenotrophomonas 5.62％、类芽孢杆菌属Paenibacillus 4.49％、鞘氨醇杆菌属Sphingobacterium 1.12％、苍白杆菌属Ochrobactrum 1.12％、不动杆菌属Acinetobacter 1.12％及肠杆菌科的一些属58.43％.结论 泛菌属和芽孢杆菌属是根腐病三七根中的两大优势细菌类群.
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粪菌移植在消化系统疾病中的应用
粪菌移植是指将健康人粪便中的微生物移植到患者体内,重建患者正常肠道菌群,从而达到治疗疾病的目的,这一方法以往只是作为难辨梭状芽孢杆菌感染后的治疗手段.随着对肠道菌群研究的不断深入,粪菌移植逐渐被应用于其他与肠道菌群相关的疾病治疗.
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荆门市东宝区一起学校发生的芽孢杆菌食物中毒事件调查
目的 2012年12月12日,荆门市东宝区象山小学二至六年级多名学生发生不明原因恶心、呕吐、腹痛、头晕等症状.方法 采用现场流行病学调查方法,搜索病例进行个案调查,采集呕吐物及12月11日留样的食物进行检测.结果 采集16份剩余食物、原料,13份餐(用)具和3份中毒病人的腹泄物、呕吐物进行抽样,共32份,送荆门市疾病控制中心检测.荆门市疾控中心的流行病学调查报告的结论为:象山小学48名中毒学生系蜡样芽胞杆菌致食物中毒,中毒食物为:豆皮青椒肉片;此次食物中毒为:蜡样芽胞杆菌污染豆皮所致.
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正常人群百日咳抗体水平监测分析
白喉、百日咳是由白喉杆菌、百日咳杆菌引起的小儿急性呼吸道传染病,发病遍布世界各地,发展中国家尤盛.破伤风是创伤后被破伤风芽孢杆菌污染引起的人体严重疾病.开展计划免疫是消除白喉、百日咳、破伤风的根本措施.为了解我区正常人群白喉、百日咳、破伤风抗体水平,评价百日咳的免疫效果和计划免疫工作报告,2001年我站采集正常人血清130份进行抗体监测,现简述如下.
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芽孢杆菌B13对白菜产量和品质的影响
通过盆栽和田间小区试验研究了接种B13对白菜生长产量和品质的影响.盆栽结果表明,与对照相比,株高、伸展度、鲜重同比增长分别为16.4％、17.3％、50.8％;硝酸盐、还原糖、Vc和蛋白质DPS方差分析差异具有统计学意义(P＜0.01);总钾的含量比CK增加了1/3倍,总养分同比增加了6.3％,分别增加了11.0 mg/kg和42.1 mg/kg.小区试验表明,芽孢杆菌B13与有机肥一起施用对白菜增产差异具有统计学意义.由此说明接种芽孢杆菌B13发酵液能够改良小白菜的生物性状、改良土壤、抗病,收获时还能提高白菜的产量和品质.
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云南省富宁磁铁矿矿区可培养细菌多样性初步研究
目的 对云南富宁磁铁矿矿区样品中可培养细菌进行分离并对其多样性进行了初步研究.方法 采集云南富宁磁铁矿矿区土样和矿石样,采用固体肉汤培养基、卵黄培养基及PYGV培养基分离该矿区环境中的可培养细菌,利用16S rRNA基因序列分析构建系统发育树,并统计不同种属细菌的数量,初步评估细菌多样性.结果 富宁磁铁矿矿区环境细菌的主要种群包括厚壁菌门、放线菌门和变形菌门的不同菌属:芽孢杆菌属、葡萄球菌属、节杆菌属和假单胞菌属的菌株,其中抗逆性较强的优势菌群为厚壁菌门的芽孢杆菌.结论 本研究初步表明富宁磁铁矿矿区可培养细菌种类具有一定的多样性.
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一株多功能芽孢杆菌的鉴定
目的 从土壤筛选所得l株芽孢杆菌并对该菌进行鉴定.方法 通过表型特征、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析(GenBank登录号为:JN609382).结果 形态学观察:菌落呈圆形,白色微黄,中央凸起,半透明,长时间培养容易形成褶皱；革兰染色为阳性；芽孢中生,周生鞭毛,细长且多.生理生化特征:参照《常见细菌手册》和《伯杰氏细菌鉴定手册》,其中接触酶反应、V-P测定、卵磷脂以及革兰染色呈阳性；能够利用D-葡萄糖、D-木糖、D-甘露醇产酸,并能使淀粉水解；不能利用丙酸盐,不能形成吲哚,不能水解酪氨酸,生理生化试验结果显示该芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的特征一致.分子生物学鉴定:在GenBank上经过BLAT分析,其与枯草芽孢杆菌的相似性高(99％).结论 鉴定该菌为枯草芽孢杆菌.
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芽孢杆菌降解有机磷农药的研究
目的 筛选出既能降解农药又有抑制霉菌的芽孢杆菌,并测定此芽孢杆菌的佳生长条件.方法 本实验以有机磷农药为试验用培养基中惟一氮源筛选出10株能分解有机磷农药的芽孢杆菌,并测试其抑制霉菌作用,摸索菌株适生长条件.结果 筛选得到的降解农药的7号菌株,有抑制霉菌生长作用,培养温度为35℃,pH7.0.结论 芽孢杆菌能够抑制霉菌并且降解有机磷农药.
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血培养分离产气荚膜梭菌1例
产气荚膜梭菌是一种革兰染色阳性的粗大芽孢杆菌，普遍存在于环境和哺乳动物的胃肠道中，为胃肠道的条件致病菌。该菌可在患者外伤后侵入伤口并繁殖迅速，造成严重的感染。产气荚膜梭菌入血较少见，我院从临床患者阳性血培养中分离出产气荚膜梭菌1例，现报告如下。
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纳豆激酶对动物体内血栓的溶解作用
[目的]探讨纳豆激酶对兔体内血栓和大鼠肺部血栓的溶解作用.[方法]采用物理方法诱导兔颈动脉血栓形成,观察纳豆激酶对血栓的影响.采用125I标记血栓法制成大鼠肺部血栓,考察纳豆激酶对大鼠肺部血栓的影响.[结果]大、中剂量纳豆激酶组兔体内血栓湿及干质量均明显低于空白对照组;各剂量纳豆激酶组大鼠肺部血栓凝固时间均明显短于空白对照组.[结论]纳豆激酶具有溶解动物体内血栓的作用.
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蓝氧妇科生殖道治疗仪治疗60例霉菌性阴道炎的体会
霉菌性阴道炎是妇科常见病多发病,复发率较高,是女性生殖器常见炎性反应之一.主要由白色念珠菌引起,而念珠菌在我们人体内是一种条件致病菌,极易复发,主要临床表现为外阴瘙痒,灼痛,严重者坐卧不宁,异常痛苦,还可伴有继发泌尿系感染症状如尿频尿痛及性交痛,患者阴道分泌物增多,尿痛特点是排尿时尿液刺激水肿的外阴及前庭导致疼痛.分泌物由脱落上皮细胞和菌丝体、酵母菌和假菌丝组成,其特征如豆渣样或为白色稠厚呈乳酪样,白带图片可在显微镜下找到典型的菌丝及芽孢杆菌.我院自2006年引进蓝氧妇科生殖道康复治疗仪,门诊使用治疗霉菌性阴道炎160例,收到满意疗效.
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猪源枯草芽孢杆菌喷雾干燥工艺的优化
目的 优化猪源枯草芽孢杆菌喷雾干燥工艺,提高菌体喷雾干燥后的存活率.方法 应用SAS V 8.0统计分析软件中的二次正交旋转组合设计方案进行试验设计,分析各因素对Y值的效应关系；应用优化的喷雾干燥工艺进行3次重复喷雾干燥试验,验证预测结果的准确性；并检测芽孢率对菌体喷雾干燥存活率的影响.结果 优化的喷雾干燥工艺中各条件的佳参数为:出口温度90℃,入口温度150℃,保护剂浓度20％,入料速度1 200 ml/h；应用优化的喷雾干燥工艺进行3次重复喷雾干燥试验,菌体平均存活率为75.7％,与预测值(77％)基本相符；芽孢率对菌体喷雾干燥存活率影响较大.结论 优化了猪源枯草芽孢杆菌的喷雾干燥工艺,为其工业化生产奠定了基础.
关键词： 芽孢杆菌 枯草 喷雾干燥 二次正交旋转组合设计 -
皮上划痕人用炭疽活疫苗活茵数的测定与分析
目的 优化皮上划痕人用炭疽活疫苗的运输条件及活菌数测定方法.方法 用平皿培养菌落计数法对厂家先后2次送检(第1次为常温下运输3d,第2次为低温下运输6h)的皮上划痕人用炭疽活疫苗进行活菌数测定；对第2次送检的7批疫苗分别使用吸量管和移液器取样进行活菌数测定；取第2次送检的1批疫苗,分别使用吸量管和移液器取样进行5次活菌数测定,比较两种工具测定的精密度.结果 第1次送检的7批疫苗活菌数均不符合规定,第2次送检的疫苗活菌数显著高于第1次送检样品(P＜0.01),均符合规定；使用吸量管和移液器取样对活菌数测定结果影响不大,差异无统计学意义(P＞0.05)；使用移液器取样测定活菌数的变异系数(11.3％)明显低于使用吸量管取样测定活菌数的变异系数(23.0％).结论 炭疽活疫苗在送检过程中必须低温运输；使用移液器取样测定活菌数精密度高且操作方便,有利于制品的质量控制.
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修复肠黏膜芽孢杆菌制剂的制备及其对断奶仔鼠生长性能的影响
目的 制备具有肠黏膜修复功能的芽孢杆菌制剂,并探讨其对断奶仔鼠生长性能的影响.方法 正交试验法优化芽孢杆菌固体发酵原料配比.确定不同发酵时间对嗜热芽孢杆菌活菌数的影响,应用均匀设计试验优化发酵条件.采用佳发酵原料配比、发酵时间及发酵条件进行3次发酵验证试验,同时检测芽孢杆菌制剂对断奶仔鼠生长性能的影响.结果 佳发酵原料配比为:米糠57.45％,玉米面7.5％,豆粕7.5％,DDGS 22.5％,稻壳5％,硫酸锰0.05％.佳发酵条件为:温度37℃,底物厚度31 cm,发酵初始pH7.5,菌液量6％,料水比1.2∶1,发酵时间72 h.验证试验结果表明,嗜热芽孢杆菌固体发酵的活菌数稳定在2.5×1011 cfu/g.在仔鼠日粮添加1％芽孢杆菌制剂可显著提高断奶仔鼠3周的体重和日增重(P＜0.05).结论 成功制备了具有肠黏膜修复功能的芽孢杆菌制剂,日粮中添加1％芽孢杆菌制剂对幼龄动物具有促生长的作用.
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粗提抗原检测炭疽血清抗体ELISA方法的初步评价
目的 对使用粗提抗原检测炭疽血清抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行初步评价.方法 用间接ELISA方法检测人群血清(健康人血清42份、炭疽病人血清42份)特异性抗体,用阳性血清对照绘制标准曲线,按照标准曲线计算出每份血清标本的抗体相对含量,所得结果与重组致死因子(rLF)方法的检测结果进行比较.结果 病人组血清抗体相对含量中位数为1.19,健康人组血清抗体相对含量中位数为0.24,两组比较差异有统计学意义(uc=7.643,P＜0.05).粗提抗原检测与rLF检测结果并不完全对应,但两种方法显示出较高的一致性.结论 粗提抗原检测炭疽血清抗体的方法能区分大部分的病人和健康人,有一定的应用潜力,可用在炭疽疾病监测工作中.
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注射细菌杀灭癌细胞
近日，在好莱坞举办的年度临床介入肿瘤学研讨会上，来自Anderson癌症研究中心的研究人员通过研究揭示了利用细菌或许可以帮助治疗癌症。研究人员将一种名为诺维氏芽孢杆菌－NT（ Clostridium novyi－NT）的细菌的孢子注射入6位病人机体的肿瘤中，随后细菌就可以在肿瘤中生长并且杀灭癌细胞。
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陕西省延安市21例皮肤炭疽患者临床特征分析
目的 探讨皮肤炭疽患者的流行病学和临床特征.方法 回顾性分析2015年7月至12月延安市21例皮肤炭疽患者的流行病学资料、临床资料,对患者的一般资料、流行病学特点、临床症状、实验室检查、治疗方案和转归进行分析.结果 21例皮肤炭疽患者均在接触病死牲畜后出现皮肤火山口样溃疡,部分患者出现发热、头痛、腹泻、淋巴结肿大;2例患者皮肤损伤分泌物细菌涂片见革兰阳性杆菌,细菌呈两端截平,呈竹节状排列,其中1例细菌培养见需氧芽孢杆菌,且噬菌体试验、青霉素纸片试验均为阳性.21例患者经青霉素治疗后均痊愈.结论 接触不明原因病死畜后皮肤出现火山口样溃疡和焦痂,需高度警惕炭疽杆菌感染;及时采集标本行病原学检查可协助明确诊断;早期青霉素抗感染是控制病情、彻底治愈皮肤炭疽的有效疗法;及早上报疫情、加强炭疽知识的宣传是防控疫情扩散的关键措施.
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两株产生大环内酯Macrolactin S的海洋细菌的筛选及鉴定
目的:从中国东海分离筛选抗菌活性微生物,确定活性菌株的分类地位.方法:随机挑选30株本室保存的分离自中国东海的细菌,利用抗大肠杆菌模型进行活性筛选.对活性菌株进行形态特征、生化特征、盐需求测试及16S rDNA序列分析,并将所测得的序列在NCBI数据库进行相似性搜索,选取其中具有代表性的序列以邻接法构建系统进化树,将菌株鉴定到属.结果:筛选出活性菌株F81612和F201721,它们的适生长盐浓度分别为10%和7.5%,菌株形态特征、生化性质与Bacillus sp.相符,菌株F81612和F201721的16S rDNA序列分别与Bacillus subtilis和Bacillus amyloliquefaciens相似程度大.结论:利用抗大肠杆菌模型筛选到两株产大环内酯Macrolactin S的细菌,均为中等嗜盐的海洋Bacillus sp.
关键词： Macrolactin.S 芽孢杆菌 鉴定 16S.rDNA
