甜叶菊发酵提取物的抗组胺作用

342红曲大蒜发酵提取物对胆固醇负荷兔高脂血症及动脉硬化性病变的作用

发酵技术在中药配伍中的应用概述

中药发酵制药技术是在继承中药炮制学发酵法的基础上,吸取微生态学研究成果,结合现代生物工程的发酵技术而形成的高科技中药制药新技术,是从中药(天然药物)制药方面寻找药物的新疗效.

胆南星发酵制品与混合蒸制品的鉴别研究

目的:以猪胆汁及天南星、制天南星为原料分别制备发酵制胆南星及混合蒸制胆南星,以胆汁酸类成分为指标,建立以猪胆汁为炮制辅料的胆南星2种炮制品的薄层鉴别及HPLC-ELSD特征图谱.方法:采用硅胶G薄层板,以石油醚:丙酮:冰醋酸(11:8:0.8)为展开剂,10％ 硫酸乙醇溶液为显色剂,建立薄层色谱鉴别方法.采用Agilent Eclipse XDB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈与0.1％ 冰醋酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,柱温为30℃,ELSD:漂移管温度为105℃,氮气流量为2.5 mL/min,建立胆南星HPLC-ELSD特征图谱鉴别方法.结果:TLC和HPLC-ELSD图谱均显示发酵制胆南星可检测到游离型胆汁酸类成分猪胆酸(HCA)、猪去氧胆酸(HDCA)和鹅去氧胆酸(CDCA)3个特征成分,而混合蒸制胆南星中未检测出;混合蒸制胆南星可检测到结合型胆汁酸类成分甘氨猪去氧胆酸(GHDCA)和甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA)2个特征成分,而发酵制胆南星中未检测出.结论:所建胆汁酸类成分的薄层色谱鉴别法(TLC)和高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)均可有效鉴别胆南星的发酵制品和混合蒸制品,为胆南星质量控制提供依据.

猴头菌发酵炮制中药刺五加对小鼠抗疲劳作用的影响

目的:探讨刺五加经猴头菌发酵后抗疲劳作用,为中药新药源开发提供理论依据.方法:昆明种小鼠40只,随机分为5组,分别为刺五加经猴头菌发酵后水提物低、中、高(1.625,3.25,6.5 g·kg-1)剂量组,空白对照组(生理盐水)及刺五加水提物对照组(3.25 g·kg-1).连续ig给药30 d,小鼠ig量0.02 mL·g-1.以小鼠游泳时间、血乳酸清除率、血尿素氮(BUN)含量及肝糖原含量为指标考察中药刺五加经猴头菌发酵后抗疲劳作用.结果:刺五加经猴头菌发酵炮制后水提物中剂量组游泳时间为(130.46±10.91)min较空白对照组(48.35±5.36)min和刺五加水提物对照组(70.07 ±9.66)min显著延长(P<0.01);游泳后20 min血乳酸为(11.88±2.27)mmol·L-1(P<0.01),血乳酸清除率为37.88%;血尿素氮含量为(5.14±0.54)mmol·L-1(P<0.01);肝糖原含量为(0.49±0.11)mg·g-1(P<0.05);各项指标与空白组及相同剂量刺五加水提物对照组比较差异均具有统计学意义.结论:猴头菌发酵炮制中药刺五加具有抗疲劳作用.炮制后与刺五加原药材相比,抗疲劳作用显著增强.

胃肠舒口服液的主要药效学研究

胃肠舒口服液是在明黑虎丹的基础上衍生而来的良方,主要由猪胆汁和小米发酵精制而得,具有健脾和胃、清热燥湿之功效,对食滞和湿热引起的腹泻、消化不良、腹涨等疗效甚好.为胃肠舒的临床应用提供药效学基础.我们根据其作用做了如下试验研究.

4种药用真菌发酵对番荔枝种子总内酯成分的影响

目的:观察4种药用真菌发酵番荔枝种子后,番荔枝总内酯含量的变化.方法:将番荔枝种子作为“药性基质”,在一定的条件控制下,使其被灵芝菌等4种药用真菌发酵,产生不同的“药性菌质”,采用反相高效液相色谱法对各组的总内酯成分变化进行比较,用紫外-可见分光光度法对种子发酵前后的总内酯含量进行检测.结果:在一定的时间范围内,D,V,F菌在番荔枝种子基质上的适应性良好,菌丝体生长旺盛.4种菌发酵之后的菌质中总内酯含量与生药材、发酵空白组比较均有明显的升高,同时伴随峰的消失和相对峰值的变化,各菌发酵品中12,15-cis-squamostatin-A及布拉他辛(bullatacin)的含量较发酵空白组显示不同程度地变化.结论:发酵后,4种“药性菌质”中总内酯含量明显升高,内酯的相对含量发生变化,间双四氢呋喃(THF)及邻双THF内酯含量有不同程度地改变,提示真菌发酵可能利于某种类型番荔枝内酯的富集.

4种发酵法炮制中药材的微生物初步研究

目的:通过对发酵法炮制的4种中药材(生神曲、生建曲、生半夏曲、生淡豆豉)进行相关的微生物培养、鉴定及分析,进而确定其内在质量,为临床安全用药提供参考.方法:采用血平板、沙氏、中国蓝及常规空气4种培养皿分别对上述中药材进行细菌培养及形态学检测.结果:4种中药材在常规空气培养皿中均培养出较多杂菌,在中国蓝培养皿中均培养出一定量G-杆菌.在血平板中培养出不同程度的G+杆菌、G-杆菌、G+球菌、真菌孢子等,在沙氏培养基中只有生神曲及生建曲培养出真菌并形态学鉴定为酵母菌.结论:生神曲和生建曲培养出较多的真菌酵母菌为发酵法产生的有益菌,而生半夏曲和生淡豆豉却未发现有真菌存在,因此应提醒关注发酵炮制的过程,进一步确保药材质量.

纳豆菌产糖苷酶的发酵工艺优化

目的:优选纳豆菌产糖苷酶的发酵工艺.方法:采用TLC检测发酵后纳豆中大豆异黄酮变化情况.以酶活力为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察发酵时间、加水量、接种量、初始pH对发酵工艺的影响.结果:TLC确定使用纳豆菌产的糖苷酶为胞内酶.佳发酵工艺为发酵时间36 h,加水量70％,接种量10％,初始pH7.5,酶活力达205 U·mL-1.结论:大豆异黄酮经纳豆菌发酵能由糖苷形式转化为苷元形式,纳豆菌所产的胞内酶转化染料木苷为染料木素的酶活力高于胞外酶.

红曲霉液体培养法制备姜黄素的工艺优化

目的:优选红曲霉液体培养法制备姜黄素的工艺条件.方法:以天然姜黄为原料,姜黄素得率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察发酵时间、料液比、营养比和发酵液pH对制备工艺的影响.结果:佳制备工艺为发酵时间5d,料液比1 g·L-1,营养比1/6,发酵液pH 4,姜黄素得率达0.43％.结论:优选的制备工艺稳定可行、效率高.

胆南星质量标准的现状与思考

胆南星是常用的清热化痰、息风定惊药,但目前胆南星的质量标准简单粗略,尚不规范,无相关的制法、检查、含量测定等内容.《中国药典》2015年版中仅有简单描述——本品为制天南星的细粉与牛、羊或猪胆汁经加工而成,或为生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经发酵加工而成.导致厂家生产胆南星制法不一,质量参差不齐,不利于胆南星的质量监控,并影响其临床用药的安全性和有效性.通过对胆南星文献研究进行归纳并结合对生产企业实地调研,本文针对目前胆南星及其炮制辅料质量标准存在的主要问题,提出相应对策与建议,建议增加相应检测指标并完善辅料标准等,有助于规范和完善胆南星及其炮制辅料的质量标准,供同行思考与借鉴.

黑曲霉生物转化黄酮类成分研究进展

黄酮类化合物具有多种药理活性,包括抗炎、抗氧化、抗血栓、抗菌、抗病毒、降血脂等,而黑曲霉作为世界公认的安全食用性的低等真核生物而广泛应用于微生物转化,并在黄酮类成分生物转化中发挥着重要的作用.该文综述近15年来国内外关于黑曲霉生物转化黄酮类物质及其衍生物的研究进展,以期为黑曲霉的进一步开发应用提供参考.结果表明以黑曲霉为菌种转化黄酮类化合物的主要类型包括黄酮类、黄酮苷类、二氢黄酮类、查尔酮类、多甲氧基黄酮类、异黄酮类等,主要发生羟基化、脱羟基、甲基化、脱甲基、羰基化、脱羰基、糖基化、去糖基化等反应,转化机制可能是在黑曲霉产生丰富广泛酶系的参与下,发生酶促反应后产生相应转化产物.通过黑曲霉生物转化黄酮类成分研究进展,对黑曲霉应用到黄酮类成分转化的实际生产中提供理论指导,也为微生物高效转化具有药理活性的化学成分奠定理论基础和参考.

岭南特色炮制工艺对枳壳挥发油成分的影响

目的:采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对枳壳不同炮制品中挥发油成分进行定性和定量分析,探讨岭南特色炮制工艺中枳壳挥发油成分的变化规律.方法:按照不同工序分别制备枳壳炮制品(生枳壳、麸炒枳壳、清蒸枳壳、单纯发酵枳壳及广东制枳壳),采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,通过GC-MS鉴定不同枳壳炮制品中挥发油成分,运用峰面积归一化法计算各成分的相对质量分数.运用聚类分析和主成分分析分析枳壳不同炮制品中挥发油成分及其含量.结果:从生枳壳、广东制枳壳、单纯发酵枳壳、清蒸枳壳、麸炒枳壳的挥发油中分别鉴定出化合物54,44,25,31,32种.其中岭南特色制枳壳的挥发油中新增化合物多,且挥发油主要成分含量较生枳壳和麸炒枳壳升高.结论:提示发酵与清蒸相结合的岭南特色炮制方法对改变枳壳炮制品的质量并增强其临床疗效具有重要意义,值得深入研究和进一步推广.

鲜干品组方六神曲发酵前后指标成分的LC-MS测定及指纹图谱分析

目的:建立六神曲的指纹图谱质控方法,比较鲜干品各组样品发酵前后槲皮苷、槲皮素、木犀草素等成分的变化状况.方法:经拆方研究,按前期优选的工艺制备六神曲基本组及鲜干品各组,分别为基本组、鲜品煎汁组、干品1/3量煎汁组及干品全量煎汁组,并于发酵前后取样检测.采用LC-MS检测,Ulitimate XB-C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2％甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长254 nm,电喷雾离子源(ESI),正离子模式检测.结果:确定鲜干品组方六神曲指纹图谱共有峰15个,其中10,13,15号峰分别为槲皮苷、木犀草素、槲皮素.基本组仅含木犀草素,发酵前后质量分数分别为18.5,21.3 μg·g-1,明显低于其他3组.在发酵前,鲜品煎汁组样品的3种成分含量均显著高于其他3组,与发酵前相比,发酵后木犀草素、槲皮素质量分数分别增长54.84％,4.53％;槲皮苷质量分数降低了0.76％.干品全量煎汁组发酵后3种成分含量较发酵前显著增加,其中槲皮苷、木犀草素、槲皮素质量分数分别增加了59.9％,161.7％,75.5％.结论:该质控检测方法精密、准确、重复性好,适用于六神曲的量化质量评价.发酵法可促进六神曲部分药效成分的溶出度增加及其生物转化反应的发生,初步揭示了六神曲发酵前后药效物质变化状况及鲜品入药优于干品的药效物质基础.

灵芝菌发酵基质的条件优化及菌质活性物质的分析

目的:通过灵芝菌与玉米须、玉米芯的双向固体发酵,形成新的药性菌质,并对其活性成分进行分析.方法:以不同配比的玉米须和玉米芯为基质,以活性物质多糖和三萜的含量为指标考察菌质的佳培养基配比,分别采用紫外分光光度法、薄层色谱法和高效液相色谱法进行定性及定量分析.结果:玉米须和玉米芯以1∶0,1∶1,1∶2,1∶3,i∶4,1∶5,0∶1配比,用灵芝菌发酵,形成的菌质多糖含量递增,三萜含量递减;薄层色谱结果显示,与发酵前对比,发酵后色谱斑点由红色转为蓝绿色荧光,并随着玉米须在培养基中比重增加而斑点越明亮;高效液相色谱结果显示,发酵后原有一些物质峰减弱或消失,并生成新的物质.结论:以玉米须-玉米芯1∶5作为基质产生的菌质长势及活性成分含量高,发酵前后菌质的物质组成有明显改变.

葛根芩连汤发酵前后总黄酮和总生物碱含量变化研究

目的:建立葛根芩连汤酵母菌发酵样品总黄酮和总生物碱的含量测定方法,为葛根芩连汤的深入开发提供科学依据.方法:利用酿酒酵母ATCC9763和酿酒酵母GIM2.9对葛根芩连汤进行发酵.采用紫外可见分光光度法在波长510nm处,测定葛根芩连汤发酵样品总黄酮的含量.以中性氧化铝柱处理样品,溴甲酚紫显色,在405nm波长处测定葛根芩连汤发酵样品总生物碱的含量.结果:葛根芩连汤经过两种酵母菌发酵后,总黄酮含量分别提高了32.90％和30.20％,总生物碱含量分别提高了24.91％和30.89％.结论:酵母菌发酵中药葛根芩连汤,可以减少服用量,提高有效成分相对含量.

松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖成分的影响

目的 观察松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响及发酵茯苓菌丝与天然茯苓多糖含量的差别.方法 加松根液与不加松根液发酵培养茯苓菌丝,将两者在菌丝产量,水溶性多糖含量方面进行比较;并将发酵菌丝与天然茯苓进行水溶性多糖含量比较.结果 加松根液发酵培养的茯苓菌丝产量有提高,但水溶性多糖含量下降;发酵菌丝较天然茯苓水溶性多糖含量显著提高.结论 松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响不同;发酵茯苓菌丝多糖含量高于天然茯苓.

虫草及其发酵制品抗氧化能力研究

目的:考察天然冬虫夏草、蛹虫草及其发酵制品水和乙醇提取物体外抗氧化活性.方法:测定样品的6个抗氧化指标:抑制亚油酸氧化的能力;清除DPPH自由基、羟自由基、过氧化氢和超氧阴离子的活性以及螯合金属离子(Fe2+)的效果.结果:各样品具有不同程度的抗氧化能力,没有一种提取物在所有测试中均显示出很强的活性,但可以认为天然蛹虫草水提物的抗氧化能力为8个样品中高,它在抑制亚油酸氧化,螯合金属离子以及清除DPPH自由基和羟自由基的实验中都显示了很高的活性.研究同时表明天然及发酵虫草水和醇提物中多酚类的含量差异很大.结论:虫草及其发酵制品可作为一种潜在的天然抗氧化剂,发酵培养能够影响虫草制品的抗氧化活性,而天然与发酵虫草的抗氧化能力与其含有的多酚类的量没有显著相联.

西洋参锈腐病菌拮抗放线菌F05发酵培养基的优化

目的:从老参地土壤中分离得到一株对西洋参锈腐病菌具有良好拮抗作用的菌株F05,对该菌株的发酵培养基进行了初步研究,确定了其佳培养基组成.方法:利用单因素试验和均匀设计试验优化培养基组分.结果:优化结果碳源为玉米秆粉,氮源为磷酸氢二铵,无机盐为硫酸镁、磷酸氢二钾,质量分数分别为3.720 6%,0.531 2%,0.035 5%,0.040 0%,优化后活菌生物量为1.57×10~9CFU·mL~(-1).

微生物技术在中药炮制中的应用

中药的发酵炮制是传统中药加工炮制的重要方法,起源于古老的酿酒技术,在我国具有悠久的历史.发酵炮制中药在民间应用极其广泛,对多种疾病具有良好的预防与治疗作用.经自然发酵加工而成的中药品种有六神曲、半夏曲、红曲、淡豆豉、百药煎、片仔癀等.该文对发酵炮制中药的历史起源、主要品种、微生物在炮制中的作用、加工现状以及存在的问题等进行了总结,并对中药发酵炮制的现代化发展进行了展望.