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铁皮石斛制剂免疫调节作用研究
铁皮石斛(Dendrobium officinale)为兰科石斛属多年生附生草本植物铁皮石斛的干燥茎,因表皮呈铁绿色而得名,主要分布于西南和江南各省.是《中华人民共和国药典》中被收载的5种石斛属植物之一.其具有益胃生津、滋阴清热之功效.以铁皮石斛为主(其主要有效成分为铁皮石斛多糖),以红参、麦冬、五味子为副制成水煎浓缩制剂,通过细胞免疫、体液免疫、巨噬细胞吞噬能力及NK细胞活性实验,探索其免疫调节作用机制,为铁皮石斛的进一步开发利用提供依据.
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食品毒理学和保健食品功能学评价中流式细胞术的应用
目的建立部分食品毒理学安全性评价及保健食品功能学评价指标的FCM检测方法,并应用于实际检测以评价其应用价值.
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本草九代口服液对小鼠的免疫调节作用
目的受试物对小鼠的免疫调节作用方法 160只雌性小鼠,按体重随机分为4组,每组40只.设1个对照组和3个剂量组(1 670、16 700、50 000μl/kg).依薛彬等方法检测免疫指标.结果本实验在小鼠经口给予本草九代口服液后,各实验组及对照组体重增长良好.在本草九代口服液给予剂量为1 670和16 700μl/kg时,淋巴细胞增殖能力增加,与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05);剂量为16 700μl/kg时,小鼠的吞噬率、吞噬指数及抗体积数均增加,与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05);剂量为50000μl/kg时,抗体生成细胞数和足跖增加厚度均显著高于对照组(P＜0.01).结论不同剂量的本草九代口服液对小鼠体液免疫、细胞免疫、巨噬细胞吞噬功能均有不同程度的提高作用,除PFC数和足跖厚度两项指标的高剂量组效果明显外,其他如巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞转化能力、抗体积数均以中剂量组效果为佳.而近年来对多糖的免疫调节与剂量关系的实验研究认为,多糖的免疫调节量效关系呈钟罩形,存在着作用的适剂量范围.因此,并非推荐食用量越大,功效成分浓度越高,免疫调节作用就越强.此次的研究结果也证实了如上观点.本研究说明,本草九代口服液对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫均有一定的促进作用.
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长期喂饮钇对子代大鼠免疫功能的影响
目的探讨长期摄入稀土Y3+对子代大鼠免疫功能的影响.方法40只Wistar大鼠,随机分为4组,分别喂饮钇浓度为0、0.534、53.4和5340mg/L的饮用水.6个月后,处死F1代大鼠,心脏取血,摘取胸腺、睥,称重;流式细胞仪测定T细胞亚群CD3、CD4、CD8百分率,计算CD4/CD8比值;ELISA试剂盒测定血清中IgG、IgM含量.结果饮水中稀土浓度为0.534mg/L时,IgM、IgG含量明显升高(P＜0.05),其他指标无明显变化;浓度为53.4mg/L时,各指标无明显变化;浓度为5340mg/L时,大鼠的CD3、CD8、IgM、IgG含量显著降低(P＜0.05),CD4/CD8比值显著提高(P＜0.05),CD4无明显变化;各剂量组大鼠脏器指数亦无明显变化.结论长期喂饮钇对子代大鼠的细胞免疫和体液免疫均有一定的影响.
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6种多糖对小鼠免疫细胞活性作用的比较研究
目的 探讨香菇多糖等6种多糖(LPS)对小鼠免疫细胞活性的作用,并比较其免疫调节作用的逢径和强度.方法 6种多糖体外作用于小鼠免疫细胞,MTT法测脾淋巴细胞增殖活性,ELISA法测LPS诱导的脾淋巴细胞分泌IgG水平,吞噬中性红法测腹腔巨噬细胞吞噬功能,乳酸脱氢酶测定法测脾NK细胞活性.结果 协同ConA促进脾淋巴细胞增殖作用强弱依次是香菇多糖、灵芝多糖、黄芪多糖、人参多糖、海带多糖和地衣多糖(P＜0.05);协同LPS促进脾淋巴细胞增殖作用依次是灵芝多糖、香菇多糖、地衣多糖、黄芪多糖和人参多糖(P＜0.05);促进脾淋巴细胞分泌IgG的依次是黄芪多糖、灵芝多糖、人参多糖、地衣多糖和＞香菇多糖(P＜0.05);增强腹腔巨噬细胞吞噬活性的依次是黄芪多糖、地衣多糖、香菇多糖、海带多糖、灵芝多糖和人参多糖(P＜0.05);增强脾NK细胞活性的依次是黄芪多糖、地衣多糖、海带多糖、香菇多糖和灵芝多糖(P＜0.05).结论 6种多糖作用的机制和效果各不相同.香菇多糖、灵芝多糖、地衣多糖和黄芪多耱分别在增强细胞免疫、体液免疫和非特异免疫的某一功能上效果显著,可以适宜的剂量比例组合成复合多糖.
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亚急性低剂量铅暴露对大鼠细胞免疫功能的影响
为探讨亚急性低剂量铅暴露对大鼠细胞免疫功能的影响,将幼年SD大鼠分成6组,给予含不同剂量铅的饲料8周,观察铅暴露后大鼠血铅、T细胞亚群、血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和脾脏超微结构的变化.8周后各剂量铅暴露组血铅均高于正常对照组(P<0.01),并且随着铅剂量的增加而呈阶梯状升高.各铅暴露组T细胞亚群分布异常,CD4明显减少,CD4/CD8比例下降,CD8各组间差异无显著性;血清TNF-α分泌异常,低剂量组TNF-α升高,而其余各组显著降低;电镜观察,低剂量组脾脏免疫细胞未见明显异常,而其余各组均表现为线粒体肿胀、嵴断裂、空泡化;内质网肿胀、脱颗粒等不同程度的破坏.提示亚急性低剂量铅暴露即可造成细胞免疫功能的损害、免疫器官结构的改变.
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硫酸氨基葡萄糖对正常小鼠免疫功能的影响
目的 了解硫酸氨基葡萄糖对正常小鼠免疫功能的影响.方法 将ICR雌性小鼠按体重随机分成低、中、高(150、300、900mg/kg bw)3个剂量组和对照组.连续灌胃30天后,进行脾指数、胸腺指数、细胞免疫、体液免疫、NK细胞、单核-巨噬细胞及NK细胞活性的测定.结果高剂量组小鼠的胸腺指数显著高于对照组(P<0.05);中、高剂量组小鼠迟发型超敏反应(DTH)应激能力、血清溶血素水平及抗体生成能力明显高于对照组(P<0.05);高剂量组小鼠的NK细胞的活性显著高于对照组(P<0.05);硫酸氨基葡萄糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖转化能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、碳廓清吞噬指数均无影响.结论 硫酸氨基葡萄糖从细胞免疫功能、体液免疫功能及NK细胞活性方面能增强正常小鼠的免疫功能.
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骨碎补醇提物对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的调节作用
目的 研究骨碎补乙醇提取物对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠细胞免疫功能的调节作用.方法 60只昆明种小鼠随机分为6组:空白对照组,低下模型组,阳性对照组(左旋咪唑0.05 g/kg),骨碎补醇提物低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg),每组10只.4个给药组按10 mL/kg容积灌胃给药20 d,空白对照组和低下模型组给予等体积的生理盐水.除空白对照组外,其余5组小鼠于给药的第11 ～13天腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺建立免疫抑制模型.实验结束后,检测小鼠脾淋巴细胞增殖能力,迟发型超敏反应,脾组织病理切片,外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+T细胞数,脾组织IFN-γ、IL4 mRNA的表达等指标.结果 5 g/kg和10 g/kg骨碎补醇提物可以增强小鼠刀豆蛋白A诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力、迟发型超敏反应(DTH),提高外周血CD4+T细胞数、CD4+/CD8+比值、脾组织IFN-γ mRNA的表达以及IFN-γ/IL-4比值;可以降低外周血CD8+T细胞数以及脾组织IL-4 mRNA的表达;但对脂多糖诱导的B淋巴细胞增殖反应无明显影响.结论 骨碎补醇提物对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的细胞免疫功能有调节作用.
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大蒜素对小鼠脾细胞免疫功能和细胞内Toll受体4、髓样分化因子88表达的影响
目的 探讨大蒜素对小鼠脾细胞免疫功能和细胞内Toll受体4(TLR-4)、髓样分化因子88(MyD-88)表达的影响.方法 用0.2、0.4和1.2g/kg剂量的大蒜素给小鼠灌胃30天,以脾淋巴细胞转化实验和DTH实验观察其对小鼠脾细胞免疫功能的影响和以免疫组化实验方法检测细胞内TLR-4、MYD-88表达的改变.结果0.2g/kg和1.2g/kg剂量组能提高小鼠的淋巴细胞转化能力,0.2g/kg BW剂量组能提高小鼠的足跖肿胀度,3个剂量组对小鼠的脾脏/体重比值和胸腺/体重比值无明显影响；各剂量组均能提高脾细胞内TLR-4、MyD-88的含量.结论 大蒜素能明显调节机体的细胞免疫功能,该药理作用可能与大蒜素能够上调TLR-4、MyD-88的表达水平密切相关.
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雌激素调节免疫系统的研究进展
雌激素不仅对生殖系统有不可缺少的作用,且对包括免疫系统在内的其它方面也有重要作用.研究表明雌激素可以调节体液免疫和细胞免疫;雌激素含量和功能的失调可以导致一些自身免疫性疾病.深入研究雌激素与免疫系统的调节、作用机制以及与自身免疫性疾病的关系,可以更好地了解某些雌激素相关性疾病的发病机理,并开创新的治疗方法和思路.
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西沙诺尼果汁(冻干粉)对BALB/c小鼠免疫功能的影响
目的 探讨西沙诺尼果汁(冻干粉)对BALB/c小鼠免疫功能的影响.方法 SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为4组,即对照组和受试物低、中、高剂量组(1.0、2.0、3.0 g/kg BW).连续灌胃给予受试物30 d后,测定主要免疫器官(胸腺、脾)脏器系数;并检测小鼠细胞免疫功能指标(淋巴细胞转化能力、迟发型变态反应)、体液免疫功能指标(血清溶血素凝集水平、溶血空斑生成)、非特异性免疫功能指标(吞噬细胞吞噬鸡红细胞能力、吞噬细胞碳廓清能力、NK细胞活性).结果 西沙诺尼果汁(冻干粉)低剂量组(1.0g/kgBW)胸腺系数高于对照组(P＜0.05);3个剂量组的细胞免疫功能、体液免疫功能及非特异性免疫功能各项指标均显著高于对照组(P＜0.05).结论 在本实验条件下,西沙诺尼果汁(冻干粉)对BALB/c小鼠具有很好的增强免疫功能的作用.
关键词： 西沙诺尼果汁(冻干粉) Balb/c小鼠 细胞免疫 体液免疫 非特异性免疫 -
烹调油烟冷凝物对小鼠细胞免疫及免疫监视功能的影响
昆明种雌性小鼠皮下注射经动式染毒装置制备的豆油、菜籽油以及精炼色拉油油烟冷凝物.发现当皮下注射菜籽油油烟冷凝物后,与溶剂对照组相比,低剂量(1.13g/kg)菜籽油油烟冷凝物使动物迟发型变态反应明显下降.高剂量使小鼠迟发型变态反应和自然杀伤细胞活性明显下降.皮下注射高剂量(2.26g/kg)豆油油烟冷凝物后,小鼠迟发型变态反应、自然杀伤细胞活性和钙调素水平下降,并均具有显著性意义.动物在皮下注射低剂量色拉油油烟冷凝物后,与对照相比动物迟发型变态反应和自然杀伤细胞活性明显下降.本文结果表明,皮下注射一定剂量的烹调油烟冷凝物对小鼠细胞免疫及免疫监视功能会造成一定的损伤.
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静脉注射免疫球蛋白对新生儿溶血免疫功能及临床效果的影响
目的 探讨静脉注射免疫球蛋白对新生儿溶血免疫功能及临床效果的影响.方法 将本院收治的新生儿溶血性黄疸患儿98例随机分为两组,各49例.对照组患儿采用双面蓝光间歇光疗联合苯巴比妥嗅化钠治疗,观察组在对照组基础上联合使用丙种球蛋白.比较两组患儿的临床效果.结果 治疗后72 h,观察组患儿血清IgA、IgG和IgM水平均明显高于对照组(P<0.05),观察组CD4+、CD8+水平高于对照组(P<0.05),观察组CD4+/CD8+基本正常且高于对照组(P<0.05);治疗后24、48、72 h,观察组血清胆红素水平均显著低于对照组(P<0.05);观察组光照时间、住院时间均短于对照组(P<0.05).结论 丙种球蛋白治疗新生儿溶血效果显著,能有效改善机体免疫能力,降低黄疸水平,值得临床推广.
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化疗对鼻型NK/T细胞淋巴瘤患者细胞免疫功能的影响研究
目的:分析鼻型NK/T细胞淋巴瘤患者化疗前后细胞免疫功能的变化,对比化疗对其的影响.方法 50例鼻型NK/T细胞淋巴瘤患者为观察组,检测化疗前与两个周期完成后,患者T淋巴细胞各亚群与NK细胞数并记录,对照组为50例健康人,对比分析其结果.结果 与对照组相比较,化疗前患者的T淋巴细胞亚群紊乱,比例不合理,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+以及NK细胞数明显较低,而CD8+、CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)较高,P值均小于0.05.化疗后,有效组的CD3+、CD4+、CD4 +/CD8+以及NK细胞数提升,CD8+、CD4+ CD25+ Treg下降,且P＜0.05,除CD4+和CD8+各项指标与对照组的差异无统计学意义；无效组则CD4+ 、CD4 +/CD8+以及NK细胞数变得更低,CD8+变得更高,P＜0.05.结论 患有鼻型NK/T细胞淋巴瘤者,其细胞免疫功能较差,T淋巴细胞亚群紊乱,比例失调,NK细胞数明显偏少,有效化疗能杀伤瘤细胞或诱其凋亡,以减小负担,CD4+ CD25+ Treg数目降低,以减小部分免疫抑制,从而有效提高患者细胞免疫力,否则将继续恶化.T淋巴细胞各亚群比例与NK细胞数指标能表征患者其细胞免疫功能强弱,具有重要的临床指导意义.
关键词： 鼻型NK/T细胞淋巴瘤 化疗 细胞免疫 -
儿童肾病50例免疫功能分析
目的:探讨免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM,KAPP,LAMB)及细胞免疫T细胞亚群(CD3,CD4,CD8)在原发性肾病综合征(PNS)患儿血清中的变化及在临床治疗中的意义.方法:测定了50例(男27例,女23例)PNS患儿和20例对照组儿童免疫功能并进行定量分析.结果:肾病组IgG,IgA,IgM,KAPP,LAMB与对照组比较差异有高度显著性(P＜0.01)其中KAPP,LAMB显著低于正常对照组(P ＜0.0001),肾病组CD3,CD4细胞百分率较对照组明显降低,有显著差异,CD8细胞百分率与对照组比较无显著差异.结论:测定PNS患儿血清中(IgG,IgA,IgM,KAPP,LAMB)及T细胞亚群(CD3,CD4,CD8)水平对判断PNS患儿病情变化及估计预后有一定参考价值.
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结核分枝杆菌新型抗原Rv3400的免疫原性研究
目的 用结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)特异性抗原Rv3400联合弗氏不完全佐剂(incomplete Freund's adjuvant,IFA)构建结核亚单位疫苗(Rv3400-IFA),在C57BL/6小鼠体内评估其免疫效应.体外用抗原Rv3400感染巨噬细胞RAW264.7并评估其免疫应答.方法 PCR扩增基因Rv3400,构建重组质粒pET28a(+)-Rv3400,转入大肠埃希菌BL21 (DE3) pLysS感受态细胞中,诱导表达并纯化Rv3400蛋白.用抗原Rv3400、阳性对照脂多糖(lipopolysaccharides,LPS),分别刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,阴性对照为未刺激的巨噬细胞,流式细胞术检测细胞表面分子表达,收集细胞培养上清,ELISA检测细胞因子的分泌.另一方面纯化的Rv3400蛋白与IFA充分乳化构建亚单位疫苗免疫小鼠;C57BL/6小鼠采用数字表法随机分为3组,分别为实验组Rv3400组、阳性对照组Rv3425组、阴性对照组IFA组,每组5只,每2周1次、共免疫3次.分别采用酶联免疫斑点检测技术(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)和酶联免疫吸附测定(ELISA)技术对免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫进行评估.结果 (1)成功克隆表达并纯化结核分枝杆菌特异性抗原Rv3400.(2)体外细胞实验结果显示:Rv3400抗原刺激巨噬细胞,其表面分子CD80、CD86、CD40、MHCⅡ表达量显著提高,阳性细胞比率[分别由未刺激的(34.70±2.40)％、(31.25±18.31)％、(41.80±6.01)％、(44.30±0.44)％提高至1 μg/ml Rv3400抗原刺激后的(90.45±7.71)％、(90.10±4.10)％、(89.97±7.79)％、(85.13±5.12)％];能促进细胞分泌高水平的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),分别达(49 217.0±390.61) pg/ml、(1783.4±51.18) pg/ml.(3)免疫小鼠后,ELISPOT结果显示:实验组Rv3400组小鼠分泌INF-γ的斑点形成细胞(spot forming cells,SFC)(136.20±95.09)显著高于阴性对照组(14.00±9.62)(t=2.859,P＜0.01);ELISA结果显示:Rv3400组小鼠T细胞产生TNF-α和IFN-γ的水平[(247.38±142.268)pg/ml、(325.45±75.19)pg/ml)]明显高于阴性对照组[(69.25±60.06) pg/ml、(2.22±1.28) pg/ml(t=2.579,P＜0.05;t=8.597,P＜0.01)];(4)Rv3400组小鼠脾CD4+ CD44high、CD4+ CD62Llow、CD8+ CD44high、CD8+ CD62LlowT淋巴细胞百分比[(44.20±11.95)％,(43.56±11.90)％,(48.88±7.42)％,(47.04±7.72)％]与对照组IFA组[(27.02±6.56)％,(62.60±4.73)％,(30.57±6.00)％,(58.48±6.06)％]相比,差异有统计学意义(one-way ANOVA,F=18.460,F=8.108,F=32.194;F=4.080;P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),呈显著性增加.(5)通过间接ELISA测定免疫后的小鼠血清抗体IgG效价水平高达1:409 600,表明抗原Rv3400也能诱导有效的体液免疫应答;IgG2b/IgG1水平为1.8,说明抗原Rv3400诱导小鼠以Th1型免疫反应为主.结论 亚单位疫苗Rv3400-IFA在C57BL/6小鼠体内可产生较好的细胞免疫和体液免疫效应.结核分枝杆菌特异性抗原Rv3400有望成为新的结核病疫苗设计及诊断的候选抗原.
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HIV/AIDS人群中肺结核患者的治疗效果与细胞免疫的相关性研究
目的 了解HIV/AIDS人群中肺结核(HIV(+)TB(+))患者的免疫特征及抗结核治疗的效果. 方法 横断面收集12例现症HIV(+)TB(+)患者、24例HIV/TB双重感染者(HIV(+)PPD(+))、74例单纯HIV/AIDS患者(HIV(+)PPD(-))、56例单纯肺结核病患者(HIV(-)TB(+))(初治涂阳)及36例正常对照者的外周血2ml,进行淋巴细胞亚群的比较.同时前瞻性收集12例HIV(+)TB(+)患者及56例HIV(-)TB(+)患者的血常规数据、药物不良反应的发生、痰菌阴转及肺部病变的改变进行抗结核治疗的效果分析.结果 (1)与正常人群相比,HIV感染或结核感染均可导致患者的淋巴细胞亚群不同程度的下降(P<0.05).(2)在HIV与结核双重感染人群的细胞免疫中,与HIV相关的免疫改变起主要作用:不管其是否结核发病,其淋巴细胞计数都存在同等程度的下降.(3)HIV(+)TB(+)患者的抗结核治疗效果较好:与HIV(-)TB(+)患者相比,药物不良反应、痰菌阴转及肺部病变的改变无显著性差异(P>0.05).结论 HIV(+)TB(+)患者的细胞免疫主要与HIV感染有关,而有效的抗结核药物治疗可提高HIV(+)TB(+)患者的细胞免疫功能,并可使其肺结核病得到良好的控制.
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空洞肺结核细胞因子水平测定临床研究
肺结核的发生与机体细胞免疫功能失衡有关.近年研究表明,老年肺结核及免疫功能低下患者常患空洞肺结核[1-2].因此,空洞肺结核是重症肺结核的一个主要表现[3].白介素-4(IL-4)是Th2细胞分泌的一个特征性细胞因子,它主要调节体液免疫反应并在抵御细胞外致病因数方面发挥作用.并与细胞内病原所致的进展性疾病相关联[4].
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结核病与相关免疫细胞和细胞因子
结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis M.TB)感染引起的,是目前世界上死亡率高的慢性传染病.每年约有800万人发病,200万人死亡[1].结核分枝杆菌被吞噬并寄生在巨噬细胞内,主要引起细胞介导的免疫反应.机体对结核菌免疫主要是细胞免疫.非特异性表达结核菌免疫的细胞主要是巨噬细胞,而特异性介导结核菌免疫的细胞是淋巴细胞.结核菌侵入人体后,首先被巨噬细胞吞噬.有活性的结核杆菌能在巨噬细胞内长期潜伏,甚至存活几十年.巨噬细胞作为抗原提呈细胞,处理结核菌抗原后,在细胞表面表达,激活T细胞.而CD4 T细胞和CD8 T细胞又共同激活巨噬细胞.巨噬细胞被激活后,与T细胞一起,促进结核性肉芽肿形成.肉芽肿由巨噬细胞及CD4 T、CD8 T细胞构成,中心包绕结核杆菌,抑制结核杆菌播散.
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中西医结合治疗女性生殖道尖锐湿疣临床研究
目的:探索用中西医结合方法治疗女性生殖道尖锐湿疣的疗效及机理.方法:对386例女性生殖道尖锐湿疣患者随机采用三氯醋酸局部治疗(对照组)与中西医结合治疗(中西医结合组)两种方法,用阴道镜协助判定疗效及复发率,并检测治疗前后免疫功能变化.结果:中西医结合组的总有效率优于对照组(P＜0.05);复发率明显低于对照组(P＜0.01).中药治疗后CD3、CD4明显增高.结论:中西医结合治疗女性生殖道尖锐湿疣可以提高疗效,降低复发率.其机理可能与提高患者的细胞免疫功能有关.
