药物生物技术杂志
Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology 약물생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中国药科大学;中国医药科技出版社;中国药学会
- 影响因子： 0.46
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8915
- 国内刊号： 32-1488/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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替考拉宁产生菌A.teichomycoticus FIM-37发酵条件优化
为了优化替考游动放线菌FIM-37菌株产替考拉宁发酵条件,采用单因素试验和正交试验研究发酵培养基组成,探讨摇瓶发酵的主要影响因子初始pH值、装液量、转速、温度等发酵参数的影响.结果确定了适宜发酵培养基和发酵参数:可溶性淀粉3.0％,葡萄糖1.0％,黄豆粉4.5％,蛋白胨0.5％,磷酸氢二钾0.02％,氯化镁0.05％,硫酸铵0.02％,脯氨酸0.1％,碳酸钙0.3％,初始pH7.5 ～8.0,装液量50 mL/500 mL,种龄40～48 h,接种量5％,摇床转速230 r/min,发酵温度30℃,发酵时间8d.优化后的发酵水平较原工艺提高了40％以上,该优化发酵工艺为替考拉宁的工业化生产奠定了基础.
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火龙果籽白蛋白提取工艺及抗氧化能力研究
为探索火龙果籽中白蛋白的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液提取工艺及抗氧化效果,采用Box-Behnken 试验设计优化白蛋白的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液提取工艺,SDS-PAGE检测确认,并评价DPPH-自由基、·OH自由基、O2-自由基的清除能力,还原力和抗脂质过氧化力.结果表明:火龙果籽中白蛋白佳提取工艺为料液比为1∶30,pH为7.08,加热温度74.0℃,时间3.0h,白蛋白提取得率达76.37 mg/g,相对分子质量约13.2k.火龙果籽白蛋白有较强的抗氧化活性,DPPH·、·OH及O2-;IC50分别为5.75,27.11和20.09μg/mL;还原力强,抗脂质过氧化能力弱于对照品BHT.研究结果为火龙果籽应用于保健食品开发提供数据基础.
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构建MDCK Ⅱ-hMDR1-hCYP3A4共表达体系
构建MDCK-hMDR1-CYP3A4双转表达体系,研究CYP3A4和P-gp之间的相互作用.根据基因文库合成CYP3A4基因编码片段,连接到pcDNA3.1/Hypgro表达载体,进行测序.验证正确的重组质粒pcDNA3.1/Hypgro/hCYP3 A4转染MDCK-MOCK细胞以及MDCK-hMDR1细胞,经潮霉素B(HygromycinB)加压筛选阳性克隆,获得稳定高表达人CYP3 A4的MDCK-hCYP3A4单转以及MDCK-hMDR1-hCYP3A4双转稳转细胞株.结果显示相比于空白细胞(MDCK-MOCK)以及阴性细胞(MDCK-MDR1),CYP3A4在MDCK-hCYP3A4、MDCK-hMDR1-hCYP3A4细胞中的表达更稳定并且活性显著增强.MTT结果表明,在MOCK、MDCK-MDR1、MDCK-CYP3A4以及MDCK-MDR1-CYP3A4 4种细胞系中,苏尼替尼的IC50值分别为2.832,5.717,3.628,6.561μ,mol/L,而伯舒替尼的IC50值分别为0.712 6,4.413,2.184,7.010μmol/L.由于苏尼替尼和博苏替尼是CYP3A4以及P-gp的共同底物,CYP3 A4的代谢活性以及P-gp的外排功能共同作用使得苏尼替尼和博苏替尼毒性降低,因而MDCK-hMDR1-hCYP3A4双转细胞株IC50值比MDCK-hMDR1、MDCK-hCYP3 A4明显增大.以上结果说明了构建的稳定单转MDCK-hCYP3A4以及MDCK-hMDR1-hCYP3A4双转细胞株是具有功能的,并且CYP3A4与P-gp之间的作用是相互影响的,同时该模型的建立也为药物的转运与代谢研究提供更全面的研究技术与思路.
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响应面分析法优化金线莲黄酮提取工艺的研究
为优化金线莲黄酮提取工艺,根据单因素试验结果与响应面分析法中的Box-Behnken中心组合设计原则选取试验因素与水平,从中选取对叶绿素提取结果有影响的提取时间、提取温度、乙醇体积分数、液料比4个因素进行优化;并利用Design Expert 7.1.6分析软件对试验数据进行分析.结果表明,影响金线莲总黄酮含量的因素大小顺序为:提取温度、乙醇体积分数、提取时间、液料比,金线莲黄酮提取的佳工艺参数为提取温度62.25℃,乙醇浓度为80.68％,提取时间89.8 min,液料比为79.38∶1;在此条件下,金线莲黄酮含量为2.243 7 mg/g,与预测值2.338 6 mg/g接近.采用响应面分析法得到的金线莲黄酮提取优化工艺准确可靠、可行,可用于金线莲总黄酮的提取,为金线莲资源的进一步开发利用提供了实验依据.
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抗菌肽Shepherin的表达纯化和抗菌活性研究
多肽Shepherin是一种早在荠菜中发现的抗菌肽.研究显示Shepherin具有良好的抗菌活性,能抑制植物病原微生物的生长.通过构建Shepherin的表达质粒在大肠杆菌中生产抗菌肽并研究其对常见临床菌的抗菌活性.首先构建大肠杆菌表达质粒pET32 a-Trx-His-Erk-Shepherin,并在大肠杆菌BL21中进行表达.经过菌体破碎、镍柱亲和层析、酶切、柱层析等分离纯化步骤,终获得高纯度的Shepherin抗菌肽.选取临床常见细菌研究Shephefin的抗菌活性,并初步探讨抗菌肽Shephefin对脂质体和细菌外膜的作用.pET32-Trx-His-Erk-Shep-herin在大肠杆菌BL21中成功表达,融合蛋白主要以可溶性形式表达,约占总蛋白30％.经过酶切和多步柱层析,终目的蛋白Shephefin纯度达到90％以上.抗菌实验显示Shepherin对常见的临床病菌均显示有良好的抗菌活性,但是Ca2+离子能显著降低抗菌肽的杀菌活性.杀菌曲线显示抗菌肽能在2 min内快速杀灭99％的E.coli,并在半小时内杀灭所有细菌.钙黄氯素泄露实验和杀菌曲线类似,证明Shephefin能破坏磷脂双分子层并在数分钟内造成胞质的快速泄露.透射电镜结果显示Shepherin能破坏E.coli细菌的外膜结构致使胞质泄露.Shepherin在大肠杆菌能以融合蛋白的形式成功进行表达;Shephefin蛋白对大多数临床细菌具有较好的杀菌活性;其杀菌机制主要是通过破坏细菌E.coli的外膜的完整性造成胞内物质外流.
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费休氏法测定头孢拉定胶囊水分的不确定度评定
为了建立费休氏法测定头孢拉定胶囊水分的不确定度评定,根据《测量不确定度评定与表示》(JJF1059-1999),分析不确定度的来源,通过建立数学模型,对水分测定过程中各影响因素进行分析评估,计算各变量的不确定度,合成不确定度,得出水分测定的扩展不确定度为0.28％(k=2),该方法适用于费休氏法测定头孢拉定胶囊水分的不确定度评定.
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安神补脑液中维生素B1高效液相法测定方法的改进
建立HPLC紫外检测器的方法来检测安神补脑液中维生素B1的含量,用以改进现行标准中的方法.采用安捷伦SB-C18柱,以0.02 mol/L磷酸二氢铵-0.025 moL/L庚烷磺酸钠溶液(磷酸pH调至3.0)∶乙腈(80∶ 20)为流动相,检测波长为245 nm.线性范围为2.08～ 41.6 μg/mL,相关系数R2=1.000,线性关系良好.该方法专属性好,准确、灵敏,解决了现行方法出现的问题,并简化了前处理步骤,更适合于VB1的含量测定.
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运用DOE方法降低抗体生产过程中五聚甘露糖水平的工艺开发
通过试验设计(DOE)方法和JMP软件分析快速优化重组CHO细胞在生物反应器中的培养工艺,保证抗体高表达量的同时降低五聚甘露糖(Man5)水平.以培养基CD-CIM1为基础培养基,在细胞培养过程中添加补料培养基流加培养,利用3L小型生物反应器,对反应器pH值,溶氧(DO),温度(T)3个控制参数进行3因子2水平比较,以抗体表达量(Titer)、产物蛋白Man5水平为响应变量,应用JMP软件进行拟合模型小二乘法分析,找出优工艺参数.用优化的工艺参数进行验证,并且放大到50 L生物反应器中,先后培养两个批次,进一步验证优化结果.通过分析,参数T、pH值及3因素间两两交互作用对Titer均有显著影响,DO对Titer影响不显著;pH对Man5有显著影响,T、DO及3因素间两两交互作用对Man5的影响均不显著.结果预测,为获得高表达量及可接受范围(O％～10％)内的Mad水平,优工艺参数为pH7.10,DO 60％,T34.5℃.用优化工艺在小型生物反应器内进行验证,收获时抗体表达量分别为1 152,901 mg/L;Man5水平分别为8.60％,7.49％;两个批次的50 L生物反应器放大培养,抗体表达量分别为840,849 mg/L,Man5水平分别为6.03％,9.45％,结果均符合预期.成功运用DOE方法快速高效的建立了降低Man5水平的细胞培养工艺,为后期放大提供依据.
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分子动力学模拟探讨Annexin A5的N-末端对其结构的影响
研究ANX A5的N-末端存在与否对其核心区域结构以及四级结构的影响.ANX家族蛋白的显著特征是含有高度保守的C-端核心序列以及多变的N-末端结构,核心序列由4个重复的同源序列构成,具有明显的同源性,而N-末端的序列及长度在进化过程中表现出很大的多样性.为了研究N-末端对ANX蛋白的意义,文章以ANX A5为例,采用分子动力学模拟的手段分别对ANX A5单体和三聚体进行了模拟,研究N-末端对ANX A5的核心区域结构以及四级结构的影响.模拟结果显示,N-末端存在与否并不影响ANX A5单体/亚基的结构,对钙离子的结合也没有大的影响;但是N-末端存在与否对ANX A5核心序列四级结构造成了很大的影响,三聚体有加速分散的趋势,从而猜测N-末端对ANX A5的亚基之间聚合有重要作用.综上可得,N-末端存在与否不会对其核心区域的结构稳定以及与Ca2+的结合造成大的影响,但是对于ANX A5三聚体结构的形成是必不可少的.
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磺胺二甲基嘧啶完全抗原的合成和鉴定
比较小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SM2)用两种不同方法合成完全抗原的免疫效果,通过比较这两种不同方法合成的完全抗原的免疫效果,为进一步的SM2单克隆抗体的制备和SM2残留检测奠定基础.分别采用重氮化(直接连接)、戊二醛法(引入间隔臂)将药物磺胺二甲基嘧啶(SM2)偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,并用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定完全抗原合成,确定其偶联比,然后用合成的完全抗原免疫小鼠,免疫周期结束后眼眶取血,用酶联免疫分析法测定血清效价,比较两种不同方法合成的完全抗原的免疫效果.通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定,重氮化法和戊二醛法都成功合成了磺胺二甲基嘧啶(SM2-BSA)完全抗原,偶联比分别为13.6∶1和12.6∶1.通过小鼠血清的酶联免疫分析法检测,进一步证明实验成功合成了SM2完全抗原,并能有效的刺激机体产生良好的免疫反应.
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蛇毒类凝血酶的研究进展
蛇毒类凝血酶(SVTLEs)是与人血浆凝血酶结构和功能非常相似的一类丝氨酸蛋白酶,具有精氨酸酯酶和酰氨酶活性,但其裂解纤维蛋白原的作用机制与凝血酶不同.大部分SVTLEs都是糖蛋白,含糖量在0％～ 30％之间.SVTLEs主要分布于蝰科的蝮亚科和蝰亚科.由于SVTLEs体外促凝、体内去纤的生理性质,其在心肌梗死、缺血性中风和其他血栓性疾病方面拥有巨大的潜在应用价值.随着对SVTLEs研究的不断深入,目前已有多种SVTLEs应用于临床止血、抗血栓及诊断等方面.该文对SVTLEs的分布,生化特性,基因工程研究以及应用等作了简要综述.
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预设计锚蛋白重复蛋白及其应用进展
预设计锚蛋白重复蛋白DARPins (Designed ankyrin repeat proteins),是一类衍生自天然锚蛋白重复序列的新型结合蛋白.由于其分子质量小,高效力,高稳定性,高亲和力和具备柔性结构等诸多特点而广受关注.DARPin蛋白在生化研究和临床治疗领域有着极大的应用价值.从DARPin结构的发现到DARPin药物候选分子进入临床,已有十几年的时间.该文总结了DARPin结构与功能特点,并阐述了其在生物医药与免疫治疗领域的应用情况,以期为相关领域的科研人员提供有价值的参考.
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人工抗菌肽的研究进展
抗菌肽由于具有广谱抗菌、半衰期较短的特点,成为有望替代抗生素的产品之一,但是天然抗菌肽仍然存在产量低下、生产成本高等问题,通过设计抗菌肽片段、改变部分氨基酸序列、连接抗菌肽片段等基因工程方法可实现人工抗菌肽的稳定及高产量表达,可获得具有更高生物活性的人工抗菌肽,文章分析了近年来人工抗菌肽在生物活性、抗菌机制、设计方法及应用方面的研究进展,为抗菌肽的高效利用和低成本生产提供理论基础.
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结构修饰的基于聚乙烯亚胺的载体在基因递送方面的研究进展
聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)是阳离子聚合物非病毒基因转染载体的代表之一,具有转染效率高,易于从溶酶体中逃逸,易于化学修饰等优点.但PEI毒性大,靶向性低,不易在体内生物降解的缺点限制了其应用.因此,许多研究者致力于PEI的结构修饰,在一定程度上改善了PEI的缺点.该文综述了生物相容性材料修饰的基于PEI的载体、靶向因子修饰的基于PEI的载体及基于PEI的环境响应型可解聚载体在基因递送方面的研究进展,以期为合理设计基因递送体系提供新的思路和方法.
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尼达尼布抗肿瘤研究进展
尼达尼布是用于特发性肺纤维化治疗的小分子化学药物,作为一种可抑制血管生成和组织纤维化的多靶点受体酪氨酸激酶抑制剂,近年大量研究表明尼达尼布具有较好的抗肿瘤作用,其与抗肿瘤药物联用可提高抗肿瘤疗效.文章通过查阅文献及临床研究报告,对尼达尼布的临床前抑瘤作用及在多种肿瘤治疗中的临床试验研究进行了综述,为尼达尼布进一步的抗肿瘤研究开发提供参考.
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金纳米粒应用于关节炎治疗的研究进展
金纳米粒(Gold nannoparticles,AuNPs)因其具有比表面积大、化学性质稳定、生物相容性好、表面可以被多功能化修饰等优势,被广泛用作递送药物和生物大分子的载体,以改善药物的溶解度低和生物大分子难以入胞的问题.AuNPs自身对关节炎起到一定的治疗作用,可以与药物产生协同效应.另外,AuNPs独特的光学特性,可用作探针和显影,辅助关节炎的诊断和治疗.文章就AuNPs的制备以及在关节炎治疗方面的研究进展进行了综述.
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治疗性抗体在脑部相关疾病中的研究进展
中枢神经系统疾病越来越严重的危害着人类的健康,由于血脑屏障上脑毛细血管内皮细胞的紧密连接,极大的限制了药物通过血液进入脑组织而发挥作用.目前所研发的传统脑部治疗性抗体临床Ⅲ期结果均不理想,究其原因主要由于抗体主动进入脑内的含量太低未能达到其治疗剂量,因此如何在疾病发现早期使抗体可以稳定、大量的进入血脑屏障(BBB)成为研究的关键.在众多使药物进入脑内的策略中利用血脑屏障自身的转运系统,通过与脑内腔表面特定受体结合经转胞吞作用来转运大分子的转运形式具有开发前景.临床研究显示靶向转铁蛋白受体(TfR),胰岛素受体(IR)等的抗体可以有效促进药物跨血脑屏障进入脑内发挥作用.因此研发重组抗体成为了抗体治疗中枢神经系统疾病的研究趋势,将治疗性抗体与靶向脑部特异性受体的抗体相“组合”形成具有双功能的治疗性抗体,使其与血脑屏障上特定靶点结合进入脑内并在脑部达到治疗剂量从而发挥作用.文章对治疗脑部疾病的抗体,脑部靶点应用及其研究趋势进行综述.
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壳聚糖复合创面敷料研究进展
壳聚糖因具有止血、良好的生物相容性和生物降解性、诱导细胞增殖和组织修复以及抗菌等生物活性而被广泛用于创面治疗.虽然壳聚糖具有作为生物敷料的优势,但机械强度低,抗菌效果不稳定,促创面愈合时间长等缺陷限制了它的临床应用.壳聚糖复合创面敷料通过在壳聚糖基质上负载或交联其他材料或药物,可提高敷料的机械强度,加速细胞增殖和伤口愈合,增强抗菌活性.文章针对近几年的壳聚糖及其衍生物的复合型创面敷料表现的优势特性开展了综述,并对其进一步研究方向也进行了展望.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 02 03 04 |
