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服用百草枯、溴敌隆中毒的检验研究
百草枯是一种毒性极强的除草剂，而溴敌隆则为毒性较强的杀鼠药物，在生活中比较常见也比较容易获得，尤其是我国农村地区，经常有使用这两类药物服毒或意外死亡的案例报道。本文介绍了生物检材中百草枯和溴敌隆的液相萃取，即利用液相色谱串联质谱，同时配备不同的色谱柱，对百草枯和溴敌隆进行定性分析的方法。
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法医毒物学开放性实验教学模式探讨
开放性实验教学是一种全新的实验教学模式,阐述了法医毒物学开放性实验的经验和不足之处,探讨医学教育开放实验内容、实验过程、实验时间段及成绩评定方式等开放性实验教学模式,为医学生开放性实验教学提供参考思路.
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l-四氢巴马汀对氯胺酮依赖大鼠海马GFAP及伏隔核ERK磷酸化蛋白表达的影响
目的 观察l-四氢巴马汀(l-THP)对氯胺酮依赖大鼠条件位置偏爱(CPP)、海马CA1区神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及伏隔核ERK磷酸化蛋白表达的影响.方法 随机将40只大鼠分为空白对照组、氯胺酮模型组(10 mg/kg)、l-THP低剂量(10 mg/kg)干预组、l-THP高剂量干预(20 mg/kg)组,每天大鼠给药及训练,建立条件位置偏爱模型.采用免疫组化法检测海马CA1区GFAP蛋白,Western blot法检测大鼠伏隔核ERK磷酸化蛋白.结果 与空白对照组比较,氯胺酮模型组大鼠在伴药箱时间明显增加(P＜0.05),成功建立氯胺酮依赖大鼠条件位置偏爱模型.与模型组比较,l-THP高剂量干预组可明显减少大鼠在伴药箱中的时间(P＜0.05).免疫组化结果显示,与空白对照组比较,氯胺酮模型组GFAP阳性细胞数量明显增多(P＜0.05);与模型组比较,l-THP低剂量、高剂量干预组GFAP阳性细胞数量明显减少(P＜0.05).Western blot结果显示,与空白对照组比较,模型组ERK磷酸化蛋白表达明显增加(P＜0.05);与模型组比较,l-THP低剂量、高剂量干预组ERK磷酸化蛋白明显降低(P＜0.05).结论 l-THP拮抗氯胺酮依赖与伏隔核p-ERK蛋白表达有关,并且l-THP对氯胺酮依赖大鼠神经元损伤具有保护作用.l-THP对氯胺酮成瘾具有调制作用.
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乙醇对氯胺酮在家兔体内毒物代谢动力学的影响研究
目的 研究乙醇对氯胺酮在家兔体内毒物代谢动力学行为的影响.方法 实验家兔分为单用氯胺酮组、氯胺酮与乙醇合用组及对照组,三组动物分别灌胃氯胺酮0.15 g/kg、乙醇3.0r/kg与氯胺酮0.15 g/kg及等体积生理盐水.分别于给药前和给药后不同时间点收集血、尿标本,GC和GC/MS法测定氯胺酮和代谢物去甲氯胺酮浓度,WinNorLin软件拟合房室模型并计算氯胺酮和去甲氯胺酮毒物代谢动力学参数.结果 氯胺酮在家兔体内的毒物代谢动力学过程呈一级动力学特征,符合二室开放模型,合用乙醇后不改变其房室类型.合用乙醇组家兔体内氯胺酮的K_(10)、AUC和β均大于单用氯胺酮组,而T_(1/2K_(10))、T_(1/2β)、A和C_(max)均小于单用氯胺酮组,两组之间存在显著性差异(P＜0.05);V/F、K01、K_(12)、T21、T_(1/2K01)、α、T_(1/2α)、Tmax和B等参数两组之间无显著性差异(P＞0.05).合用乙醇组家兔体内氯胺酮的代谢物去甲氯胺酮的K0、A、B和C_(max)等参数均大于单用氯胺酮组,而T_(1/2K01)、Tmax均小于单用氯胺酮组,两组之间存在显著性差异(P＜0.05);V/F、K_(10)、K_(12)、K_(21)、AUC、T_(1/2K_(10))、T_(1/2β)、T_(1/2α)、T_(1/2β)、β等参数两组之间无显著性差异(P＞0.05).结论 乙醇可加快氯胺酮在体内的消除过程,促进其转化为去甲氯胺酮,对于氯胺酬与乙醇合并滥用的鉴定,应考虑两者的相互作用.
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家兔唾液与血液中氯胺酮浓度的相关性
目的 研究家兔唾液中氯胺酮及代谢物去甲氯胺酮浓度与血药浓度的相关性.方法 实验家兔分为氯胺酮灌胃组(6只)、静脉注射组(6只)和对照组(6只),分别于染毒前、后不同时间点收集唾液和血液.采用气相色谱/质谱联用(OC/MS)伞扫描定性、气相色谱(GC)定分析样品中氯胺酮及去甲氯胺酮的浓度.采用双变量Pearson 相关分析研究唾液中药物浓度和血药浓度的相关性.结果 氯胺酮灌胃组和静脉注射组给药后各时间点氯胺酮及去甲氯胺酮在唾液和血液中的浓度相关系数(r)范围为0.80～0.95.结论 氯胺酮及去甲氯胺酮在唾液和血液中的浓度均有良好的相关性,根据唾液药物浓度推断血药浓度可用于氯胺酮滥用的法医学鉴定.
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气相色谱-串联质谱法分析尿和血中除草剂百草枯
目的 建立尿和血中百草枯的离子交换固相萃取-气相色谱-串联质谱分析方法.方法 尿样加内标乙基百草枯,用732阳离子交换树脂提取;血样加内标乙基百草枯,用三氯乙酸凝聚蛋白质后取上清液用732阳离子交换树脂提取.提取物用硼氧化钠在水溶液中碱性条件下还原,还原物用有机溶剂提取进行气相色谱-串联质谱法分析.结果 尿和血中百草枯的提取率分别为76%和74%,检测限分别为2ng/mL和10ng/mL,尿添加百草枯100ng/mL和血添加百草枯500ng/mL水平的回收率分别为99.6±5.6%和99.3±7.6%(Mean±CV).结论 本文建立的分析方法灵敏度高,能够满足中毒致死案件检验及临床毒物检验的需要.
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气相色谱质谱联用法检测大鼠尿液中2C-B及其代谢物
目的 研究4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺(2C-B)在大鼠体内的代谢物以及代谢途径.方法 取 Wistar大鼠3只,以2C-B灌胃,收集24h内尿液,用β葡萄糖醛酸酶水解,Oasis HLB柱固相提取,DB-35MS柱分析,气相色谱质谱联用检测.结果 从大鼠尿液中检出6种2C-B的代谢产物,分别为:4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯乙醇、4-溴-2,5-二甲氧基苯乙醇、4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯乙酸、4-溴-2,5-二甲氧基苯乙酸、1-乙酰氨基-2-(4-溴-5-羟基-2-甲氧基苯)乙烷和1-乙酰氨基-2-(4-溴-2-羟基-5-甲氧基苯)乙烷.未检出2C-B原药.结论 2C-B在大鼠尿液中主要以代谢物形式存在,其在大鼠体内至少存在两种代谢途径:第一种是2C-B的2位和5位氧上去甲基后氨基被乙酰化;第二种是2C-B去氨基生成醛,接着被还原或氧化生成醇和羧酸.
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GC/MS和GC法定性定量分析可卡因
目的 建立用于可卡因案件检验鉴定的GC和GC/MS定性、定量分析方法.方法 通过选择和优化,建立GC、GC/MS法检验可卡因的佳分析条件;用分别含0.6mg/ml地西泮为内标的0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20mg/ml可卡因标准品乙醇液,考察线性范围和方法检测限.结果 分析方法线性方程:GC/FID, Y=1.055X-0.0021,R2=0.9999,GC/NPD, Y=0.556X-0.0016,R 2=0.9996;可卡因检测限:GC/FID法10ng, GC/NPD法2ng;分别以所建GC/FID、GC/NPD分析方法和内标法对案件中缴获的可卡因毒品进行定量分析,结果为72%±2.3%,且两方法定量重现性良好.结论 本文所建方法可以用于可卡因涉毒案件的检验鉴定.
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薄层色谱法检测丁丙诺啡
目的 建立丁丙诺啡薄层色谱分析方法.方法 血浆先用乙醇除蛋白,尿、水剂样品则直接加pH10.8Na2CO3/NaHCO3缓冲溶液后用氯仿提取,提取液经净化浓缩后进行薄层色谱分析.结果 选定碘化铋钾作显色剂,丁丙诺啡薄层色谱分析展开效果较好,检测灵敏度为0.5μg,血浆、尿液和水剂中检出限分别为0.7、0.7和0.6μg/ml.结论 该方法适用于涉毒案件中丁丙诺啡的日常检验.
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水和生物体液中3种镇痛麻醉药中空纤维膜液相微萃取
目的 研究采用中空纤维膜液相微萃取(hollow fiber liquid phase microextraction,HF-LPME)法提取水和生物体液中的哌替啶,氯胺酮,曲马多.方法 样品调节至pH 11.5和盐饱和,磁力搅拌器转速为600转/min,内标为盐酸萘福泮,取4μl甲苯,注入到聚偏氟乙烯中空纤维膜中,萃取20min,抽回1μl甲苯进入GC中进行分析.结果 血浆、尿、水相关系数R2:哌替啶分别为0.9935、0.9981、0.9997,氯胺酮分别为0.9906、0.9913、0.9927,曲马多分别为0.9741、0.9913、0.9970;检测限:水、尿中哌替啶、氯胺酮、曲马多均为0.01μg/ml,血浆中哌替啶、氯胺酮、曲马多均为0.05μg/ml;血浆、尿、水日内RSD:哌替啶分别为13.0%、7.3%、4.6%,氯胺酮分别为15.1%、13.6%、1.4%,曲马多分别为3.7%、4.3%、9.0%;血浆、尿、水日间RSD:哌替啶分别为15.1%、13.5%、12.2%,氯胺酮分别为12.3%、5.3%、6.0%,曲马多分别为7.1%、15.5%、11.9%;血浆、尿、水相对回收率:哌替啶分别为109.80%、93.49%、97.57%,氯胺酮分别为91.09%、101.80%、100.40%,曲马多分别为106.40%、92.94%、113.32%.结论 中空纤维膜液相微萃取用于水和生物体液中的哌替啶,氯胺酮,曲马多的分析,所需有机溶剂少,避免残留和交叉污染,集萃取,富集,进样于一步完成,简单,高效,实用.
关键词： 法医毒物学 中空纤维膜液相微萃取 哌替啶 曲马多 氯胺酮 -
生物检材中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的LC-MS/MS分析
目的建立生物检材中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法.方法生物检材包括血液、尿液和毛发,采用稀释法和液液提取的前处理方法,应用两个不同的液相柱,优化LC-MS/MS分析方法,并考察了血液和尿液基质的离子抑制作用.结果同时分析苯丙胺和MDA,液相1在3min内完成,液相2可用于确认分析或复杂基质分离.尿液稀释法检材用量少,前处理简便快速.毛发中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的低检测限(LOD)为0.005～0.05ng/mg.对送检案例检材产妇头发和胎毛进行苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的分析.结论本方法可用于生物检材中苯丙胺类兴奋剂和氯胺酮的同时分析,血、尿等生物检材的离子抑制作用是影响本方法灵敏度的主要原因.
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液相色谱质谱联用测定乌头碱在大鼠体内代谢产物
目的鉴定乌头碱在大鼠体内的主要代谢产物.方法灌胃给予雄性大鼠1.0mg/kg乌头碱后,收集24h尿液,固相萃取法提取,液相色谱-质谱法测定乌头碱及其代谢物.结果经与空白组对照发现给药后大鼠尿样中除乌头碱原体外还有4种代谢产物,并分别测得其准分子离子峰及其各级碎片离子.结论经与对照品比较及质谱断裂规律推断4个代谢产物分别为中乌头碱、16-O-去甲基乌头碱、16-O-去甲基中乌头碱、苯甲酰乌头碱.
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利多卡因蛛网膜下腔麻醉致死的动物模型
目的建立利多卡因麻醉致死的动物模型.方法犬蛛网膜下腔注射利多卡因(37.01mg/kg体重),观察麻醉致死过程的生命体征变化及死后各器官的病理改变特点.结果实验组犬心电、血压和呼吸消失的平均时间分别为23.8min(7～42min)、16.4min(7～35min)和18.6min(10～47min).各器官病理改变均呈急死征象.结论所建模型实验动物的表现和生命体征变化符合蛛网膜下腔麻醉致死的生前表现,可应用于利多卡因麻醉意外致死案件法医学鉴定的实验研究.
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度冷丁慢性依赖和自然戒断大鼠脑神经细胞Bax蛋白的变化
目的探讨度冷丁药物依赖形成机制和法医学鉴定的诊断依据.方法采用免疫组织化学SP染色法及图像分析技术,观察度冷丁慢性依赖和自然戒断大鼠大脑皮质(CC)、中脑导水管周围灰质(PAG)和中脑腹侧被盖区(VTA)神经细胞Bax的变化.结果度冷丁慢性依赖时,大鼠表现为跳跃、竖尾等兴奋症状,自然戒断时出现高度激惹、异常姿势、叩齿、咬牙、腹泻等戒断症状和体征.对照组、慢性依赖组和自然戒断组在CC神经细胞Bax的染色灰度分别为146.0±5.92、118.6±6.77和106.0±7.49;在PAG分别为183.2±7.26、112.0±5.52和119.0±5.43;在VTA分别为171.2±9.65、113.6±4.34和93.2±6.06;Bax的表达在慢性依赖和自然戒断组比对照组明显(p＜0.05);自然戒断组比慢性依赖组明显(p＜0.05).Bax阳性神经细胞数的变化趋势与Bax染色灰度结果相同.结论度冷丁药物滥用引起的神经细胞Bax明显增加可能与药物依赖的形成机制有关.Bax免疫组织化学变化可作为度冷丁吸毒法医学鉴定的形态学诊断辅助依据.
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高效液相色谱法测定肝组织中4种蟾蜍二烯内酯类化合物
目的建立高效液相色谱法检测肝组织中蟾蜍二烯内酯的定量方法.方法以Oasis HLB固相萃取柱对样品进行提取,应用HPLC色谱法分离、二极管阵列检测器测定.结果该方法的回收率高于70%,线形范围在12ng/g～1200ng/g,经该方法测得华蟾毒它灵、蟾毒灵的小检出量为0.4ng,华蟾毒精、脂蟾毒配基的小检出量为0.5ng(S/N≥3).结论该方法快速、灵敏、准确,可用于蟾酥中毒的法医学检验.
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大麻的DNA分析检验技术
本文简要回顾了大麻的一些常规检验方法,并重点综述了大麻植物的DNA分析检验技术,包括随机扩增多态性DNA(RAPD)、测序扩增区段(SCAR)、短串联重复序列(STR)、扩增片段长度多态性(AFLP)、单核苷酸多态性(SNP)等DNA分子标记检测法.并且对这几种技术的应用范围及前景做了简要分析,以期为实践工作提供基础理论帮助.
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易制毒化学品快速检测方法
<中华人民共和国刑法>第三百五十七条规定的毒品,是指鸦片、海洛因、甲基苯丙胺(冰毒)、吗啡、大麻、可卡因以及国家规定管制的其他能够使人形成瘾癖的麻醉药品和精神药品.近年来,易制毒化学品进入非法渠道和走私出境的犯罪案件呈逐年上升的态势,应引起足够重视[1].为此,本文作者根据易制毒化学品的物理及化学性质,利用显色反应,对1988年<联合国禁止非法贩运麻醉药品和精神药物公约>(即<八八公约>)严格管制的22种以及针对"金三角"地区制造毒品使用量较大的氯化铵、氯化亚砜、氯化钯、硫酸钡、醋酸钠及三氯甲烷等化学品[2]进行快速定性预检测,该方法操作简便易行,旨在为进一步的定性检测工作奠定基础.
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血尿肝中巴比妥类药物硅藻土提取紫外差示导数光谱测定
目的建立一种操作简单、快速、去除杂质能力强、提取率高的硅藻土提取血、尿、肝中巴比妥类药物的方法.方法尿液不经稀释、血液经稀释过硅藻土柱,乙醚洗脱;肝匀浆用6%高氯酸沉淀蛋白,上清液过硅藻土柱,二氯甲烷洗脱药物.洗脱液挥干用0.45mol/L氢氧化钠溶液溶解,将溶液等分为两份,分别用等量的0.45mol/L氢氧化钠溶液和0.6mol/L硼酸-氯化钾溶液稀释,得到pH10和pH14水溶液,以pH10溶液为参比,测定pH14溶液的紫外二阶导数光谱进行药物检测.结果该法提取率血98.6%～100.3%,尿99.7%～103.2%,肝78.4%～102%,检出限均低于1.0μg/g(ml),变异系数小于2.9%,线性范围0.5～5.0μg/ml.结论硅藻土提取血、尿、肝中巴比妥类药物、紫外差示导数光谱法进行测定,适合作为法医毒物常规检验方法.
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兽用麻醉药鹿眠宁在腐败尸体内检出1例
2002年,我们受理了一起利用兽用麻醉药鹿眠宁进行绑架并撕票案件的检验鉴定,经过实验研究,在所送检材中均检出鹿眠宁成分.
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人服三唑仑后72小时内尿中排泄规律
三唑仑(Triazolam)为苯二氮卓类安定药,该药具有抗惊厥、抗癫痫、抗焦虑、镇静催眠作用.加大用量可导致昏迷,目前尚未见致死量的报道.人口服三唑仑后尿液含量的检验已有一些报道[1～5],但选择的服药量均在治疗量范围内(1～2片),药量偏低.
