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应用基因芯片技术筛选长期机械应力刺激下表皮的相关基因研究
目的 探讨额部扩张皮肤表皮与颞部附加切口正常皮肤表皮基因的表达差异,在转录水平上探讨组织扩张分子生物学机制.方法 选取2009-2011年行额部扩张器的5例患者,收集患者额部扩张器张力大点 (扩张组)、颞部行附加切口处 (未扩张组)的全层皮肤5对,为了排除多种细胞和组织成分的干扰,将表皮与真皮分开,取表皮层进行全基因组表达芯片分析,筛选差异基因进行功能聚类分析,并对部分结果行荧光定量PCR验证芯片结果.结果 对5对数据分组分析,共筛选差异表达基因105个,上调93个,下调12个.筛选出的差异基因涉及氧化磷酸化、免疫、炎症、增殖、凋亡等多个生物学过程.选取8个差异基因行定量PCR,7个与芯片结果相符.结论 扩张皮肤的表皮与未扩张皮肤的表皮之间存在多处基因表达差异,可能从某些重要基因作为突破,为促进细胞增殖、加快扩张速度带来新的启示.
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欣洛维与奥美拉唑临床疗效的比较研究
消化性溃疡病是一种古老而又难以治疗的疾病,其发病机理众说纷纭,临床用药种类很多,常见的有:抗酸药、胃酸分泌抑制剂、粘膜保护药、抗幽门螺杆菌药.临床多采用上述品种单独或联合用药,基本上缓解了消化性溃疡病症状和溃疡愈合问题,但溃疡愈合质量差、复发率高及药物不良反应大仍是等待解决的问题.欣洛维(胸腺蛋白口服液)能增强胃粘膜防御机能,通过促进胃壁表皮细胞成纤维细胞再生及营养局部受损粘膜而达到溃疡愈合的目的.我院于2002年1月至2002年8月期间对部分消化性溃疡患者分组给予欣洛维、奥美拉唑和欣洛维、奥美拉唑联合用药,并对临床疗效进行分析.
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142.组织干细胞
1.定义组织按相应的分化阶段分为①干细胞(stem cells);②前体细胞(progenitor cells/transit amplifying cells);③成熟细胞(mature cells)三类.组织干细胞或称躯体性干细胞,既有多分化能力,也保持未分化性的胚胎性干细胞特征.干细胞具有多分化能力的同时,也具有干细胞产生干细胞的自我复制能力.这样的由干细胞系统产生的细胞群有血细胞、皮肤表皮细胞、消化道黏膜细胞、睾丸生殖细胞等.干细胞占构成组织的全体细胞的比例很低,例如造血干细胞仅以有核细胞的1/100000的低比率存在.但是,利用多种单克隆抗体和干细胞特有的药剂排泄活性、荧光细胞分离技术(FACS),使分离干细胞成为可能.干细胞的细胞转化周期非常慢,该集团中一部分细胞进入细胞周期后,区别于前体细胞可显示出高的增殖能力.明确什么刺激使干细胞开始增殖、分化、子细胞的不均等分裂,或自我复制(birth)和细胞分化(death)两个不同的方向是由怎样的机制产生的是今后的课题.
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关于儿童哮喘相关基因与气道重塑
细胞因子(cytokin)是指主要由免疫细胞(单核/巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等)和某些非免疫细胞(血管内皮细胞、表皮细胞、成纤维细胞等)经刺激而合成、分泌的,能调节细胞功能的可溶性小分子多肽[1],多数以单体形式存在,少数以双体形式发挥生物学作用,如IL-12.细胞因子以网络形式发挥作用,同时,内源性和外源性调节因子对细胞因子也有一定的调节作用,细胞因子并具有一定的趋化作用.
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γδT细胞在皮肤损伤中的作用研究进展
皮肤γδT细胞是一种存在于表皮中具有树突样结构的独特T细胞,我们又称之为树突状表皮T细胞( Dendritic epidermal T cell ,DETC) ,它在皮肤损伤修复过程中发挥重要作用. 皮肤位于人体的外层并具有非常重要的防御保护功能,然而它也经常受到外界各种因素的侵袭损害. 表皮γδT细胞源自于胚胎的胸腺前体细胞并表达一种固定的Vγ3Vδ1TCR,能够监控周围表皮细胞,识别邻近病变角化细胞表达的相关抗原并做出反应,在皮肤损伤后的炎症反应和愈合过程中发挥重要作用. 活化的表皮γδT细胞可以产生多种趋化因子、细胞因子和生长因子,这些因子通过自分泌和旁分泌作用调节损伤部位细胞的增殖、迁移、募集以及各种炎症细胞、表皮细胞的功能,从而促进创伤愈合. 本文就皮肤γδT细胞在皮肤稳态、炎症反应、创伤修复的相关研究进展作一综述.
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维甲酸对皮肤角阮细胞水孔蛋白通道3表达的影响
目的:探讨维甲酸类药物对表皮角阮细胞中水孔蛋白通道(AQP)3表达的影响。方法异维A酸、阿维A、阿达帕林处理角朊细胞的体外培养模型(HaCaT),采用免疫组化、RT-PCR、Western印迹分子生物学方法检测不同浓度(0.000、0.001、0.010、0.060、0.100 mg/ml)、不同作用时间(0、6、12、24、48 h)及不同干预因素下对HaCaT中AQP3含量的变化。结果①浓度为0.010 mg/ml时,三组HaCaT中AQP3的表达均高于其他浓度(P<0.05);②0.010 mg/ml浓度的异维A酸、阿维A、阿达帕林作用12 h,三组HaCaT中AQP3的表达异维A酸组>阿维A组>阿达帕林组,组间比较差异显著(P<0.05)。结论维甲酸可调节HaCaT中AQP3的表达,0.010 mg/ml浓度的异维A酸组12 h的时候对HaCaT中 AQP3表达的上调作用明显。
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助你活过百岁的10种养生法
随着人类的进步,长命百岁已不是遥不可及的梦想.近日,美国著名医学博士穆罕默德·奥兹在“奥兹博士网站”上撰文介绍了10个可助人活过百岁的方法,这些方法是:1.常吃红色食物奥兹博士指出,红色食品是指外观呈红色、橙红色或棕红色的食品,主要包括紫色卷心菜、甜菜根、红柿椒、西红柿、胡萝卜、红心白薯、山楂、红苹果、草莓、红枣、老南瓜、红米、柿子等.此类食物具有缓解疲劳、防治缺铁性贫血、增加食欲、增强表皮细胞的再生功能、防止皮肤衰老、提高免疫力等作用.其中,紫色卷心菜等十字花科蔬菜还有较强的抗癌作用,甜菜根则有较强的调节血压作用.
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无机砷诱导体外培养人皮肤细胞的增殖作用
目的观察亚砷酸钠诱导体外培养的人皮肤细胞的作用,探讨砷性皮肤损伤的分子机制.方法原代培养皮肤成纤维细胞和表皮细胞,通过直接细胞计数法和噻唑蓝(MTT)还原法检测亚砷酸钠诱导对2种细胞系生长的影响.结果成纤维细胞较表皮细胞易于培养,与对照组比较,不同剂量的亚砷酸钠诱导后,吸光度值均有升高,有剂量-效应关系(P<0.01).0.5~8.0 μmol/L浓度的亚砷酸钠对成纤维细胞有明显的增殖作用;低浓度(0.8,1.6 μmol/L)对表皮细胞有明显的增殖作用,浓度高于3.2 μmol/L 时,表皮细胞生长受抑制.10 μmol/L亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞有明显的毒性作用.结论无机砷对人皮肤细胞有双向调节的促增殖作用,可能是无机砷引起慢性砷中毒皮肤损伤不同表现的一个重要原因,具体作用机制有待进一步研究.
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表皮细胞悬液与胶原海绵联合移植的研究
目的用皮下植入方法研究表皮细胞悬液与胶原海绵联合移植的形态学变化,评价胶原海绵的生物相容性.方法以昆明小鼠为动物模型,实验组移植胶原海绵及表皮细胞悬液(以BrdU标记表皮细胞),对照组单纯移植胶原海绵,于术后3、7、10、16、30天取材进行组织学、免疫细胞化学检测.结果实验组各时段均可见生长活跃、增殖旺盛的表皮细胞;BrdU染色阳性.与对照组相比,胶原海绵降解吸收快.结论胶原海绵具有良好的细胞相容性和组织相容性,可作为皮肤组织工程理想的载体材料.
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表皮生长因子在妊娠中的生物学功能进展
1974年人类从尿中提取出表皮生长因子,由53个氨基酸残基组成,分子量6201Da,分子内含有3个二硫键,组成生物活性所必须的受体结合区域.主要由颌下腺、十二指肠合成.EGF广泛存在于体液和多种腺体中,生殖器官和多种肿瘤组织中也含有EGF.在妊娠期还存在于孕妇及胎儿的许多组织及血浆,尿,羊水当中.EGF的主要功能是促进细胞的增殖分化,主要是表皮细胞和内皮细胞.它在角膜损伤、烧烫伤及手术等创面的修复和愈合中起到了一定的作用.但是EGF只有与EGF受体(Epidermal Growth Factor Receptor)相结合才能发挥生物学效应,两者的结合有高度特异性和亲和力.
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紫外线照射表皮细胞后凋亡机制的研究进展
紫外线照射皮肤表皮细胞后可引起细胞凋亡,本文综述报道此条件下细胞凋亡过程和凋亡机制相关的因子(fas/fas-L、p53/p21、TNF-α、galectin-7、bcl-2、bcl-X1、p38 MAPK、E2F1)在凋亡中的作用及它们之间的相互作用,它们部分参与诱导表皮细胞凋亡的某些环节,部分则具有相反的作用.
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054表皮细胞总mRNA表达谱研究揭示化脓性链球菌属FAS调节活性与侵袭性的相关性
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食管上皮细胞的体外原代培养及形态学观察
食管上皮细胞为未角化的复层鳞状上皮,我们借鉴了表皮细胞的培养方法[1,2],摸索了新生牛食管上皮细胞体外原代培养的条件,并进行了形态学观察和细胞鉴定.
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内镜超声引导下 Trucut活检与细针穿刺的比较
内镜超声(endoscopic ultrasonography,EUS)及其引导下的细针穿刺(EUS-guided fine needle aspiration,EUS FNA)对于诊断胃肠道内外肿瘤和判断肠道周围(peri-intestinal)淋巴结的良恶性是一种非常敏感的方法[1~3],尤其适用于胃肠道恶性肿瘤的TNM分期和胰腺良恶性病变的诊断.依据不同部位,EUS FNA的诊断准确率为60%~90%,而判断淋巴结良恶性的准确率则大于90%[4~6].但EUS FNA技术本身仍存在一定缺陷,如操作过程中需细胞病理学医师在场进行细胞快速固定、HE染色和病理学诊断,这并非所有医疗机构均能做到;细胞学判断亦受到穿刺后病灶内出血和穿刺过程中带出的正常消化道表皮细胞的影响,高分化的肿瘤有时单靠细胞学检查亦很难作出正确判断[4];尤其是对胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)和淋巴瘤的诊断,由于无法采集完整的组织样本,加上组织结构受到一定程度的破坏,限制了EUS FNA诊断的敏感性[4,7,8].
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Twist基因在肝癌中的表达及其与转移的关系
肝细胞肝癌是常见的恶性肿瘤之一,且5年生存率较低.了解肝癌形成过程中分子机制的改变,对肝癌的诊断和治疗有重要意义.Twist基因是bHLH蛋白家族的转录因子,在线虫胚胎发育过程中,人们发现Twist能够引起表皮细胞向间叶细胞转变(epithelial-mesenchymal transition, EMT),使其获得运动能力,从而促进中胚叶的形成[1].近的研究表明,这种存在于胚胎发育过程中的现象也可能存在于恶性肿瘤的转移过程中.当EMT发生时,上皮细胞的极性消失,形态呈纤维原细胞状改变,E-钙粘素(cadherin)的表达降低,N-钙粘素的表达增高,这样就会使细胞的运动能力明显增强.在本实验中,我们研究了Twist基因在肝细胞肝癌中的表达情况及其与肿瘤转移的关系,同时对Twist在引起癌细胞的E-钙粘素和N-钙粘素表达变化中的作用进行了探讨.
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合成角质细胞生长因子活性短肽促进表皮细胞增殖的实验研究
目的 应用噬菌体随机7肽库筛选角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)的关键序列,进行KGF活性短肽的调整和合成,并研究其对表皮细胞增殖的作用.方法 以KGF单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机7肽库,获得KGF的特异性序列,并进行序列调整.用免疫荧光法检测KGF活性短肽的表皮细胞亲和力.用CCK-8法检测KGF活性短肽对表皮细胞增殖的影响.用RT-PCR法和Western-blot法检测表皮细胞上特异性受体KGFR的表达水平.结果 筛选噬菌体随机7肽库,获得2个与KGF相似的特异性序列,合成获得2个KGF活性短肽,并纯化至98%纯度,短肽的C端进行氨基化封闭,N端进行罗丹明激光染料标记.免疫荧光检测结果显示,2个KGF活性短肽均能够与表皮细胞相结合.CCK-8检测结果显示,与阴性对照组相比,2个KGF活性短肽能够促进表皮细胞增殖,并呈浓度依赖性.RT-PCR和Western-blot检测结果显示,2个KGF活性短肽组中表皮细胞表达KGFR增强.结论 从噬菌体随机7肽库中筛选到2个KGF的关键序列,合成的2个KGF活性短肽能够与KGFR相结合,并增强KGFR的表达,从而促进表皮细胞增殖,有望应用于促进创面愈合.
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人表皮细胞抽提物重编程脂肪干细胞的实验研究
目的 观察人表皮细胞抽提物重编程人脂肪干细胞(hADSCs),使其向表皮细胞转化。方法超声乳化人表皮细胞,离心后获得抽提液冻存备用。培养2~3代hADSCs,链球菌溶血素O(SLO)处理后加入表皮细胞抽提液。7d时观察hADSCs形态学、角蛋白K1/10及K19基因的变化及细胞膜K1/10及K19蛋白表达的变化。结果 SLO处理hADSCs后,可使hADSCs的通透率明显增加,达70%左右。加入表皮细胞抽提液后的hADSCs变为表皮细胞特有的铺路石样形态,并表达表皮细胞特有的K1/10及K19基因及膜蛋白。结论表皮细胞抽提液可以重编程hADSCs,使其向表皮细胞转化。
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毛囊干细胞双向分化的分子调控机制
随着皮肤组织工程研究的逐步深入,毛囊干细胞有望作为稳定的种子细胞用于组织工程化皮肤的构建,并应用于临床.目前的研究表明,皮肤表皮细胞和毛囊各种细胞成份都来源于位于真皮层的毛囊外根鞘隆突区的毛囊干细胞,即毛囊干细胞具有双向分化的潜能,其分化方向有可能是受细胞增殖分化的内源性生物信号通路和外源性微环境调节控制的[1-6].本文就近年来毛囊干细胞特性、定向分化生长的调控机制研究进展做一综述.
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组织工程化皮肤低温保存的研究进展
组织工程化皮肤,是指有机体分离出来的表皮细胞或成纤维细胞在一种三维生长支架上进行体外复合培养,形成再生的表皮或真皮等同物.组织工程化皮肤作为一种皮肤创伤修复材料和损伤皮肤的替代品,不仅被覆在创伤表面、保护创面、促进皮肤的恢复和生长,而且支架材料中的活性细胞还能通过分泌生长因子促进细胞增殖、诱导细胞分化,使组织工程化皮肤终能永久地代替损伤和(或)缺失的皮肤.
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硒化镉量子点对人黑素瘤细胞和正常表皮细胞的毒性
目的 通过cell counting kit-8(CCK-8)检测不同粒径硒化镉(Cdse/ZnS)量子点对人恶性黑素瘤细胞A375,A375.s2以及正常人表皮细胞HaCaT的细胞毒性,研究硒化镉量子点对黑素瘤细胞生长的影响.方法 分别取处于对数生长期的A375、A375.s2以及HaCaT细胞铺人96孔板内,次日分别向铺有细胞的孔内加入浓度为162、81、54、40.5、27、10.125,4.05、2.025、1.012 5 nmol/L水溶性量子点(QDs)-605与QDs-545进行孵育,24 h后每孔加入10μl CCK-8,测定2种硒化镉量子点对A375、A375.s2及HaCaT细胞增殖的影响.结果 CCK-8法显示,随着QDs-605与QDs-545浓度的增加,A375和A375.s2细胞存活率随之下降.不同浓度的QDs-605与QDs-545作用于A375、A375.s2细胞.24 h后其细胞存活率均低于对照组(P<0.05,P<0.01),但是对HaCaT细胞没有抑制作用.结论 硒化镉量子点对A375、A375.s2人黑素瘤细胞有一定的抑制作用,而对HaCaT正常人表皮细胞抑制作用不明显.