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蜡样芽胞杆菌引起眼部感染1例分析
蜡样芽胞杆菌是条件致病菌,主要导致胃肠道感染,致眼部感染极其罕见.我们遇到1例,报道如下.
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一种快速定量检测炭疽杆菌方法的建立
目的建立一种快速、准确、特异定量检测炭疽杆菌的方法.方法根据复合探针荧光定量分析原理,以炭疽杆菌染色体rpoB基因为靶序列,设计合成引物和探针,对炭疽杆菌进行实时定量聚合酶链反应(PCR)检测,并探讨荧光探针与淬灭探针用量及比例、镁离子浓度、淬灭探针长度对定量结果的影响.结果本法适条件:荧光探针浓度300 nmol/L、荧光探针与淬灭探针的比例为1/2,镁离子浓度为3 mmol/L,淬灭探针长15个核苷酸,该法检测炭疽杆菌的灵敏度达103拷贝,能特异区分炭疽杆菌与其他蜡样杆菌. 结论复合探针荧光定量PCR技术能够快速准确、特异、敏感地对炭疽杆菌进行定量分析,可为临床诊断提供帮助.
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炭疽芽孢杆菌特异性基因序列双重TaqMan聚合酶链反应快速检测体系的建立
目的 以炭疽芽孢杆菌的主基因和致病毒素基因pagA特异性序列为检测标志,建立高敏感、高特异的荧光双重实时TaqMan聚合酶链反应快速检测体系.方法 根据炭疽杆菌主基因组特异性序列(GS)和特异的毒力岛pagA基因序列(Pag)设计引物及探针,通过构建目的质粒获得标准模板,利用TaqMan标记探针和便携式Smartcycle实时聚合酶链反应检测平台探讨该检测体系的检测敏感性和特异性.结果 该体系炭疽芽孢杆菌的检测敏感度为102拷贝每反应体系,与其他蜡样杆菌群细菌未出现非特异性扩增,具有较高的特异性.整个反应在1 h内完成,适合于实验室或野外环境下炭疽芽孢杆菌的快速检测.结论 本研究建立的双重TaqMan实时聚合酶链反应检测体系可作为炭疽芽孢杆菌快速、准确、特异、敏感的检测手段.
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727株不同人群艰难梭菌分离株的耐药性特征
艰难梭菌是一种革兰阳性专性厌氧芽孢杆菌，为人类肠道的正常菌群。2003年以来，艰难梭菌感染（ Clostridium difficile infection，CDI）的发病率和疾病严重程度在全球范围内呈上升趋势，尤其是艰难梭菌高产毒株（ BI／NAP1／027／毒素Ⅲ型）的出现和暴发流行，使得艰难梭菌成为医院获得性腹泻的主要病原菌之一。027型高于毒株对多种抗生素耐药，在其暴发流行中起到了一定的作用［1］。近年来有报道称CDI的传统治疗药物甲硝唑和万古霉素的敏感性有所下降，且治愈后复发率高达25％～60％［2］。国内对CDI的关注也逐渐增多［3-4］，但艰难梭菌耐药性方面的相关报道较少，且菌株数量少，标本来源单一。因此，本研究对近年来从河北地区不同人群收集到的艰难梭菌分离株进行抗生素敏感性分析，为临床CDI的预防和治疗提供可靠数据。
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纳豆激酶对正常大鼠凝血系统的影响
目的 通过检测正常大鼠的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT),观察纳豆激酶(NK)冻干粉(NK-1)肌肉注射和固体发酶纳豆粉(NK-2)给药方式的NK抗凝血作用.方法 将80只SD大鼠随机分为空白对照组、肝素对照1组、肝素对照2组、阿司匹林对照组、NK-1注射低剂量组、NK-1注射中剂量组、、NK-1注射高剂量组[注射剂量依次为1.6万～25.9万U/(kg·d)],NK- 2口服低剂量组、NK -2口服中剂量组、NK-2口服高剂量组[口服剂量依次为0.5万～7.5万U/(kg·d)],每组8只.给药后观察各组大鼠血浆APTT、TT和PT指标变化.结果 与空白对照组比较,NK-1注射高剂量组、NK-2口服高剂量组和阿司匹林对照组PT明显延长(P＜0.05,P＜0.01);肝素对照1、2组、NK 1注射低、中、高剂量组、NK- 2口服高、中剂量组和阿司匹林对照组APTT明显延长(P＜0.05,P＜0.01);肝素对照2组、NK- 1注射高剂量组TT明显延长(P＜0.01).结论 NK-1在1.6万～25.9万U/(kg·d)剂量范围内注射给药,与NK- 2在0.5万～7.5万U/(kg·d)剂量范围内口服给药,对正常大鼠均具有一定的抗凝血作用,且抗凝血作用随剂量的升高而增强.
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同种异体骨移植引起的疾病传播
同种骨移植的大潜在危险是通过骨移植把供体体内的病原微生物传播给受体.除了一般性细菌感染,受到更大重视的是以下三种病毒的传播:引起艾滋病的人类免疫缺陷病毒HIV,引起海绵状脑病的Creutzfeld-Jabob病(CJD)病毒,以及肝炎病毒.不久前,美国发生梭形芽孢杆菌污染同种骨的恶性事件,又引起对细菌的重视.杜绝任何疾病传播,保证产品的安全使用,是骨库质量控制的核心任务.下面简要介绍有关的国外事例,以期引起人们的重视.
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炭疽芽孢杆菌芽孢适配子的结构与亲和性分析
为了对炭疽芽孢杆菌疫苗株A.16R芽孢的适配子进行亲和性分析，体外构建了78个碱基的随机DNA库，以炭疽芽孢杆菌疫苗株A.16R芽孢为靶标，用SELEX技术进行了15轮的筛选，将筛选到的适配子库进行克隆、测序，用Macaw 2.05和DNA sis v2.5软件对每一适配子的保守序列和二级结构进行分析，并用生物素-链酶亲和素-辣根酶系统检测，根据OD值的高低判定亲和力的大小，对每一适配子进行亲和力测定。结果表明，适配子的亲和力高低不一，OD值高为1.2，低为0.25，二级结构分析结果显示，茎环和茎等二级结构可能是适配子与芽孢结合的基础；其一级结构提示有AGGGG、CCCCG、GGGTT、ACACT等保守序列，上述分类与OD值的高低分布基本吻合。
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利用免疫蛋白质组学鉴定炭疽杆菌蛋白MetK及其免疫原性验证
目的 验证免疫蛋白质组中鉴定到的S-腺苷甲硫氨酸MetK蛋白的免疫原性.方法 免疫蛋白质组学的方法鉴定到MetK蛋白,通过PCR方法扩增metK基因全长,然后将其克隆到原核表达载体pET32a中,转化大肠杆菌DH5α,测序正确后提取质粒转入BL21(DE3)中进行诱导表达.再通过Ni-NTA柱纯化MetK蛋白,纯化后的蛋白免疫SPF级的BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,通过多克隆抗体与炭疽芽孢杆菌A16R全菌蛋白Western印迹检测,验证MetK蛋白的免疫原性.结果与结论成功表达了MetK蛋白,制备了其多克隆抗体,为免疫蛋白质组学鉴定到的蛋白点进行验证,也为研究MetK蛋白的生物学功能研究提供了条件.
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SELEX法筛选炭疽芽孢杆菌芽孢适配子的研究
目的:利用SELEX(system evolution of ligands by exponential enrichment)体外筛选技术,寻找能与炭疽芽孢杆菌芽孢特异结合的寡核苷酸适配子(aptamer).方法:体外合成长度为78个核苷酸的随机DNA库,通过SELEX技术,以炭疽芽孢杆菌疫苗株A.16R的芽孢为靶标进行15轮的筛选,利用生物素-亲和素显色系统判断寡核苷酸与芽孢的结合活性.结果:随着筛选轮数的增加,PCR扩增电泳条带逐渐单纯,寡核苷酸与芽孢结合后显色,D值提高了9倍以上,D值随适配子结合量的增加而递增.结论:已初步筛选到与炭疽芽孢具有亲和力的适配子.
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炭疽芽孢杆菌突变株AP431与A16R的生物特性比较研究
目的 系统评价所构建的炭疽芽孢杆菌突变株AP431的生物特性,并与出发菌株A16R对比,为后续研究提供数据基础.方法 绘制生长曲线比较突变株AP431和A16R的生长性能;糖酵解实验分析二者生化特性的差异;免疫印迹和流式细胞术检测菌株的保护性抗原PA蛋白表达情况;连续传代共培养分析其竞争关系;过氧化氢灭菌实验和抑菌圈实验分析菌株对活性氧的耐受性;以C57小鼠为动物模型比较二者的毒力大小.结果 与A16R相比,突变株AP431生长稍慢,生化特性基本一致.突变株AP431的PA蛋白在S层呈现表达良好,并且在培养基上清、细胞内和外膜上的表达水平均比A16R高.共培养实验发现AP431的生存竞争能力明显减弱.过氧化氢敏感实验表明,突变株AP431对过氧化氢的敏感性比A16R显著增高.动物毒力实验结果显示,分别在两种注射剂量下,突变株的致死率显著降低,与A16R组相比差异显著(P＜0.01).结论 与A16R相比,炭疽菌突变株AP431保护性抗原PA表达水平明显提高,毒力明显降低,可作为新的疫苗候选株进行进一步研究.
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2007～2011年中国皮肤炭疽流行病学分析
目的 分析2007～2011年中国皮肤炭疽流行病学特征,为预防和控制该病提供参考依据.方法 收集2007～2011年中国皮肤炭疽监测资料,采用描述性流行病学方法,对其进行分析.结果 2007～2011年中国有18个省(区)的225个区、县、旗报告皮肤炭疽病例,共报告病例1911例,死亡病例13例,年平均发病率0.0288/10万.各年龄段均有病例,中年人居多;发病者多为牧民和农民,占86.08％.结论 2007～2011年中国皮肤炭疽发病较平稳,主要集中在夏秋季节;年龄、性别、职业存在差异;有明显的区域性,主要分布在牧区.
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炭疽芽孢杆菌芽孢萌发研究进展
芽孢是炭疽芽孢杆菌为应对不适的外界环境而形成的一种生命形式，休眠期的芽孢可以通过萌发恢复生长成为繁殖体。萌发过程作为关键步骤，可以由营养萌发剂和一些非营养类物质或者在其他情况下触发。在萌发过程中，萌发剂通过与存在于芽孢内膜上的萌发剂受体结合来触发芽孢核内各种阳离子的释放以及芽孢核对水的吸收。在芽孢皮层的肽聚糖被酶水解后，芽孢核逐渐完全水合化，开始进行新陈代谢以及大分子的合成活动，逐渐成长为一个新的营养细胞。该文将从萌发受体、芽孢皮层水解酶功能等方面对炭疽菌芽孢萌发机制进行阐述。
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炭疽芽孢杆菌建立感染的过程及其机制
炭疽是一类烈性传染病，其病原体炭疽芽孢杆菌（简称炭疽菌）形成的芽孢是生物战剂和生物恐怖的原材料。免疫预防和特异性的治疗药物是应对这类生物威胁的重要手段。炭疽菌感染的机制研究，尤其是感染建立过程的研究能够为新型炭疽防治药物的研发提供新的思路。该文通过综述相关研究进展，介绍了炭疽菌的感染过程，描述了可能的感染机制，并结合炭疽防治药物的研究工作展开了讨论。
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BslA蛋白在减毒炭疽芽孢杆菌中的表达和功能分析
目的 在减毒炭疽芽孢杆菌AP422中表达BslA蛋白,并分析其生物学活性.方法 利用PCR方法从炭疽芽孢杆菌中扩增出bslA基因,克隆至穿梭质粒pDG148,采用电转化方法将表达载体转入减毒炭疽芽孢杆菌AP422后诱导表达重组BslA.并利用SDS-PAGE电泳、Western印迹、间接免疫荧光实验和流式细胞术分析目标蛋白的表达,并对其进行空间定位,后用细菌黏附实验分析其生物学功能.结果 BslA蛋白在AP422中获得成功表达,且目标蛋白主要表达于菌体表面.表达BslA蛋白的AP422(pDG-BslA)菌株具有黏附宿主细胞表面的能力,该黏附能力与阳性对照A16R菌株基本一致.结论 在减毒炭疽芽孢杆菌AP422中实现了BslA蛋白的功能性表达,为进一步研究该蛋白的功能和构建新的疫苗候选株奠定了实验基础.
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商丘市2000-2002年新生儿破伤风流行病学分析
新生儿破伤风(NNT)是由破伤风芽孢杆菌引起的死亡率高的疾病.破伤风芽孢杆菌是土壤中常见的菌群之一.从土壤标本中20～47%可分离到破伤风芽孢杆菌,人与动物粪便中也含该菌,马粪中破伤风芽孢杆菌检出率为8～30%.
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中成药中的芽孢杆菌鉴定
目的:随机取抽验细菌数超限的中成药20批,对培养检出的芽孢杆菌进行鉴定.方法:根据培养检出的16株芽孢杆菌的形态、生理生化、碳源及氮源利用等32项特征鉴定到种.结果与讨论:16株芽孢杆菌中,巨大芽孢杆菌3株;枯草芽孢杆菌8株;环状芽孢杆菌3株;蜂房芽孢杆菌1株;球形芽孢杆菌1株.从中成药检出以上芽孢杆菌,说明中成药现行幅射剂量可能不足,或是保存期间再次受微生物污染,具体原因待进一步探讨.建议今后的<中国药典>,在[微生物限度]检查项目中,应当考虑增加有关芽孢杆菌的质控内容.
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益生菌在功能性肠病中的应用
微生态制剂也称微生态调节剂,是指含活菌、死菌、菌体组分和产物或是仅含活菌和死菌的微生物制剂,包括益生菌(probiotcs)、益生元(prebiotics)、合生元(synbiotics)三大类,具有调整微生态、保持微生态平衡、提高宿主健康水平的作用.益生菌由含足够数量的非致病性的特定活菌组成,通过改善宿主黏膜表面的微生物菌群来保持微生态平衡.临床常用的益生菌是乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌和芽孢杆菌.
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地衣芽孢杆菌联合双歧杆菌乳杆菌三联活菌治疗化疗相关性腹泻的疗效研究
目的：研究地衣芽孢杆菌联合双歧杆菌乳杆菌三联活菌对胃癌患者化疗相关性腹泻（CID）的治疗效果。方法回顾性分析72例发生CID的胃癌患者的临床资料，将患者按治疗方法分为四组，每组18例，A组口服蒙脱石散，B组口服蒙脱石散和地衣芽孢杆菌，C组口服蒙脱石散和双歧杆菌乳杆菌三联活菌，D组口服蒙脱石散、地衣芽孢杆菌和双歧杆菌乳杆菌三联活菌。患者若存在严重腹泻均给予补液、维持水电解质平衡、营养支持等对症治疗。观察患者治疗前后Karnofsky行为表现量表评分（KPS评分）、腹泻分级以及疗效。结果 A组、B组、C组和D组治疗后KPS评分均较治疗前明显升高[（70.6±10.6）分比（62.2±12.2）分、（76.1±7.8）分比（61.7±9.9）分、（77.2±7.5）分比（61.1±10.8）分、（83.9±5.0）分比（63.9±10.9）分]，而且B组、C组和D组明显高于A组，D组明显高于B组和C组，差异有统计学意义（P＜0.05）。四组治疗后腹泻分级均较治疗前改善，而且B组、C组和D组明显优于A组，D组明显优于B组和C组，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组显效2例，有效10例，无效6例；B组显效8例，有效8例，无效2例；C组显效7例，有效9例，无效2例；D组显效9例，有效9例，无效0例。D组疗效明显优于其他三组，差异有统计学意义（Hc=10.81，P＜0.05）。结论地衣芽孢杆菌联合双歧杆菌乳杆菌三联活菌对胃癌CID患者疗效确切，值得临床推广。
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枯草芽孢杆菌性眼内炎误诊一例
感染性眼内炎对视功能的影响非常严重,枯草芽孢杆菌性眼内炎是感染性眼内炎的一种,因其毒力较强,可在12 ～24 h内导致失明.
