药物生物技术杂志
Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology 약물생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中国药科大学;中国医药科技出版社;中国药学会
- 影响因子： 0.46
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8915
- 国内刊号： 32-1488/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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大马哈鱼皮胶原蛋白制备和表征
用稀碱处理大马哈鱼皮,然后进行限制性酶解,制备得到胶原蛋白,检验制备样品的纯度,测定样品的热变性温度和细胞相容性.制备的胶原蛋白α链的含量≥75%,β链的含量≤25%,有微量的γ链;变性温度是12.5C;细胞培养3天的相对活力是80.0±3.6%;大马哈鱼皮胶原蛋白为基质的细胞活力仅次于对照组(空白细胞培养板),优于聚乳酸、聚羟基丁酸和聚-3羟基丁酸戊酸.海鱼皮胶原蛋白可进一步应用于生物材料研究.
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可承载CETP多肽表位的颗粒样蛋白表达载体的克隆、表达与分离纯化
为了提高多肽表位的免疫原性,利用乙肝病毒核心抗原能够在体外自行组装成病毒样颗粒的特性,将人源胆固醇酯转运蛋白羧基端26个氨基酸连同大肠杆菌DnaK基因C端结构域克隆入乙肝病毒核心抗原的免疫优势决定区,并在大肠杆菌BL-21(DE3)表达,以包含体形式存在,经过洗涤、复性和分子筛纯化,获得纯度达90%以上的目的蛋白.纯化的蛋白免疫新西兰大白兔后能够诱导产生高水平的抗胆固醇酯转运蛋白的抗体,表明乙肝病毒核心抗原能够在体外自发装配成多聚体颗粒,并能够将插入其免疫优势决定区的胆固醇酯转运蛋白(CETP)多肽表位展示于颗粒表面以提高免疫原性,显示出其作为疫苗免疫载体的良好前景.
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瑞替普酶(reteplase)在海带中表达的鉴定分析
为验证本实验室构建的瑞替普酶(reteplase,r-PA)基因是否成功转入海带,本文通过FAPA、PCR、Southern blotting和Western blotting等方法分别从体外纤溶活性、DNA的整合以及目的蛋白的表达等三个方面进行鉴定,并运用固定化金属离子亲和层析对表达的蛋白进行了初步分离纯化.FAPA结果表明转基因海带蛋白具有溶栓活性,PCR和Southern Blotting显示在1 100 bp处有特异性条带,Western blotting在39 ku处有蛋白条带,证明r-PA基因已成功转入海带而且获得稳定表达,海带中表达的r-PA不需复性就具有溶栓活性,同时说明在r-PA N端设计的(His)6有助于我们利用亲和层析分离纯化目的蛋白.
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川麦冬脱病毒和组织培养技术的研究
采用茎尖分生组织培养技术,获得了川麦冬的脱病毒试管苗.通过川麦冬组织培养技术的正交试验及优化筛选,筛选出佳的培养基组成,用于脱病毒苗的快速繁殖.建立了川麦冬根尖染色体鉴定的佳条件.结果表明,川麦冬适繁殖培养基MS+BA(6-卞基腺嘌呤)2.0 mg/L+NAA(萘乙酸)0.5 mg/L;川麦冬佳诱导愈伤培养基:MS+BA1.5 mg/L+IAA(吲哚乙酸)0.1 mg/L+2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)1.0 mg/L;通过在培养基中添加不同浓度生长素,得到适合川麦冬的生根培养基:1/2MS+IAA 0.5 mg/L+ABT 0.5 mg/L.染色体鉴定结果表明:川麦冬的染色体为2n=68.
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泰山野生丹参与种植丹参根、茎、叶中三种有效成分含量的分析比较
选用乙醇超声提取法提取丹参酮ⅡA,选用氨水超声提取法提取丹参素和原儿茶醛,用HLPC法测定泰山野生紫花丹参、种植紫花丹参和白花丹参中的丹参素、原儿茶醛、丹参酮ⅡA三种有效成分含量,并进行分析比较.结果表明野生紫花丹参、种植紫花丹参和白花丹参根中均含有丰富的有效成分;丹参叶中丹参素含量较高;丹参茎中三种有效成分含量较低.研究表明泰山三种丹参中有效成分含量无明显差异,丹参叶含丰富的丹参素和原儿茶醛,提示丹参叶也具有一定的药用价值.
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发酵液中纳他霉素的提取及鉴定
通过对纳他霉素部分理化性质的研究,建立了溶剂萃取法从发酵液中提取纳他霉素的工艺路线和参数.发酵液经预处理后离心分离收集菌体,加入适量甲醇,调节pH至10.5,离心除去不溶杂质,再调节pH至中性,经蒸发浓缩结晶获得纳他霉素.纳他霉素粗品经进一步纯化后,通过紫外光谱、红外光谱、核磁共振图谱和生物活性检测法进行了分析鉴定.通过该工艺回收的纳他霉素粗品纯度为74.6%±2.95%,回收率达到80.3%±3.27%,较好的保持了其生物活性.结果显示,该工艺在低浓度发酵液中提取纳他霉素达到较为理想的效果.
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一种鲨肝再生因子类似物的克隆表达及纯化
获得可溶性表达的鲨肝再生因子类似物,初步研究性质与活性.构建含有鲨肝再生因子类似物片段的原核表达载体pET 32a-S;转化BL21,IPTG诱导表达融合蛋白,表达产物经过分离纯化-FXa酶切-分离纯化,得到鲨肝再生因子类似物;利用MTT比色法研究该重组产物对肝癌细胞株SMMC-7721的增殖活性.结果原核表达的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶的形式存在,表达量为40%,分子质量为30 ku,去除融合子后的鲨肝再生因子类似物分子质量为12kμ,PI=4.7.活性研究显示在6.25～50μg/ml浓度范围内,类似物与天然产物均有相似的刺激SMMC-7721细胞株增殖的活性,但是在高浓度下却表现出了抑制活性.
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重组人甲状旁腺素1-34分子量测定方法的研究
分别采用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)、Tricine-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(Tricine-SDS-PAGE)和分子排阻色谱法(SEC)测定重组人甲状旁腺素1-34的相对分子质量,为制定该品种的质量标准提供依据.MALDI-TOF/MS测定基质溶液为α-氰基-4-羟基肉桂酸(a-cyano-4-hydroxy-cmnamic acid,CCA);Tricine-SDS-PAGE电泳采用Tris-tricine电极缓冲系统;SEC测定色谱柱为TSK-GELG2 000 SWXL(300mm×7.8mm,5μm);流动相为三氟乙酸-乙腈-水(0.05:20:80);检测波长为215nm;流速为0.5 mL·min-1.结果:质谱法测定结果准确,实验值与理论值一致,误差±1;Tricine-SDS-PAGE测定结果与理论值基本一致,误差小于10%;但SEC法测定结果与理论值偏差较大.质谱法适用于产品的质量控制.
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噬菌体展示技术生物淘选CTGF表位的研究
噬菌体展示技术筛选缔组织生长因子(CTGF,connective tissue growth factors)蛋白表位.用含有30 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液干预人肾小球系膜细胞2 d后,提取CTGF天然蛋白,应用Western blotting方法鉴定CTGF单克隆抗体的特异性;以CTGF单克隆抗体为筛选工具,对噬菌体随机12肽库进行筛选,逐步增加选择压力,经过3轮筛选后随机挑取4个克隆测序,用竞争抑制和间接ELISA方法检测噬菌体阳性克隆的特异性.Western blotting分析显示,CTGF单克隆抗体能与CTGF天然蛋白及重组蛋白特异性结合.噬菌体文库经过3轮筛选后得到的阳性克隆,测序结果表明4个克隆的序列高度一致,推导获得小肽序列,命名为ZD521;竞争抑制和间接ELISA分析与预期结果一致.本研究用噬菌体展示技术成功获得与CTGF单抗高度结合的小肽,为CTGF功能研究以及进一步以该肽为疫苗预防和治疗纤维化疾病打下基础.
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动物脾脏RNA生产工艺研究
采用羊脾作为原料,苯酚-稀盐法进行RNA提取,提取率为1.45‰.蛋白质浓度检验试剂盒BCA法测定蛋白含量为2.05%,紫外分光光度计测定吸光度比值(260 nm/280 nm)为1.84,定磷法测DNA含量为2.74%,地衣酚显色法测RNA含量为94.50%.
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高效液相色谱法AtlantisC18反相色谱柱检测生物样品中儿茶酚胺的研究
采用了AtlantisC18反相色谱柱(适用于分离极性分子的反相色谱柱),成功地分离了去甲肾上腺素(NA),肾上腺素(A),多巴胺(DA)等儿茶酚胺(CAs)类物质,研究了CAs在Atlantis C18和Novle pak C18柱的保留特性,比较了流动相中离子对试剂辛烷基磺酸钠(B8)浓度对CAs容量因子k'的作用,确认采用AtlantisC18柱分离CAs,色谱条件优化空间更大,更适于复杂生物样品分析.色谱条件:Atlantis C18柱,电化检测,流动相:NaH2PO4 50mmol/L、柠檬酸钠50 mmol/L缓冲液-乙腈(体积比(75:25),检测限(S/N=2)在0.932.43pg,绝对回收率均在98.02%以上,样品日内RSD1.5%以下.方法精密、准确.
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反相制备色谱分离酪丝亮肽拟似物
本文介绍了以反相C18制备色谱柱分离强极性小肽拟似物的方法.采用BüCHI中压制备系统,以水-甲醇为梯度洗脱体系,并配合HPLC检测,结果成功分离纯化了三个活性拟肽化合物,纯度达97%以上.该法简便、分离效果好,可用于该类小肽化合物的分离制备.
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文蛤糖肽(MGP0501)体外抗癌活性研究
文蛤糖肽MGP0501(Meretrix meretrix GlycoPeptide)是从海洋软体动物文蛤中分离的一种低分子糖肽.该文以溴化二苯偶氮盐(MTT)法检测MGP0501对体外培养的癌细胞的抑制作用和稳定性.MGP0501对体外培养的人肺癌细胞株(A549),卵巢癌细胞株(HO8910),宫颈癌细胞株(Hela),鼻咽癌细胞株(KB),肝癌细胞株(SMMC-7721)生长均有很强的抑制作用,并且对鼠源性癌细胞株(B16)有更强的抑制作用,并呈量效关系.MGP0501有很好的温度稳定性,中性条件下抗肿瘤活性强.证明MGP0501具有稳定的、广谱的抗癌活性.
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Duchenne型肌营养不良症药物筛选模型的构建
建立一种能方便检测utrophin表达的方法,制备筛选Duchenne肌营养不良症治疗药物的细胞模型.将Utrophin基因上18号和19号外显子及其周围约6.7kb的DNA,分三段克隆下来,并将TETC报告基因插入插入片段Ⅰ(其中的18号外显子)中,构建打靶基因.经过电转化的方法,将测序正确的打靶基因转染到C2C12细胞株中.经G418筛选,FlAsH荧光染色,PCR扩增鉴定得到正确同源重组的细胞株.为筛选utrophin表达促进剂建立了细胞模型,为筛选DMD治疗药物打下基础.
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酶膜生物反应器中酶的固定化方法研究及其应用进展
利用膜作为固定化酶载体的酶膜反应器,能有效地将酶固定,可实现产物的原位分离,消除位阻效应和抑制效应,且可连续操作,便于放大,已广泛应用于蛋白质、纤维素、淀粉等的酶解、污水处理等.文章对酶膜反应器中的固定化方法研究进行了分类,介绍并综合了酶膜反应器的应用,及存在问题.对其前景做了展望.
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羧肽酶B研究进展
羧肽酶B是重组胰岛素生产中的一个必需工具酶,同时在蛋白质测序等领域中也得到广泛应用.文章综述了羧肽酶B的结构、测活方法、性质、稳定性及储存条件、提取方法、基因工程方法生产羧肽酶B的研究及重组羧肽酶B的性质等.
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近红外标记技术在生物医药领域的应用
文章主要介绍了与ICG类似的几类近红外菁染料:ICG衍生物、Cy系列染料及IRDye系列,总结了它们的结构特征、光谱性质和修饰部位,着重介绍了它们与生物大分子结合形成的一些荧光标记复合物,并且就其与抗体、多肽、药物骨架等结合的复合物在生物医药领域的应用进行了阐述.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 02 03 04 |
