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己烯雌酚干预下围产期小鼠睾丸Leydig细胞INSL3 mRNA的表达变化
目的:通过体内、体外实验研究己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)对KM小鼠围产期小鼠睾丸Leydig细胞胰岛素样因子3(Insuliu-like hormone 3,INSL3)mRNA表达的影响,探讨隐睾发生的可能机制.方法:DES分别以低、中、高3组剂量(1、5、25μg/L)分别作用于原代培养的胎龄16 d小鼠胚胎Leydig细胞,应用RT-PCR和原位分子杂交技术检测DES对睾丸Leydig细胞INSL3 mRNA 的表达水平;DES分别以低、中、高3组剂量[1μg/(kg·d)、10 μg/(kg·d)、100 μg/(kg·d)]灌胃作用于GD(Gestation day)12～PND(Postnatal day)3孕鼠,RT～PCR检测新生小鼠睾丸INSL3 mRNA表达的相对强度,并比较其差异性.结果:DES改变原代培养的小鼠胚胎Leydig细胞和新生小鼠睾丸的形态结构,以中、高剂量组改变尤为明显;体外实验中,DES中、高剂量组原代Leydig细胞INSL3 mRNA表达水平均明显低于对照组(P＜0.01)和DES低剂量组(P＜0.01);DES试验组Leydig细胞INSL3 mRNA表达相对强度低于对照组(P＜0.01) .体内实验中,DES试验组不同时间点的新生鼠睾丸INSL3 mRNA表达相对强度均明显低于对照组(P＜0.05,或P＜0.01),实验组组间两两比较也有差异(P＜0.05,或P＜0.01) .结论:DES可下调睾丸Leydig细胞INSL3 mRNA的表达水平,其可能是影响小鼠睾丸引带发育导致隐睾的机制之一.
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己烯雌酚对小鼠脾内淋巴细胞的影响
[目的]了解外源性给予新生雌性BALB/c小鼠己烯雌酚对其脾内淋巴细胞数量和分布的影响以及对T细胞亚型百分比的影响.[方法]选取同一窝、体重差异小于5%的一对雌性新生BALB/c小鼠.随机分为对照组和DES组.共选用25对雌性小鼠,其中DES组新生小鼠在生后24 h内颈背部皮下注射DES,每隔24 h注射1次,共连续5次,对照组平行注射等量无菌豆油.分别在生后d 7、d 14、d 21、d 35和d 49将小鼠处死,取脾进行常规石蜡包埋,5μm连续切片,进行CD3和CD20的免疫组织化学检测:用Ficoll分层液分离脾单个核细胞,在流式细胞仪上进行CD4+、CD8+和CD4+CD8+细胞亚型分析.[结果]无论是CD3+细胞还是CD20+细胞,其DES组的平均光密度和积分光密度在生后d 7、d 14、d 21、d 35和d 49均显著低于对照组.在DES组,CD4+细胞的百分比在生后d 35显著降低,在d 49显著增高:CD4+CD8+(DP)细胞的百分比在生后d 7和d 35显著增高,在生后d 49显著降低;CD8+细胞的百分比无明显改变.DES组和对照组CD3+和CD20+细胞的脾内分布基本一致.[结论]DES可以显著减少雌性BALB/c小鼠脾内T细胞和B细胞的数量以及T细胞和B细胞表面特异性抗原的表达强度;显著改变CIM+细胞和DP细胞的百分比;但对T细胞和B细胞的脾内分布不产生影响.
关键词： 新生BALB/c小鼠 脾 己烯雌酚 淋巴细胞 -
鸡肉中己烯雌酚残留量的HPLC法测定研究
[目的]建立鸡肉中己烯雌酚残留量的高效液相色谱测定方法.[方法]用乙醇萃取鸡肉中的己烯雌酚残留,采用固相萃取柱(SPE),甲醇-水(10+90)2 ml淋洗,甲醇2 ml洗脱,收集洗脱液浓缩蒸干,再用甲醇港解残渣,用紫外检测器高效液相色谱仪,在波长280 nm处检测,并使用外标法定量.[结果]平均回收率可达到72.2%以上,低检测浓度10 μg/kg.[结论]建立的高效液相色谱测定鸡肉中己烯雌酚残留量的方法与其他方法相比具有操作简便、快速、精密度高、回收率高、重现性较好,检测限低等优点.
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己烯雌酚对小鼠脾细胞黄体生成素表达的影响
[目的]了解新生期注射己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)后BALB/c小鼠脾细胞黄体生成素(luteinizinghormone,LH)表达的变化以及这种变化在不同性别之间是否存在差异.[方法]选取同一窝、体重差异小于5%的新生BALB/c小鼠,随机分为对照组和DES组,雌、雄各选25对,在生后24 h内,DES组小鼠颈背部皮下注射DES,每隔24 h注射1次,共连续注射5次.对照组小鼠平行注射等量无菌豆油.分别在生后d 7、14、21、35和d 49将小鼠处死,取其脾组织进行常规石蜡包埋、切片及LH的免疫组织化学检测.[结果]无论是雌性小鼠还是雄性小鼠,从生后d 7到d 49,对照组和DES组小鼠脾内均可见LH阳性细胞,阳性细胞呈淋巴细胞和小鼠脾巨噬细胞形态结构特点,阳性表达在两组均随周龄的增加而减弱;同一时间点条件下观察发现,DES组的LH阳性表达均低于对照组.雌性小鼠和雄性小鼠相比,雌性小鼠在各时间点DES组脾内的LH阳性细胞数量均低于对照组,且两组之间差异具有统计学意义;而雄性小鼠的DES组在生后d 7和d 14与对照组之间无差异,在生后d 21、35和d 49与对照组相比差异具有统计学意义.[结论] (1)无论是雌性还是雄性BALB/c小鼠,其脾内均存在LH表达细胞,表达水平随年龄的增加而降低; (2)新生期接触DES可导致BALB/c小鼠脾内LH阳性细胞减少,减少程度与小鼠的性别有关,雌性小鼠对DES的敏感性大干雄性小鼠.(3)不论是雌性小鼠还是雄性小鼠,DES对其脾内LH表达的抑制作用均可从新生期持续到成年期.
关键词： 新生BALB/c小鼠 己烯雌酚 脾 免疫组织化学 黄体生成素 -
SPE-HPLC同时测定水产品中己烯雌酚、甲基睾酮的研究
目的:固相萃取高效液相色谱法同时测定水产品中己烯雌酚(DES)、甲基睾酮(MET)的残留量.方法:固相萃取小柱为Alltech Extract-clean columns C18,200 mg/4.0ml,洗脱液为甲醇;色谱柱为SUPELCO Discovery C18 5μm250×4.6 mm,流动相为:甲醇:水=75:25(V/V),流速为1.0 ml/min,二极管阵列检测器,检测波长为245 nm.结果:该方法的线性范围为:0.5～10.0 μg/ml;标准曲线线性良好,其回归方程及相关系数r分别为己烯雌酚:y=61.31042x+2.38615,r=0.99994;甲基睾酮:y=66.55427x+2.32491,r=0.99994.低检出限分别为:己烯雌酚9.5μg/kg;甲基睾酮5.4μg/kg;回收率在95%～102%之间,相对标准偏差小于1.3%.结论:该方法操作简便、快捷,是水产品激素残留的快速而准确的检测方法.
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中西医结合治疗继发性闭经46例
根据月经周期的特点,以补肾为主,采取中药人工周期配合小剂量雌激素周期治疗继发性闭经46例,其中子宫发育不良14例、卵巢功能早衰10例、高泌乳素血症14例、单纯性肥胖8例,结果治愈15例、好转23例、无效8例、总有效率为83.4%.
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己烯雌酚联合米非司酮在利凡诺引产术中的诱导效果
目的:探讨已烯雌酚联合米非司酮在利凡诺中孕引产术中的诱导效果.方法:回顾性分析在我院行利凡诺中孕引产术的孕20～ 26周169例孕妇的引产情况,其中未用诱导剂的73例定为A组,96例用已烯雌酚联合米非司酮做诱导剂的定为B组,比较引产记录中的总时长(自羊膜腔内注射利凡诺到引产成功)、产时与产后出血量、软产道损伤情况、引产结果等,评估诱导方法的诱导效果.结果:A组引产3例未成功,B组引产全部成功.A组平均时长40.2±2.3 h,B组平均时长20.4±1.8h,B组较A组总时长明显缩短,A组平均产时与产后出血量及软产道损伤方面与B组比均有显著性差异.结论:己烯雌酚联合米非司酮在利凡诺中孕引产术中的诱导作用效果显著,方法简单,促进宫颈软化效果好,副作用少,具有重要临床推广意义.
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薄层色谱法鉴别雌氯乳膏中氯霉素和己烯雌酚
采用薄层色谱法鉴别雌氯乳膏中氯霉素和己烯雌酚.
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薄层色谱法鉴别白斑膏中己烯雌酚、克霉唑、马来酸氯苯那敏和氢化可地松
目的用薄层色谱法鉴别白斑膏中4种主要成分.方法吸附剂为硅胶GF254 ,展开剂为二氯甲烷-乙醚-甲醇-浓氨水(38.5∶3∶3∶1).结果 Rf值分别为0.72、0.89、0.49和0.25.结论 4种成分可以完全分离.
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鱼肝油治疗乳头皲裂的疗效观察
乳头皲裂为哺乳期妇女常见并发症,既往采用己烯雌酚、紫草油、MEBO(湿润烧伤膏)及乳汁涂擦[1-4]等多种方法,虽然有一定疗效,但患者疼痛消失缓慢.我院自1998年9月至2000年4月期间,采用鱼肝油局部涂擦乳头治疗乳头皲裂,效果明显.现报告如下:
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己烯雌酚配伍米非司酮、米索前列醇用于10～16周终止妊娠
我院自1991年开始应用米非司酮配伍米索前列醇终止早孕.在此基础上,1996年1月至1998年6月,采用己烯雌酚配伍米非司酮、米索前列醇终止10～16周妊娠98例,取得满意效果,现总结如下.
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己烯雌酚溶液做导尿管润滑剂的探讨
导尿术是解除尿潴留直接的方法.近几年来,笔者经临床应用观察,用己烯雌酚溶液做导尿管润滑剂,预防留置导尿所致尿路刺激症状,取得了满意的效果.此方法在临床上应用具有简便、有效、无副作用优点,现介绍如下.
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淫羊藿苷对去卵巢小鼠血清雌二醇水平的影响
淫羊藿苷是淫羊藿的主要有效成分之一,其对去卵巢小鼠雌激素水平的影响尚未见报道.本实验以去卵巢小鼠观察其对血清雌激素水平的影响.1 材料与方法1.1 材料淫羊藿苷,淡黄色粉末,南京崇原生物科技有限公司(批号:20070501);己烯雌酚,合肥久联制药有限公司(批号:20060518).KM种小鼠,雌性,4周龄,体质量20～22 g,一级实验动物(由贵阳医学院实验动物中心提供,合格证:SCXK(黔)2002-0001);We//Scanks酶标仪(芬兰雷勃);AB104-S梅特勒-托利多电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司).
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去氧孕烯炔雌醇片用于100例功能性子宫出血患者的临床分析
目的 探讨和研究去氧孕烯炔雌醇片治疗功能性子宫出血患者的临床疗效.方法 选取2011年1月-2013年1月之间收治的100例功能性子宫出血患者为研究对象,随机分组,对照组50例采用常规治疗,给予己烯雌酚口服,观察组50例则给予去氧孕烯炔雌醇片治疗,治疗结束后统计疗效并对比.结果 从两组患者的疗效来看,观察组总有效率98.0％(49/50),对照组总有效率86.0％(43/50),观察组显著优于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 去氧孕烯炔雌醇片治疗功能性子宫出血的疗效较好,相较于己烯雌酚效果更加显著,值得在临床上推广和应用.
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中医周期疗法治愈闭经1例
翟某,女,17岁,高二学生.2005年9月2日初诊.患者13岁初潮,每1～2个月来潮一次,持续3～5d干净,量较多,有少量血块,色暗红.因经期贪凉饮冷致月经于2003年4月突然停闭 .外院给予己烯雌酚配合安宫黄体酮片周期调治,患者月经能按月来潮,但停用西药后月经又复停闭.
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己烯雌酚免疫原的合成及其抗血清制备
目的: 制备人工合成的己烯雌酚(DES)的多克隆抗体.方法: 采用碳二亚胺法将DES与牛血清白蛋白(BSA)交联, 经紫外扫描估算其交联比为22, SDS-PAGE实验初步表明DES与BSA发生交联.用双向免疫琼脂扩散实验检测经DES-HS-BSA 多次免疫新西兰白兔的抗血清.结果: 合成的DES-HS-BSA复合物, 具有免疫原性, 并产生了针对小分子DES的抗体.结论: DES免疫原的合成是成功的, 为其试剂盒的研制提供了条件.
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己烯雌酚与布洛芬对包皮环切术后疼痛及并发症的影响
目的:比较己烯雌酚和布洛芬对包皮环切术后阴茎勃起疼痛及并发症的影响.方法:将200例行相同术式包皮环切患者随机分成布洛芬使用组(A组)和己烯雌酚使用组(B组).A、B二组服药时间均为术后当天开始至术后第3天.A组每人每次口服布洛芬200mg,3次/日;B组每次口服己烯雌酚lmg,3次/日.观察两组术后夜间勃起疼痛次数和维持时间、清晨勃起、夜间阴茎肿胀,术后伤口疼痛情况等指标.观察各组并发症发生情况,药物不良反应发生率.结果:在夜间勃起次数、勃起维持时间、清晨勃起、夜间阴茎肿胀和术后并发症等指标对比中,A组与B组之间无显著差异(P>0.05).A组术后伤口疼痛明显较B组轻.B组药物不良反应较A组明显(P<0.05).结论:包皮环切术后不必常规服用己烯雌酚,服用布洛芬可以较好控制术后疼痛.
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己烯雌酚对体外培养正常人表皮黑素细胞的作用
目的:观察不同浓度外源性雌激素己烯雌酚(Dlaethylstilbestro,DES)对体外培养人正常黑素细胞的细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响.方法:采用MTT法测定黑素细胞增殖情况.参考Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性.结果:不同浓度己烯雌酚对体外培养人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性均有促进作用.结论:己烯雌酚能促进人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性.对相关皮肤色素性疾病可能有一定的治疗作用.
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己烯雌酚用于绝经后妇女取环术分析
目的:对比观察己烯雌酚在绝经后妇女取环术中的临床效果.方法:选择我院绝经后行取环术患者119例,随机分为观察组和对照组,观察组63例,口服己烯雌酚1mg,每天1次,维生素B620mg,每天3次,饭后服用.连续服药5天后行取环术；对照组56例,直接按手术常规操作.随诊3个月,B超监测子宫内膜情况.结果:观察组63例绝经后妇女(其中46例惰性宫内节育器不锈钢单环、17例Tcu220)均1次取环成功,成功率为100％,随诊3个月,B超未发现子宫内膜增厚.对照组56例(其中31例惰性宫内节育器不锈钢单环、25例Tcu220)中,5例未取出,成功率91.07％.结论:己烯雌酚用于绝经后妇女的取环术,手术成功率高,效果好.
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己烯雌酚对体外培养中脑神经元的保护作用
为观察己烯雌酚对体外培养的胎鼠中脑神经元的影响,将孕14 d的SD胎鼠中脑取出,制成细胞悬液后种植在24孔培养板中.实验分空白对照组和己烯雌酚组(浓度分别为10-9、10-8、10-7 mol/L).用倒置显微镜观察各组细胞的存活及生长状况,并用免疫细胞化学方法测定各组细胞神经元特异烯醇化酶(NSE)及c-Fos蛋白阳性表达情况.结果显示,己烯雌酚浓度在10-8mol/L时细胞容易贴壁,突起形成早而多,NSE、c-Fos阳性细胞数与对照组及低浓度组有显著差异(P＜0.05),与高浓度组无显著差异.由此提示己烯雌酚对中脑神经元具有保护作用,并能提高其功能活性.
