蒿甲醚对血吸虫超微结构的影响

蒿甲醚是青蒿素的一个衍生物,不仅是有效的抗疟药,而且对血吸虫特别是血吸虫童虫亦有效,并已在20世纪末被发展为预防血吸虫病的药物.为了了解蒿甲醚的抗血吸虫作用,除观察其对血吸虫生化代谢的影响外,还用扫描电镜和透射电镜观察了蒿甲醚对感染人体的主要3种血吸虫,即日本血吸虫、曼氏血吸虫和埃及血吸虫超微结构的影响,结果表明蒿甲醚不仅损害血吸虫的皮层、感觉器和皮层结节,而且对虫的肌层、实质组织、肠上皮细胞和卵黄细胞等亦引起广泛的损害.该文综述了蒿甲醚对这3种血吸虫超微结构损害的观察结果,并进行了讨论.

052 恶性疟原虫对肠外给药的蒿甲醚可能发生的耐药性:印度孟买的病例报告

7种抗蠕虫药物的体外抗华支睾吸虫作用

目的 观察吡喹酮、三苯双脒、左旋咪唑、蒿甲醚、青蒿琥酯、阿苯达唑和甲苯达唑体外对华支睾吸虫成虫的作用.方法 70只大鼠于感染华支睾吸虫囊蚴(50～100个/只)5～7周后解剖,从胆总管内采集华支睾吸虫成虫,亨氏盐平衡溶液培养.取24孔培养板,每孔放置华支睾吸虫3～4条,加入不同浓度的上述药物,于药物处理后1、4、24、48和72 h,在倒置显微镜下观察成虫的活动和形态变化.结果 吡喹酮可迅速减弱华支睾吸虫的活动,使口吸盘丧失吸附皿壁能力,虫体蜷缩、皮层出现空泡.吡喹酮对华支睾吸虫的低致死浓度为0.1g/ml.三苯双脒0.5、1和10g/ml组虫体接触药物后迅速麻痹伸直呈松弛状.三苯双脒对华支睾吸虫的低致死浓度为0.05 g/ml.左旋咪唑10和20g/ml组华支睾吸虫的活动经药物作用后逐渐减弱,虫体松弛,但48 h后,大部分虫体和口吸盘明显恢复活动.左旋咪唑的浓度高达50g/ml时,虫体立即伸直麻痹,其表现与三苯双脒组相仿.蒿甲醚和青蒿琥酯10g/ml和50g/ml组虫体和口吸盘的活动减弱,虫体收缩,继则松弛,体表出现空泡,培养72 h后两组均有半数以上虫体死亡.阿苯达唑和甲苯达唑10g/ml和50 g/ml组华支睾吸虫除口吸盘在培养的24 h内呈兴奋的伸缩活动外,未见其他变化,培养72 h内无虫死亡.结论 吡喹酮和三苯双脒对体外培养的华支睾吸虫具有很强的杀死作用;左旋咪唑对华支睾吸虫低致死浓度为三苯双脒的50倍;较高浓度的蒿甲醚和青蒿琥酯有较缓慢抑制虫体活动的作用,并可杀死部分成虫;较高浓度的阿苯达唑和甲苯达唑无杀虫作用,仅见口吸盘兴奋.

三苯双脒、青蒿琥酯、蒿甲醚和吡喹酮单剂、多剂或联合用药治疗大鼠华支睾吸虫感染的实验研究

目的 观察三苯双脒、青蒿琥酯、蒿甲醚、或吡喹酮单剂、多剂给药,及其伍用治疗感染华支睾吸虫大鼠的疗效.方法 147只SD大鼠各感染50个华支睾吸虫囊蚴,于感染后42～44 d分组治疗.各药物采用灌胃给药.①60只感染大鼠随机分为11组(每组4～5只),分别为三苯双脒150 mg/kg(顿服)、75 mg/(kg·d)×2 d、50 mg/(kg·d)×3 d和25 mg/kg(tid)×2 d组:吡喹酮150 mg/kg(顿服)、75 mg/(kg·d)×2 d和25 mg/kg(tid)×2 d;青蒿琥酯或蒿甲醚75 mg/kg(顿服)和37.5 mg/(kg·d)×2 d组.②另87只感染大鼠随机分为15组(每组4～6只),用青蒿琥酯或蒿甲醚(30 mg/kg)分别与吡喹酮(150 mg/kg)、三苯双脒(50 mg/kg和75 mg/kg)伍用组;三苯双脒(50 mg/kg)与吡喹酮(150 mg/kg)伍用组;三苯双脒(75 mg/kg)与吡喹酮(187.5 mg/kg)伍用组,及各药的单用组.并设同批感染未治疗对照组.受治鼠于治疗后2周剖杀,收集胆管和肝组织内的残留华支睾吸虫,计算各组的平均虫数和减虫率,用非参数统计方法(Mann-Whitney 秩和检验)对相应组间的平均虫数进行分析.结果感染华支睾吸虫的大鼠口服单剂三苯双脒或吡喹酮(150 mg/kg)的减虫率分别为57.2%和63.8%.三苯双脒各小剂量多次给药组的减虫率稍高,达77.1%～79.4%,而吡喹酮小剂量多次给药组的减虫率则为50.6%～54.2%.但两种药物各组间的平均虫数的差异无统计学意义.青蒿琥酯和蒿甲醚各单剂给药组与小剂量多次给药组的减虫率均较高,分别为90.4%～98.5%和100%.三苯双脒小剂量(50或75 mg/kg)与吡喹酮(150mg/kg或187.5 ms/kg)伍用治疗,减虫率为74.9%～100%,高于其各单药组的减虫率(26.9%～79.6%).青蒿琥酯或蒿甲醚小剂量(30 mg/kg)与吡喹酮(150 mg/kg)或三苯双脒(50或75 mg/kg)伍用治疗,减虫率为74.9%～97.9%,亦高于其各药组的减虫率(24.8%～79.6%).结论青蒿琥酯、蒿甲醚、吡喹酮和三苯双脒均为有效的抗华支睾吸虫药物,各药物小剂量伍用具有增效作用.

蒿甲醚对感染小鼠体内埃及血吸虫皮层的损害

目的 评价蒿甲醚对小鼠体内埃及血吸虫皮层的损害作用.方法 8只小鼠于感染埃及血吸虫尾蚴后81 d,用单剂蒿甲醚400 mg/kg口服治疗.治疗后1、3、7和14 d各剖杀2只小鼠,用灌注法收集血吸虫,并按常规方法固定和处置虫体,作扫描电镜观察.从另2只未作治疗的感染小鼠取虫作对照.结果 用蒿甲醚治疗后24 h,雄虫的皮层结节肿大、破溃或从皮层上剥落;在雄虫和雌虫的体表可查见有局灶性或广泛的皮层肿胀、融合、空泡变化、糜烂和剥落,以及感觉结构的破坏.治疗后3 d,雌、雄虫的皮层损害加重,严重的损害为口吸盘肿胀和破溃,并查见皮层褶嵴有广泛和严重的肿胀、糜烂和剥落,以及雌虫盘状感觉结构的破坏.治疗后7至14 d,有些虫仍示有中或重度皮层损害,而有些仍存活的虫则示其大部分皮层已有明显恢复.结论 蒿甲醚对埃及血吸虫的皮层具有广泛和严重的损害作用.

蒿甲醚对感染小鼠体内埃及血吸虫超微结构的影响

目的 观察蒿甲醚对小鼠体内埃及血吸虫成虫超微结构的损害.方法 8只小鼠于感染埃及血吸虫尾蚴后81 d用单剂蒿甲醚400 mg/kg口服治疗.治后24 h、3 d、7 d和14 d各剖杀2只小鼠,用灌注法收集血吸虫,并按常规方法固定和处置虫体,作透射电镜观察.从另2只未治疗的感染小鼠体内取虫作对照.结果 蒿甲醚对血吸虫皮层超微结构的损害主要是皮层基质的肿胀、溶解和空泡变化,基底膜消失和部份受损皮层破裂;在感觉器和皮层结节中,常见其内部结构广泛溶解.在肌层、实质组织、合体细胞和肠管上皮细胞中,查见局灶性或广泛的溶解、粗面内质网减少及线粒体空泡变化和变性.雌虫卵黄细胞的严重变化是空泡变化、粗面内质网减少、卵黄球融合以及受损卵黄细胞破溃等.上述雌、雄虫变化于感染小鼠用蒿甲醚治疗后24 h即可见到,并逐渐加重,3～7 d后重.治后14 d,部分雌、雄虫仍示有超微结构的损害,但同时亦观察到受损虫组织的恢复.结论 蒿甲醚对埃及血吸虫成虫的皮层和皮层下组织具有广泛和严重的超微结构损害.

蒿甲醚与瑞香素伍用对感染伯氏疟原虫小鼠的治疗作用

目的研究蒿甲醚与瑞香素伍用(A+D)对感染伯氏疟原虫ANKA株小鼠的疗效及其联合作用方式.方法按"四天抑制法"d0感染,d0～d3给药,每天1次,d4涂薄血膜检查,并计算d4减虫率及各药丰数有效置(ED50),用等效应图解法分析A+D的合并作用.结果蒿甲醚0.4 mg/(kg·d)×4 d的d4减虫率与对照组相比差异无显著性;[A 0.4 mg/(kg·d)+D7.7 mg/(kg·d)]×4d的抗疟效果提高,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).A+D各组的ED50均低于单用药组;不同配伍比例的R值皆大于0.4,小于2.7(0.4＜R＜2.7).结论蒿甲醚与瑞香素伍用治疗感染伯氏疟原虫小鼠能提高抗疟疗效,且两药合并呈相加作用.

蒿甲醚对曼氏血吸虫的作用:剂量与效应的关系和虫的形态学和组织病理学的变化

目的应用感染曼氏血吸虫(利比里亚株)的小鼠观察蒿甲醚单剂量与效应的关系,虫体肝移及蒿甲醚所引起的虫的形态学和组织病理学变化.方法感染21 d童虫的小鼠一次口服蒿甲醚12.5 mg/kg至600 mg/kg不同剂量,治后28 d剖检观察各组虫数.感染46 d或70 d成虫的小鼠一次口服蒿甲醚400 mg/kg后8～14 d,观察虫体肝移及其形态和组织病理学变化.结果蒿甲醚对21 d童虫的低有效剂量为200 mg/kg,减虫率为81%.用蒿甲醚治疗后8 h成虫开始肝移,3～7 d全部肝移,14 d有31%的虫返回肠系膜静脉.成虫虫体萎缩,咽部扩大,肠管膨胀及其色素减少.雌虫局部体表受损,白细胞附着,卵巢及卵黄腺变性退化,以及雄虫睾丸萎缩等.在肝内的虫体被嗜酸粒细胞为主的炎细胞包围和浸润.结论蒿甲醚对小鼠曼氏血吸虫21 d童虫的低有效剂量为200 mg/kg,可引起曼氏血吸虫成虫萎缩、退化或死亡.在肝内受损的虫体主要是被嗜酸粒细胞包围和侵袭所致.

蒿甲醚引起线粒体跨膜电位下降在神经毒性中的作用

目的用嗜铬细胞瘤细胞(PC-12细胞)、原代培养的大鼠神经元细胞和大鼠脑线粒体作为体外模型观察线粒体跨膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞膜通透性改变在蒿甲醚引起的神经毒性中的作用.方法用流式细胞仪测定蒿甲醚对线粒体跨膜电位和细胞膜通透性的影响,用分光光度法分析蒿甲醚对线粒体肿胀度的影响.结果蒿甲醚能够降低两种细胞的MMP,使其峰值左移,摄入的Rh123荧光强度降低,量效关系明显;能增加两种细胞的细胞膜通透性,使细胞内的PI摄入增加;能引起大鼠脑线粒体肿胀,有一定的时间-效应和剂量-效应关系.结论MMP下降是蒿甲醚引起神经毒性的重要环节,可通过影响线粒体膜通透性转运孔,改变线粒体跨膜电位和线粒体肿胀度,并能增加细胞膜通透性,引起细胞能量代谢障碍,终导致神经毒性.

蒿甲醚诱导日本血吸虫雌虫总抗氧化能力下降

目的观察蒿甲醚对日本血吸虫成虫总抗氧化能力的影响.方法体外将血吸虫在含蒿甲醚和氯化血红素的培养液内培养24 h后,或体内感染小鼠经蒿甲醚300 mg/kg治疗6～24 h后,测定虫体的总抗氧化能力.结果体外50μmol/L的蒿甲醚与氯化血红素伍用引起雌虫总抗氧化能力明显下降.体内蒿甲醚作用血吸虫6 h,即见雌虫的总抗氧化能力明显下降.体内、体外试验中,蒿甲醚对雄虫的总抗氧化能力均无影响.结论蒿甲醚诱导雌虫总抗氧化能力下降.

谷胱甘肽抑制蒿甲醚的抗血吸虫作用

目的观察还原型谷胱甘肽(GSH)对蒿甲醚伍用氯化血红素抗日本血吸虫作用的影响.方法将蒿甲醚、氯化血红素、GSH及谷胱甘肽耗竭剂2,4-二硝基氯苯(CDNB)单一或伍用加入含5周龄血吸虫的培养液内,温育24 h后,测定虫体的丙二醛含量,并观察培养至96 h虫体存活情况.感染小鼠经蒿甲醚300 mg/kg治疗后6、1 2或24h,测定虫体的GSH水平.结果体外,蒿甲醚伍用氯化血红素作用血吸虫24 h后,虫丙二醛含量明显升高.培养时间延长,虫陆续死亡.GSH对蒿甲醚伍用氯化血红素诱导血吸虫脂质过氧化及杀虫作用具有拮抗作用,CDNB则有增强作用.体内,蒿甲醚作用血吸虫6～24 h,虫体内GSH水平先降低再明显升高.结论GSH可能在血吸虫防御蒿甲醚衍生的毒性过氧化物和自由基攻击中起重要作用.

蒿甲醚对日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶、醛缩酶、磷酸甘油酸变位酶和烯醇化酶的影响

[目的]观察蒿甲醚(Art)对小鼠体内日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶(GPM)、醛缩酶(ALD)、磷酸甘油酸变位酶(PGM)和烯醇化酶(ENO)的影响.[方法]小鼠感染血吸虫尾蚴4～5 wk后,1次灌服Art 100mg/kg或300 mg/kg,并于24～48 h后剖杀,收集日本血吸虫雌虫和雄虫,按NADPH的生成量或NADH的耗用量测定虫体的上述4种酶活力.[结果]经Art 100 mg/kg作用24 h后,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO活力分别较对照组下降15%、19%、50%和46%,其间差别均具有显著意义,而雄虫仅PGM和ENO活力分别下降22%和32%;48 h后,雄虫的GPM和ALD活力亦分别下降21%和18%,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO及雄虫的PGM和ENO活力则进一步下降.经Art 300 mg/kg作用后24～48 h,雌虫和雄虫的上述4种酶活力均明显下降,且呈一定的时间效应关系.[结论]Art对日本血吸虫尤其是雌虫的上述4种酶有抑制作用.

蒿甲醚对日本血吸虫糖代谢酶的影响

[目的]观察蒿甲醚(Art)对日本血吸虫糖代谢酶活性的影响.[方法]小鼠感染日本血吸虫尾蚴4～5wk后,1次灌服Art 300 mg/kg,于治疗后24 h、48 h或72 h剖杀收集雌虫和雄虫,制备虫匀浆上清液,然后进行平板淀粉凝胶电泳,以对9种糖代谢酶活性作定性观察.[结果]经Art作用24～48 h后,雌虫的己糖激酶、苹果酸脱氢酶、苹果酸酶和磷酸葡萄糖异构酶活性均有所下降; 72 h后,上述4种酶以及醛缩酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、6-磷酸葡糖酸脱氢酶和6-磷酸甘露糖异构酶的活性均明显降低,甚至完全被抑制.在上述观察时间内,雄虫的醛缩酶、6-磷酸甘露糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性受一定的影响.[结论]Art对日本血吸虫雌虫的糖代谢具有广泛的影响.

三苯双脒、青蒿琥酯和蒿甲醚抗华支睾吸虫及其他吸虫的实验研究进展

吡喹酮是目前用于治疗血吸虫病和其他吸虫病的主要药物.近年的实验研究发现,治疗肠道线虫感染的新药三苯双脒具有抗华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫和卡氏棘口吸虫(Echinostoma caproni)的作用.特别是对感染华支睾吸虫的大鼠,其顿服接近治愈的剂量为300 mg/kg,低于吡喹酮的治愈剂量375～500 mg/kg.抗疟药青蒿琥酯和蒿甲醚不仅已被发展为预防血吸虫病的药物,而且发现它们对多种吸虫有效,特别是对华支睾吸虫,其顿服对大鼠华支睾吸虫感染的治愈或高效剂量为75 mg/kg.本文系综述这些药物单用或联合用药治疗大鼠、小鼠、仓鼠或犬的华支睾吸虫及其他吸虫感染的实验研究进展.

青蒿素类抗疟药的作用机制

70年代,我国学者自中草药黄花蒿中分离出抗疟药青蒿素之后,又陆续合成了蒿甲醚、青蒿琥酯和双氢青蒿素等有效衍生物.这类药物的问世,在抗疟药物研究史上树立了新的里程碑.在目前疟原虫对传统抗疟药普遍产生抗性情况下,青蒿素类抗疟药投入使用十余年,迄今尚未见抗药性出现,故其抗疟作用机制引起了学者的注意.青蒿素类药物具有独特的过氧桥结构,阐明其作用机制,对开发新一代高效低毒抗疟药具有重要意义.本文就近年来有关青蒿素类抗疟药作用机制方面的研究进展一综述.

反复发病的疟疾一例报告

患者余某,男,50岁,原籍江苏省,近10年住云南省思茅市.2000年11月3日,到缅甸佤联邦第二特别行政区办事,2天后返回思茅市.11月17日出现畏寒、发热、头痛,到思茅地区医院诊治,3d后血检确诊为间日疟.经思茅地区卫生防疫站用氯/伯八天疗法(氯喹10片,3d分服,伯氨喹24片,8d分服),再加上第1天肌肉注射蒿甲醚160mg,bid,第2～4天各80mg,总量560mg治疗.

棉子酚、吡喹酮、蒿甲醚对重组日本血吸虫乳酸脱氢酶的作用

目的 检测棉子酚、吡喹酮、蒿甲醚对重组日本血吸虫乳酸脱氢酶(rSjLDH)活性的影响.方法 在已建立的rSjLDH标准酶活性测定体系中分别加入不同浓度的棉子酚(0～0.10 mmol/L)、吡喹酮(0～0.20 mmol/L)及蒿甲醚(0～0.10 mmol/L),以相应药物溶剂作对照,分光光度法测定药物对rSjLDH活性的影响.用SPSS13.0软件统计结果,计算药物对酶活性的相对抑制率.结果 与对照组比较,0.04 mmol/L棉子酚对rSjLDH催化丙酮酸还原为乳酸及乳酸氧化为丙酮酸的相对抑制率分别为59.1%和34.4%(P＜0.01),0.10 mmol/L棉子酚分别为91.3%和89.1%(P＜0.01);0.06mmol/L吡喹酮分别为5.77%和41.4%(P＜0.05),0.20 mmol/L吡喹酮分别为83.8%和72.2%(P＜0.01).0.10 mmol/L蒿甲醚对rSjLDH则无抑制作用(P＞0.05).结论 棉子酚及吡喹酮对rSjLDH活性均有显著的抑制作用,SjLDH可能是吡喹酮的分子靶标之一.

蒿甲醚早期治疗实验小鼠弓形虫病的初步观察

弓形虫病是近年来广泛关注的一种人兽共患寄生虫病,可引起孕妇流产、胎儿畸形或死胎,也是艾滋病等免疫缺陷病患者常见的并发症和致死原因.目前治疗弓形虫病主要采用磺胺类与乙胺嘧啶的联合疗法,但该复方的不良反应大、复发率高,因此研究寻找高效低毒的新药有重要意义.文献报道,青蒿素类对弓形虫有一定的抑制作用[1-3],本文初步观察了蒿甲醚早期治疗小鼠弓形虫病的效果.

蒿甲醚伍用伯氨喹治疗恶性疟的研究

目的观察蒿甲醚伍用伯氨喹治疗恶性疟的疗效和副作用. 方法在中非共和国选择恶性疟121例,随机分为两组.伍用组:口服蒿甲醚80 mg,qd×5 d,首日蒿甲醚160 mg加服伯氨喹3片(含基质7.5ng,qd×3～4 d)治疗32例;肌注蒿甲醚加服伯氨喹,治疗29例;对照组:单用口服蒿甲醚治疗33例和肌注蒿甲醚治疗27例,B组、C组和D组所用剂量与疗程均同A组.上述病例于用药前及后6、14、21、及28 d各随访1次,密切观察病例的临床症状与体征变化. 结果 A组、B组、C组和D组病例的平均退热时间分别为(47 6±15.7)、(36.9±10.7)、(48.5±18.4)和(42.2±9.5)h.其临床治愈率依次为84.4%、100%、90 1和96.3%,其复燃率依次为6.3%、3.4%、21.2%和18.5%.4组药物副作用均轻. 结论蒿甲醚伍用伯氨喹及单用蒿甲醚(口服或肌注)对恶性疟治疗作用均良好,但联合使用药物能降低恶性疟的复燃率.

蒿甲醚-防疟Ⅱ号片联用一次法治疗恶性疟疾63例观察

为探索恶性疟疾简便速效治疗措施,我们于1982、1983年6～10月,在云南省勐腊县对]30例恶性疟疾分三组观察.