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如何正确进行ELISA操作
临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式,测定操作非常简单,一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步骤的不当都会影响测定结果,且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚.现分述如下.
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输液器存有微孔造成空气栓塞1例
一次性输液器具有灭菌好,隔离性强和使用方便的优点,深受广大医护人员及患者欢迎.然而,在临床应用中,我们却发现个别输液器在输液管或墨菲氏壶上存有微孔或裂缝,一旦漏气未被发现即可给患者带来危害,我们近期遇有1例因输液器存在微孔而造成空气栓塞的患者,现加以报告,以引起人们的重视.
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激光心肌血管重建术研究进展
激光心肌血管重建术(TMLR)是目前国内外正在研究的一种治疗心肌梗塞的新方法,是通过用激光在缺血的心肌区打数个贯穿心室壁的微孔来把心腔中的氧合血引向缺血的心肌,从而使心肌缺血情况得以改善,达到治疗和预防的目的[1].1981年,Mirhoscini首次用CO2激光在心肌和左心室腔间造了许多直径数微米的通道[2],引起国内外学者的重视.1983年在动物实验的基础上,首例临床CO2激光心肌血管重建术获得成功,自此以后,有多种激光用于动物激光心肌血管重建的临床试验,包括CO2、氯离子、Nd:YAG、Ho:YAG、准分子等激光器.
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乙型肝炎HBV DNA/补体双特异性免疫复合物的检测
HBV DNA/C1q-TCIC和HBV DNA/B-TCIC的阳性率年均以慢性乙型肝炎高.以羊抗人C1q和B因子IgG为捕提抗体,分别用以捕捉通过经典和旁路途径激活抗体的Dane颗粒抗原抗体免疫复合物中的C1q和B因子,再利用引物的特异性和PCR的强大扩增能力,对捕捉物中的HBVDNA进行微孔法反向杂交检测,时间短且效果明显,是一种快速检测手段.
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中空纤维反应器管外腔胶原凝胶混合肝细胞培养
早期的生物人工肝是将培养液混悬肝细胞灌入中空纤维反应器管外腔,一般效果不好.后改将培养液混悬肝细胞或微载体肝细胞灌入中空纤维管内腔或先用胶原液在中空纤维管内腔壁涂层,再将培养液混悬肝细胞灌入中空纤维管内腔;使患者血(血浆)流过管外腔,通过中空纤维膜上的微孔,管内腔和管外腔发生物质交换,使血中的毒物被肝细胞解毒[1-2].近年来Excorp Medical公司推出将胶原凝胶混合肝细胞灌注中空纤维管外腔的生物人工肝反应器,效果尚待验证[3].本研究将胶原凝胶混合肝细胞灌注中空纤维反应器管外腔培养(凝胶混合法),与将培养液混悬肝细胞灌注腔壁涂有胶原层的中空纤维管外腔培养(单层凝胶法)对照,验证肝细胞功能.
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WFZ型微孔活塞式分装机
WFZ型微孔活塞式分装机是江苏永和制药机械有限公司在面对制药装备科技发展迅速,产品持续更新,市场和用户对制药设备提出更新更高的要求的发展趋势下,在吸收国外制药装备先进制造技术的基础上,通过广泛的市场调研、技术论证和经反复试验,成功研发的新一代制药包装设备.
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激光微孔化猪脱细胞真皮基质的设计、制备及同步移植实验
目的 构建一种新型真皮替代物——激光微孔化猪脱细胞真皮基质材料(LPADM)并验证其修复全层皮肤缺损的效果.方法 取新鲜健康小白猪断层真皮,一部分经高钠-SDS法脱细胞获得脱细胞真皮基质(ADM),另一部分则先行激光打孔再经脱细胞获得LPADM;检测LPADM的物理性状.在SD大鼠(n=30)背部制作2.0 cm ×2.0 cm的全层皮肤缺损创面(n=4),分别采用LPADM自体中厚皮片(L组)和无孔ADM自体中厚皮片(A组)复合移植及自体全厚皮片(F组)和中厚皮片原位移植(C组)修复.分别于术后第3、5、7、10、14天,每组随机选取6只大鼠,观察创面皮片成活情况,处死动物后采集创面组织行组织学检查.结果 制备的LPADM呈瓷白色,柔软有光泽;显微镜下观察未见细胞残留.移植术后第3天,组织学检查发现L组创面组织有内皮细胞围成的空腔样结构;术后第3、5、7、10天,L组和C组创面移植皮片成活良好,L组血管样结构中已可见红细胞;A组皮片起泡甚至发黑坏死;F组皮片部分起小泡,但泡皮下基底红润.术后第14天,L组真皮微孔中可见大量血管形成,L组、C组和F组移植皮片全部或基本存活,创面愈合率分别为(99.10±0.66)%、(99.25 ±0.23)%、(97.07±1.32)%,差异无统计学意义(P>0.05);A组皮片全部坏死脱落,创面愈合率为(27.46±2.05)%,显著低于其他各组(P<0.01).结论 构建的新型激光微孔化猪脱细胞真皮基质,同步复合自体皮移植,移植成功率高,较快实现早期血管化,为一种较理想的真皮替代物.
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干眼模型兔角膜层间植入PHEMA、PMMA后角膜组织学及超微结构的改变
目的 观察微孔聚甲基丙烯酸-β-羟乙酯[Poly(β-hydroxyethyl methacrylate)],PHEMA和微孔聚甲基丙烯酸甲酯(polymethyl methacrylate,PMMA)材料植入干眼模型兔角膜层间后引起的组织学和超微结构的改变,评价这两种材料的生物相容性,为进一步的研究提供依据.方法 干眼模型兔12只,随机分为2组,分别在右眼造模眼的角膜层间植入微孔PHEMA、微孔PMMA材料,分别于术后0.5月、1月、2月处死动物,行HE染色光学显微镜检查和透射电镜检查.结果 实验兔的眼部刺激症状,均在术后短期内迅速缓解;术后0.5月,材料的孔隙内可见少量长梭形的角膜基质细胞和成纤维细胞;术后2个月,角膜基质细胞和成纤维细胞继续长入材料的孔隙内并向材料的中心迁徙,同时合成胶原纤维.结论 微孔PHEMA、微孔PMMA材料植入干眼模型兔角膜层间后对组织刺激性较小,具有良好的生物相容性.
关键词: 微孔 干眼 生物相容性 聚甲基丙烯酸-β-羟乙酯 聚甲基丙烯酸甲酯 -
兔角膜板层植入PHEMA人工角膜支架的实验研究
目的通过体内实验研究聚甲基丙烯酸-β-羟乙酯(poly 2-hydroxyethl methecylate,PHEMA)人工角膜支架与角膜的生物愈合特性,并比较两种不同孔径大小的材料中角膜组织生长情况.方法将直径6 mm,厚0.2 mm,孔径50~100 μm及100~150 μm的PHEMA圆形薄片植入兔角膜层间,分别于半月,1个月,2个月进行光镜和电镜检查.结果术后1月胶原纤维及角膜成纤维细胞即可长入PHEMA微孔中,未见组织溶解、坏死及植入物脱出.孔径50~100 μm的支架内胶原纤维比孔径100~150 μm的支架多.结论 PHEMA具有良好的生物相容性,孔径50~100 μm的支架比孔径100~150 μm的支架更易于角膜组织愈合.
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三种牙面处理剂对牙齿与复合树脂粘结强度影响的研究
复合树脂材料与牙面的粘结需要牙面处理剂具有既能使牙釉质产生足够深度的微孔,又不造成牙本质过度脱矿的性质.形成的粘结面有适宜的机械性和化学性的固位结构,从而获得复合树脂与牙面的牢固粘结[1,2].本研究采用磷酸、24%乙二胺四乙酸(EDTA)、24%EDTA+磷酸三种不同处理剂处理牙面,测定其粘结强度,并比较三种牙面处理剂对牙釉质和牙本质与复合树脂粘结强度的影响.
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Neuro-Patch硬膜替代材料在脊髓外科的临床应用(附30例报告)
硬脑膜替代材料在颅脑神经外科已有广泛应用[1,2],但在脊髓神经外科领域,有关新型合成材料修补硬脊膜缺损的研究尚少.2000至2007年,作者尝试使用德国贝朗公司生产的Neuro-Patch合成微孔硬脑膜替代材料修补硬脊膜30例.现将临床应用的初步经验报告如下.
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离子通道(14)
离子通道是细胞膜上一种特殊的亲水性蛋白质结构的微孔道,其跨越细胞膜的双层脂膜结构,进而能够沟通细胞内外物质的交流,是神经、肌肉细胞电活动的物质基础.
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微孔反应板培养法在阴道毛滴虫实验诊断中的应用
阴道毛滴虫感染是妇科常见病之一,并被列为性传播疾病.本病常用实验诊断方法有涂片法和培养法.近年,笔者对培养法进行了一些改进,以微孔反应板代替培养皿,并对培养液成分进行改进,效果比较理想.
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Sysmex系列F-800血细胞分析仪少见故障一例分析及排除
Sysmex系列F-800血细胞分析仪是我院在1996年4月购置的一台二分类血细胞分析仪;该仪器性能稳定,检测准确、重复性好,使用至今,无大故障.工作中我们积累了丰富的维护维护维修经验,特别是处理堵孔问题我们已有一套方法.堵孔原因很多,如:在日常工作中由于采血时血液与抗凝剂未能及时混匀而出现血凝块、蛋白质沉积、棉花纤维、尘埃微粒、红细胞碎片积聚等等都可致堵孔.我们在日常工作完成后通常连续做2~3次空白进行清洗,然后用10%次氯酸钠溶液浸泡微孔,很少出现堵孔现象.但这次堵孔报警少见,现报导如下.
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温度对阻抗法血细胞计数的影响
电阻抗法原理(princilple of electrical impedance):血细胞相对于其悬浮的电解质稀释液是非导体,在通过计数微孔时占据同等体积的稀释液引起电阻变化,产生相应的电压脉冲信号,依据脉冲信号的数目和大小对血细胞进行计数和体积测定.电阻抗法血液分析仪,以其结构简单、准确度高、成本低等优点被国内外广泛应用,但影响因素较多,诸如:仪器自身阈电压大小,微孔电流大小,稀释液的渗透压、离子强度、计数细胞的离子大小;环境温度等[1],为了解温度对血细胞计数结果的影响,我们做了如下对比试验.
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滤膜的完整性测试-起泡点试验
微孔滤膜过滤法作为一种重要的除菌方法,已在制药工业中广泛应用,除菌过滤器除了需要做滤器溶出物检查、滤器清洁度检查以及药液适应性试验外,还应做滤膜完整性测试.
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激光微孔冷冻异体真皮与自体刃厚皮片复合移植的试验研究
目的 制备大鼠激光微孔冷冻异体真皮,探讨其与自体刃厚皮片复合移植在全层皮肤缺损的应用.方法 在大鼠背部制作全层皮肤缺损创面,激光微孔冷冻组采用激光微孔冷冻异体真皮+自体刃厚皮片,网状脱细胞组采用网状异体脱细胞真皮+自体刃厚皮片,每组30只大鼠.对照组单纯移植自体刃厚皮片,10只大鼠;观察移植后2周、4周、8周各组创面愈合情况,计算移植物成活率,并行组织学观察.结果 移植后2周、4周、8周,激光微孔冷冻组与网状脱细胞组移植物成活率比较差异无统计学意义(P>0.05).组织学观察见各组上皮化良好,胶原纤维排列整齐,基底膜结构完整.结论 激光微孔冷冻异体真皮+自体刃厚皮片修复全层皮肤缺损能够抑制瘢痕增生,改善创面愈合质量.
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钛合金假体表面涂层微孔孔径和孔隙率对骨整合的影响
目的 探讨钛合金假体表面涂层微孔孔径和孔隙率对骨整合的影响.方法 采用3D打印技术打印3种不同微孔孔径和孔隙率的钛合金假体,第一种假体表面微孔孔径(260.5±34.5)μm、孔隙率68.1%,第二种孔径(553.2±16.7)μm、孔隙率79.2%,第三种孔径(749.8±15.0)μm、孔隙率89.0%,分别标记为a、b、c型假体.选择新西兰大白兔27只,随机分为A、B、C组各9只,分别将a、b、c型假体植入兔股骨髓腔.术后4、8、12周,每组随机处死3只,通过Micro CT扫描观察各组成骨情况并测量骨体积分数(BV/TV)、组织矿物密度(TMD),通过拔出试验检测各组大拔出力.结果 术后4周,各组内植物均在位,微孔内及周围呈低信号,无明显沉积骨质;拔出标本仅远端有少量未成熟骨质,表面多覆盖纤维结缔组织及陈旧血凝块,处理标本时可轻易洗去;三组BV/TV、TMD及大拔出力比较差异均无统计学意义(P均>0.05).术后8周,各组微孔内及周围均见部分中密度影,为未成熟骨质,A组相对较多;三组拔出标本远端均有明显骨质覆盖,A组假体体部表面可见沉积骨质;三组间BV/TV、TMD比较差异均无统计学意义(P均>0.05),但A组大拔出力明显高于B、C组(P均<0.05).术后12周,各组微孔内及周围均见高密度影,为沉积骨质,且伸入微孔内部,形成锁结,A组多于B、C组,无明显骨溶解;A组整个假体表面均匀覆盖较多骨质,B、C组远端和近端可见明显沉积骨质,但少于A组;A组BV/TV、TMD明显高于B、C组(P均<0.05);大拔出力A组>B组>C组,组间两两比较P均<0.05.结论 钛合金假体表面涂层微孔孔径226~295 μm、孔隙率68.1%有利于促进骨整合,并具有较好的生物力学性能.
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药片:整片服还是嚼碎服?
不可以分割或嚼碎服的药品近年来上市的控释、缓释片剂药物越来越多,它能起到长效作用,减少服药次,给病人服药带来了方便.缓释片、控释片缓释片 缓释片的外观与普通片剂相似,但在药片外包有一层半透膜.口服后,胃液可通过半透膜进入片内溶解部分药物,形成一定的渗透压,使饱和药物溶液通过膜上的微孔,在一定的时间内非恒速地缓慢排出,待药物释放完毕,外壳即被排出体外.且每日用药次数比普通片剂少.
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磷酸-高碘酸钾测定空气中锰及其化合物的比色法改进
测定电焊锰尘中锰及其化合物含量,目前依据主要是<劳动卫生监测检验方法>.依采样方法的不同,检验方法也有所不同.当用超细玻璃纤维滤膜采集粉尘样品时,一般要求用磷酸-高碘酸钾比色法.当用微孔滤膜采样时,一般要求用火焰原子吸收光谱法测定.