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汉坦病毒核壳蛋白重组抗原的制备和基因分型研究
根据肾综合征出血热病毒(HFRSV)抗原检测、分型和流行病学目前还存在许多待解决的问题,研制了HFRSV的核衣壳基因工程抗原,建立了逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和逆转录-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)分型方法.
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肿瘤抗原和肿瘤疫苗的研究
提取肿瘤细胞的表面抗原及各种抗原间结构的比较将成为今后研究的热点.理想的肿瘤疫苗很可能包括多个肿瘤特异性抗原和/或多个肿瘤非特异性抗原.对肿瘤抗原的研究不仅对免疫应答的机制和肿瘤免疫逃避机制具有重要的理论意义,而且对肿瘤的发病学、诊断、治疗及疫苗的制备也具有重要的应用意义.寻找肿瘤抗原的方法可分为3类:(1)基因工程制备抗原.经典的技术有基因工程与抗体技术和基因工程与T细胞克隆技术两种.(2)天然抗原的提取与纯化.根据MHC-Ⅰ类分子-肽复合物表达于肿瘤细胞表面这一现象,膜结合蛋白的纯化就显得尤为重要.(3)合成肽抗原的制备.另外,各种肿瘤疫苗均有一定效果,但其抗原性仍不理想.理想的肿瘤疫苗应有多向作用靶点.
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基因重组丁型肝炎病毒抗原的制备与检测
丁型肝炎病毒是一种缺陷性RNA病毒,其感染发病需在乙型肝炎病毒(HBV)存在时才能发生[1],这种重叠性感染通常导致暴发性肝炎、进行性慢性活动性肝炎及肝硬化[2].采用HDV感染实验动物,提取HDV抗原制备诊断HDV试剂盒[3,4],方法复杂,周期长,实验动物进口不便.为解决HDVAg的来源,我们构建了表达HDV的大肠杆菌工程菌株.
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人精子膜抗原的制备及其在人精子抗体检测中的应用
精子表面的抗原与受精和胚胎的早期发育有密切关系,其中部分抗原能引起机体产生相应的抗体,从而影响到精子的受精功能和胚胎的发育,导致免疫性不育.因此对人类精子膜抗原的研究有助于从蛋白质水平来揭示受精的过程和不育的机制,为不育特别是免疫性不育的治疗及免疫避孕开辟一条新途径.因为精子膜比较坚固,难以破碎和溶解,不易得到较高浓度的精子膜抗原.而且即使精子膜被破碎溶解后,往往有许多种抗原成分混在一起,为了提取一种成分,常需反复分离.
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肝肾微粒体1型抗原的制备及纯化
在1973年,Rizzetto用间接免疫荧光法发现了与近端肾小管和肝细胞胞浆反应的自身抗体[1].这些针对细胞内质网反应的自身抗体被命名为肝肾微粒体抗体(LKM),随后鉴定出LKM抗体有3种亚型, LKM-1、LKM-2和LKM-3.LKM-1是Ⅱ型自身免疫性肝炎(AIH)的血清学标志[2].
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日本血吸虫病混合型诊断抗原的制备及实验室检测
血吸虫病目前依然是严重的全球性社会公共卫生问题[1],WHO 估计全球有6 亿人受到血吸虫感染的威胁,2 亿人受到感染,1.2 亿人出现临床症状,其中2 千万人病情严重,年死亡人数多达数十万[2~4],我国是受日本血吸虫病危害为严重的国家之一[5],因此早期诊断血吸虫病对防治尤为重要.当前免疫诊断血吸虫病使用多的还是单一的诊断抗原,很难达到同时具有早期、敏感、特异性诊断的要求,因此制备一种具有上述要求的混合型诊断抗原试剂显得尤为重要,本研究制备了虫卵和成虫的混合型粗抗原,并进行了实验室检测,现将结果报告如下.
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云南山区崀峨乡有钉螺无血吸虫病区的研究
据不完全统计,我国存在有钉螺孳生而无血吸虫病流行(简称有螺无病)地区分布于10省、市、自治区的88个县(市),约735个乡(镇),而我省有7个县18个村[1]。为证实永胜县峨乡是否存在有螺无病现象,并分析其形成原因,本文于1996年对峨乡血吸虫病流行的病情、螺情等方面进行了系统调查,现将研究结果报告如下。1 方法1.1 人群病情调查1.1.1 调查对象峨乡4~60岁人群共965人。1.1.2 抗原的制备采用云南日本血吸虫尾蚴感染成功后的家兔肝脏,按常规方法,制备石蜡包埋福尔马林固定含有大量血吸虫卵肉芽肿肝组织切片,做成厚6μm的石蜡切片,存于4℃冰箱备用。1.1.3 诊断血清羊抗人IgG荧光抗体购自上海生物制品研究所。其工作浓度为1:8,批号为960201。1.1.4 受检血清从调查对象的耳垂或手指采血制成两个滤纸干血滴(每个血滴直径1cm),凉干后置于4℃冰箱备用。IFAT法:按[2]进行。1.1.5 粪便检查对IFAT法检测阳性者,按常规粪便检查法进行。1.2 保虫宿主感染情况调查对峨血吸血病保虫宿主的粪便进行孵化(顶管孵化法)。其中包括马9匹,黄牛8头、水牛28头、猪88头、骡14头、驴13头、羊四群。1.3 螺情调查1.3.1 1996年8月通过系统抽样和环境抽样方法对峨钉螺分布情况进行调查。依据螺点分布理论[3],共调查145个条(块),18169.5m2。1.3.2 对捕获的钉螺进行解剖和逸螺,以检查有无血吸虫感染。