药物生物技术杂志
Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology 약물생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中国药科大学;中国医药科技出版社;中国药学会
- 影响因子： 0.46
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8915
- 国内刊号： 32-1488/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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药用甘草离体快速繁殖体系的建立
筛选合适的甘草快速繁殖技术体系,为甘草的大规模生产生物活性物质、基因工程和人工制种奠定基础.以乌拉尔甘草、黄甘草和光果甘草为供试材料,以其子叶茎段和侧芽茎段作外植体,对影响甘草快速繁殖形成和发生的因素进行研究.结果显示乌拉尔甘草诱导的丛生苗数较多,是3个供试材料中好的；甘草适宜的外植体是子叶茎段.利用甘草子叶茎段和侧芽茎段作外植体进行快速繁殖,具有生长周期短,再生频率高,适于规模化工厂生产.
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新型甘露聚糖酶基因的克隆及在毕赤酵母中的表达
构建土壤基因组文库,通过功能筛选得到一水解底物魔芋粉的阳性克隆,测序后,序列分析表明:该基因全长为1 530 bp,包含一个糖基水解家族26结构域,编码510个氨基酸,相对分子质量为56 438.此基因推导的氨基酸序列与Cellulomonas fimi的Man26A和Cellvibrio japonicus的mannanase A氨基酸序列同源性分别为64.3％、38％.将此基因的成熟肽的编码序列克隆到表达载体pHBM905上,得到重组质粒pHBM730,将pHBM730经SalI酶切线性化后转化3株毕赤酵母GS115、KM71、SMD1168,该甘露聚糖酶基因在这3种毕赤酵母中均实现分泌表达.将此3种重组毕赤酵母GS115 (pHBM730)、KM71( pHBM730)、SMD1168( pHBM730)诱导产酶,对这3种重组酶进行相关的酶学性质研究.分析表明,在KM71中表达量高,其适反应pH值均约为6.6,适反应温度均约为45℃.在适反应条件下测得其酶活力为19.64 U.此结果为瓜尔豆胶降解产物的工业化应用提供了参考.
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葡萄糖脱氢酶缓释系统PL-γ-PGA纳米颗粒的制备及研究
γ-聚谷氨酸( γ-PGA)是一种由枯草芽孢杆菌发酵生产的阴离子聚合物,具有良好的吸水性、生物相容性和生物降解性,无毒性且可由人体降解代谢,是一种很理想的药物载体.发酵得到的γ-PGA一般都具有很高的分子量,本文通过酸水解的方法,得到分子量符合药物载体要求的γ-PGA,并采用离子凝胶法,在水相反应体系中由低分子量γ-PGA与聚赖氨酸(PL)制备得到形态及表面特性良好的PL-γ-PGA纳米颗粒,粒径200～500 nm.在此基础上,制备了搭载葡萄糖脱氢酶(PQQ-GDHs)的PL-γ-PGA纳米缓释系统,载药效率达到61.2％,并且具有很好的稳定性,在体外模拟胃肠道和血液系统的缓释结果表明,分别有31.7％和40.2％的PQQ-GDHs在前48 h被释放.
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细胞增殖法检测rhCNTF生物活性方法的建立和验证
建立检测rhCNTF生物活性的TF-1.CN5a.1细胞增殖法(简称细胞增殖法),并用该法检测不同浓度的CNTF1和CNTF2,确定样品的检测范围；不同时间重复检测样品CNTF4,证明细胞检测法的重复性.检测国际标准品CNTF、CNTF3、其它细胞因子及CNTF冻干保护液对TF-1.CN5a.1细胞的增殖效应,验证细胞检测法的专属性.实验结果显示,CNTF的有效检测范围为40～0.001 ng/mL; CNTF4的活性均值为1.42×106 IU/mg；rhCNTF、NGF与TF-1.CN5a.1细胞存在明显量效关系,而其它细胞因子则不存在量效关系,但NGF与CNTF是不同性质的细胞因子.细胞增殖法有较好的重复性和专属性,该法能很好地应用于rhCNTF的生物活性测定.
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人β-防御素DEFB113的重组表达及活性鉴定
DEFB113为人β-防御素家族新成员,其生物学功能尚不清楚.为了探索一种可以较低成本和较高产量表达活性DEFB113多肽的方法,将编码DEFB113成熟肽的序列克隆到载体pTWIN1上,并转化至E.coliBL21 (DE3)中进行表达.结果表明融合蛋白主要以可溶形式存在；重组载体中融合标签的几丁质结合域(CBD)和内含肽(intein)分别使亲和层析纯化和融合标签自剪切一步完成.终得到DEFB113多肽的产率为6～7 mg/LLB.经活性鉴定,该重组DEFB113多肽对于S.aureus,E.coli K12D31和C.albicans均表现出较强的抑制作用；另外DEFB113无明显的溶血活性,是一种较理想的多肽抗生素.该研究为进一步研究DEFB113的生理功能以及其它人β-防御素结构与功能奠定了基础.
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杂合抗菌肽HMCM的原核表达及其活性鉴定
将哺乳动物抗菌肽(Hexapeptide)、两栖类抗菌肽(Magainin)、昆虫抗菌肽(Cecropin A和Melittin)的有效作用部分拼接在一起,以获得一种新型的杂合抗菌肽HMCM.根据HMCM氨基酸序列和大肠杆菌B细胞的密码子偏好性设计了HMCM的基因序列；将目的基因克隆到原核表达载体pET-32a-c(+),构建了重组表达载体pET-32a-HMCM；再转化原核表达菌株E.coli BL21( DE3)实现融合表达,通过摸索诱导时间、IPTG浓度、OD600和温度等条件确定了表达佳条件,并确定了融合蛋白以可溶形式存在；通过亲和层析纯化了融合蛋白,并进行了Western-blotting鉴定；后用EK酶酶切融合蛋白释放出HMCM,对HMCM的抗菌性进行了初步研究.结果表明HMCM对枯草芽孢杆菌有良好的抑菌作用.
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金针菇固态发酵产木聚糖酶的纯化及其性质研究
摘要金针菇固态发酵产生木聚糖酶经硫酸铵盐析、透析、浓缩、Sephadex G-75分子筛层析等分离与纯化步骤,得到了一种相对分子质量约为59.7k的电泳纯木聚糖酶,其终的活性收率为23.3％,纯化倍数为9.4.该木聚糖酶在pH值为6.0,50℃下的酶解效果佳.酶的pH稳定性及热稳定性都比较好,在pH 4.0～8.0时基本稳定,80℃时相对酶活力仍保持在55.81％.Ca2+、Zn2+对该酶活性有一定的激活作用,而Hg2+、Cu2+则有较强的抑制作用.
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重组蛋白A在大肠杆菌中的分泌表达及活性测定
利用大肠杆菌表达系统表达金黄色葡萄球菌蛋白A,根据大肠杆菌密码子偏好性对金黄色葡萄球菌蛋白A的基因序列进行密码子优化,在N端加入L-门冬酰胺酶( L-AsPsII)信号肽简并基因序列使其分泌表达,将全合成的蛋白A基因片段插入到pET-28a载体中,转化人BL21( DE3).乳糖诱导使其表达,其中80％以上目的蛋白位于胞外,表达量达到375 mg/L,剩余目的蛋白位于周质.将胞外目的蛋白超滤浓缩,通过DEAE阴离子交换剂,一步纯化后得到的蛋白,在SDS-PAGE上显示为约32 k的单一条带,纯度达95％以上.利用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测重组蛋白A活性较高,能与小鼠、兔及羊IgG抗体高效结合,且沸水煮10 min后仍能保持同IgG结合的活性.
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不同产地绞股蓝Se、总蛋白及总皂苷含量及三者相关性分析
对5省绞股蓝Se、总蛋白及总皂苷含量进行测定,分析三者相关性.采用氢化物发生-原子荧光光谱法(HG-AFS)测定绞股蓝Se含量,凯氏定氮法测定绞股蓝总蛋白含量,超声波法提取绞股蓝皂苷和香草醛-高氯酸比色法测定绞股蓝皂苷的含量.5省中湖北咸丰绞股蓝Se含量高,四川青城绞股蓝总蛋白及总皂苷含量高.贵州锦屏绞股蓝Se、总蛋白及总皂苷含量均为低.5省绞股蓝Se含量与总蛋白含量、总皂苷和总蛋白含量均呈显著正相关,r分别为0.910、0.919；实验中随着Se含量的上升,总皂苷的含量也呈上升趋势,但两者之间无显著相关性.绞股蓝Se、总蛋白、总皂苷含量之间有密切的关系,值得更深入的研究.
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艾塞那肽对2型糖尿病临床疗效观察
观察艾塞那肽对2型糖尿病患者血糖控制情况.将2010年7月～12月间应用艾塞那肽的15例2型糖尿病患者进行一般资料分析:包括年龄、糖尿病病程、空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白,甘油三酯、胆固醇、就诊时降糖药物应用药统计.对患者进行艾塞那肽5μg一日2次早晚餐前1h皮下注射后,观察用药前后空腹血糖及餐后2h血糖变化.结果显示用艾塞那肽后空腹血糖及餐后血糖均较用药前下降,艾塞那肽降低餐后血糖较空腹血糖程度高.艾塞那肽可短时间内有效降低空腹及餐后血糖,降低餐后血糖较空腹血糖效果好.
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林荫银莲花不定芽增殖培养基的优化
为提高林荫银莲花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)不定芽繁殖系数,对其组培快繁体系进行优化.以林荫银莲花无菌苗为外植体,研究了培养基中激素、碳源、添加物和矿质元素钙等组分对其不定芽增殖和生长状况的影响,得出佳的不定芽增殖培养基配方.以1/2 Ca浓度MS为固体培养基,激素为1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,蔗糖或食用白糖30 g/L,水解酪蛋白为添加物,浓度为750 mg/L,培养30 d后繁殖系数可达4.01,大幅提高了不定芽的增殖速度和质量,为工厂化生产林荫银莲花种苗奠定了基础.
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应用噬菌体空斑法快速检测金霉素发酵的研究
探讨噬茵体空斑法快速鉴定技术在金霉素发酵中的应用.采用双层琼脂平板法检测噬菌体,观察空斑数.对所有经噬茵体空斑法检测的样品进行电镜检测,其重复符合率为87％.噬茵体空斑法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,而且方法简单、快速,无需贵重仪器,可以应用于金霉素发酵噬菌体的常规检查.
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波形蛋白基因的构建、表达及鉴定
文章进行波形蛋白(VIM)基因重组质粒的构建,并进行表达与鉴定,为开辟新的肝癌诊断方法奠定基础.从人宫颈癌细胞( HELA)中提取总RNA并采用PR-PCR及PCR技术克隆VIM基因,经酶切连接等构建带有GST标签的PGEX-4T-1-VIM重组表达质粒,在大肠杆菌DH5α菌中扩增重组质粒,并在BL21菌中进行诱导表达,通过SDS-PAGE及Western blotting等进行鉴定.重组及表达蛋白Vimentin的融合蛋白,为建立一种新的肝癌早期诊断方法奠定基础.
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条纹斑竹鲨鱼DNA结合抑制因子cDNA的克隆、序列特征及其在肝再生过程中的表达分析
DNA结合抑制因子(Inhibitor of DNA binding,Id)又称分化抑制因子(Inhibitors of Differentiation,Id),属于负调控因子HLH家族的成员,其功能是与DNA结合并抑制细胞的分化和促进细胞的增殖.为揭示Id蛋白在鲨鱼肝脏再生过程中的作用,作者从前期构建的条纹斑竹鲨鱼肝脏cDNA文库中克隆到编码Id蛋白的cDNA全序列并预测了其编码产物(CpId)的结构,探讨了该基因在鲨鱼体内的时空表达方式,结果表明:CpId cDNA全长为1074bp,编码一个由135个氨基酸残基组成的无跨膜区的胞内蛋白,理论分子质量(Mr)为14 857.2,理论等电点(pl)为5.35.CpId蛋白序列与其他生物来源的Id蛋白的同源性介于42％ ～ 62％之间,其N端第31～87aa组成一个相对保守的Myc型helix-loop-helix结构域.CpId基因在鲨鱼各种组织中均有表达,但以在肝脏、脑和生殖腺中的表达高；肝部分切除后,CpId基因的表达迅速上调,在切除1h后到达高值(为正常肝组织的18倍左右),其后逐渐下降,并在24h时恢复至正常肝组织中的水平；CpId基因的表达在肝部分切除后的第48 h出现第2个相对较高的表达峰.上述结果表明CpId基因参与了肝脏再生调控的过程,其作用可能与促进肝细胞的增殖再生过程有关.
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亲和层析介质性能分析及其在单抗纯化中的应用
对6种商品化蛋白A亲和层析介质进行了性能分析,包括动态载量、洗脱条件等,并对含有单抗药物Mab-HS006的实际料液进行了捕获分离,对宿主细胞蛋白及蛋白A的残留进行了分析.结果表明,Prosep Ultra Plus和Mabselect SuRe亲和介质的载高,而Protein A Sepharose CL-4B和r-Protein A Sepharose的洗脱条件温和.一步层析捕获分离Mab-HS006单抗的结果表明,各种介质的纯度均可达90％以上,Prosep Ultra Plus的宿主细胞蛋白残留高,Mabselect SuRe蛋白A的脱落低.
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TAT介导的几种纳米药物载体的研究概况
TAT是一种应用早且现今为常用的细胞穿膜肽,已经成功与多种纳米载体如脂质体、胶束、纳米粒等连结形成可内化进入细胞内的载药体系.文章主要对TAT介导的几种纳米载药体系的穿透机制、体内外抗肿瘤活性及靶向病变部位能力等方面的研究进行综述,同时对微环境pH敏感的TAT靶向药物载体的研究进展作了简单介绍.
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DNA分析技术及其在药用植物分析中的应用
DNA分析技术作为一种先进的遗传标记已被广泛应用于药用植物品种及亲缘关系的鉴定、道地性、资源评定、多样性保护、辅助育种等方面的研究中,对于药用植物的开发、利用及保护起到了重要的作用.
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MicroRNA-21表达调控研究
MicroRNAs (miRNAs)是一类广泛存在于真核细胞中的长约22 nt的非蛋白编码的、单链RNA,具有转录后基因调控的功能,与细胞分化、生长以及代谢等多种生物学过程的调节有关.研究发现,人体很多肿瘤中都存在miRNA的差异表达.而在这些差异表达的miRNA中,又以miR-21( miRNA-21)较为特殊.因为miR-21在几乎所有实体肿瘤中都存在高表达,而且高表达的miR-21可能发挥类似原癌基因的作用.miR-21通过负调节靶基因增加肿瘤细胞的增殖、凋亡以及肿瘤侵入转移,这些靶基因有PTEN、PDCD4、RECK等等.该文主要介绍miR-21在肿瘤中的作用、调节机制,以及作为靶基因在肿瘤的治疗中的临床意义.
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类固醇生成因子-1(SF-1)的研究进展
类固醇生成因子-1( SF-1),又被称为Ad4BP或NR5A1,是孤儿核受体家族成员,在类固醇生成、脑和垂体激素调控、肾上腺肿瘤发生中发挥着关键作用,是肾上腺和性腺发育及功能的重要调控因子.近几年,SF-1的研究取得了很大进展,本文将对SF-1的发现、分子结构、体内表达进行简述,重点阐述SF-1调控的靶基因、转录激活功能调控在生理病理中的研究,特别是相关的拮抗药物进展等几个方面.
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G蛋白偶联受体寡聚化检测技术——共振能量转移技术和蛋白质片段互补技术
蛋白质-蛋白质相互作用( protein-protein interactions,PPIs)在细胞内信号途径的分子机制中具有重要作用,文章叙述了活细胞中以非侵入性荧光和生物发光为基础检测特异性PPIs的方法如FRET、BRET、BiFC和BiLC,上述技术广泛应用于G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)寡聚化的研究,单独或联合应用这些新技术是研究两个蛋白或多个蛋白PPIs的佳方法,文章描述了上述生物技术的新进展及其优缺点,着重阐述在PPIs方面的应用.
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非甾体抗炎药研究的新进展
非甾体抗炎药(NSAIDs)是一类广泛用于抗炎、解热、镇痛的药物,但由于胃肠道毒副作用和肾毒性使它的应用受到很大限制.因此研制出能降低传统NSAIDs副作用且具良好活性的新型NSAIDs成为这类药物发展的主要方向,如选择性环氧化酶-2( COX-2)抑制剂、一氧化氮释放型NSAIDs、环氧化酶/脂氧合酶(COX/ LOX)双重抑制剂、脂蛋白磷脂酶A2( LP-PLA2)抑制剂、前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)抑制剂以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抑制剂等.本文从这几个方面对NSAIDs新研究进行了简要介绍.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 02 03 04 |
