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无血清条件下紫外线诱导表皮细胞凋亡的实验研究
目的:观察紫外线照射诱导新生大白鼠表皮细胞凋亡.方法:用不同剂量的紫外线照射培养条件下和活体状态下表皮细胞,采用Tunel法检测表皮细胞凋亡,流式细胞仪观察表皮细胞P53、Bcl-2、CD95表达.结果:传代培养12~24 h,用1 500J/m2紫外线照射,照射后继续培养24~48 h表皮细胞凋亡率达高峰.紫外线照射后的表皮细胞P53表达升高.相同剂量紫外线照射,活体状态下表皮细胞凋亡率低于培养表皮细胞.结论:表皮细胞凋亡与P53表达升高相关,活体上的表皮细胞能较强抵抗紫外线诱导的凋亡作用.
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表皮细胞体外培养及临床应用
利用手术切除阴茎包皮,剪碎后经胰蛋白酶消化,添加1640培养液和表皮生长因子,制成细胞悬液,接种于垫有塑料薄膜载体的培养瓶中,经体外培养和传代培养,可在载体上得到大面积的表皮细胞生长薄膜,在移植时可将载体从培养瓶中取出,使长有表皮细胞薄膜一面贴敷于深二度烧伤创面和肉芽创面,一周后,可见移植创面长满培养的表皮细胞。经大量临床治疗证明,有很好的疗效。因此,以阴茎包皮作为培养皮肤细胞来源,通过增殖不仅达到扩大表皮面积目的,而且能较快地修复创面,有很好的实用价值和发展前景。
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正确识别白带
白带是由阴道黏膜渗出物、宫颈腺体和子宫内膜的分泌物混合而成的,其中含有表皮细胞、少量白细胞和非致病性阴道杆菌.新生女婴在出生后数日内阴道即有乳白色的分泌物,称"新生儿白带",这种白带一般在一星期内可自然消失.幼女也有极少量的白带,起到滋润阴道、防止粘连的作用.进入青春期后,随着雌激素的增多,女性分泌的白带也会增多,以湿润阴道、防御病菌的侵入,并有利于性生活.
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Bowen病长期误诊为湿疹1例
临床资料患者女,60岁.因左手背部皮疹5年就诊.患者5年前无明显诱因左手背部出现片状红斑,表面覆有鳞屑,其后皮损处破溃、渗出,并逐渐加重.在当地多家医院就诊一直按"湿疹"给予抗组胺药口服及糖皮质激素类药膏外用治疗,症状未缓解,且出现溃烂,结痂.患者既往健康,否认有糖尿病、肿瘤病史及家族史.否认放射性物质或含砷农药等的接触史.体检:一般情况好,全身浅表淋巴结未触及肿大,各系统检查未见异常.皮肤科情况:左手背部可见1.5 cm×2.0cm暗红色斑块(图1),形状不规则,略隆起,边界清楚,上覆鳞屑及厚痂.厚痂剥离后,表面湿润潮红,触之无明显疼痛.皮损组织病理示:表皮角化不全,棘层肥厚,表皮突增宽,表皮细胞排列不规则,呈非典型增生,可见散在瘤巨细胞,表皮基底膜带完整,真皮上部炎症细胞浸润(图2、3).结合临床和组织病理结果,诊断为:Bowen病.治疗:手术切除.
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毛囊角化病并发红皮病1例
毛囊角化病于1859年首先由Darier命名,故又名Darier病.本病是以表皮细胞角化不良为基本病理改变的慢性角化性皮肤病,是一种常染色体不规则显性遗传性皮肤病.1国内少见毛囊角化病并发红皮病,现将我科遇到l例报道如下.
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沿Blaschko线分布的毛囊角化病1例
毛囊角化病是一种以表皮细胞角化不良为基本病理变化的慢性角化性皮肤病,一般好发于皮脂溢出部位,而本例于上腹呈Blaschko线带状分布,现报道如下.
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母女同患毛囊角化病误诊2例
毛囊角化病又名毛囊角化不良病,是一种少见的以表皮细胞角化不良为基本病理变化的丘疹鳞屑性皮肤病,首先由Darier命名.母女同患毛囊角化病较少见.2003年10月在北京积水潭医院皮肤科会诊2例,现报道如下.
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毛囊角化病合并马拉色菌和细菌感染1例
毛囊角化病是以对称性分布于面部、躯干和四肢屈侧的倾向于融合成片的油污性疣状、丘疹样赘生物为特征,以表皮细胞角化不良为基本病理变化的慢性角化性皮肤病,临床上较为少见.我科近收治1例毛囊角化病合并马拉色菌和细菌感染,现报道如下.
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色素性玫瑰糠疹表皮细胞角化不良变性1例
临床资料患者,女,7岁,躯干,四肢起浅红色斑,微痒3个月.患儿于3个月前在腋部、臀部发现数个花生米大小的浅褐色斑,偶有微痒,未予治疗.其后皮疹增多,向胸背、腰腹部和四肢蔓延,并有少量浅红色的皮疹.于2001年8月来我院诊治.患者婴幼儿期体键,无特殊疾病史.
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中波紫外线诱导小鼠表皮细胞Bax和Bcl-2的表达
目的:探讨中波紫外线(UVB)对正常小鼠表皮细胞凋亡及凋亡相关基因Bax和Bcl-2的调控.方法:将正常ICR小鼠随机分为对照组(假照射组)、不同剂量紫外线照射后2 h组.1500 J/m2紫外线照射不同时间组.采用SP法染色检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果:小鼠皮肤用不同剂量紫外线照射2 h后,Bax的表达随紫外线剂量增大而变大,Bcl-2表达减少,呈剂量依赖性.用1500 J/m2紫外线照射小鼠后,Bax和Bcl-2的表达与紫外线照射后时间有关.结论:中波紫外线照射小鼠皮肤后,Bax表达上调,Bcl-2表达下调,促进小鼠紫外线损伤的表皮细胞凋亡.
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消银合剂对小鼠表皮细胞增殖、免疫调节及抑菌作用的研究
目的:探讨消银合剂治疗寻常型及红皮病型银屑病的作用机制.方法:观察消银合剂对小鼠表皮细胞增殖及免疫功能的影响,并进行抑菌试验.结果:消银合剂对小鼠表皮细胞增殖有抑制作用,对小鼠细胞免疫有促进作用,与对照组比较差异均有高度显著性(P<0.01),但药物浓度的高低对抑制、促进作用的影响不大(P>0.05).消银合剂对甲型、乙型链球菌均有明显的抑制作用.结论:消银合剂的治疗机制可能主要是通过抑菌、抑制表皮细胞增殖、调节机体的免疫功能完成的.
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四物汤对小鼠表皮细胞增殖的影响
目的:探讨中药四物汤治疗银屑病的可能机理.方法:应用四物汤灌胃小鼠,MTT法检测小鼠血清对表皮细胞增殖影响程度.结果:四物汤灌胃小鼠组A560值显著低于对照组(P<0.01).结论:四物汤对银屑病的治疗作用可能是通过抑制表皮细胞增殖来完成的.
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T细胞皮肤归巢在银屑病发病机制中的作用
银屑病是一种慢性复发性炎症性皮肤病,以表皮过度增殖和真皮慢性炎症反应为特征,为遗传与环境等多种因素相互作用的多基因遗传病,其发生机制是一种免疫介导性疾病.目前关于本病的免疫发病机制尚未完全清楚,多数学者认为,银屑病是由活化T细胞引起的表皮细胞增殖性疾病.T细胞介导的细胞免疫在银屑病皮损的发生及持续存在中起了重要作用1.现就这一发病机制作一简要综述.
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KGF在成纤维细胞促进表皮细胞增殖中的作用
目的 研究成纤维细胞产生的角质细胞生长因子(KGF)时表皮细胞增殖的影响.方法 自包皮分离培养成纤维细胞和表皮细胞,采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)、酶联免疫吸附法(ELISA)、MTT法和免疫荧光等方法分别检测成纤维细胞KGF基因的转录水平、培养液中KGF的浓度、成纤维细胞培养液对表皮细胞增殖的促进作用.结果 RT-PCR结果显示,成纤维细胞中KGF转录水平显著,ELISA法可检测到成纤维细胞培养液中存在较高水平的KGF,细胞计数结果和MTT结果表明,含有KGF的成纤维细胞培养液能够促进表皮细胞增殖,保持表皮细胞的活性,免疫荧光观察到KGF与表皮细胞表面的特异性受体结合.结论 成纤维细胞能够合成和分泌较高水平的KGF,成为其促进表皮细胞增殖的重要因素.
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表皮细胞体外培养过程中生物学特性改变的观察
目的通过观察表皮细胞体外增殖与老化规律,为选择合适的组织工程化皮肤种子细胞提供依据.方法取正常年轻人表皮细胞进行传代培养,以不同代龄细胞为实验对象,采用形态学观察、群体倍增时间(PDT)、免疫细胞化学及β-半乳糖苷酶染色等一系列方法,检测表皮细胞老化规律.结果体外单层培养9代,P2的PDT短,前5代增殖能力较强,P5以后PDT明显延长,P8细胞不再增殖;随着细胞的连续传代培养,SA-β-Gal表达呈现从弱(在年轻细胞中%)到强(在老化细胞中占65%)的趋势.结论建立了体外培养正常人表皮细胞的衰老模型,第1~5代表皮细胞(供者年龄16~18岁)可作为构建组织工程化皮肤的种子细胞.
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人表皮细胞分离条件的优化
目的通过优化表皮细胞分离条件,大程度的获得基底层内的表皮细胞.方法采用Dispase Ⅱ酶与胰蛋白酶联合消化法分离培养表皮细胞.将Dispase Ⅱ酶浓度、胰蛋白酶浓度及其作用时间作为实验因素,利用L16(44)正交表设计实验,优化佳分离条件.观察不同分离条件对表皮细胞生长情况、贴壁率、克隆形成率的影响.正交设计的计量资料数据用方差分析.结果 Dispase Ⅱ酶、胰蛋白酶的作用浓度、作用时间对原代分离的活细胞数无显著影响;胰蛋白酶的作用浓度、作用时间对24h贴壁率有显著影响;胰蛋白酶作用时间显著影响克隆形成率.0.125% Dispase Ⅱ酶冷消化10h、0.1%胰蛋白酶37℃消化30 min,分离的原代表皮细胞克隆形成率高.结论通过优化表皮细胞分离条件,可大程度的得到有克隆形成能力的细胞,从而为利用表皮细胞作为人工皮肤的种子细胞奠定基础.
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秋季给秀发肌肤进补
秋天不但头发容易脱落,而且皮肤也感觉干燥.所以秋天特别要呵护好秀发和肌肤.秋天头发容易脱落的原因,还得从夏季谈起.夏日强烈的阳光照射,对头发会产生不利的影响.尤其是阳光中波长在280~320纳米的紫外线,能使表皮细胞和真皮中的胶原纤维、弹力纤维发生变性,直接影响毛发的营养供应.倘若再加上秋天来临,头屑过多,常因头皮瘙痒抓搔头皮,更易招致秀发脱落.
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皮肤磨削术并自体表皮细胞移植治疗白癜风临床观察
我科于1997年8月~1999年8月对58例门诊白癜风患者进行了皮损处磨削术并自体表皮细胞移植术,治疗方法简便、快捷,疗效显著可靠,比以往的方法有明显的优越性.
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脱细胞猪角膜基质体外支持皮肤细胞生长的实验研究
目的 探讨脱细胞猪角膜基质体外是否支持皮肤细胞的生长.方法 制备脱细胞猪角膜基质(前期实验已完成).体外培养人皮肤表皮细胞和成纤维细胞,取第3代人皮肤成纤维细胞接种在脱细胞猪角膜基质的中间基质面,培养3 d后,将材料翻转,取第3代人皮肤表皮细胞接种在材料的上皮面上,再培养10 d后,取细胞-支架复合体制作石蜡切片,HE染色后光镜下观察.结果 组织学观察显示皮肤的表皮细胞和成纤维细胞体外均可在脱细胞猪角膜基质上黏附生长.接种10 d后,皮肤表皮细胞在材料表面形成复层结构,可见角化的细胞.接种13 d可见成纤维细胞存活并在支架层间生长.结论 脱细胞猪角膜基质有良好的细胞相容性,在体外能支持皮肤细胞的生长和增生.
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盐酸法舒地尔在脂肪干细胞向表皮细胞诱导分化中的作用
目的 探讨盐酸法舒地尔(HA1077)在脂肪干细胞(ADSC)向表皮细胞诱导分化中的作用.方法 用酶消化法消化人脂肪组织获取ADSC,以基础培养基即体积分数含10%胎牛血清的DMEM培养基传代,取生长良好达到90%融合的第3代人ADSC分为4组,第1组持续用基础培养基培养、传代;将第2、3、4组弃基础培养基,无菌磷酸盐缓冲溶液冲洗,分别换用培养液2(基础培养基+20 μmol·L-1 HA1077)、培养液3(体积分数70%的基础培养基+体积分数30%的成纤维细胞培养基上清液+10 ng·L-1重组人表皮生长因子)、培养液4(20 μmol·L-1 HA1077+培养液3),诱导后经免疫细胞化学、流式细胞仪检测CK19的表达.结果 免疫细胞化学分析表明ADSC表达CD44、CD49d,而不表达CD106、CD34、CK19;流式细胞仪检测CD44、CD49d的阳性率分别为(98.84±0.02)%、(92.52±0.04)%.流式细胞仪检测各组CK19的表达阳性率分别为(0.23±0.01)%、(0.35±0.02)%、(9.73±0.80)%、(17.65±1.00)%,其中第3、4组CK19的阳性率较对照组明显增高,差别均有统计学意义(P<0.05).结论 HA1077对ADSC向表皮细胞诱导分化有促进作用.