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大鼠自体移植静脉中转化生长因子β1和基质金属蛋白酶1及其抑制剂的基因表达
目的 观察转化生长因子β1和基质金属蛋白酶1及其抑制剂在大鼠自体移植静脉中的动态表达,探讨它们与移植静脉内膜增生之间的关系.方法 建立大鼠自体静脉移植模型,随机分成3、7、14和28天组.行苏木素-伊红及Verhoffe染色,计算机图像分析系统测量不同时间点的内膜和血管壁厚度.采用Western印迹和逆转录-聚合酶链反应测定转化生长因子β1、基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶组织抑制剂1的蛋白及mRNA表达.结果 术后7天内膜明显增厚,与对照组比较有统计学意义(P＜0.05),术后14天内膜增生达到高峰.转化生长因子β1蛋白表达在术后第3天开始增加,第7天达到高峰,第28天回到基线水平.3天和7天组基质金属蛋白酶1的蛋白水平与对照组比较没有明显差别,14和28天组比对照组明显减少.基质金属蛋白酶组织抑制剂1的蛋白表达在第14和28天明显增加.三者mRNA水平的变化趋势与蛋白表达结果相似.结论 转化生长因子β1通过破坏基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶组织抑制剂1之间的平衡,从而使细胞外基质过量堆积,是内膜增生和血管狭窄形成的机制之一.
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同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1活性的影响
观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1活性的影响,并探讨其作用机制.采用体外培养的大鼠血管平滑肌细胞,加入不同浓度的同型半胱氨酸作用48 h,通过酶谱分析和半定量逆转录聚合酶链反应的方法观察同型半胱氨酸对基质金属蛋白酶1活性及其mRNA表达的影响.结果发现,同型半胱氨酸抑制基质金属蛋白酶1活性,下调其mRNA表达,并有剂量依赖效应.提示同型半胱氨酸通过减少基质金属蛋白酶1的合成,抑制其活性,从而减少胶原降解而使胶原蓄积.表明同型半胱氨酸减少胶原降解可能是致动脉粥样硬化的发病机制之一.
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辛伐他汀、丙丁酚和卡托普利在动脉粥样硬化斑块消退中的作用及与金属蛋白酶1和组织抑制物1基因表达的关系
观察药物消退和稳定动脉粥样硬化的作用并探讨基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶组织抑制物1的表达.对实验性动脉粥样硬化兔,分别给予辛伐他汀、丙丁酚和卡托普利治疗12周.结果发现, 3种药物均可显著降低血脂,以丙丁酚和辛伐他汀效果较强;在停止喂胆固醇后,自然消退组内中膜进一步增厚,3种药物均可显著消退动脉粥样硬化;药物治疗组的胶原Ⅰ、基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶组织抑制物1的mRNA表达水平均下降,其中丙丁酚组金属蛋白酶1的表达下降有统计学意义.3种药物均有消退动脉粥样硬化的作用,以辛伐他汀佳;而药物通过减少基质金属蛋白酶1表达,相对减少基质金属蛋白酶1/基质金属蛋白酶组织抑制物1的表达比例,起到稳定斑块的作用.
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冠心病患者基质金属蛋白酶1基因多态性
目的研究基质金属蛋白酶1基因多态性与冠心病的关系.方法运用聚合酶链反应检测62例冠心病患者(急性冠状动脉综合征35例,稳定型心绞痛患者27例)及31例正常对照者基质金属蛋白酶1基因型,并运用高频超声技术检测双侧颈动脉.结果急性冠状动脉综合征患者基质金属蛋白酶1基因2G/2G型、2G等位基因频率均明显高于稳定型心绞痛患者及正常对照者,颈动脉脂质型斑块基质金属蛋白酶1基因2G/2G型、2G等位基因频率均明显高于纤维型和钙化型斑块,基因型及等位基因频率分布差异均有统计学意义.结论急性冠状动脉综合征、稳定型心绞痛患者及正常对照者基质金属蛋白酶1基因分布存在不同.2G/2G型、2G等位基因与动脉粥样硬化斑块不稳定性可能有关.
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肺高压肺血管重建大鼠基质金属蛋白酶1基因表达
目的 探讨基质金属蛋白酶1(MMP-1)基因表达与肺高压形成的关系。方法 利用野百合碱(monocrotaline MCT)诱导的大鼠肺高压动物模型，经导管介入测定大鼠肺动脉平均压力，逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间点大鼠肺组织MMP-1 mRNA相对表达水平。结果 实验第3周肺动脉压力已明显升高，以第4周为高，而大鼠肺组织MMP-1 mRNA表达水平以实验第2周为明显，第3，4周表达水平下调，但仍高于第1周。结论 MMP-1早期基因表达升高参与细胞外基质屏障的降解，对肺血管重建可能起了触发作用，实验后期表达水平下调可能是导致细胞外基质积聚的重要原因之一。
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MMPI过表达的骨髓间充质干细胞对肝纤维化的修复作用
目的:探讨基质金属蛋白酶1 (matrix metalloproteinase 1,MMP-1)过表达的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠肝纤维化修复作用的影响.方法:50只雄性SD大鼠随机分为4组,重组腺病毒Ad-人MMP-1 (human MMP-1,hMMP-1)-增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)组(A组,n=10)、空载体Ad-EGFP组(B组,n=10)、肝纤维化对照组(C组,n=15)及正常对照组(D组,n=15).应用CC14植物油溶液皮下注射制作大鼠肝纤维化模型,10周后成模.经尾静脉将已转染的细胞注入大鼠体内,肝纤维化对照组和正常组注射等量生理盐水.3周后处死大鼠,观察转染MMP-1的BMSCs对大鼠体质量、肝组织质量、肝功能、肝纤维化指标及肝组织病理的影响.结果:与对照组相比,转染MMP-1的BMSCs致大鼠体质量、肝组织质量和血清白蛋白显著增加(P＜0.05);血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、透明质酸酶(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN)及Ⅲ型前胶原(procollagen Ⅲ,PC Ⅲ)显著下降(p＜0.05);苏木精-伊红染色法(HE染色)可见平均视野下纤维化的程度显著改善(P＜0.05).结论:转染hMMP-1能够增强BMSCs对肝纤维化的修复能力.
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MMP-1在肝细胞癌中的表达及临床意义
目的 明确MMP-1在肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化法检测MMP-1在正常肝组织和肝癌组织中的表达,采用卡方检验评估MMP-1表达与临床病理参数的相关性,对预后因素进行多元回归分析.结果 MMP-1在正常肝组织呈低表达,在肝癌组织中高表达,与肝细胞癌复发、TNM分期以及门静脉浸润显著相关(P＜0.01).在多元回归分析中,MMP-1表达是影响患者总生存率与无病生存率的独立预后因素(P＜0.01).结论 MMP-1可作为预测肝细胞癌患者复发和转移的新指标,也是预后不良的重要指标.
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xCT在鼻咽癌细胞体外迁移侵袭中的作用及机制
目的 观察xCT基因对鼻咽癌细胞侵袭转移能力的影响并初步探寻其可能机制.方法 实时荧光定量PCR和Western blot检测xCT在鼻咽癌高转移性细胞5-8F与低转移性6-10B细胞中的表达差异;建立过表达xCT的6-10B细胞和敲低xCT的5-8F细胞,用划痕实验及Transwell实验观察干预xCT对细胞迁移侵袭能力的影响;用Western blot检测各组细胞中基质金属蛋白酶1(MMP1)表达的改变.结果 鼻咽癌高转移性细胞5-8F中xCT的mRNA及蛋白表达量均高于低转移性6-10B细胞;外源性过表达xCT增强6-10B细胞的迁移侵袭能力,xCT表达沉默或功能抑制能降低5-8F细胞的迁移侵袭能力;5-8F细胞中MMP1的表达明显高于6-10B细胞,且其表达水平与xCT呈正相关.结论 xCT与鼻咽癌的侵袭转移密切相关,xCT能增强NPC细胞的迁移侵袭能力;xCT可能通过上调MMP1来介导NPC细胞的增殖及侵袭转移.
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地塞米松对瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶1调控的研究
目的:探讨地塞米松对瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶1(又被称为间质胶原酶1)蛋白的分泌合成和mRNA表达的影响.方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)和Northern杂交技术检测了培养瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶1蛋白的合成分泌和mRNA的表达.结果:培养瘢痕疙瘩成纤维细胞对照组基质金属蛋白酶1蛋白的浓度为(151.02±27.70)pg/mL;加入10-9 M10-6 M含地塞米松培养基24小时后,基质金属蛋白酶的浓度分别为(121.27±45.57)pg/mL(P<0.05)和(101.78±35.82)pg/mL(P<0.01).加入地塞米松24小时后,培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的基质金属蛋白酶1mRNA的表达被显著抑制,经密度扫描定分析:基质金属蛋白酶1 mRNA的表达分别下降了大约36%和53%.结论:地塞米松可抑制培养瘢痕疙瘩成纤维细胞基质会属蛋白酶1蛋白的合成分泌及其mRNA的表达,可能是地塞米松在抗瘢痕疙瘩纤维化作用中,尤其是纤维化形成后,疗效欠佳的原因.
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补骨脂素对人皮肤成纤维细胞衰老相关基因的调控作用
目的 研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响.方法 以雌二醇为阳性对照,采用MTF法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol· L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基因Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)mRNA表达水平的影响.结果 补骨脂素中剂量组的作用与雌二醇相似,能使ESF-1细胞的增殖明显提高,同时使Col Ⅰ、ColⅢ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达水平显著增强,MMP-1 mRNA的表达水平显著降低.结论 补骨脂素具有促ESF-1细胞增殖的作用,可促进胶原蛋白合成,提示其具有潜在的抗皮肤衰老作用.
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不同剂量辛伐他汀对动脉粥样硬化兔基质金属蛋白酶动态变化的影响
目的 探讨不同基质金属蛋白酶(MMPs)在动脉硬化兔模型的动态变化及不同剂量辛伐他汀治疗的作用.方法 高脂喂食加球囊拉伤股动脉建立动脉硬化兔模型75个,分别为高脂组、低剂量他汀组和高剂量他汀组,后两个他汀组除高脂饮食同时分别服用辛伐他汀2和4 mg/kg.3组均于拉伤后第1、7、14、21、28天采血,ELISA法检测MMP-1、9和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1),并取血管行病理检查.结果 MMP-1、9在拉伤后第1天均达到峰值,延续至拉伤后7天;TIMP-1在第1天达到峰值,并进行行降低;辛伐他汀在第7、14、21、28天明显抑制MMP-1水平,低剂量组和高剂量组无明显区别;在第21、28天明显抑制MMP-9水平,两个剂量组无明显差异;而在第1、7、14、21、28天均对TIMP-1有明显抑制,而且高剂量和低剂量组之间各时间段有明显差异.结论 动脉硬化兔模型的MMPs和TIMP有不同变化规律,而不同剂量辛伐他汀抑制MMPs/TIMP分泌的作用也不同.
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MMP1 mRNA在口腔鳞癌与正常黏膜中的表达及临床意义
目的 探讨基质金属蛋白酶1(MMP1)mRNA在口腔鳞状细胞癌(OSCC)及配对正常口腔黏膜组织中的表达及临床意义.方法 用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常口腔粘膜中MMP1 mRNA的表达;所得数据采用t-test检验方法进行统计学处理.结果 RT-PCR检测结果表明,MMP1 mRNA在OSCC和配对正常粘膜的表达水平分别为4.06±0.52和1.24±0.17,上调3.26倍(P＜0.0001).在30例OSCC标本中,MMP1 mRNA表达在病理Ⅱ/Ⅲ级OSCC中的表达(4.31±0.68)高于Ⅰ级OSCC的表达(3.87±0.57)(P＞0.05);在临床Ⅲ/Ⅳ期OSCC患者标本中的表达水平(4.18_+0.67)高于Ⅰ/Ⅱ期OSCC的表达水平(3.65±0.53)(P＞0.05);在颈淋巴结阳性OSCC患者的表达水平(4.32±0.71)高于颈淋巴结阴性OSCC患者的表达水平(3.91±0.51)(P＞0.05).结论 MMP1可能在OSCC的侵袭过程中起重要作用,可能是OSCC诊断、治疗及预后判断的一个基因靶标;MMP1在OSCC分类诊断中有应用价值.
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良恶性胸腔积液中基质金属蛋白酶1和9的表达及意义
目的:检测不同性质胸腔积液中基质金属蛋白酶1和9(MMP-1,-9)的表达,评价它们在良恶性胸腔积液发病机制中的意义和对鉴别诊断的价值.方法:分别以酶联免疫吸附法(ELISA)检测结核性、恶性及漏出性胸腔积液中MMP-1和MMP-9表达水平.结果:MMP-1、MMP-9浓度在结核性胸液和恶性胸液中均明显高于漏出液(P＜0.05)；在结核性胸液又较恶性胸液更高(P＜0.05).结核性和恶性胸液的MMP-9表达与其乳酸脱氢酶、白细胞总数、单叶核细胞数之间呈显著正相关(均P＜0.05).结核性胸液MMP-9与腺苷脱氨酶正相关(P＜0.05).结论:MMP-1和MMP-9在结核性及恶性胸腔积液的形成中起重要作用,检测其表达水平可能对良恶性胸液的诊断和鉴别有积极意义.
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牛磺酸对扩张型心肌病大鼠左室基质金属蛋白酶1表达的影响
目的:探讨牛磺酸对扩张型心肌病大鼠模型左室基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinases,MMP1)表达的影响.方法:随机选取2周龄Wistar大鼠50只,雄性,体重(62.56±5.12)g,以呋喃唑酮诱导扩张型心肌病模型,随机分为模型组(DCM)、牛磺酸干预Ⅰ组(I Tau)、牛磺酸干预Ⅱ组(ⅡTau)、牛磺酸假干预组(TC)及空白对照组(NC),每组又根据不同时间点分为4周和12周二个亚组.应用多功能超声心动图诊断仪检测不同时间点大鼠模型左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(EF)及左室缩短率(FS).应用HE染色光镜下观察心肌组织的病理学改变.应用免疫组化方法检测左室心肌Ⅲ型胶原含量的变化.应用RT-PCR技术检测左室心肌MMP1的表达活性.结果:DCM模型组及TC组4、1 2周亚组大鼠与NC组相应亚组比较,LVEDD和LVESD均明显增大(P均＜0.05);FS、EF均明显降低(P均＜0.01);心肌细胞肥大,胞浆灶性溶解,呈不同程度的颗粒变性与空泡变性,细胞核增大、分裂、畸形,细胞间隙增宽,间质胶原纤维明显增生,左室心肌Ⅲ型胶原明显升高(P均＜0.01);左室心肌组织MMP1 mRNA基因表达水平均明显升高(P均＜0.01).而ⅠTau组和ⅡTau组上述指标无明显变化(P均＞0.05).结论:呋喃唑酮诱导的扩张型心肌病Wistar大鼠模型,MMP1在左室心肌中的表达明显增高,且具有一定的时间规律性,参与左室重塑的全过程;应用牛磺酸可抑制MMP1的活性,逆转心室重塑;牛磺酸有望成为DCM的一种新的治疗方法.
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青蒿琥酯对增生性瘢痕成纤维细胞Ⅲ型胶原表达的影响
目的:研究青蒿琥酯(ART)对增生性瘢痕来源的成纤维细胞(HFBs)的Ⅲ型胶原(COLⅢ)蛋白表达的影响.方法:原代培养人HFBs,分为空白对照组和ART干预组(分别用75 μmol/L、150 μmol/L、300 μmol/L、600 μmol/L ART干预24 h),荧光定量PCR(q-PCR)法检测Ⅲ型前胶原α1链(proCOL3A1)的基因转录情况,western blotting法检测COLⅢ蛋白的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测基质金属蛋白酶1(MMP-1)的含量.结果:与空白对照组比较,ART干预组的proCOL3A1 mRNA相对表达量明显降低,且不同浓度ART组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).ART干预组COLⅢ蛋白表达水平明显下降,细胞培养上清液中MMP-1含量明显升高,且各浓度组间两两比较差异均有统计学意义(均P＜0.05或P＜0.01).结论:ART能抑制人HFBs的COLⅢ的基因转录和蛋白水平,同时促进MMP-1分泌增加,加速胶原降解,抑制细胞外基质沉积,这可能是ART治疗增生性瘢痕的机制之一.
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水蛭素对压应力作用下牙龈成纤维细胞胶原纤维Ⅰ和基质金属蛋白酶1表达的影响
目的:研究压应力对人牙龈成纤维细胞(HGFs)生物学行为的影响及不同浓度水蛭素对压应力作用下HGFs胶原纤维I(COL-I)和基质金属蛋白酶1(MMP 1)表达的影响.方法:建立HGFs压应力作用模型,MTT法检测压应力对细胞增殖活性的影响.采用RT-qPCR和ELISA两种方法检测不同压应力作用下的HGFs及不同浓度水蛭素作用下的HGFs受力后COL-I、MMP-1的表达.结果:3 g/cm2力值刺激细胞增殖效果为显著(P＜0.05).压应力作用HGFs后,上调COL-I和下调MMP-1的表达(P＜0.05).水蛭素作用压应力刺激的HGFs后,可抑制COL-I和促进MMP-1的表达(P＜0.05).结论:压应力刺激促进HGFs增殖,影响牙龈组织细胞外基质(ECM)的代谢.水蛭素抑制ECM胶原的沉积,促进胶原的降解,进而促进正畸牙移动过程中牙龈的改建.
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基质金属蛋白酶-1基因多态性对汉族人群牙种植早期失败的影响
目的 从遗传学的角度探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的基因多态性是否与种植体早期失败有关.方法 采用病例对照的临床试验设计方法,将选取的53例不吸烟、无牙周炎的汉族种植患者根据有无种植体早期失败(1个月内)分为失败种植体组和成功种植体组;同时收集所有患者的静脉血提取DNA;采用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性方法对MMP-1-1607位点进行基因型的测定.结果 携带MMP-1-1607基因型1G/2G杂合子的患者其种植体早期失败的发生率明显高于携带MMP-1-1607基因型1G/1G纯合子患者.多元Logistic回归分析结果显示:MMP-1-1607 1G/2G基因型相对于MMP-1-16071G/1G基因型的比值比是13.894(P＜0.05).结论 MMP-1-1607 1G/2G基因型和种植体早期失败有相关性.
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热损伤角质形成细胞培养上清对真皮成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1表达的影响
目的 探讨角质形成细胞(keratinocytes,KC)热损伤后对真皮成纤维细胞(fibroblasts,Fb)Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP-1)表达的影响. 方法 分离培养人正常Fb及KC,分别建立KC、Fb热损伤模型; 收集正常及热损伤12h后细胞培养上清,并配制成浓度为50％的细胞条件培养液.根据培养液不同将第3～5代Fb分为3组,分别采用含50％热损伤KC培养上清(A组)、含50％正常KC培养上清(B组)的条件培养液及单纯DMEM(C组)培养,24 h后收集3组细胞; 另于培养0、1、2、6、12、24、48 h分别收集A组细胞.采用含50％热损伤Fb培养上清的条件培养液培养Fb,于0、1、2、6、12、24、48 h收集细胞.采用实时荧光定量PCR检测各时间点KC热损伤条件培养上清对Fb Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA表达影响,以及Fb热损伤条件培养上清对Fb MMP-1mRNA表达影响. 结果 KC热损伤条件培养上清培养24 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均显著高于B、C组,差异有统计学意义(P＜0.05).培养2、6、12、24、48 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均高于0h (P＜0.05),1h与0h差异无统计学意义(P＞0.05); 随培养时间延长相对表达量逐渐增高,2h后各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).Fb热损伤条件培养上清培养1、2、6、12、24、48 h,MMP-1 mRNA相对表达量与0h比较,差异均有统计学意义(P＜0.05); 培养2h后相对表达量逐渐降低,各时间点间差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 热损伤后KC培养上清对Fb Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1的表达具有调控作用.
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重组腺病毒Ad-人基质金属蛋白酶1体外转染大鼠BMSCs研究
目的 利用重组腺病毒Ad-人基质金属蛋白酶1(human matrix metalloproteinase 1,hMMP-1)体外转染大鼠BMSCs,为BMSCs联合hMMP-1基因移植治疗肝纤维化奠定实验基础. 方法 取2～3周龄SD大鼠骨髓采用全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,传至第3代并进行鉴定；用携带增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记的重组腺病毒Ad-hMMP-1-EGFP体外转染第3代BMSCs,荧光显微镜下观察转染情况,流式细胞仪检测转染效率并确定佳感染复数(multiplicity of infection,MOI).实验分为未转染BMSCs组(A组)、Ad-EGFP转染BMSCs组(B组)及Ad-hMMP-1-EGFP转染BMSCs组(C组),采用MTT法检测转染后细胞增殖情况,RT-PCR及Western blot分别检测转染后各组细胞内hMMP-1基因和蛋白表达情况,ELISA法检测上清中蛋白hMMP-1分泌水平,hMMP-1酶活性荧光定量试剂盒测定其活性. 结果 重组腺病毒转染BMSCs后24 h可见绿色荧光表达,72 h时荧光强度高,佳MOI为200.MTT检测示3组细胞均于培养3d进入对数生长期,6d后进入平台期;各时间点3组间细胞吸光度(A)值比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).RT-PCR、Western blot及ELISA检测示,A、B组均无hMMP-1基因和蛋白表达,C组hMMP-1基因和蛋白均高效表达.荧光定量试剂盒测定A、B组均未检测到hMMP-1酶活性,C组hMMP-1酶活性为1.24 nmol/ (mg.min). 结论 利用重组腺病毒Ad-hMMP-1成功将外源基因导入大鼠BMSCs并高效表达,为BMSCs联合hMMP-1基因移植治疗肝纤维化奠定了实验基础.
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灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1表达的干预作用
目的 研究灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1(MMP1)和金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)表达的影响.方法 以人胚肺成纤维细胞系MRC-5为研究对象,Western blot法检测常氧、低氧、丝/苏氨酸激酶抑制剂星型孢菌素( straurosporine,SP)、灯盏细辛作用下MRC-5缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)、Ⅰ型胶原前α1链(pro-collα1)、p-smad2蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白的含量.结果 体外培养的MRC-5,常氧环境下细胞内表达一定的pro-col1α1、p-smad2蛋白,几乎不表达HIF-1α,细胞外基质有较低水平的Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白表达；低氧环境下细胞内pro-col1α1、psmad2蛋白、HIF-1α和细胞外基质Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1均较常氧组表达增加(P＜0.05)；SP(5 nmol/L)预处理细胞30 min与单纯低氧组比较,其胞内的p-smad2蛋白、pro-col1α1和基质中的Ⅰ型胶原、TIMP1降低(P＜0.05),而基质中的MMP1表达增加(P＜0.05)；灯盏细辛组(12.5μg/mL、50μg/mL)与单纯低氧组比较其胞外的Ⅰ型胶原、MMP1、TIMP1蛋白和胞内的HIF-1α、pro-col1α1和p-smad2蛋白表达均有降低(P＜0.05).结论 灯盏细辛可降低低氧环境下HIF-1α蛋白的表达,并部分通过p-smad2信号通路抑制Ⅰ型胶原、TIMP1蛋白生成.
