首页 > 文献资料
-
基质金属蛋白酶-2,9及其抑制因子-1,2在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达
目的研究基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2、MMP-9)及其抑制因子-1,2(TIMP-1、TIMP-2)在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达,探讨其在老年性白内障发病中的作用.方法对40例老年性白内障患者(排除代谢性和继发性白内障)和8例晶状体脱位(晶状体透明)患者晶状体前囊膜,用免疫组化方法(SP法)和免疫荧光技术检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达.结果 MMP-2、MMP-9、 TIMP-1、TIMP-2在老年性白内障晶状体上皮细胞表达均为阳性,而在透明晶状体上皮细胞仅1例表达阳性,其余为阴性.MMP-2在老年性白内障组和透明晶状体组平均吸光度(A值)分别为(0.447 9±0.093 7)、(0.145 8±0.053 6);TIMP-2为(0.573 4±0.109 4)、(0.135 7±0.023 1);MMP-9为(0.177 9±0.065 5)、(0.039 2±0.009 3);TIMP-1为(0.279 0±0.062 6)、(0.092 2±0.028 2).结论基质金属蛋白酶及其抑制因子在老年性白内障发病机制中可能发挥重要作用.
-
脂多糖对血管平滑肌细胞表达MMP-2、9及TIMP-1、2的影响
目的探讨脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)表达基质金属蛋白酶2、9(matrix metalloproteinase-2,-9; MMP-2, MMP-9)及其组织抑制因子1、2(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-1, -2; TIMP-1,TIMP-2)的影响.方法贴块法进行血管平滑肌细胞培养,细胞免疫化学检测基质金属蛋白酶及其抑制剂的蛋白表达,原位分子杂交分析MMP-9 mRNA表达. 结果 LPS是MMP-9的强诱导物,可在蛋白及mRNA水平诱导MMP-9的表达,同时LPS可诱导TIMP-1的表达,作用较对MMP-9减弱.LPS对二者诱导作用强度与LPS的浓度及作用时间呈正相关.LPS降低TIMP-2的表达,其表达与LPS的浓度及作用时间呈负相关.LPS对MMP-2的表达没有明显作用.结论 LPS诱导平滑肌细胞MMP-9、TIMP-1表达的同时可降低TIMP-2的表达,其作用呈浓度时间依赖性,在动脉粥样硬化发病过程中可能起一定作用.
关键词： 脂多糖 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 -
腹股沟直疝及斜疝患者血清MMP-2及TIMP-2的表达
目的:比较基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制因子2(tissueinhibitorofmetalloproteinase-2,TIMP-2)在腹股沟直疝及斜疝患者血清的表达,探讨腹股沟疝的发病机制.方法:以行疝修补术患者为研究对象.根据年龄进一步将斜疝及直疝患者分为低年龄组(≤50岁)和高年龄组(＞50岁).用ElISA法检测患者血清MMP-2及TIMP-2的表达.结果:斜疝组和直疝组病人血清MMP-2水平显著高于正常组(P＜0.05),MMP-2水平在直疝组和年龄呈负相关(P＜0.05,r=-0.356)；在低年龄组直疝患者血清TIMP-2水平显著下降(P＜0.05),与MMP-2水平呈负相关(P＜0.05,r=0.517).结论:MMP-2与腹股沟疝的发生有关,TIMP-2与低年龄组患者直疝的发生有关.
关键词： 疝 腹股沟 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 -
基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与脑胶质瘤侵袭性
人恶性胶质瘤具有高度侵袭性,是目前治疗上的主要障碍.而基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMPs)在细胞外基质中的相互作用是胶质瘤细胞侵袭转移的关键因素.探讨MMPs、TIMPs在胶质瘤组织中的合成机制及在胶质瘤细胞侵袭中的作用,对胶质瘤诊断及预后有重要意义,也可为其治疗提供新的方向和新的策略.
关键词： 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 胶质瘤 侵袭性 -
晶状体吸出术后兔眼后囊膜组织MMP-2、TIMI-2的表达及意义
目的 观察透明晶状体皮质吸出术后早期兔眼后囊膜组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子(TIMP-2)的表达变化,并探讨其意义.方法 40只成年新西兰健康大白兔,随机分为5组,各8只.每兔一眼行晶状体吸出术,另一眼作对照(不接受任何手术).分别于术后第1、3、7、14及28天行空气栓塞法各处死一组动物,立即摘出眼球,甲醛固定,免疫组织化学法检测MMP-2、TIMP-2,随机取一组的对侧眼做为对照组.结果 对照组眼后囊膜有低的MMP-2、TIMP-2表达 ;术后第1天术眼晶状体后囊膜即可见MMP-2、TIMP-2表达增强,术后第3天、第7天较第1、3天增强 ;术后第14天后囊膜上成纤维细胞成簇状排列,其胞质内可见强的MMP-2、TIMP-2表达,赤道部残留上皮细胞胞质内亦见MMP-2、TIMP-2强表达 ;术后第28天,瞳孔区后囊膜存留细胞胞质内见MMP-2、TIMP-2强表达.结论 晶状体吸出术后早期兔眼后囊膜组织MMP-2、TIMP-2表达升高,在后囊膜混浊及纤维化的始动阶段可能起了重要作用.
-
基质金属蛋白酶组织抑制因子-1和2在垂体腺瘤中的表达
目的探讨基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)-1和2的蛋白表达与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法采用免疫组化S-P法检测8例正常垂体前叶组织、20例非侵袭性和31例侵袭性垂体腺瘤组织中TIMP-1和TIMP-2的蛋白表达.结果TIMP-1和TIMP-2在正常垂体前叶组织中阳性率均为100.0%,在非侵袭性垂体腺瘤中的阳性率分别为75.0%和80.0%,在侵袭性垂体腺瘤中的阳性率分别为41.9%和38.7%.TIMP-1和TIMP-2在侵袭性垂体腺瘤中的表达强度显著性低于非侵袭性垂体腺瘤和正常垂体前叶组织(P＜0.05).结论垂体腺瘤的侵袭性与TIMP-1和TIMP-2表达水平降低有关,二者可能在调控垂体腺瘤的侵袭性生长过程中起重要作用.
关键词： 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 垂体肿瘤 -
垂体腺瘤中基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2的表达及意义
目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)-2及其组织抑制因子(TIMP)-2的蛋白表达与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法 采用免疫组化SP法检测8例正常垂体前叶组织、20例非侵袭性和31例侵袭性垂体腺瘤组织中MMP-2和TIMP-2的蛋白表达.结果 在正常垂体前叶组织、非侵袭性垂体腺瘤和侵袭性垂体腺瘤中MMP-2的阳性表达率分别为62.5%(5/8)、80%(16/20)和87.1%(27/31),TIMP-2的阳性表达率分别为100%(8/8)、80%(16/20)和38.7%(12/31).在非侵袭性垂体腺瘤中MMP-2和TIMP-2表达强度差别无统计学意义(P＞0.05),在侵袭性垂体腺瘤中二者差别有统计学意义(P＜0.05).结论 垂体腺瘤的侵袭性与MMP-2和TIMP-2的表达失衡密切相关,二者可能在调控垂体腺瘤的侵袭性生长过程中起重要的作用.
关键词： 垂体腺瘤 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 侵袭性 -
他扎罗汀和全反式维A酸对热休克后的成纤维细胞表达金属基质蛋白酶及其抑制剂的研究
目的 观察维A酸(他扎罗汀和全反式维A酸)对体外培养的成纤维细胞热休克后,表达基质金属蛋白酶(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的影响,探讨他扎罗汀和全反式维A酸对热休克后的真皮发生作用的分子生物学机制.方法 体外培养的成纤维细胞在43℃水浴中热休克30 min后,加入不同浓度的维A酸,24 h后应用ELISA法上清液检测MMP-1和TIMP-1表达,并与对照组比较.结果 维A酸类药物作用于热休克后的成纤维细胞,可减少MMP-1,同时增加其抑制剂TIMP-1的含量.其中,他扎罗汀的效果优于全反式维A酸.结论 维A酸类药物对热休克后成纤维细胞产生的,在皮肤老化中有重要作用的MMP-1及其抑制剂TIMP-1有调节作用,可能对修复热休克导致的真皮基质改变有积极作用.
-
基质金属蛋白酶组织抑制因子-1在2型糖尿病患者中的表达变化
目的：探讨未发生并发症的2型糖尿病患者基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（ TIMP-1）的变化及其与空腹血糖的关系。方法选取无并发症的2型糖尿病患者41例，门诊体检正常者30例为对照。采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测外周血单个核细胞中 TIMP-1 mRNA的量，采用ELISA的方法检测血浆中TIMP-1的量。结果（1）2型糖尿病患者外周血单个核细胞中TIMP-1 mRNA的表达量[（6.13±1.59）copies/mL]明显高于正常者[（5.29±1.56） copies/mL]。（2）2型糖尿病患者血浆中 TIMP -1蛋白的表达量[（246334.83±82567.858）pg/mL]明显高于正常者[（105498.00±21554.324）pg/mL]。（3）2型糖尿病患者血浆中TIMP-1与空腹血糖呈负相关（r＝-0.4901，P＜0.01）。结论无并发症的2型糖尿病患者TIMP-1无论是mRNA的表达量还是蛋白的表达量均较正常者偏高，并且血浆中蛋白的表达量与空腹血糖负相关。
-
病毒性心肌炎MMP-3和TIMP-1的动态变化及其与心肌胶原重构的关系
目的探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在病毒性心肌炎小鼠发病过程的动态变化及其在心肌胶原重构中的作用.方法50只7周龄雄性Balb/c小鼠腹腔接种0.2 ml的CVB3建立VM模型,应用SP免疫组化法观察VM组心肌炎发病过程中MMP-3,TIMP-1的表达,心脏石蜡切片HE染色计算病理积分,masson三色法胶原特异染色及氯氨T法测定心肌的胶原含量.结果VM小鼠心肌MMP-3和TIMP-1均呈现一过性表达.MMP-3表达于第10天达高峰.TIMP-1于第7天可见表达,第21天达高峰;心肌胶原含量在21,30d显著增高(P＜0.05);MMP-3与心肌病理积分呈正相关(r=0.852,P＜0.05),TIMP-1与胶原含量有正相关性(r=0.819,P＜0.05).结论VM小鼠心肌MMPs过度激活并伴有继发的胶原含量增高,且MMPs表达与心肌病理变化密切相关,TIMP-1表达与胶原含量密切相关.MMPs/TIMP参与了心肌炎的病理改变,可能是导致心肌间质改变、胶原增生的因素之一.
关键词： 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 心肌炎 胶原 -
膈下逐瘀汤降低基质金属蛋白酶组织抑制因子的表达抑制大鼠肝纤维化形成
目的 探讨膈下逐瘀汤抗大鼠肝纤维化作用及可能机制.方法 SD大鼠110只,分成4组:正常组、模型组、膈下逐瘀汤低、高剂量组.通过大鼠皮下注射CCl4制备肝纤维化模型.12周后,比较各组大鼠血清肝功能生化指标ALT、AST、ALB、TP及T-bil,肝纤维化Ishak评分,肝组织TIMP-1表达.结果 与模型组比较,低剂量组大鼠血清ALT、AST、Bil水平降低,血清TP、ALB水平升高;高剂量组大鼠血清ALT、AST、T-bil水平明显降低,血清TP、ALB水平明显升高;低、高剂量组肝纤维化Ishak评分明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05).膈下逐瘀汤低、高剂量组TIMP-1表达程度较模型组减轻.结论 膈下逐瘀汤可能通过抑制大鼠肝脏纤维化组织中TIMP-1的表达,从而发挥抗肝纤维化作用.
关键词： 膈下逐瘀汤 肝纤维化 基质金属蛋白酶组织抑制因子 大鼠 -
基质金属蛋白酶及其组织抑制物与肿瘤侵袭转移
基质金属蛋白酶(MMPs)是降解细胞外基质成分的一大类含2价锌离子水解酶,基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)则是基质金属蛋白酶(MMPs)的天然抑制物,两者在细胞外基质代谢中的相互作用是肿瘤细胞的侵袭及转移的关键因素;探讨MMPs与TIMPs在不同类型肿瘤及在不同表型的分泌和表达水平,对临床肿瘤的预防、诊断及预后有重要意义,也可为临床肿瘤治疗提供新的方向和新的策略.
关键词： 肿瘤 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 侵袭 转移 -
极限门静脉压力分支结扎对肝脏再生和基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响
目的 探讨极限门静脉压力分支结扎对大鼠肝脏基质金属蛋白酶(MMP)及其组织抑制因子(TIMP)表达的影响. 方法 Sprague-Dawley雄性大鼠96只,随机分成假手术对照组和门静脉结扎实验组.观察术后0.5、1、3、5、7、14、21 d和28 d保留侧肝脏和肝脏总质量变化,光学显微镜下观察保留侧肝细胞的形态变化,用免疫组织化学方法检测保留侧肝细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)及MMP2、MMP9和TIMP2的表达.用SPSS11.5统计软件根据不同数据资料进行t检验或Pearson相关分析进行统计学分析. 结果 (1)90%极限门静脉分支结扎后,95.8%的大鼠存活良好.结扎侧肝叶呈进行性萎缩、变小,保留侧肝叶占总肝质量的比例在1 d内增加较缓慢,而1～5 d时,保留侧肝叶所占比例则增加速度明显加快,5 d以后保留侧肝叶所占比例增加变慢,于7 d达"平台期";(2)术后PCNA阳性细胞计数与假手术对照组比较,门静脉结扎实验组术后0.5～3 d明显增多,0.5、1、3 d组PCNA阳性率分别为13.86%±4.73%、17.45%±4.38%、21.33%±5.59%对比7.33%±2.63%、9.42%±3.98%、8.13%±2.37%,P值均＜0.01,第5天达高峰(25.70%±6.80%对比6.37%±3.38%),第7天有所减少,但仍高于对照组(P值均＜0.01),以后逐渐恢复正常;(3)保留侧肝叶的MMP2、MMP9和TIMP2蛋白的表达均在术后1 d开始明显增加,至术后7 d达高峰;此后逐渐恢复至术前水平(P＞0.05),仅见少量肝细胞胞质表达;(4)大鼠肝脏MMP2的表达在术后0.5、1、5、7、14 d组与肝组织PCNA表达均呈正相关关系,MMP9的表达在术后0.5、1、7、21 d组与肝细胞PCNA指数呈正相关关系,大鼠肝脏TIMP2的表达在术后1、7、14、21 d组与肝细胞PCNA指数呈正相关关系. 结论 90%极限门静脉分支结扎术后保留侧肝叶的MMP2、MMP9和TIMP2蛋白的表达均在术后1 d开始增加,至术后7d达高峰;此后逐渐恢复至术前水平;术后PCNA指数与保留侧肝叶的MMP2、MMP9和TIMP2蛋白的表达明显相关,MMP2、MMP9和TIMP2蛋白在肝再生的过程中发挥重要作用.
关键词： 肝再生 门静脉 结扎 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 -
葶苈生脉饮对慢性心衰大鼠心肌MMP-9、TIMP-1表达及胶原影响的研究
目的:探讨葶苈生脉饮治疗慢性心力衰竭(CHF)的相关作用机制.方法:采用腹主动脉缩窄法建立心力衰竭大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、葶苈生脉饮高剂量组、葶苈生脉饮低剂量组、心宝丸组,施以相应治疗因素4周后,采用免疫组化法检测各组大鼠心肌组织MMP-9、TIMP-1的表达及胶原容积百分比(CVF).结果:模型组与正常组比较MMP-9表达显著增强,TIMP-1表达显著减弱,CVF显著升高;各治疗组与模型组比较,MMP-9表达显著减弱,TIMP-1表达显著增强,CVF显著降低,其中葶苈生脉饮高剂量组明显优于葶苈生脉饮低剂量组和心宝丸组.结论:葶苈生脉饮可能通过调控MMP-9和TIMP-1的表达,调节胶原代谢,逆转心室重构,改善心脏功能,是治疗CHF的作用机制之一.
关键词： 葶苈生脉饮 心力衰竭 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 -
含人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1重组腺病毒的构建与体外表达
从人肝癌组织中提取总RNA,RT-PCR合成hTIMP-1的全长cDNA,克隆到腺病毒载体AdEasy系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,与骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183受体菌中进行同源重组,成功构建含hTIMP-1全长cDNA的重组腺病毒载体,经293细胞的包装、扩增,生成含hTIMP-1基因的重组腺病毒AdhTIMP-1并实现体外表达,为进一步研究肝癌浸润和转移机理以及肝癌的基因治疗提供实验基础.
关键词： 基质金属蛋白酶组织抑制因子 肝细胞癌 重组腺病毒 基因治疗 -
基质金属蛋白酶及其抑制物与炎症性肠病
基质金属蛋白酶(MMPs)是一组能降解细胞外基质(ECM)的蛋白水解酶类,参与组织的损伤与修复,其上调的活性可能参与肠黏膜炎症的上皮损伤.基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)是一组具有抑制MMPs功能的活性多肽,其在MMPs活性的表达及ECM代谢的调节中起非常重要的作用.炎症性肠病(IBD)是一组病因和发病机制尚不十分明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病.MMPs主要通过降解ECM、促进细胞凋亡、影响新生血管生成、促进细胞因子释放等多种途径参与IBD及其并发症的发生、发展.加强对MMPs/TIMPs的研究,有利于进一步深入探讨IBD的发病,对探索新的治疗方法具有重要意义.
-
重组腺病毒介导hTIMP-1对人肝癌细胞系体外增殖的影响
目的 探讨人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(hTIMP-1)过表达对人肝癌细胞系HepG2体外增殖的作用.方法 构建携载hTIMP-1全长cDNA的重组腺病毒载体,感染HepG2细胞,应用Western blot及RT-PCR方法检测TIMP-1蛋白及mRNA的表达,透射电镜观察细胞超微结构改变,MTT法检测hTIMP-1对HepG2细胞生长的影响.结果 成功构建携载hTIMP-1的重组腺病毒载体,感染HepG2细胞,实现其体外稳定表达,hTIMP-1过表达对HepG2体外增殖有明显抑制作用.结论 hTIMP-1过表达可抑制人肝癌细胞系HepG2的体外增殖,可用于肝癌基因治疗的研究.
关键词： 基质金属蛋白酶组织抑制因子 肝细胞癌 腺病毒 基因治疗 -
pcDNA3.1/hTIMP-1-EGFP真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达
目的 构建标记有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(hTIMP-1)真核表达质粒pcDNA3.1/hTIMP-1-EGFP,并通过转染大鼠血管平滑肌细胞(SMCs)验证hTIMP-1的表达.方法 将hTIMP-1及编码EGFP的互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列通过扩增、酶切、插入pcDNA3.1质粒的多克隆位点,构建pcDNA3.1/hTIMP-1-EGFP真核表达质粒;应用脂质体介导的基因转染技术,将基因导入SMCs(pcDNA3.1/hTIMP-1-EGFP转染组).应用荧光显微镜观察EGFP的表达情况;流式细胞仪检测转染效率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blotting)等方法检测hTIMP-1的表达情况;明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9活性.用空质粒pcDNA3.1转染SMCs(空质粒pcDNA3.1转染组)和未转染质粒的SMCs(未转染组)作为对照.结果 pcDNA3.1/hTIMP-1-EGFP转染组重组质粒转染SMCs后,SMCs生长受到抑制;转染24 h后在荧光显微镜下可见强绿色荧光,流式细胞仪检测转染效率约为15%;RT-PCR检测结果显示,SMCs出现646 bp目的基因;Western blotting检测显示,在转染后的血管SMCs中有hTIMP-1表达;明胶酶谱法检测结果显示,MMP-2、MMP-9活性降低;与空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 TIMP-1真核表达质粒的构建和在血管SMCs中的表达,为TIMP-1基因治疗的研究奠定了基础.
关键词： 基质金属蛋白酶组织抑制因子 真核表达载体 平滑肌细胞 -
绝经后压力性尿失禁患者盆底胶原分解及雌激素受体表达
目的:探讨盆底组织胶原分解代谢及雌激素受体(ER)亚型表达与绝经后压力性尿失禁(SUI)发生的关系.方法:选取绝经后SUI患者23例为研究组,因卵巢良性肿瘤或宫颈上皮内瘤变行手术治疗的绝经后患者18例为对照组,采用RT-PCR技术检测尿道旁组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子(TIMP-2)mRNA表达;同时采用免疫组化技术检测ERα、ERβ表达.结果:①研究组尿道旁组织MMP-2 mRNA表达较对照组明显升高,差异有高度统计学意义(P＜0.01),且MMP-2/TIMP-2比值也较对照组明显升高(P＜0.05);②绝经后妇女尿道旁组织均可发现ERα和ERβ表达,研究组尿道旁组织血管内皮细胞ERβ表达明显高于对照组(P＜0.01),且与MMP-2 mRNA表达呈正相关(spearman相关系数r=0.984,P＜0.01).结论:绝经后妇女可能通过尿道旁组织血管内皮细胞ERβ表达升高,介导局部组织胶原蛋白降解加速,导致SUI.
关键词： 压力性尿失禁 胶原 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 雌激素受体 -
阿霉素对心肌基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制因子表达影响
目的 研究阿霉素对大鼠心肌的基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)表达的影响.方法 采用RT-PCR测定mRNA水平,采用Western blotting测定蛋白质水平及蛋白质磷酸化.结果阿霉素处理导致大鼠心肌组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1 mRNA和蛋白质水平均升高,阿霉素处理还诱导p38 MAPK激酶磷酸化水平增加,但不影响Erk1/2和JNK MAPK激酶磷酸化水平.结论 在阿霉素介导的心衰发展过程中,胞外基质的降解和累积同时发生.p38 MAPK激酶可能参与了阿霉素诱导的心肌毒性作用.
关键词： 阿霉素 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子 p38MAPK激酶
