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体内电穿孔对载体表达效率和人类免疫缺陷病毒1型DNA 疫苗免疫反应效果的研究

刘强;王文波;黄维金;邵荣光;王佑春

摘要: 本文旨在分析体内电穿孔(EP)技术对 DNA载体 pDRVI1.0表达效率和人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)DNA疫苗免疫反应的辅助效果,为其在DNA疫苗中的应用提供参考数据。通过构建携带荧光素酶基因的pDRVI1.0-Fluc质粒,利用活体成像技术分析EP接种对荧光素酶蛋白的组织分布、表达水平和持续时间的影响;同时,构建携带我国HIV-1 CRF07_BC流行毒株 env基因的DNA疫苗pDRVI1.0-HIV ,利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和中和抗体法对 EP辅助免疫反应的特点进行分析。结果显示,EP接种后,pDRVI1.0-Fluc质粒未改变组织分布特点,但其体内表达效率显著提高,载体的饱和接种量降低。同时,EP技术提高了pDRVI1.0-HIV疫苗免疫小鼠后诱导的γ干扰素(IFN-γ)分泌型T细胞反应和Env特异性结合抗体效价。结果提示,EP技术可在DNA疫苗应用方面发挥作用。

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