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E2F4对CDK2和CyclinA在肝癌细胞系中的转录调控特异性研究
目的 研究E2F4对细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)和细胞周期素A(Cyclin A)在肝癌细胞系中的转录调控活性.方法 扩增并克隆不同片段长度的CDK2和CyclinA启动子序列,E2F4表达质粒序列,转染肝癌细胞系(HepG2、QGY1007),双荧光报告系统检测荧光素酶表达活性,实时定量反转录.聚合酶链反应检测肝癌细胞系中CDK2和Cyclin A mRNA的表达水平.结果 双荧光报告系统、卖时定量反转录-聚合酶链反应显示,在肝癌细胞系中转染E2F4表达质粒组CDK2和CyclinA启动子活性明显低于未转染E2F4表达质粒组,CDK2和CyclinA mRNA的表达水平降低.结论 E2F4在肝癌细胞系中可以抑制CDK2和CyclinA的转录活性.
关键词： E2F4 细胞周期素依赖性激酶2 细胞周期素A 启动子 转录调控 -
Cdk2及其抑制因子p27Kip1在胃癌中的表达和意义
目的:探讨细胞周期素依赖性激酶2(Cdk2)及其抑制因子p27Kip1与胃癌生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法对60例胃癌组织原发灶和淋巴结转移灶进行Cdk2、p27Kip1免疫组化染色,腹水或腹腔冲洗液行脱落细胞学检查.结果:Cdk2阳性表达率56.67%(34/60),阳性细胞定位于细胞核和细胞浆,以Ⅲ、Ⅳ期表达率较高(P<0.01),与胃癌大体类型及浆膜分型关系密切(P<0.01);p27Kip1阳性表达率为43.33%(26/60),阳性细胞定位于细胞浆,在高分化及Ⅰ、Ⅱ期胃癌高表达(P<0.05),且与淋巴结转移密切相关(P<0.01);Cdk2、p27Kip1同时阳性表达19例,占31.67%(19/60).结论:Cdk2与胃癌浸润深度、淋巴结转移呈正相关,p27Kip1表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移呈负相关.
关键词： 胃癌 细胞周期素依赖性激酶2 p27kip1 免疫组织化学方法 -
细胞周期素依赖性激酶2及p27Kipl与血管瘤
目的:进一步探讨细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)及p27Kipl.在血管瘤发生、发展及退化过程中的作用机制.方法:采用免疫组织化学SP法检测49例皮肤毛细血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中CDK2和p27Kipl的表达水平;采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统,对CDK2和p27Kipl表达的平均光密度和阳性面积率进行图像分析.结果:增生期组CDK2的表达明显高于退化期组和正常皮肤组织组;增生期血管瘤内皮细胞p27Kipl的表达显著低于退化期血管瘤内皮细胞.结论:p27Kipl能抑制血管瘤内皮细胞的增殖,在血管瘤的退化过程中起了重要作用;而CDK2能促进血管瘤内皮细胞增殖,存血管瘤的增生过程巾起了重要作用.
关键词： 血管瘤 细胞周期素依赖性激酶2 P27kipl 免疫组织化学 -
Cyclin A、CDK2基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义
目的研究细胞周期素A(Cyclin A)和细胞周期素依赖性激酶2(cyclin-dependent kinases,CDK2)基因在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其相互关系,探讨其对NSCLC发生、发展、淋巴结转移及预后的影响.方法采用免疫组织化学二步法检测40例NSCLC(伴淋巴结转移21例,不伴淋巴结转移19例),11例支气管黏膜上皮增生或不典型增生,9例淋巴结转移癌组织中Cyclin A、CDK2蛋白的表达,并随访40例NSCLC患者3年生存期.结果在支气管黏膜上皮增生或不典型增生,不伴淋巴结转移的NSCLC,伴淋巴结转移的NSCLC,淋巴结转移癌组织中,Cyclin A蛋白的阳性表达率分别为9.09%(1/11),31.58%(6/19),80.95%(17/21),66.67%(6/9);CDK2蛋白的阳性表达率分别为9.09%(1/11),36.84%(7/19),76.19%(16/21),77.78%(7/9);不伴淋巴结转移的NSCLC组织中的Cyclin A、CDK2蛋白阳性表达率分别与伴淋巴结转移NSCLC组织、淋巴结转移癌组织的Cyclin A、CDK2蛋白阳性表达率比较,差异均有显著性(P均＜0.05).23例Cyclin A蛋白表达阳性患者3年生存率为21.74%(5/23),17例表达阴性患者3年生存率为58.82%(10/17),两者比较有显著性差异(P＜0.05);23例CDK2蛋白表达阳性患者3年生存率为17.39%(4/23),17例表达阴性患者3年生存率为64.71%(11/17),两者比较有显著性差异(P＜0.05).NSCLC中Cyclin A与CDK2蛋白表达呈正相关(x2=19.22,P＜0.001,列联系数Pearson=0.570).结论在NSCLC发生、演进、浸润、淋巴结转移过程中CyclinA、CDK2起正调控作用,NSCLC组织中CyclinA、CDK2表达上调可作为判断NSCLC预后不良的参考指标.
关键词： 非小细胞肺癌 细胞周期素A 细胞周期素依赖性激酶2 免疫组织化学 -
CDK2及其抑制因子P57kip2在血管瘤中的表达和意义
目的:探讨细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)及其抑制因子P57kip2在血管瘤发生、发展过程中的表达及意义.方法:应用免疫组织化学方法(SP法)检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及其正常皮肤组织中CDK2及P57kip2的表达水平.结果:CDK2在增生期血管瘤内皮细胞的表达明显高于退化期血管瘤内皮细胞和正常皮肤组织血管内皮细胞(P＜0.001),而后两组比较差异无统计学意义.P57kip2在增生期血管瘤内皮细胞的表达显著低于退化期血管瘤内皮细胞(P＜0.005),退化期血管瘤内皮细胞P57kip2表达水平与正常组织相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:CDK2的高表达及P57kip2的低表达或缺失可能在血管瘤的发生发展中起重要作用.
关键词： 血管瘤 内皮细胞 细胞周期素依赖性激酶2 p57KIP2 -
VES体外抑制Raji细胞增殖及机制的初步研究
目的观察维生素E琥珀酸酯(VES)体外对人单核细胞白血病Raji细胞的抗增殖作用及对细胞周期和细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)的影响.方法应用荧光显微镜、流式细胞仪、免疫细胞化学染色等技术方法,体外观察VES对Raji细胞的作用.结果 VES对Raji细胞的生长抑制作用与诱发细胞凋亡的明显增加同步发生,具有剂量效应和时间效应关系,同时VES作用后,细胞内CDK2蛋白表达下降,细胞周期发生变化,细胞阻滞于G1期.结论 VES通过影响细胞周期调控因子CDK2的表达从而干扰细胞周期可能是其抗肿瘤的途径之一.
关键词： 维生素E琥珀酸酯 Raji 细胞 细胞周期素依赖性激酶2 细胞周期 -
视黄酸对CDK2组成性表达HL-60细胞增殖的影响
目的探讨细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)在视黄酸对急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞的增殖抑制和分化调控过程中的作用.方法应用真核细胞基因转染技术将外源CDK2基因转入人HL-60早幼粒细胞白血病细胞中,进而以视黄酸处理1～4d.结果HL-60细胞的增殖受到明显抑制,且出现了分化趋势,与对照组相比,更多的CDK2组成性表达的HL-60细胞被阻止于G0/G1期,但与未转染的HL-60细胞相比,视黄酸的抑制增殖、诱导分化作用均有所削弱,同时,CDK2的蛋白表达量变化并不明显.结论CDK2在视黄酸诱导的增殖抑制和分化过程中起重要作用,由于CDK2的组成性超表达,导致视黄酸对HL-60细胞的增殖抑制和诱导分化作用下降.
关键词： 视黄酸 HL-60细胞 细胞周期素依赖性激酶2 细胞周期 组成性表达
