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三磷酸腺苷发光法快速检测结核分枝杆菌药敏技术的研究

钟敏;朱重颐;彭志刚;张文宏

摘要: 目的 建立一种利用三磷酸腺苷(ATP)与荧光素酶反应测定结核分枝杆菌(简称结核杆菌)释放的ATP来判断结核杆菌药敏的技术.方法 ATP生物发光法(简称ATP法)通过裂解液体培养基中的结核杆菌,释放活菌中的ATP,加入荧光素酶使之发光以检测结核杆菌的活性.共采用H37Rv标准株和10株临床分离菌株,用ATP法与BACTEC 3D法同步平行进行利福平药敏检测,连续7 d检测结核杆菌释放的ATP,观察其生长曲线,并以此判断对药物的敏感性.结果 在生长5~7 d的培养基中ATP法可以检测到敏感菌释放的ATP,并且显著高于耐药菌所释放的ATP,通过与BACTEC 3D法相比确定其判断药敏的临界值,检测结果与L-J法及同步平行的BACTEC 3D法对照组符合率达100%.结论 ATP法可用于结核杆菌对抗结核药物敏感性的检测,且因其价格较低,无放射性元素的存在,作为一种新型的结核杆菌药敏检测技术具有巨大的临床应用潜力.

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