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大黄鱼过敏原的提取、分离及免疫学特性鉴定
目的 提取、分离大黄鱼特异性过敏原成分,并对其免疫学特性进行鉴定.方法 采用Coca'8提取液提取大黄鱼蛋白;十二烷基磺酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析大黄鱼总蛋白的组成,以对鱼过敏患者阳性血清为一抗,Western-Blotting分析大黄鱼中的过敏原;阴离子交换层析对大黄鱼总蛋白进行初步分离,Western-BIotting分析各个组份的免疫学活性.结果 大黄鱼粗浸液蛋白分子量在8-116kD之间;westem-B10tting检测到分子量为54、29、27和14kD的过敏原;通过离子交换层析分离,过敏原蛋白的相对含量有显著提高,且大多都保持原有的免疫学活性.结论 研究发现了大黄鱼中多种过敏原并对其免疫学活性进行了鉴定.
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肿瘤抗原和肿瘤疫苗的研究
提取肿瘤细胞的表面抗原及各种抗原间结构的比较将成为今后研究的热点.理想的肿瘤疫苗很可能包括多个肿瘤特异性抗原和/或多个肿瘤非特异性抗原.对肿瘤抗原的研究不仅对免疫应答的机制和肿瘤免疫逃避机制具有重要的理论意义,而且对肿瘤的发病学、诊断、治疗及疫苗的制备也具有重要的应用意义.寻找肿瘤抗原的方法可分为3类:(1)基因工程制备抗原.经典的技术有基因工程与抗体技术和基因工程与T细胞克隆技术两种.(2)天然抗原的提取与纯化.根据MHC-Ⅰ类分子-肽复合物表达于肿瘤细胞表面这一现象,膜结合蛋白的纯化就显得尤为重要.(3)合成肽抗原的制备.另外,各种肿瘤疫苗均有一定效果,但其抗原性仍不理想.理想的肿瘤疫苗应有多向作用靶点.
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红心萝卜中莱菔烷提取及纯化方法建立
莱菔硫烷(sufloraphane,SFN)是一类要存在于十字花科蔬菜中的异硫氰酸盐类物质.研究证实,莱菔硫烷是1种多功能酶诱导物,可在没有明显改变细胞色素合成的情况下,提高Ⅱ相酶的相对含量,在肿瘤发生的多个阶段发挥抑癌作用[1].试验证明,莱菔烷对结肠癌、乳腺癌及大肠癌等均有很好的防治效果[2-3].本研究根据早期蔬菜中莱菔硫烷含量测定实验,结合经济因素及北方地域特点等综合考虑,选定红心萝卜为本实验主要原料.红心萝卜又称心里美萝卜,十字花科属,原料易得,价格便宜,而且其中的莱菔硫烷含量也很高.本实验旨在建立红心萝卜中莱菔硫烷提取与纯化方法,为其他十字花科蔬菜中莱菔硫烷的制备提供参考数据.
关键词： 莱菔硫烷 提取与纯化 正交设计 高效液相色谱(HPLC) -
桂花中黄酮类物质提取与纯化的研究
目的:探讨桂花中黄酮类物质佳提取与纯化方法,为桂花开发提供一条新的途径.方法:采用常规提取法对桂花中的黄酮类化合物进行了提取与纯化研究,比较在不同pH值下提取方法的提取率.结果:pH＝2及pH＝4时,黄酮粗品提取率分别为5.01%,5.61%;苷元提取率分别为0.13%,0.05%.结论:此法操作简单,可对桂花中的黄酮类化合物提取与纯化进行工业化生产,具有较广的应用价值.
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牛摩拉氏菌中国地方株限制性核酸内切酶的提取与纯化
目的:为探讨牛摩拉氏菌中国地方株MABL8011限制酶的存在.方法:采用改进的Gelinas R E等方法对MABL8011菌株的培养物分别进行超声裂解、离心、盐析、BioGel-A0.5 M和磷酸纤维素P11柱层析,获得可切割λDNA和pBR332DNA与国际标准酶MboI切点一致的酶提取物.结果:在改进的条件下,3 000 ml培养物,可获得7 200U MboI,纯化率为23.2%,酶产出量高于文献报导值.结论:表明牛摩拉氏菌中国地方株MABL8011确含MboI限制性内切酶,完全可用于基因结构分析.
关键词： MboI限制酶 限制性核酸内切酶 提取与纯化 牛摩拉氏菌中国地方株 -
人血小板TGFβ的提取纯化及鉴定
目的:建立一种快速、简单、实用的从人血小板提纯转化生长因子β(TGF β)的方法.方法:改良的白膜回浆法提取人血小板,酸醇抽提裂解法提取血小板中的TGF β及2次凝胶过柱法纯化TGF β.所有提取及纯化步骤均在酸性条件下进行以防止管壁对TGF β的吸附和生物活性的影响;使用了易挥发的溶媒和缓冲液便于冻干时去除.结果:SDS-PAGE电泳及薄层分析显示纯化后的TGF β纯度达到89.38%,在EGF参与下10ng/ml浓度的TGF β可刺激NRK细胞在软琼脂培养中呈多克隆样生长.结论:运用本方法提取的TGF β纯度高,生物活性强;与以前方法相比具有成本低廉、提取工艺简单、快速实用的特点.
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马齿苋黄酮提取工艺及其分离纯化和抑菌作用分析
目的:探究马齿苋黄酮提取工艺的条件及对其抑菌作用的研究.方法:马齿苋黄酮提取的过程大致为:首先采用超声波法粗提马齿苋黄酮液,再采用正交试验对粗提液进行优化,后经大孔吸附树脂对优化液进行纯化,再通过纸片扩散法对纯化后的黄酮进行抑菌试验.结果:我们研究得出在料液比为1:25、温度50℃、时间40min、功率200W是马齿苋黄酮佳的提取条件,在此条件下,黄酮的得率为3.6%.抑制强弱顺序为:酵母菌>黑曲霉>醋酸菌>大肠杆菌.
