首页 > 文献资料
-
青蒿素通过线粒体途径诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的分子机制研究
目的 探讨青蒿素能否通过激活人肝癌细胞HepG2的线粒体凋亡途径,诱导细胞凋亡.方法 不同浓度青蒿素与人肝癌细胞HepG2共培养24 h,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测HepG2细胞周期与凋亡,Hoechst荧光染色法观察细胞凋亡形态,Western blot检测HepG2细胞内线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9和细胞色素C(Cytochrame,Cyto-C)表达水平.结果 与对照组相比,青蒿素作用HepG2细胞24 h后,细胞增殖明显受到抑制,差异有统计学意义(P＜0.05).0.2、0.4和0.8 mmol/L青蒿素给药组,细胞G2/M期比例明显升高(P＜0.05),细胞核出现染色质不均匀,核浓缩聚集、碎裂凋亡形态,细胞凋亡比例升高,上述差异均有统计学意义(P＜0.05).Westem blot结果显示,青蒿素作用后细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,Caspase-3、Caspase-9和Cyto C蛋白表达升高,上述差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 青蒿素对HepG2细胞增殖具有抑制作用并能诱发细胞凋亡,其机制可能与线粒体凋亡途径相关,使细胞周期阻滞于G2/M期.
-
姜黄素对黑色素瘤B16-F10细胞增殖及线粒体凋亡影响的机制研究
目的:探讨姜黄素体外抗黑色素瘤的药效及作用机制,为姜黄素抗肿瘤的药理机制提供实验依据.方法:以黑色素瘤B16-F10细胞为实验材料,在离体水平研究姜黄素对细胞活力、细胞内活性氧水平、细胞凋亡的影响[1].结果:姜黄素能显著抑制B16-F10细胞增殖、促进其凋亡;姜黄素可促进B16-F10细胞活性氧水平增高,且显著提高细胞内Caspase-4,9蛋白的表达,可能通过启动线粒体凋亡途径发挥促癌细胞凋亡生物活性.结论:姜黄素对黑色素瘤具有显著抑制作用[2],其可能的机制是通过提高细胞内活性氧水平,启动线粒体凋亡途径而发挥促黑色素瘤细胞凋亡的作用.
关键词： 姜黄素 黑色素瘤 B16-F10细胞株 线粒体凋亡 -
银杏叶提取物对非小细胞肺癌PC-9细胞增殖的影响
目的：探讨银杏叶提取物(EGB)对非小细胞肺癌(NSCLC)PC-9细胞增殖抑制的作用机制。方法 EGB浓度设为70、105、140、210、280 mg/L,作用于体外培养的PC-9细胞24、48、72 h,MTT法检测细胞抑制率；Hoechst33258荧光染色法观察细胞核变化；ELISA检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量；Western blot检测Caspase-3、Caspase-9、细胞色素C(Cyt-C)及凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达。结果 EGB作用24、48、72 h对PC-9细胞均有抑制作用,IC50分别为195.45、179.63、142.23 mg/L。105、140、210 mg/L EGB能够诱导PC-9细胞凋亡,引起细胞核固缩,形成凋亡小体,同时SOD活性增强,MDA含量降低(P＜0.05,P＜0.01, P＜0.001)。Western blot检测结果表明,EGB作用48 h后Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C及AIF蛋白表达明显增强,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001)。结论 EGB能够有效抑制NSCLC PC-9细胞的增殖,其机制可能是通过线粒体凋亡途径诱导PC-9细胞凋亡、抗氧化及清除自由基实现的。
-
双氢青蒿素通过调节凋亡相关蛋白的表达及活性氧的产生而抑制胰腺癌JF-305细胞的增殖
探讨双氢青蒿素诱导人胰腺癌JF-305细胞凋亡作用及活性氧在双氢青蒿素诱导JF-305细胞凋亡中的作用.采用MTT法考察不同浓度双氢青蒿素对人胰腺癌JF-305细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,Hochest 333258荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V荧光染色法检测JF-305细胞凋亡的变化,DCFH-DA检测凋亡过程中活性氧(ROS)的变化.Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C蛋白表达的变化.与对照相比,双氢青蒿素作用JF-305细胞48 h,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);细胞被阻滞于G2/M期;细胞出现核浓缩聚集、碎裂的凋亡形态,细胞凋亡比例升高(P<0.05);DCFH-DA检测双氢青蒿素给药组细胞ROS明显升高(P<0.05);Western blot结果显示,双氢青蒿素作用后细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,Cleaved caspase-3,Cleaved caspase-9和Cyto C 蛋白表达升高.双氢青蒿素能诱导JF-305细胞凋亡,其凋亡过程可能与ROS的生成增加相关.
-
姜黄素对脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的作用及机制研究
目的 研究姜黄素对脓毒症淋巴细胞凋亡的抑制作用,并探讨其机制.方法 本实验于温州医科大学遗传学实验教学中心完成.取180只清洁级BALB/c雄性小鼠,每次60只,按照随机数字法分成3组,即假手术组(n=20),脓毒症组(n=20),姜黄素组(n=20),实验重复3次.假手术组仅行开腹,不结扎穿孔;脓毒症组和姜黄素组行盲肠结扎加穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP);姜黄素组术前灌胃姜黄素200 mg/ (kg·d),持续两周.术后24 h观察病死率,并取脾脏分离淋巴细胞.采用流式细胞术检测淋巴细胞凋亡情况与线粒体膜电位水平;Western blot检测CytC、Bax蛋白表达.数据采用SPSS 16.0软件进行分析,计数资料采用x2检验,计量资料采用单因素方差分析.结果 脓毒症组小鼠术后24 h病死率较假手术组明显升高(33.3％ vs.0.0％,P=0.000),姜黄素组病死率较脓毒症组明显降低(16.6％ vs.33.3％,P=0.035).脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为(41.2±3.8)％,较假手术组(8.0±1.7)％明显增高(P=0.000);与脓毒症组比较,姜黄素组淋巴细胞凋亡率(27.3±1.3)％明显下降(P=0.000).脓毒症组线粒体膜电位阳性的细胞百分率为(40.4±1.9)％,较假手术组(79.9±2.1)％明显降低(P =0.000),姜黄素组线粒体膜电位阳性细胞比率为(57.7±1.6)％,与脓毒症组比较膜电位水平明显升高(P=0.000).脓毒症组胞浆Cyt C蛋白、线粒体Bax蛋白表达水平较假手术组明显上调(P =0.000),而姜黄素组胞浆Cyt C蛋白(P =0.037)、线粒体Bax蛋白(P=0.000)水平都较脓毒症组明显降低.结论 姜黄素可明显减轻脓毒症状态下脾脏淋巴细胞凋亡,且这一作用可能是通过拮抗线粒体凋亡途径实现的.
-
柴胡皂苷b2通过抑制线粒体凋亡通路减轻过氧化氢诱导的L-02细胞损伤
目的 探讨柴胡皂苷b2(SS-b2)对过氧化氢(H2O2)诱导的L-02细胞损伤的保护作用及其可能的作用机制.方法 将L-02细胞分为正常对照组、模型组(H2O2100μmol·L-1孵育12 h)和SS-b2组(SS-b212.5,25,50和100 mg·L-1孵育24 h后,再加入H2O2继续孵育12 h).MTT法检测L-02细胞存活率;罗丹明123染色检测L-02细胞线粒体膜电位变化;Hoechst33258荧光染色法和流式细胞术检测L-02细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测线粒体凋亡通路蛋白Bcl-2、Bax、细胞色素c(Cyt-c)、胱天蛋白酶9和3表达水平.结果 与正常对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01);细胞线粒体膜电位水平降低(P<0.01)且细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Bax(P<0.01)、Cyt-c(P<0.01)、胱天蛋白酶9(P<0.05)和3(P<0.05)蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.01).与模型组相比,SS-b2各浓度组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性(r=0.9804,P<0.05);线粒体膜电位水平升高(P<0.01);Hoechst染色和流式细胞检测结果均显示,细胞凋亡率明显降低(P<0.05,P<0.01);Bax、Cyt-c、胱天蛋白酶9和3蛋白水平显著下调(P<0.01),且Bcl-2蛋白水平上调(P<0.01).结论 SS-b2可减轻H2O2诱导的L-02细胞损伤,其机制与抑制线粒体凋亡有关.
-
线粒体凋亡在肝脏疾病中的研究进展
作为细胞的能量工厂,线粒体是绝大多数生物体内不可缺少的细胞器.除为细胞的活动产生大量能量外,其还参与细胞分化、细胞内信息传递及调控细胞凋亡等生物过程.线粒体凋亡途径是上游信号分子作用于线粒体,打开调控细胞的生死开关即存在于线粒体内膜和外膜上的线粒体膜通透性转换孔,导致线粒体内凋亡相关因子进入细胞质,激活胱天蛋白酶系统,从而引起细胞凋亡的过程.线粒体已被证实是在细胞凋亡过程中起核心作用的亚细胞结构.而肝脏作为生物体内合成分解代谢的重要器官,与线粒体的结构功能关系密切.且线粒体凋亡途径在肝脏疾病的发生、发展过程中起至关重要的作用.故未来靶向干预该途径中的相关分子,可为各类肝脏疾病的临床治疗提供新方法.
-
中药对中枢神经退行性疾病信号通路影响的研究进展
随着对中药防治中枢神经系统衰老相关疾病发病机制的深入探讨,发现中药通过信号分子Wnt、β-catenin、TCF/LEF、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB),细胞色素C(cytochrome,Cyt-C)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)家族蛋白、Caspases酶等,调节Wnt/β-catenin、PI3K/Akt、线粒体凋亡信号通路,发挥对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)、帕金森病(Parkinson's disease,PD)、脑缺血等衰老相关中枢神经系统疾病的防治作用.该文着重从以上三条信号通路,对中药在中枢神经系统退行性疾病的防治现状做一阐述.
-
肝细胞线粒体凋亡对梗阻性黄疸肝损伤的机理探讨及通腑泻热方的干预研究
目的:研究梗阻性黄疸患者肝损伤与肝细胞线粒体凋亡的关系,探讨中医通腑泄热法在梗阻性黄疸中对肝细胞线粒体的保护作用机理.方法:选取清洁健康级Wistar大鼠28只,随机将其分为4组,分别为实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和对照组,各7只,建立可逆性梗阻性黄疸模型,按照实验方案对对照组与实验Ⅰ组给予生理盐水灌胃,实验Ⅱ组给予益肝灵(20mg/ml)灌胃,实验Ⅲ组则给予通腑泄热方灌胃.建模及干预完成后对每组实验鼠肝组织进行采集,检测指标包括MDA、8-OHdG、mtDNA的变化.结果:建模成功后各组实验鼠氧化损伤指标MDA、mtDNA含量均较对照组明显降低(P＜0.05),8-OHdG均较对照组明显升高(P＜0.05);对照组和实验Ⅰ组干预后MDA、8-OHdG、mtDNA含量较同组干预前无明显变化(P＞0.05);实验Ⅱ组和实验Ⅲ组干预后MDA、8-OHdG、mtDNA含量较干预前均有所改善(P＜0.05),且实验Ⅲ组改善程度更明显,与实验Ⅰ组和实验Ⅱ组比较(P＜0.05).结论:梗阻性黄疸可引起肝细胞线粒体的凋亡或功能损伤,从而导致肝损伤和功能下降,通腑泄热法可有效预防和改善氧化损伤,在梗阻性黄疸肝损伤治疗中具有重要的作用.
-
S1通过线粒体途径诱导人卵巢癌细胞凋亡
目的 探讨小分子化合物S1对人卵巢癌(SKOV3)细胞线粒体凋亡的影响.方法 通过倒置显微镜观察S1作用卵巢癌细胞的形态学改变;不同剂量S1作用8h,JC-1染色检测线粒体膜电势变化;Western印迹检测线粒体凋亡相关蛋白细胞色素(Cyto)c、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果 与对照组相比S1作用24h能明显诱导SKOV3凋亡;流式细胞术结果显示,S1引起SKOV3细胞线粒体膜电势降低(P＜0.05,n=3);蛋白水平检测S1作用8h能明显抑制SKOV3细胞Bcl-2蛋白表达,胞浆Cyto c和Bax蛋白表达增高(P＜0.05,n=3).结论 S1可能通过抑制Bcl-2蛋白诱导人卵巢癌细胞线粒体凋亡.
-
辽东楤木叶总皂苷对卵巢癌细胞的抑制作用及其对线粒体凋亡途径的影响
目的:探讨辽东楤木叶总皂苷(TALAS)对上皮性卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用及其可能的作用机制.方法:MTT法检测TALAS对SKOV3细胞的抑制作用,绘制抑制曲线;Hoechst33258染色观察不同浓度作用后,SKOV3细胞核形态上的变化;蛋白印迹实验检测药物作用后线粒体凋亡通路中关键蛋白质的表达变化.结果:TALAS对SKOV3细胞具有明显的抑制作用,且呈现时-量依赖性;不同浓度TALAS作用后,SKOV3细胞核出现:核固缩、核碎裂等变化;用药前后,bcl-2蛋白表达随药物浓度增加而下降,bax、Apatf-1、cyt-c蛋白质表达水平升高,且具有浓度依赖性.结论:TALAS可促使SKOV3细胞发生凋亡,其作用机制可能与其激活线粒体凋亡途径有关.
-
MS-275对胃腺癌细胞抑制作用及其机制研究
目的采用分子靶向药物治疗胃癌是近年研究热点。探讨组蛋白去乙酰化酶抑制因子MS-275通过多种途径选择性杀伤人胃低分化腺癌细胞株SGC-7901的机制。方法10～100μmol/L 药物浓度梯度的MS-275分别与SGC-7901、人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1共培养24 h后，采用WST-1法检测SGC-7901及GES-1细胞存活率，流式细胞仪检测分析SGC-7901细胞线粒体膜电位变化，Western blot、实时荧光定量聚合酶链反应（RTQ-PCR）分别检测处理后胃癌细胞中p21、p27、p57、cyclin B1、cyclin D1基因及相应蛋白表达情况。结果 MS-275可使SGC-7901细胞存活率降低（P＜0.05），其作用随药物浓度增大更明显，对GES-1细胞无显著影响；MS-275可降低SGC-7901细胞线粒体膜电位（P＜0.05）；MS-275显著提升p21、p27、p57基因及相应蛋白相对含量，同时降低cyclin B1、cyclin D1基因及其蛋白相对含量（P＜0.05）。结论 MS-275可选择性杀伤胃腺癌细胞SGC-7901，这一作用可能是通过线粒体凋亡途径及调控细胞周期相关基因和蛋白表达实现的。
-
高频电刺激HL-1细胞对线粒体凋亡途径的影响
目的 探讨高频电刺激HL-1细胞对线粒体凋亡途径的影响.方法 Western blot检测对照组(HL-1细胞)和刺激组(25 Hz高频电刺激HL-1细胞24 h)B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶(Caspase)9和Caspase-3的蛋白表达量,细胞线粒体分离试剂盒分离对照组和刺激组HL-1细胞的线粒体和细胞质,Western blot检测细胞色素C(Cyt C)在线粒体内外的表达.结果 与对照组比较,刺激组Bcl-2表达下调,Bax、Caspase-9及Caspase-3表达上调(P＜0.01),线粒体内的Cyt C表达下调,而细胞质内的Cyt C表达上调(P＜0.01).结论 高频电刺激HL-1细胞能够通过激活细胞内的线粒体凋亡途径来促进HL-1细胞凋亡.
-
JNK信号通路与胰岛β细胞凋亡
c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路是近几年发现的与细胞凋亡机制、应激反应以及糖尿病发生与发展关系密切的通路之一,其生物学效应对胰岛β细胞的调节至关重要.根据刺激源的不同,JNK会介导3条凋亡通路的激活,包括死亡受体通路、线粒体凋亡通路以及内质网应激通路,各通路之间以某个因子或刺激源而产生串扰关系.活性氧作为应激源可以激活JNK信号通路,从而激活相关凋亡通路.因此,对JNK信号通路的各个节点进行调控,极有可能减少胰岛β细胞凋亡数量,保护胰腺组织完整性,降低糖尿病及并发症的风险.
关键词： C-Jun氨基端激酶 凋亡 活性氧 线粒体凋亡 内质网应激 -
ABT-737对顺铂耐药的乳腺癌细胞的杀伤作用及机制
目的 研究ABT-737是否能提高顺铂对耐药乳腺癌细胞株MDA-MB-231/R的杀伤活性并探讨其机制.方法 采用顺铂梯度处理法构建顺铂耐药乳腺癌细胞株MDA-MB-231/R;采用MTT法检测ABT-737是否能增强顺铂对MDA-MB-231/R的杀伤活性;Western blot试验检测常规MDA-MB-231细胞及MDA-MB-231/R细胞Bcl-2,Bcl-xl及Bcl-w的表达水平;采用流式细胞术检测ABT-737联合顺铂对MDA-MB-231/R细胞的凋亡诱导效应及对线粒体膜电位的影响.结果 顺铂对MDA-MB-231/R细胞的杀伤活性显著低于MDA-MB-231.联合ABT-737治疗后,顺铂对MDA-MB-231/R细胞的杀伤活性显著提高,与MDA-MB-231细胞相比,MDA-MB-231/R细胞的Bcl-2抗凋亡蛋白家族成员Bcl-w表达水平显著上调,但Bcl-2和Bcl-xl表达水平不受影响.ABT-737显著增强顺铂对MDA-MB-231/R细胞线粒体膜电位的损伤,促进细胞色素C的释放,进而诱导MDA-MB-231/R细胞发生凋亡.结论 ABT-737通过抑制Bcl-w的功能促进顺铂对耐药乳腺癌细胞的凋亡诱导效应.
关键词： ABT-737 MDA-MB-231/R Bcl-w 线粒体凋亡 -
高脂通过线粒体通路诱导H9c2心肌细胞损伤
目的 探讨高脂通过线粒体凋亡通路对H9 c2心肌细胞的损伤作用.方法 棕榈酸(0～0.4 mmol·L-1)刺激H9c2心肌细胞24 h和0.2 mmol·L-1棕榈酸刺激H9c2心肌细胞(0～48 h);MTT法评估细胞生长状态;活性氧试剂盒检测细胞内活性氧水平;凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况;线粒体膜电位试剂盒检测线粒体膜电位变化;免疫印迹法检测细胞内线粒体凋亡相关蛋白Cyt-C、Cleaved casepase-3、Bax、Bcl-2表达水平.结果 棕榈酸刺激H9c2心肌细胞24 h,棕榈酸0.2、0.4 mmol·L-1组细胞增殖率均出现明显下降;细胞内活性氧水平逐渐升高,线粒体膜电位下降,细胞凋亡增加.棕榈酸(0.2 mmol·L-1)刺激H9c2心肌细胞24、36、48 h均引起细胞增殖率明显下降.棕榈酸(0.4 mmol·L-1)刺激H9c2心肌24 h,线粒体相关蛋白Cyt-C、Cleaved casepase-3、Bax表达均明显增高(P<0.05),而Bcl-2明显降低(P<0.05).结论 线粒体凋亡信号通路可能对高脂所致H9c2心肌细胞损伤起重要作用.
-
线粒体凋亡通路在棕榈酸诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用
目的 探讨线粒体凋亡通路在棕榈酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HU-VECs)凋亡中的作用.方法 不同浓度棕榈酸(0.1、0.2、0.4、0.8 mmol·L-1)作用HUVECs(0、12、24、48 h),MTT法检测HUVECs增殖能力;免疫荧光法检测HUVECs细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的表达水平;免疫印迹法检测HUVECs中AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax等线粒体凋亡通路蛋白的表达水平;TUNEL法检测细胞内凋亡水平.结果 0.4 mmol·L-1棕榈酸作用HUVECs 24 h时,细胞增殖率明显降低;AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3、Bax/Bcl-2的水平明显升高(P<0.05),细胞凋亡水平明显增高(P<0.05);线粒体通透性抑制剂环孢素A(ciclosporine A,CsA)预处理组HUVECs凋亡水平明显下调(P<0.05).结论 棕榈酸所致血管内皮细胞损伤的发病机制可能与线粒体凋亡相关通路密切关联,此研究对脂毒性心肌损伤的防治有重要意义.
-
纳米氧化锌对SH-SY5Y神经细胞毒性损伤作用及分子机制研究
目的 研究纳米氧化锌(ZnO NPs)对SH-SY5Y人神经细胞的毒性作用及其可能的分子机制.方法 MTT法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞存活率的影响;TUNEL法检测ZnO NPs对SH-SY5Y细胞的形态学影响;流式细胞术观察ZnO NPs对SH-SY5Y细胞周期的影响及凋亡诱导作用;Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Survivin的mRNA水平变化;Western blot测定Bcl-2、Bax、Survivin及Cyto-C的蛋白表达并进行光密度定量.结果 ZnO NPs显示出对SH-SY5Y的细胞毒性,呈现浓度依赖性;15 mg·L-1 ZnO NPs作用后,TUNEL检测呈阳性反应;与未处理组相比,SH-SY5Y细胞中细胞周期阻滞于G1期并产生凋亡(P<0.05);抗凋亡基因Bcl-2、Survivin的mRNA水平和蛋白水平下调(P<0.05),促凋亡蛋白Bax的mRNA水平和蛋白水平上调,同时细胞Cyto-C的蛋白表达上调(P<0.05).结论 ZnO NP下调SH-SY5Y的细胞存活率,诱导细胞周期阻滞和凋亡产生,显示出对神经细胞的毒性损伤作用,其机制与激活线粒体凋亡通路及抑制Survivin的转录和表达有关.
-
新藤黄酸诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用研究
目的 研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制.方法 采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞的凋亡率,采用PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞周期的影响,采用Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞凋亡率的影响,采用Western blot检测凋亡相关蛋白表达的影响.结果 MTT检测结果表明,新藤黄酸对卵巢癌细胞A2780的增殖具有抑制作用,且抑制作用具有明显的剂量依赖性;fluo-3AM染色荧光显微镜下观察,可见各浓度新藤黄酸均能升高A2780细胞内钙离子水平,且呈现浓度依赖关系;PI染色流式细胞仪检测结果表明,新藤黄酸能阻滞A2780细胞于G0/G1期;Hoechst 33342染色和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测结果表明,随着新藤黄酸浓度的增加,A2780细胞凋亡率呈现增高的趋势;Western blot检测结果表明,新藤黄酸可以促进凋亡相关蛋白p53、细胞色素C以及Caspase-9表达水平升高.结论 新藤黄酸具有抑制卵巢癌A2780细胞增殖和诱导肿瘤细胞发生线粒体凋亡的作用.
关键词： 新藤黄酸 卵巢癌细胞A2780 线粒体凋亡 -
DEAB促进肝癌细胞凋亡及增强其对ADM敏感性的机制研究
目的 探讨ALDH抑制剂DEAB致肝癌细胞凋亡及增强其对ADM化疗敏感性的具体机制.方法 通过DEAB干预肝癌细胞系HepG2和正常肝细胞系L02以及与经ADM处理的HepG2和L02细胞.通过流式细胞仪检测各组细胞中活性氧(ROS)的表达变化及Annexin-V和PI双染后细胞凋亡量的变化.通过Realtime PCR及western blot方法检测各组细胞中Bcl-2、Bax、ALDH1以及MDR1基因和蛋白的变化.结果 DEAB干预HepG2细胞后,致使其ROS表达增强、凋亡量增加,ALDH1基因和蛋白表达无明显变化,Bcl-2、MDR1基因和蛋白表达下调,Bax基因和蛋白表达上调.正常肝细胞系L02无以上变化.结论 抑制ALDH可致肝癌细胞系HepG2凋亡,并增强其对ADM的化疗敏感性.而对正常肝细胞系L02无此作用.
