首页 > 文献资料
-
葡萄糖调节蛋白78和94蛋白在直肠腺癌中的表达及其意义
目的 探讨葡萄糖调节蛋白(GRP) 78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中的表达及其临床意义.方法 收集直肠腺癌手术标本45例,常规石蜡包埋后切片,应用EnVisionTM免疫组织化学法检测GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织及相应癌旁组织中的表达水平.结果 ①在45例直肠腺癌的癌组织中GRP78和GRP94蛋白表达阳性率明显高于其在对应的癌旁组织中的表达(GRP78:x2=16.200,P＜0.001; GRP94:x2=14.221,P＜0.001).②GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中的阳性表达均与病理分化类型、Dukes分期和淋巴结转移有关(P＜0.05),尚未发现GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中的阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤大小等临床特征有关(P＞0.05).③在24例GRP78蛋白表达阳性病例中,GRP94蛋白表达阳性者为18例,21例GRP78蛋白表达阴性病例中,GRP94蛋白表达阳性者为6例,两者在直肠腺癌中的表达呈正相关(rs=0.464,P＜0.01).结论 GRP78和GRP94蛋白在直肠腺癌的癌组织中呈高表达,并与其转移和侵袭有关,可作为判断直肠腺癌恶性程度的有用指标.
-
葡萄糖调节蛋白78在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78( GRP78)在子痫前期孕妇胎盘组织中表达及其与子痫前期发病机制的关系.方法:选择2009年1 ～12月在青岛市市立医院及青岛市第八人民医院住院的子痫前期孕妇120例,其中早发型轻度子痫前期孕妇30例(早发轻度组),晚发型轻度子痫前期孕妇30例(晚发轻度组),早发型重度子痫前期孕妇30例(早发重度组),晚发型重度子痫前期孕妇30例(晚发重度组)；另选同期健康孕妇30例为健康孕妇组.采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胎盘组织中GRP78mRNA相对表达量；采用免疫组织化学方法、West-ern-Blotting检测胎盘组织GRP78蛋白的表达.结果:①子痫前期各组胎盘组织中GRP78 mRNA表达水平均高于健康孕妇组,差异有统计学意义(P＜0.05)；但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义(P＞0.05).②子痫前期各组和健康孕妇组胎盘组织中都有GRP78蛋白表达,主要表达于细胞质,呈棕黄色染色.Western-Blotting检测结果显示,子痫前期各组胎盘组织中GRP78蛋白表达水平均高于健康孕妇组,差异有统计学意义(P＜0.05)；但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:GRP78在子痫前期胎盘组织中表达升高,GRP78的表达水平变化可能与子痫前期发病有关.
-
肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠内质网应激的影响
目的:探讨肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠内质网应激的影响.方法:30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n=10);糖尿病肾病组(n=10);肾炎康复片组(n=10).16周后检测大鼠24 h尿蛋白及血肝肾功水平.光镜观察大鼠肾组织病理改变.免疫组化方法检测大鼠肾脏葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、p-JNK的表达.TUNEL检测肾组织凋亡细胞.RT-PCR检测肾组织GRP78 mRNA、CHOP mRNA的表达.结果:18周时,糖尿病肾病组、肾炎康复片组24 h尿蛋白水平、血清尿素及肌酐水平均显著高于正常对照组(P<0.05),血白蛋白水平低于正常对照组.肾炎康复片组血清尿素及肌酐水平较糖尿病肾病组明显降低.糖尿病肾病组、肾炎康复片组GRP78、JNK、生长阻滞和DNA诱导基因153(growth arrest and DNA damage-inducible gene 153,CHOP)表达显著高于正常对照组(P<0.05),肾炎康复片组较糖尿病肾病组表达明显降低(P<0.05).结论:内质网应激参与了糖尿病肾病的发生,肾炎康复片可以通过抑制肾脏的内质网应激反应而起肾脏保护作用.
-
稳定沉默GRP78基因的胰腺腺泡细胞株AR42J的建立
目的 设计并构建编码大鼠葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的短发夹样RNA (shRNA)慢病毒载体,用以建立稳定沉默GRP78基因的大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J.方法 设计并合成3条编码大鼠GRP78 mRNA的shRNA质粒表达载体,用三质粒包装系统包装成慢病毒,并以相应慢病毒转导大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J.经流式细胞分选术(FCAS)筛选出绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞,采用real-time PCR及Western blot方法检测GRP78基因的mRNA和蛋白表达.结果 测序证实,成功构建了编码GRP78的shRNA慢病毒载体LVshGRP78-1、LVshGRP78-2和LVshGRP78-3.慢病毒转导AR42J细胞后,经荧光显微镜和FCAS证实转导效率＞85％.经real-time PCR验证,与未处理组相比,LVshGRP78-1、LVshGRP78-2和LVshGRP78-3处理组对GRP78 mRNA表达的沉默效率分别为69.4％±1.42％、74.7％±1.69％和86.6％±1.73％ (P＜0.05),含无义序列的阴性质粒LV-Non Target对照组与未处理组相比,GRP78 mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot结果显示各组GRP78蛋白表达与mRNA表达趋势一致.结论 成功构建了编码GRP78的shRNA慢病毒载体,建立了稳定沉默GRP78基因的胰腺腺泡细胞株AR42J,为探讨GRP78基因在急性胰腺炎发病机制中的作用提供了新的细胞模型.
-
内质网伴侣分子GRP78在胆管癌细胞中的作用研究
目的:研究葡萄糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78,GRP78)在胆管癌细胞中的表达及其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响.方法:体外培养胆管癌细胞QBC939、RBE和HCCC-9810,应用Western blot检测GRP78的表达,用CCK-8比色法和Transwell小室迁移实验检测GRP78对胆管癌细胞增殖和迁移的影响.结果:胆管癌细胞中GRP78呈高表达,且GRP78的高表达不依赖于内质网应激.干扰GRP78表达显著抑制胆管癌细胞的增殖和迁移(P＜0.05).结论:GRP78对胆管癌细胞的增殖和迁移起重要促进作用,GRP78在胆管癌治疗中具有潜在的靶点价值.
-
内质网应激蛋白GRP78在宫颈癌组织中的表达及意义
目的:观察内质网应激蛋白GRP78在宫颈癌组织中的表达情况,探讨宫颈癌组织中HPV感染状态与GRP78表达的关系.方法:收集手术切除的宫颈癌组织标本89例,分析高危型HPV感染和低危型HPV感染与患者年龄、病理分化、临床分期及淋巴转移的关系,用免疫组化法检测GRP78在不同HPV亚型感染的宫颈癌组织中的表达情况.结果:在宫颈癌组织中,HPV(+)感染率在低分化鳞癌中高于高分化鳞癌(P＜0.05),宫颈癌Ⅱ期中高于宫颈癌Ⅰ期(P＜0.05),有淋巴结转移的患者中高于无淋巴结转移的患者(P ＜0.05);GRP78蛋白在高危型HPV感染的宫颈癌组织中阳性表达率显著高于低危型HPV感染及HPV阴性的宫颈癌组织(P＜0.01),而GRP78在低危型HPV感染及HPV阴性的宫颈癌组织中表达无明显差异(P＞0.05).结论:HPV(+)感染率随宫颈癌恶性程度增高而增加,高危型HPV感染的宫颈癌组织中GRP78蛋白呈高表达.
-
葡萄糖调节蛋白78和蛋白质二硫键异构酶在肝癌细胞内质网应激前后的表达
目的:探讨正常肝细胞和肝癌细胞在诱导发生内质网应激(ERS)前后细胞裂解液中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白质二硫键(PDI)、的表达水平.方法:取培养获得的第3代正常肝细胞LO-2和肝癌HepG2与SMMC-7721细胞,采用150 mmol/L无水乙醇处理48 h诱导发生ERS;分别提取3种细胞裂解液中蛋白质,采用Western blot方法检测GRP78和PDI表达水平.结果:在ERS前,GRP78在HepG2细胞中表达高,其次为SMMC-7721细胞,在LO2细胞中表达低,3种细胞GRP78表达水平比较,差异有统计学意义(P＜0.001);诱导细胞发生ERS后,HepG2细胞及LO2细胞GRP78表达均上调,而SMMC-7721细胞GRP78表达下调,分别与相应细胞发生ERS前比较,差异有统计学意义(P＜0.05);在ERS前,PDI的表达在SMMC-7721细胞中高,其次LO2细胞,在HepG2细胞中表达低,3种细胞比较,差异有统计学意义(P＜0.001);诱导发生ERS后,与ERS前相对应细胞比较,3种细胞的PDI表达水平均下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:ERS后,肝癌SMMC-7721和HepG2细胞裂解液中的GRP78表达水平发生变化,PDI表达降低.
-
GRP78、GRP94及CHOP在亚砷酸钠致肝损伤过程中的表达变化
目的 观察亚砷酸钠致肝损伤过程中肝脏内GRP78、GRP94及CHOP的表达变化并探讨其在亚砷酸钠致肝损伤中的可能作用.方法 Wistar大鼠20只,随机分为正常组及亚砷酸钠组,每组各10只.亚砷酸钠组大鼠自由饮用含200 mg/L的NaAsO2自来水制备砷中毒致肝损伤模型,正常组大鼠则自由饮用自来水,时间为8周.采用免疫组织化学技术检测肝组织中GRP78、GRP94及CHOP蛋白的表达变化;采用PCR技术检测肝脏中GRP78、GRP94及CHOP mRNA的变化;同时应用TUNEL法检测肝细胞凋亡.结果 免疫组织化学技术检测发现亚砷酸钠组大鼠肝脏中GRP78、GRP94及CHOP在蛋白水平的表达较正常组大鼠显著增加(P＜0.05);PCR检测结果显示亚砷酸钠组大鼠肝脏中GRP78、GRP94及CHOP mRNA的表达也较正常组显著增加(P＜0.05);此外与正常组比较,亚砷酸钠组大鼠肝脏中肝细胞凋亡明显增多(P＜0.05).结论 GRP78、GRP94及CHOP在基因及蛋白水平表达上调可能参与了亚砷酸钠致肝损伤的发生发展过程.
-
沉默葡萄糖调节蛋白78基因增强高氧诱导的肺泡上皮细胞凋亡
目的 探讨小干扰RNA(siRNA)干扰内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因表达对高氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的影响及作用机制.方法 培养人肺腺癌A549细胞,用构建的siRNA片段通过脂质体LipofectamineTM 2000转染A549细胞,将细胞分为高氧空白组、阴性对照(阴性siRNA)组和实验(GRP78-siRNA)组3组,利用950 mL/L O2建立高氧细胞损伤模型.48 h后通过实时定量PCR检测C/EBP同源蛋白(CHOP) mRNA的表达,Western blot技术检测CHOP蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 应用siRNA抑制GRP78表达后,GRP78 mRNA和蛋白表达下调、CHOP mRNA和蛋白表达上调、A549细胞凋亡增加.结论 下调GRP78基因可增强高氧活化的CHOP凋亡途径,诱导肺泡上皮细胞凋亡.
-
膀胱出口梗阻后大鼠逼尿肌细胞内质网形态及GRP78表达的研究
目的 观察膀胱出口部分梗阻后膀胱重构中,逼尿肌平滑肌细胞内质网形态及内质网应激标志性蛋白——葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达情况,探讨内质网应激在膀胱重构机制中可能的作用.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组10只,梗阻2周组15只,梗阻4周组15只,采用经会阴途径球部尿道部分结扎的方法建立膀胱出口部分梗阻模型.采用透射电子显微镜观察逼尿肌平滑肌细胞的超微结构,通过免疫组化和Real-time PCR分别检测逼尿肌中GRP78蛋白及mRNA表达变化.结果 假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组大鼠膀胱逼尿肌细胞GRP78蛋白阳性表达率分别为(3.37±0.38)％、(51.22±0.27)％、(27.02±1.85)％,梗阻2周组大鼠膀胱逼尿肌中GRP78阳性表达明显增多,与假手术组相比有明显差异(P＜0.01),梗阻4周组大鼠逼尿肌中GRP78阳性表达增多,与假手术组相比有明显差异(P＜0.01),但比梗阻2周组表达量减少(P＜0.01).各组GRP78 mRNA表达量分别为(22.21±1.58)、(30.62±2.49)、(24.52±2.24),梗阻2周组大鼠膀胱逼尿肌细胞GRP78 mRNA表达较假手术组明显增加(P＜0.01);与梗阻2周组相比,梗阻4周组大鼠膀胱逼尿肌细胞GRP78 mRNA表达量下降,有显著性统计学意义(P＜0.01),梗阻4周组与假手术组相比无统计学意义.结论 在梗阻后膀胱重构过程中,逼尿肌平滑肌细胞内质网形态有明显损伤性变化,GRP78蛋白及mRNA表达水平明显增加,提示内质网应激参与膀胱重构的进展.
-
内质网分子伴侣GRP94、GRP78和XBP1在病理性瘢痕中的表达初探
目的:检测内质网应激反应的关键分子葡萄糖调节蛋白94(GRP94)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和X-盒结合蛋白1(XBP1)mRNA在病理性瘢痕的表达,探讨其基因表达及内质网应激反应与病理性瘢痕形成及转归的关系.方法:用RT-PCR法检测GRP94、GRP78和XBP1 mRNA在:①瘢痕疙瘩(13例)、增生性瘢痕(17例)和正常皮肤(15例)组织以及体外培养的瘢痕疙瘩(5例)、增生性瘢痕(5例)和正常皮肤(6例)成纤维细胞中的表达;②体外培养瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞(各5例)中经0.1mg/ml氢化可的松作用前后的表达.结果:①GRP94、GRP78和XBP1 mRNA在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤组织及其成纤维细胞中的表达均无显著性差异(P>0.05);②0.1mg/ml氢化可的松作用后,GRP94 mRNA在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕来源的成纤维细胞中的表达量均显著下降,具有统计学意义(P<0.01);而GRP78和XBP1mRNA在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕来源的成纤维细胞中的表达量改变均无显著性差异(P>0.05).结论:内质网分子伴侣GRP94、GRP78和XBP1在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕组织及其成纤维细胞中基因转录与正常皮肤组织及其成纤维细胞中基因转录水平一致;GRP94 mRNA的表达量显著下降可能是糖皮质激素治疗病理性瘢痕的机制之一.
-
内质网应激在高脂血症引起肾脏损害中的作用
目的 探讨内质网应激在高脂血症引起的肾脏损害中的作用.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC,n=20)和高脂喂养组(HF,n=20),分别给予普通饲料和高脂饲料喂养.分别于4、8、12、18周时各组随机选取5只大鼠,观察血脂、24h尿蛋白、肾组织病理改变;TUNEL方法检测肾组织细胞凋亡情况;免疫组织化学方法检测肾组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达;RT-PCR方法检测肾组织GRP78 mRNA和CHOP mRNA的表达.结果 与NC组相比,HF组血脂水平、GRP78 mRNA及蛋白的表达在4、8、12、18周时明显增加(P<0.05);而24h尿蛋白、肾组织细胞凋亡指数及CHOP mRNA的表达在8、12、18周时明显增加(P<0.05).结论 内质网应激通过CHOP途径参与了高脂血症引起的肾脏损伤.
-
姜黄素对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺泡上皮细胞内质网应激的影响
目的 探索姜黄素对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠肺泡上皮细胞内质网应激的调节作用.方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、COPD模型组、姜黄素干预组和溶剂对照组,采用香烟烟熏联合气管内注射脂多糖的方法建立COPD大鼠模型,并按照分组情况对大鼠进行干预.干预结束后计数支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量,HE染色观察肺组织病理学改变,透射电子显微镜观察肺泡上皮细胞内质网形态,免疫组织化学法检测葡萄糖调节蛋白78 (glucose regu-lated protein 78,GRP78)在肺泡上皮细胞中的表达水平.结果 与正常对照组比较,COPD模型组大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量均显著升高(P＜0.05);姜黄素干预组大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量较COPD模型组降低(P＜0.05).光镜和透射电子显微镜观察显示COPD模型组大鼠肺泡腔扩张、肺泡上皮细胞内质网肿胀,姜黄素干预可减轻肺泡上皮细胞及内质网损伤.与正常对照组相比,GRP78在COPD大鼠肺泡上皮细胞中表达水平显著升高(P＜0.05);姜黄素干预可显著下调GRP78在COPD大鼠肺泡上皮细胞中表达水平(P＜0.05).结论 姜黄素可能通过抑制肺泡上皮细胞内质网应激而发挥对COPD的保护作用.
-
烫伤大鼠结肠动力基本功能单位细胞损害和内质网应激研究
目的 了解严重烫伤大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间从cajal间质细胞(ICC)-平滑肌细胞超微结构改变以及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)表达情况,探讨其在烫伤大鼠结肠动力损伤中的可能机制.方法 采用简单随机法将50只SD大鼠分为烫伤组(40只):大鼠造成30%TBSA Ⅲ度烫伤,伤后腹腔注射乳酸林格液(50 mg/kg)复苏.于伤后3、6、12、24 h处死大鼠,在距盲肠约5 cm处剪取近端结肠4 cm肠管,取中间各1 cm分别用体积分数3%戊二醛及体积分数10%甲醛固定.对照组(10只)除不烫伤外,其余处理同烫伤组.取戊二醛固定的标本,透射电镜下观察大鼠肠道细胞变化情况.取甲醛固定的标本,采用免疫组织化学法检测结肠壁中GRP78和caspase-12的表达.结果 透射电镜下,对照组大鼠结肠平滑肌细胞排列整齐,肌细胞内细胞器丰富,核居中,常染色质均匀,线粒体嵴较多、滑面内质网较少,肌间丛神经元细胞器丰富,紧邻肌让丛神经元可见ICC;烫伤组肠道平滑肌细胞形状不规则,排列紊乱,核周隙增宽,细胞内有溶解性大空泡,线粒体空泡样变,嵴溶解、固缩,粗面内质网扩张并部分溶解,ICC核周细胞质明显减少.烫伤组伤后3、6、12 h GRP78评分分别为(4.3±0.9)、(6.0±0.7)、(4.8±1.1)分,均高于对照组[(2.4±0.7)分,P<0.05];烫伤组伤后6～24 h caspase-12评分均高于对照组(P<0.05).对照组细胞均有GRP78表达,烫伤组强度染色主要出现在黏膜和肌间神经丛、间质细胞,而平滑肌细胞多呈轻中度染色.烫伤后3、12 h GRP78呈阳性表达,伤后6 h呈强阳性.caspase-12在伤后3 h阳性表达不明显,伤后6、24 h表达呈弱阳性,伤后12 h表达呈阳性;对照组未见caspase-12表达.结论 严重烫伤后大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间丛ICC-平滑肌细胞存在明显病理改变,这与内质网过度应激启动caspase-12凋亡通路致细胞损伤可能有关.
关键词： 烧伤 结肠 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氮酸蛋白酶12 葡萄糖调节蛋白78 -
GRP78蛋白在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响研究
目的:检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在胰腺癌组织中的表达,探讨GRP78蛋白与胰腺癌发生、发展的相关关系.观察GRP78基因表达下调对胰腺癌细胞凋亡和增殖的影响,为以GRP78基因为靶基因治疗胰腺癌提供理论依据.方法:利用免疫组织化学技术检测93例胰腺癌组织及58例胰腺良性病变组织中GRP78蛋白的表达情况;Sh GRP78和Sh Neg克隆人真核表达载体,经脂质体转染胰腺癌细胞系BXPC-3,G418筛选阳性克隆,半定量RT-PCR检测GRP78 mRNA表达,Western blot检测GRP78蛋白表达.采用流式细胞仪、磺酰罗丹明B(SRB)染色法检测各组细胞增殖和凋亡情况.结果:GRP78蛋白在正常胰腺组织表达率为10.8％,在胰腺良性病变组织的表达率为41.4％,在胰腺癌组织中阳性率为88.2％,3组之间差异显著.建立了2组稳定转染细胞系:BXPC-3 sh GRP78和BXPC-3 sh Neg,BXPC-3 sh GRP78细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达显著下调.GRP78基因表达抑制后BXPC-3细胞的增殖明显受到抑制,凋亡显著增加.结论:GRP78蛋白在正常胰腺组织,胰腺良性病变组织及胰腺癌组织中的表达水平依次升高;GRP78基因高表达是细胞组织恶性转化的重要标志物.
-
应激性心肌病模型大鼠心肌组织cathepsin L和GRP78表达及意义
目的 探讨应激性心肌病模型大鼠心肌组织中溶酶体组织蛋白酶L(cathepsin L)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达变化,及其在应激性心肌病法医学诊断中的意义.方法 将25只大鼠随机分为模型组(15只)和对照组(10只).模型组大鼠采用束缚加电击的复合应激方法造模,对照组不做任何处理.应用放射免疫法检测两组大鼠血清皮质醇的含量,免疫组化方法检测大鼠心肌组织cathepsin L和GRP78蛋白的表达.结果 模型组大鼠血清皮质醇含量明显高于对照组(t=8.78,P＜0.05),造模成功.模型组大鼠心肌组织cathepsin L和GRP78蛋白表达量均高于对照组,差异有统计学意义(t=10.44、2.55,P＜0.05).结论 应激性心肌病大鼠心功能受损,cathepsin L和GRP78表达升高,二者检测有望成为法医学诊断应激性心肌病所致心源性猝死的重要辅助手段.
-
对比剂肾病大鼠肾脏组织葡萄糖调节蛋白78的表达
目的 研究对比剂肾病大鼠肾脏中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达情况,探讨内质网应激在对比剂肾病发生发展中的作用.方法 将56只大鼠随机分为对照组(B组)和模型组(C组),每组28只.C组大鼠造模当天每隔15 min尾静脉先后注射吲哚美辛(INDO,10 mg/kg)、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME,10 mg/kg)和760 g/L泛影葡胺(10 mg/kg);B组大鼠每隔15 min尾静脉先后注射与C组等量的INDO、LNAME和生理盐水.两组分别于造模后12、24、48、72 h各处死6只大鼠,观察大鼠一般状况,检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏病理改变,原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测肾脏细胞凋亡情况,RT PCR检测肾脏GRP78 mRNA的表达情况;免疫组化和Western blot方法观察肾脏GRP78蛋白表达情况.结果 B组大鼠肾组织无明显病理损伤,肾组织GRP78 mRNA及蛋白几乎无表达,各时间点血BUN、Scr含量无明显差异(P＞0.05).与B组相比,C组大鼠各时间点病理损伤较严重,肾组织中GRP78 mRNA及蛋白表达均明显升高,且在12h达到高峰,随后有所降低,差异有统计学意义(t=11.74～49.05,P＜0.05).各时间点C组血BUN、Scr含量均较B组明显升高,且在48 h时达到高峰,随后逐渐下降,差异有统计学意义(t=4.03～47.24,P＜0.05).结论 内质网应激可能参与大鼠对比剂肾病的发生发展.
